一种罗沙司他中残留溶剂N,N-二异丙基乙胺的检测方法与流程

一种罗沙司他中残留溶剂n,n-二异丙基乙胺的检测方法
技术领域
1.本发明属于药物分析领域，具体涉及一种罗沙司他中残留溶剂n,n-二异丙基乙胺的检测方法。


背景技术：

2.罗沙司他胶囊是由珐博进(中国)研发，用于治疗正在接受透析治疗的患者因慢性肾脏病(ckd)引起的贫血。罗沙司他化学名为：（4-羟基-1-甲基-7-苯氧基异喹啉-3-羰基）甘氨酸，结构式如下：在罗沙司他合成过程中用到n,n-二异丙基乙胺，参考ich指导原则q3a原料药中杂质的界定限度，规定不得过0.15%。
3.目前尚无关于通过气相色谱分析方法检测罗沙司他中n,n-二异丙基乙胺的文献或专利公开。


技术实现要素：

4.本发明要解决的技术问题是提供一种测定罗沙司他原料药及制剂中残留溶剂n,n-二异丙基乙胺的方法。该方法采用气相色谱分析法进行测定，通过在供试品溶液中加入适量30%甲醇钠溶液，以减少罗沙司他对n,n-二异丙基乙胺的吸附干扰，实现对罗沙司他中残留溶剂n,n-二异丙基乙胺的精确检测。
5.本方法是通过以下技术方案实现的：一种罗沙司他中残留溶剂n,n-二异丙基乙胺的检测方法，其特征在于所述的方法采用气相色谱法，通过在供试品溶液中加入甲醇钠溶液进行测定；所述的检测方法，其特征在于气相色谱法的检测条件为聚二甲基硅氧烷为固定液的毛细管柱，高纯氮气为载气，在特定的气相色谱参数条件下进行测定。
6.所述的气相色谱参数中进样口温度：215~225℃；优选220℃。
7.所述的气相色谱参数中检测器温度：265~275℃；优选270℃。
8.所述的供试品溶液的配制方法为：取罗沙司他约250mg，精密称定，置于10ml量瓶中，先加入5ml n,n-二甲基甲酰胺溶解后，再加0.3~0.5ml的30%甲醇钠溶液，用n,n-二甲基甲酰胺定容，摇匀，静置后离心20~40min（转速为12000rpm/min），取上清液作为供试品溶液。
9.取空白溶液、对照品溶液、系统适用性溶液和供试品溶液各1μl分别注入气相色谱仪，记录色谱图。
10.本方法的有益效果：采用本发明的方法可以有效的检测罗沙司他中残留溶剂n,n-二异丙基乙胺的含量，保证罗沙司他及其制剂的质量可控。
附图说明
11.图1为实施例1空白溶液的色谱图，图2为实施例1对照品溶液的色谱图，图3为实施例1系统适用性溶液的色谱图，图4为实施例1供试品溶液的色谱图。
具体实施方式
12.以下实施例仅对本发明内容作进一步说明，并不限定本发明。罗沙司他原料药为我公司自制；30%甲醇钠溶液购自阿达玛斯，5.4mol/l。
13.实施例1系统适用性试验仪器：岛津gc-2014c气相色谱仪色谱柱：se30 30m
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0.32mm，0.5μm载气：高纯氮气柱压：50kpa进样口温度：220℃检测器温度：270℃进样量：1μl升温程序：起始温度为60℃，维持8分钟，以每分钟40℃的速率升至 260℃，维持5分钟。
14.空白溶液：n,n-二甲基甲酰胺。
15.对照品贮备液：取n，n-二异丙基乙胺适量，精密称定，用n,n-二甲基甲酰胺定量稀释至每1ml约含n，n-二异丙基乙胺187.5μg的溶液，作为对照品贮备液。
16.对照品溶液：精密移取对照品贮备液2ml至10ml量瓶中，先加入5mln,n-二甲基甲酰胺，再加0.4ml30%甲醇钠溶液，用n,n-二甲基甲酰胺定容，摇匀，静置后离心30min（转速为12000rpm/min），取上清液作为对照品溶液。
17.系统适用性溶液：取罗沙司他约250mg，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入对照品贮备液2ml，加入5mln,n-二甲基甲酰胺溶解后，再加0.4ml30%甲醇钠溶液，用n,n-二甲基甲酰胺定容，摇匀，静置后离心30min（转速为12000rpm/min）,取上清液作为系统适用性溶液（又名加标供试品溶液）。
18.供试品溶液：取罗沙司他约250mg，精密称定，置10ml量瓶中，先加入5mln,n-二甲基甲酰胺溶解后，再加0.4ml30%甲醇钠溶液，用n,n-二甲基甲酰胺定容，摇匀，静置后离心30min（转速为12000rpm/min），取上清液作为供试品溶液。
19.测定：取空白溶液、对照品溶液、系统适用性溶液和供试品溶液各1μl分别注入气相色谱仪，记录色谱图。
20.结果：空白溶液和供试品溶液对罗沙司他中n，n-二异丙基乙胺检测无干扰。
21.实施例2耐用性试验
在不同耐用性试验条件（见表1）下，取对照品溶液和加标供试品溶液各1μl，注入色谱仪，记录色谱图。考察对照品溶液中n，n-二异丙基乙胺的理论板数，以及加标供试品溶液中n，n-二异丙基乙胺的含量。结果见表2。
22.溶液配制及测定方法参照实施例1，各色谱条件如下表1所示：表1耐用性色谱条件序号柱压（kpa）初始柱温（℃）进样口温度（℃）检测器温度（℃）色谱条件15060220270色谱条件24860220270色谱条件35260220270色谱条件45058220270色谱条件55062220270色谱条件65060215270色谱条件75060225270色谱条件85060220265色谱条件95060220275表2耐用性试验结果结果表明，各个耐用性色谱条件下对照品溶液中n，n-二异丙基乙胺的理论板数均符合要求（理论板数大于5000），以及加标供试品溶液中n，n-二异丙基乙胺的含量的极差符合要求（极差小于0.03%）。
23.实施例3定量限与检测限试验定量限溶液：取对照品溶液1ml，置10ml量瓶中，用n,n-二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，即得。
24.检测限溶液：取定量限溶液3ml，置10ml量瓶中，用n,n-二甲基甲酰胺稀释至刻度，摇匀，即得。
25.测定：精密量取定量限溶液1μl，注入气相色谱仪，记录色谱图，连续进样6次，计算峰面积及保留时间的rsd。精密量取检测限溶液1μl，注入气相色谱仪，记录色谱图。结果见表3和表4。
26.表3定量限溶液表4检测限溶液检测限浓度（μg/ml）相当于供试品浓度百分比（%）s/n1.140.054.6结果表明，定量限溶液峰面积的rsd小于10.0%，保留时间的rsd小于1.0%；定量限溶液浓度低于限度浓度的50%，该方法灵敏度满足检测要求。
27.实施例4准确度试验50%回收率溶液：取罗沙司他约250mg，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入对照品贮备液1ml，加入5mln,n-二甲基甲酰胺溶解后，再加0.4ml30%甲醇钠溶液，用n,n-二甲基甲酰胺定容，摇匀，静置后离心30min（转速为12000rpm/min），取上清液作为50%回收率溶液。平行配制3份。
28.100%回收率溶液：取罗沙司他约250mg，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入对照品贮备液2ml，加入5mln,n-二甲基甲酰胺溶解后，再加0.4ml30%甲醇钠溶液，用n,n-二甲基甲酰胺定容，摇匀，静置后离心30min（转速为12000rpm/min）,取上清液作为100%回收率溶液。平行配制3份。
29.150%回收率溶液：取罗沙司他约250mg，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入对照品贮备液3ml，加入5mln,n-二甲基甲酰胺溶解后，再加0.4ml30%甲醇钠溶液，用n,n-二甲基甲酰胺定容，摇匀，静置后离心30min（转速为12000rpm/min），取上清液作为150%回收率溶液。平行配制3份。
30.精密量取回收率溶液及对照品溶液各1μl，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算回收率，结果见表5。
31.表5回收率试验结果
结果表明，在相当于限度浓度的50%~150%范围内，n，n-二异丙基乙胺的回收率在80%~120%范围内，rsd小于10%，该方法准确度良好。