一种长效化艾塞那肽的制备方法及其应用

技术特征：
1.一种长效化艾塞那肽的制备方法，包括如下步骤：步骤1：设计长效化艾塞那肽序列，序列中包含darpin序列；步骤2：表达和纯化长效化艾塞那肽；其中darpin的序列如seqidno.1所示，长效化艾塞那肽序列如seqidno.2所示。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中长效化艾塞那肽的结构为6his-酶切位点-艾塞那肽-linker-darpin；其中，6his为组氨酸纯化标签，其氨基酸序列为his-his-his-his-his-his；linker为连接肽，其氨基酸序列为：gly-gly-gly-gly-gly；艾塞那肽氨基酸序列为：his-gly-glu-gly-thr-phe-thr-ser-asp-leu-ser-lys-gln-met-glu-glu-glu-ala-val-arg-leu-phe-ile-glu-trp-leu-lys-asn-gly-gly-pro-ser-ser-gly-ala-pro-pro-pro-ser。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述酶切位点为tev酶切位点，其氨基酸序列为：glu-asn-leu-tyr-phe-gln-gly。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2包括：步骤2-1：构建表达载体；步骤2-2：长效化艾塞那肽的表达；步骤2-3：长效化艾塞那肽的纯化。5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2-1中的表达载体为pet28a( )载体，选取的酶切位点为ndeⅰ和xhoⅰ。6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2-2中表达重组蛋白使用大肠杆菌bl21(de3)菌株。7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2-3中纯化重组蛋白使用的洗脱液包括如下成分：tris/hcl，氯化钠，咪唑。8.权利要求1-7任一项制备方法制得的长效化艾塞那肽，其中所述长效化艾塞那肽dna序列如seqidno.5所示。9.权利要求8所述长效化艾塞那肽在制备降低血糖的药物和/或保健品中的用途。10.权利要求8所述长效化艾塞那肽在制备延长艾塞那肽在血液中半衰期的药物和/或保健品中的用途。

技术总结
本发明公开了一种长效化艾塞那肽的制备方法及其应用，属于药物肽制备技术领域。本发明长效化艾塞那肽的制备过程包括：将艾塞那肽的序列融合构建到DARPin的N端，艾塞那肽与DARPin之间使用5个甘氨酸作为linker将艾塞那肽-(Gly)


技术研发人员：高国生 李建辉 蔡挺 张嫦珍
受保护的技术使用者：中国科学院大学宁波华美医院
技术研发日：2022.02.24
技术公布日：2022/5/10