一种预防和治疗糖尿病的中药组合物、制备方法及用途与流程

1.本发明属于中药制剂领域，具体涉及一种预防和/或治疗糖尿病的中药组合物、制备方法及用途。


背景技术：

2.糖尿病(diabetes mellitus)是一组由于体内胰岛素绝对或相对不足以致高血糖为特征的内分泌代谢疾病，从而导致人体内脂肪、蛋白质以及碳水化合物代谢紊乱，进一步对人体器官造成慢性损伤以及功能性障碍的代谢性疾病。
3.现在糖尿病的治疗大多以西医为主，西医治疗糖尿病大多用磺脲类、双胍类与胰岛素等药，其降血糖作用虽然明显，能达到调节代谢紊乱的程度，但复发率较高，出现合并症较多，其病变不仅在肺、胃、肾，发展后累及到心、脑、肝、脾等。目前对此病的治疗，以及其并发症的防治，是现代医学颇感棘手的问题。
4.糖尿病是中国传统医学上消渴症范畴，是一种病程长，病理变化复杂，并发症较多的慢性进行性加重的终生性疾病。传统的消渴的病机主要在于阴津亏损，燥热偏胜，而以阴虚为本，燥热为标，两者互为因果。病变的脏腑主要在肺、胃、肾，三脏之中，虽有所偏重，但往往又互相影响。cn201810522811.6公开了一种治疗糖尿病的中药组合物及其制备方法。公开了下重量份的原料组分：柴胡6-18份、白芍10-20份、黄芪15-45份、葛根9-18份、佛手6-15份、枳壳3-12份、西洋参3-12份、枸杞子6-18份、桑椹9-18份、桑叶6-15份、麦冬6-18份、山萸肉6-18份、丹参9-18份和当归6-18份。该中药用于治疗糖尿病，主要是以疏肝调气为治疗法则，达到益气养阴，生津止渴之功。
5.王骏骐在《灵芝对糖尿病患者在治疗过程中的辅助效用》中记载了灵芝水提物对糖尿病小鼠的降血糖作用，灵芝多糖能改善糖尿病小鼠的糖耐量，提高血清胰岛素水平，降低血清tg和tc水平，并且公开了灵芝制剂治疗糖尿病的临床案例。
6.随着实践的发展，中医对糖尿病发病机制有所更新和补充，传统中医脏象中的“肝、脾”与ii型糖尿病的发生发展及治疗的关系逐渐为临床医生所关注，气血津液兼顾才是攻克糖尿病的关键。
7.疏肝健脾法治疗糖尿病的理论依据：脾主运化，既能生血又可统血，升清降浊，当脾虚时则生化乏源，水液亏虚内停反聚生成病理产物痰浊，又会阻碍津液的输布，而诱发为2型糖尿病。肝主疏泄，具有疏通、宣泄功能，以维系全身气机顺畅、调达，痛而不通，通而不痛，通而不滞，散而不郁。肝失疏泄，气机不畅则郁而化火，火邪伤阴，灼伤阴液，肝郁不调不仅会导致血瘀的后果，而且肝气横逆乘脾，而使脾胃运化功能失常，气血精液输布障碍而易发为消渴。因此，其发病主责病位在之于脾、肝，脾虚失健、肝郁气结，血瘀内停是该病的主要病机。
8.cn200810055636.0公开了一种治疗肝病的中药组合物。该组合物由黄芪、葛根、柴胡、灵芝、赤芍、鳖甲、丹参、三七、鸡骨草、叶下珠按一定重量配比制备而成，该中药具有益气疏肝、活血软坚的功效，用于治疗慢性肝炎、肝纤维化、早期肝硬化，目前正在由盈科瑞
(珠海)创新医药制造有限公司开展新药临床研究，属于中药一类新药。本组方是在该中药组合物的基础上发展而来。
9.尽管现代医学研究对黄芪、葛根、柴胡、灵芝和丹参及其提取物降糖作用有研究报道，但是无几味药组合治疗糖尿病的研究。本组方从中医的辨证论治角度思考，再结合当今社会科学医学，而量身制订的健脾疏肝活血之法，有显著的临床应用价值。


技术实现要素：

10.本发明的目的在于提供一种用于预防和/或治疗糖尿病的中药组合物、制备方法及用途。本发明的另一目的在于提供一种包含上述中药组合物的制剂，该制剂可用于预防和/或治疗糖尿病，特别是早期糖尿病，并改善糖尿病患者脂肪代谢。本发明的中药组合物是通过下述技术方案实现的：
11.根据本发明的一个方面，提供一种预防和/或治疗糖尿病的中药组合物，中药组合物由如下原料药制成：
12.黄芪250—750重量份；葛根150—450重量份；柴胡150—450重量份；灵芝75—225重量份；丹参150—450重量份。
13.优选地，中药组合物由如下原料药制成：
14.黄芪400—600重量份；葛根240—360重量份；柴胡240—360份；灵芝120—180重量份；丹参240—360重量份。
15.优选地，中药组合物由如下原料药制成：
16.黄芪500重量份；葛根300重量份；柴胡300重量份；灵芝150重量份；丹参300重量份。
17.根据本发明的一个方面，提供一种预防和/或治疗糖尿病的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：将全部生药用水提取，得提取液，将提取液浓缩后，回收水，得到浓缩液，将浓缩液进一步浓缩，干燥，粉碎得到所述的中药组合物；所述生药重量与所述水的体积比为1:8～1:12。
18.优选地，所述制备提取液的具体步骤包括：将全部原料药煎煮或加热回流2～3次，每次0.5～2小时，得提取液。
19.根据本发明的另一个方面，提供一种治疗糖尿病中药组合物的制备方法，包括如下步骤：将原料药黄芪、葛根和丹参用乙醇水溶液提取，得提取液，将提取液浓缩后，回收溶剂，得到浓缩液a；柴胡和灵芝用水提取，得提取液b，提取液b与浓缩液a合并，进一步浓缩，干燥，粉碎得到所述的中药组合物；优选地，所述乙醇水溶液为50％～90％乙醇水溶液，所述原料药与所述溶剂的重量体积比为1:8～1:12。
20.优选地，所述制备提取液的具体步骤包括：将黄芪、葛根和丹参用乙醇水溶液煎煮或加热回流2～3次，每次0.5～2小时，得提取液,将提取液浓缩后，回收溶剂，得到浓缩液a；柴胡和灵芝用水煎煮或加热回流2～3次，得提取液b。
21.优选地，所述制备中药组合物的具体步骤包括：将所述浓缩液进一步在60℃～70℃浓缩至相对密度1.30～1.35浸膏，干燥，粉碎得到所述的中药组合物。
22.该制备方法的具体步骤可为，将全部原料药材，分别加8倍量水提取3次，每次提取时间为1小时，合并提取液，回收水，得到浓缩液，可选地，所述浓缩液进一步60℃浓缩，干
燥，粉碎得到所述中药组合物。
23.该制备方法的具体步骤可为，将全部原料药材黄芪、葛根和丹参用70％乙醇提取，原料药与乙醇的重量体积比1:8，煎煮或加热回流3次，每次1小时，所得提取液浓缩后，回收乙醇，得到浓缩液；柴胡和灵芝用水煎煮或加热回流3次，每次1小时，得提取液，提取液与浓缩液合并，可选地60℃将所述提取液与浓缩液进一步浓缩，干燥，粉碎得到所述的中药组合物。
24.根据本发明的又一个方面，提供一种用于预防和/或治疗糖尿病的制剂，所述制剂包括上述所述的中药组合物及药学上可接受的辅料。
25.药学上可接受的辅料包括但不限于淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、糊精、硬脂酸镁、甘露醇、甜菊素等中的一种或几种。
26.该制剂的制备步骤为，浓缩液可不经进一步浓缩，直接加入溶剂和适量辅料，制成液体制剂，例如口服液。
27.该制剂的制备步骤为，将浓缩液可以进一步浓缩为相对密度为1.30-1.35的浸膏，经干燥，粉碎，加入药学上可接受的辅料，制成固体口服制剂，例如片剂、颗粒剂等。
28.以常规的中药制剂方法制备成药学上任何一种常用剂型，包括但不限于片剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、丸剂、微丸剂、软胶囊、口服液、滴丸、分散片、泡腾片、口服液体制剂等。
29.此外，本发明中药组合物还可以采用传统的水煎法制备得到。
30.根据本发明的另一个方面，提供中药组合物用于制备预防和/或治疗糖尿病的药物中的用途。
31.根据本发明的另一个方面，提供中药组合物用于制备改善糖尿病患者脂肪代谢的药物中的用途。优选地，所述用途是指中药组合物用于制备改善糖尿病患者的血脂或肝脏脂肪代谢的药物中的用途。
32.本发明中各药物作用机理如下：
33.本组方由柴胡、黄芪、葛根、灵芝、丹参五味药组成，具有健脾疏肝活血之功。黄芪，甘，温，具有益气补中，尤其擅长补中焦脾气，脾气运则气血生化有源，升清降浊功能恢复则气血精液输布正常，灵芝亦能助黄芪补气之力；柴胡，辛、苦，微寒，具有疏肝解郁，调畅全身气机，促进肝脏疏通、宣泄功能，气行水湿自除，气行则瘀血自消；丹参，苦,微寒，活血祛瘀，葛根一方面升阳止泻协助升举阳气，输布津液，另一方面助丹参活血化瘀；诸药合用，共奏健脾疏肝活血之功，对于治疗肝郁脾虚糖尿病疗效确切。
34.本发明的有益效果：
35.1、中药组合物用于预防和/或治疗糖尿病，主要是以疏肝健脾为预防和/或治疗法则，从而实现预防和治疗糖尿病、防止糖尿病并发症的发生和发展。
36.2、本发明的黄芪、葛根、柴胡、灵芝、丹参的水或有乙醇提取物为纯天然成分，更安全，无明显的副作用，所得提取物具有显著的调节糖和脂质代谢的作用，且用水或醇制备提取物时，制备工艺经济、简便、适用于工业化大规模生产，病人服用方便。
附图说明
37.图1为本发明中药组合物对糖尿病模型小鼠口服糖耐量(ogtt)的影响；
38.图2为本发明中药组合物对糖尿病模型小鼠口服糖耐量(auc)的影响；
39.图3为本发明中药组合物对糖尿病模型小鼠胰岛素耐量(itt)的影响；
40.图4为本发明中药组合物对糖尿病模型小鼠胰岛素耐量(auc)的影响；
41.图5为本发明中药组合物对糖尿病模型小鼠血清脂质的影响；
42.图6为本发明中药组合物对糖尿病模型小鼠肝脏脂质的影响。
具体实施方式
43.为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明实施方式作进一步地详细描述。
44.实施例1
45.取干燥的黄芪500g、葛根300g、丹参300g，用体积分数70％的乙醇，固液比为1:8(即1100g饮片加入8800ml体积的乙醇)，加热回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩液备用；取干燥的柴胡300g、灵芝150g，用水进行提取，固液比为1:8(即450g饮片加入3600ml体积的水)，加热回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液与前述浓缩液合并，减压浓缩至相对密度为1.30～1.35(60℃)的浸膏，干燥，粉碎成干膏粉。上述干膏粉及糊精100g，混匀，制粒，即制成颗粒剂。
46.实施例2
47.取干燥的黄芪500g、葛根300g、柴胡300g、灵芝150g、丹参300g，用水进行提取，固液比为1:8(即1550g饮片加入12400ml体积的水)，加热回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.30～1.35(60℃)的浸膏，干燥，粉碎成干膏粉；上述干膏粉及糊精100g，混匀，制粒，即制成颗粒剂。
48.实施例3
49.取干燥的黄芪500g、葛根300g、柴胡300g、灵芝150g、丹参300g，用水进行提取，固液比为1:12(即1550g饮片加入18600ml体积的水)，加热回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.30～1.35(70℃)的浸膏，干燥，粉碎成干膏粉；上述干膏粉及糊精100g、微晶纤维素100g、硬脂酸镁3g，混匀，制粒，压片，即制成片剂。
50.实施例4
51.取干燥的黄芪250g、葛根450g、柴胡450g、灵芝75g、丹参150g，用水进行提取，固液比为1:10(即1375g饮片加入13750ml体积的水)，加热回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.30～1.35(70℃)的浸膏，干燥，粉碎成干膏粉。上述干膏粉及糊精75g、微晶纤维素75g、硬脂酸镁2g，混匀，制粒，压片，即制成片剂。
52.实施例5
53.取干燥的黄芪750g、葛根150g、柴胡150g、灵芝225g、丹参450g，用水进行提取，固液比为1:10(即1725g饮片加入17250ml体积的水，加热回流提取3次，每次1小时，滤过，滤液合并，减压浓缩至相对密度为1.30～1.35(65℃)的浸膏，干燥，粉碎成干膏粉。上述干膏粉及糊精130g，混匀，制粒，即制成颗粒剂。
54.实施例6
55.中药组合物预防和/或治疗糖尿病模型小鼠代谢性疾病的实验研究
56.为进一步说明所得提取物在制备防治ii型糖尿病药物中的应用，下面以实施例1和实施例2为例，进行动物实验，该实验以c57bl/6雄性小鼠为研究对象，以口服糖耐量、胰
岛素耐量、血清脂质和肝脏脂质为指标，研究本发明中药组合物对糖尿病的预防和/或治疗作用。
57.1、试验材料
58.1.1受试药：取实施例1和实施例2的干膏粉适量，分别用蒸馏水配成表1所需浓度。
59.1.2对照药：二甲双胍
60.1.3动物：雄性spf级小鼠、c57bl/6j、清洁级
61.1.4链脲霉素(streptozotocin，stz)、厂家：sigma chemical co
62.2、实验动物给药及造模
63.雄性spf级6-8周龄c57bl/6j小鼠50只，体重20-22g。适应性饲养一周后，按照体重将小鼠随机分为7组(表1)。正常对照组喂食普通小鼠饲料，模型组、二甲双胍组(20mg/ml)、组合物水提物低剂量组(100mg/ml)、组合物水提物高剂量组(200mg/ml)、组合物醇提物低剂量组(100mg/ml)、组合物醇提物高剂量组(200mg/ml)喂食高脂饲料并灌胃给予相应药物，每日1次，灌胃剂量10ml/kg。
64.给药以提取物干膏粉重量计，组合物醇提物是按照实施例1的方法制备的干膏粉，组合物水提物是按照实施例2的方法制备的干膏粉。
65.预防给药48天后，禁食12-16小时腹腔注射stz造模(100mg/kg.bw；stz用4℃、ph 4.4、0.1m的无菌柠檬酸缓冲液进行配制，现用现配)，连续注射5天，正常对照组腹腔注射溶剂柠檬酸缓冲液。注射完成一周后，禁食12h，测量小鼠的血糖值，并记录。造模成功后喂食普通小鼠饲料，继续给药30天取血、处死。
66.表1各组分组给药及造模方法
[0067][0068]
3、试验方法及结果
[0069]
3.1组合物对糖尿病模型小鼠口服糖耐量(ogtt)的影响
[0070]
造模成功后，测量小鼠的血糖值，并记录。操作：实验前禁食12-16h，按照血糖仪(罗氏活力型)和试纸说明书要求进行测试，以空腹血糖(fbg)做为ogtt 0min的血糖值。随后按体重灌胃给予生理盐水配制的2g/kg葡萄糖溶液，分别在给予糖负荷的15、30、60、90、120min时尾部取血检测血糖值，并记录作图。若实验动物在给予糖负荷后各时间点血糖明显升高，或曲线下面积增大则表明糖耐量异常。
[0071]
表2小鼠ogtt各时间点血糖值
[0072][0073]
注：#，与正常对照组对比，p＜0.05；##，与正常对照组对比，p＜0.01；
[0074]
*，与模型组对比，p＜0.05；**，与模型组对比，p＜0.01。
[0075]
试验结果：与正常对照组比较，模型组小鼠灌胃葡萄糖后，血糖显著升高，最高值出现在30-60min，随后逐渐下降，120min后趋于稳定，各相应时间点的血糖值均高于正常对照组，auc显著高于正常对照组，即表现出明显的糖耐量异常。
[0076]
与模型组比较，二甲双胍组与组合物水提低剂量组的各时间点血糖值显著降低，二者效果相当。提示二甲双胍组与组合物水提低剂量对于高脂饮食导致的糖耐量异常有一定的防治作用。(见图1-2)
[0077]
auc曲线下面积用以下公式计算：
[0078]
auc＝[(bg0 bg15)
×
0.25/2] [(bg15 bg30)
×
0.25/2] [(bg30 bg60)
×
[0079]
0.5/2] [(bg60 bg90)
×
1/2] [(bg90 bg120)
×
1/2]
[0080]
继续给药30天，各组小鼠末次给药后禁食12h，取血，测空腹血糖(fbg)。
[0081]
表3造模后小鼠空腹血糖值
[0082][0083][0084]
试验结果：与正常组比较，模型组的空腹血糖明显升高；与模型组比较，二甲双胍组空腹血糖显著降低，其余各给药组的空腹血糖均有降低趋势。
[0085]
结合表2和表3的空腹血糖，造模成功后模型组小鼠空腹血糖10.47
±
2.24mmol/l，组合物水提物低剂量组小鼠空腹血糖11.82
±
4.42mmol/l；给药30天后模型组小鼠空腹血糖18.61
±
3.02mmol/l，组合物水提物低剂量组小鼠空腹血糖15.47
±
2.26mmol/l；对比两组数据，提示本中药组合物能够控制糖尿病小鼠的血糖水平，延缓糖尿病发展，对糖尿病小鼠有一定的治疗作用。
[0086]
3.2组合物对糖尿病模型小鼠胰岛素耐量实验(itt)的影响
[0087]
胰岛素耐量实验，是用来评价ii型糖尿病患者胰岛素敏感程度。正常情况下，腹腔
注射胰岛素后血糖会显著下降，60-90min又会逐渐恢复；若调节功能失常，腹腔注射胰岛素后血糖浓度下降缓慢，且短时间不能回复到原值。对造模成功的小鼠进行胰岛素耐量实验评价胰岛素敏感程度。实验前禁食4-6h，以小鼠空腹血糖做为itt 0min的血糖值。随后腹腔注射0.5u/kg胰岛素，其余操作同糖耐量实验。
[0088]
补充胰岛素耐量计算公式：
[0089]
auc＝[(bg0 bg15)
×
0.25/2] [(bg15 bg30)
×
0.25/2] [(bg30 bg60)
×
0.5/2] [(bg60 bg90)
×
1/2]
[0090]
表4小鼠itt各时间点血糖值
[0091][0092]
注：#，与正常对照组对比，p＜0.05；##，与正常对照组对比，p＜0.01；
[0093]
*，与模型组对比，p＜0.05；**，与模型组对比，p＜0.01。
[0094]
试验结果：与正常对照组比较，模型组小鼠腹腔注射胰岛素后，血糖下降缓，各相应时间点的血糖值均高于正常对照组，auc显著高于正常对照组，即表现出明显的胰岛素抵抗；与模型组比较，腹腔注射胰岛素后各个给药组的各时间点血糖值显著降低，各个组合物给药组的胰岛素敏感度显著改善，且auc均显著减少(见图3-4)。说明本发明组合物能有效提高糖尿病患者的胰岛素敏感性，效果与二甲双胍相当。
[0095]
3.3组合物对糖尿病模型小鼠血清和肝脏脂质的影响
[0096]
各组小鼠末次给药后禁食12h，摘取眼球取血，静置后离心收集血清，参照试剂盒(厂家：南京建成生物工程研究所)说明书进行操作，测定血清中甘油三酯(tg)、总胆固醇(tc)、低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)、高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)的含量。
[0097]
表5小鼠血清脂质含量
[0098][0099]
注：#，与正常对照组对比，p＜0.05；##，与正常对照组对比，p＜0.01；
[0100]
*，与模型组对比，p＜0.05；**，与模型组对比，p＜0.01。
[0101]
试验结果：与模型组相比，组合物水提低剂量、高剂量，醇提低剂量、高剂量组血清的ldl-c含量均显著下降(p《0.05)，组合物各给药组对血清tc、tg、hdl-c有一定的改善作用，但未见明显差异。(见图5)。
[0102]
表6小鼠肝脏脂质含量
[0103][0104][0105]
注：#，与正常对照组对比，p＜0.05；##，与正常对照组对比，p＜0.01；
[0106]
*，与模型组对比，p＜0.05；**，与模型组对比，p＜0.01。
[0107]
试验结果：与正常对照组相比，糖尿病模型组小鼠肝脏的tg、tc、ldl-c值均显著升高，hdl-c值有降低趋势；与模型组小鼠相比，各给药组的tg含量均显著下降，tc、ldl-c、hdl-c有改善趋势(见图6)。
[0108]
综上实验结果显示，组合物水提物低剂量组预防高脂饮食加stz腹腔注射诱导糖尿病小鼠的糖代谢异常作用最显著。组合物水提物和醇提物均能够有效降低糖尿病小鼠的血清ldl-c含量以及肝脏tg，tc、ldl-c含量，从而调节肝脏脂质代谢，降低血脂。
[0109]
以上对本发明进行了详细介绍。以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。