降低高血压患者痛风发生风险的组合物的制作方法

甲基叶酸、叶酸盐、叶酸或叶酸盐的活性代谢物和可在体内释放/生成叶酸的物质中的一种或多种。
14.本发明所述的组合物，所述含镁活性成分选自碳酸镁、氧化镁、硫酸镁，以及高镁含量的天然提取物。
15.本发明所述的组合物，组合物中还包括食用或药用可接受的赋形剂或载体或其混合物。
16.本发明所述的组合物，所述组合物可以但不限于通过口服、胃肠道、局部、经皮、静脉注射、肌肉注射、吸入等方式给予。
17.本发明所述的组合物，所述组合物的剂型可以但不限于片剂、胶囊剂、缓蚀剂、控释剂、液体制剂、糖浆剂、粉剂等。
18.本发明所述的组合物在制备降低高血压患者痛风发生风险的产品中的用途，优选的所述痛风发生风险包括高尿酸血症、痛风石沉积、痛风性关节炎、痛风性肾病、尿酸性肾结石等。
19.本发明所述的用途，其特征在于，所述高血压患者为伴有同型半胱氨酸升高的高血压。
20.在本发明所述的用途中，当高血压患者血镁浓度低于819μmol/l时，50-120份以镁含量计的含镁活性成分和0.6-0.8份叶酸或其衍生物组成的组合物降低高血压患者痛风发生风险的效果显著强于其他含量的组合物，并且该组合物成分之间具有显著的协同作用，是更优的降低高血压患者痛风发生风险的组合物。
21.在本发明所述的用途中，当高血压患者血镁浓度等于或高于819μmol/l时，150-450份以镁含量计的含镁活性成分和0.2-0.5份叶酸或其衍生物组成的组合物降低高血压患者痛风发生风险的效果显著强于其他含量的组合物，并且该组合物成分之间具有显著的协同作用，是更优的降低高血压患者痛风发生风险的组合物。
22.在本发明中，"风险"涉及事件在特定的时期内发生的概率，且可意指受试者的"绝对"风险或"相对"风险。可参考对相关时间群组测量后的实际观察或参考从已被随访相关时期的统计学上有效的历史群组产生的指标值来测量绝对风险。相对风险是指受试者的绝对风险相比于低风险群组的绝对风险或平均群体风险的比率，其可随评估临床风险因素的方式而变化。
23.本发明的优点在于有临床循证医学实施例支持，并通过对高血压患者体内营养素与痛风发生风险的大样本数据分析，结合动物药理研究，提供一种降低高血压患者痛风发生风险的组合物。本发明提供的组合物具有降低高血压患者痛风发生风险的用途，含镁活性成分和叶酸或其衍生物组成的组合物的作用效果显著强于组合物中含镁活性成分或叶酸或其衍生物的单独应用效果，组合物各成分体现了令人意料不到的协同作用。本发明还特别针对不同高血压患者提供不同含量的含镁活性成分和叶酸或其衍生物组成的组合物，即根据高血压患者血镁水平不同，有针对性地提供含镁活性成分和叶酸或其衍生物组成的组合物，在体现精准治疗的基础上，使组合物发挥最佳药效。本发明提供的组合物还可以包含黑樱桃提取物。含有黑樱桃提取物的组合物，是一个更加有效地降低高血压患者痛风发生风险的组合物，因三种成分组成的组合物的作用效果显著强于黑樱桃提取物单用或镁活性成分和叶酸组成的组合物的作用效果，说明三种成分具有协同作用，因而是一种更加适
用于降低高血压患者痛风发生风险的组合物。
具体实施方式
24.此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
25.实施例1：不同剂量镁、叶酸对高血压大鼠尿酸水平变化的影响
26.一、方法
27.实验采用中老年自发性高血压大鼠(shr)，spf级，40
±
2周龄，雌雄各半，购自北京维通利华，检验合格后纳入实验。从眼眶静脉丛采血、离心，利用全自动生化免疫分析仪测定其血清尿酸(70.12
±
18.64)μmol/l，选择130只大鼠，根据尿酸水平随机分成12组，每组10-11只，按表1剂量给药(其中所用镁为硫酸镁，剂量以含镁量计)，每天一次，灌胃容积按照10ml/kg，给药20周。
28.表1：各组自发性高血压大鼠(shr)给药结束后尿酸水平(n＝10-11)
[0029][0030]
与shr组比较，*p《0.05，**p《0.01。
[0031]
二、结果
[0032]
综合上述的实验结果，从shr对照组的自发性高血压大鼠(shr)中可以看出，随着时间的推移，自发性高血压大鼠会出现尿酸水平的升高，这个结果跟文献记载和流行病调查的结果(原发性高血压常常会伴有高尿酸血症的发生)一致。
[0033]
从上表1可见，各营养素mg和叶酸单用不同剂量组抑制尿酸增加有一定的作用，补充镁在15mg/kg以上获得相似的降尿酸的效果(p值均《0.05)。各剂量二联营养素组合均有较好的抑制尿酸增加的作用。由表1提示我们较低剂量的镁(如5mg/kg)与较高剂量的叶酸
组合(如0.08mg/kg)表现出较好的抑制尿酸增加的作用，15-55mg/kg的镁与叶酸组合抑制尿酸增加效果比较接近(p值均《0.01)，其中较大剂量55mg/kg的镁与低剂量叶酸组合抑制尿酸增加的数值略高于与较高剂量叶酸的组合。
[0034]
金正均q值法[金正均，张笑文，等概率和曲线与q5e-估计合并用药效果的一种新方法，上海第二医学院学报，1981]又称概率相加法，根据在量效曲线区内，两种药物联用的药理作用及两种药物单用的药理作用，用如下公式计算q＝e(a b)/(ea eb-ea*eb)，式中分子代表“实测合并效应”，分母代表“期望合并效应”，q为两者之比。q《0.85时认为两种药物联用为拮抗作用，0.85《q《1.15时认为是相加作用，q》1.15时认为是协同作用。
[0035]
按照上述公式，对各剂量组间效应分析的计算结果如下：
[0036]
表2：镁 叶酸不同剂量组与镁和叶酸分别单用对尿酸指标的效应分析
[0037][0038]
从表2结果可以看出镁 叶酸合用时，2、3、5剂量组q值均≥1.15，表示镁 叶酸组合相较于各自单独使用都具有较好的抑制尿酸增加的协同增效作用。其中镁 叶酸(15 0.04)mg/kg组协同效应最强,较低剂量镁与较高剂量叶酸(5 0.08)mg/kg协同增效的作用较好，镁大于15m/kg时与较低剂量的叶酸表现出较好的协同增效作用，镁和叶酸剂量都大时仅表现出相加的效果。综上，从表1-2所得结果可见，较低剂量镁与较高剂量叶酸组合在抑制尿酸增加的效果上表现出较好的协同增效作用；较高剂量的镁(15-55mg/kg)与较低剂量的叶酸组合具有很好的降尿酸作用，且表现出较好的协同增效作用；增大镁和叶酸的剂量不能进一步降低尿酸水平，且两者间协同作用减弱。
[0039]
实施例2：本发明组合物对自发性高血压(shr)高尿酸模型大鼠尿酸水平的影响
[0040]
一、方法
[0041]
自发性高血压伴高尿酸血症大鼠模型：采用自发性高血压大鼠(shr)，spf级，雌雄各半，14-15周龄，购自北京维通利华，检验合格后纳入实验。
[0042]
所有自发性高血压大鼠高嘌呤饲料喂养(制备方法如下)连续8周，另外采用10只shr大鼠给以普通饲料喂养，作为shr对照组。所有大鼠自由饮水。
[0043]
高嘌呤饲料制备：将酵母干粉、腺嘌呤分别以10％和0.1％的含量均匀拌入粉碎的大鼠颗粒饲料中，重新压粒成型制得高嘌呤饲料。
[0044]
造模结束后所有大鼠从眼眶静脉丛采血，离心，利用全自动生化免疫分析仪测定其尿酸水平，根据其体重和尿酸水平将选取造模成功的shr大鼠随机分成7组，每组9-10只。分别按照以下配方(其中所用镁为碳酸镁，剂量以含镁量计)进行灌胃给药：每天一次，灌胃
容积按照10ml/kg。shr对照组及模型组给以相同容积的纯净水，连续灌胃8周。实验结束后采血用相同方法测定尿酸水平。
[0045]
表3：各组大鼠给药后尿酸、磷、镁和叶酸水平变化(n＝9-10)
[0046][0047]
与shr组比较，
#
p《0.05，
##
p《0.01；与模型组比较*p《0.05，**p《0.01；与镁 叶酸1组比较，
&
p《0.05，
&&
p《0.01；与镁 叶酸2组比较，
※
p《0.05，
※※
p《0.01；与黑樱桃提取物(80mg/kg)比较，
§§
p《0.01；与黑樱桃提取物(40mg/kg)比较，
⊕⊕
p《0.01。
[0048]
二、结果
[0049]
由实验结果可见黑樱桃提取物、镁 叶酸组合均具有较好的降高尿酸血症模型大鼠尿酸的作用(p《0.05)，黑樱桃提取物 镁 叶酸进行组合应用，较黑樱桃提取物或镁 叶酸组合具有更加显著的降尿酸效果(p《0.01)。
[0050]
利用相同于实施例1中的q值计算法，计算得到黑樱桃提取物 (镁 叶酸)组合物对降尿酸的效应分析，结果如下：
[0051]
表4：本发明组合物对大鼠尿酸指标效应分析
[0052][0053]
黑樱桃天然提取物单用具有降低尿酸的效果，与本发明的营养素组合使用，两个剂量组合物q值均≥1.15，表明黑樱桃提取物与营养素组合具有协同降低尿酸的作用。两组含黑樱桃提取物的组合物降低尿酸的效果均很明显，且黑樱桃低剂量组合具有更好的协同作用(q值更大)。
[0054]
实施例3本发明组合物对高血压伴高尿酸血症患者尿酸水平的影响
[0055]
一、方法
[0056]
我们从既往维护的高血压随访队列中选择，符合条件的参与者45-75岁的高血压
患者，定义为筛查和招募时静息收缩压≥140mmhg或舒张压≥90mmhg，或者正在服用降压药。主要排除标准包括医生诊断的中风史、心肌梗死(mi)史、心力衰竭史、冠状动脉血运重建后史和/或先天性心脏病史。
[0057]
测定基线血浆镁及尿酸(ua)浓度，选择伴有高尿酸血症患者(男性ua浓度≥417μmol/l，女性ua浓度≥357μmol/l)，按照血镁浓度＜819μmol/l，随机分为三组，一组给予安慰剂，一组给予400mg黑樱桃提取物 50mg镁(硫酸镁剂，以含镁量计，下同) 0.8mg叶酸，另一组给予400mg黑樱桃提取物 150mg镁 0.4mg叶酸；血镁浓度≥819μmol/l，也随机分成三组，给药方式同血镁浓度《819μmol/l的方式。。研究周期8周，主要观察高尿酸血症治愈率(男性ua浓度＜417μmol/l，女性ua浓度＜357μmol/l)，次要结果是ua浓度的变化，定义为入组时的ua减去出组时的ua。
[0058]
二、结果
[0059]
表5本发明组合物对高尿酸血症治疗及尿酸变化水平的影响
[0060][0061]
与对应安慰剂组比较，
##
p《0.01或
**
p《0.01。
[0062]
以上分析结果提示，高血压伴高尿酸血症患者当其血镁浓度小于819μmol/l时，可以通过补充较高剂量的叶酸、小剂量的镁与黑樱桃提取物的组合大大降低尿酸水平，58％高尿酸血症患者的尿酸水平可以降到高尿酸血症的诊断标准以下，相对而言采用较高剂量的镁与较低剂量叶酸组合，有改善的效果，但不如前者降尿酸治疗高尿酸血症的治疗效果好；当其血镁水平大于819μmol/l时，可以补充较高剂量的镁、小剂量叶酸与黑樱桃提取物的组合大大降低尿酸水平，45％高尿酸血症患者尿酸水平可降至诊断标准之下，相对而言采用较低剂量的镁和较大剂量叶酸的组合，有改善效果，但不如前者降尿酸治疗高尿酸血症的治疗效果好。