cardiac muscle cell arrhythmia model."中华中医药杂志031.002(2016):656-658.再例如，feng y,teng l,wang y,et al.using spectrum-effect relationships coupled with lc
–
tof
–
ms to screen anti-arrhythmic components of the total flavonoids in hypericum attenuatum extracts[j].journal of chromatographic science,2020.然而，关于乌腺金丝桃是否存在能够抑制胰岛素抵抗的活性化合物尚未有文献进行报道，本技术的发明人通过对乌腺金丝桃中活性成分的研究，出人意料的发现了能够抑制胰岛素抵抗的活性化合物，并据此完成了本发明。
技术实现要素：
[0006]
为了抑制胰岛素抵抗，本发明提供一种抑制胰岛素抵抗活性的化合物及其应用。具体而言，本发明拟采用如下的技术方案：
[0007]
本发明一方面涉及一种抑制胰岛素抵抗活性的化合物，其选自金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇中的一种或者两种的组合。
[0008]
在本发明的一个优选实施方式中，所述化合物被制备成药学上可接受的制剂。
[0009]
在本发明的另一个优选实施方式中，所述药学上可接受的制剂为口服制剂，例如，片剂、胶囊剂、液体制剂、缓释制剂。
[0010]
在本发明的另一个优选实施方式中，所述药学上可接受的制剂还包括药学上可接受的辅料。
[0011]
本发明另一方面涉及一种抑制胰岛素抵抗活性的组合物，其包括作为活性成分的金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇，其中，金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇的重量比为1：4～3：2；优选为1.8-2.2：2.8-3.2。本发明通过金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇以特定比例进行组合，有助于发挥两者的协同抑制胰岛素抵抗活性作用。
[0012]
本发明另一方面还涉及上述活性化合物或者药物组合物的应用，所述应用是指在制备抑制胰岛素抵抗的药物中的应用。
[0013]
在本发明的一个优选实施方式中，所述药物被用于治疗二型糖尿病。
[0014]
有益效果
[0015]
本发明的金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇具有抑制胰岛素抵抗活性，特别是两者以特定比例进行组合时，有助于发挥两者的协同抑制胰岛素抵抗活性作用。本发明对于提供一种新的治疗二型糖尿病的药物具有重要意义。
具体实施方式
[0016]
为了进一步理解本发明，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0017]
如无特殊说明，本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。
[0018]
实施例1
[0019]
1.材料
[0020]
1.1金丝桃苷(下称化合物1)和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇(下称化合物2)按照文献方法采用色谱技术进行分离和纯化(董建勇等，赶山鞭中黄酮类化学成分研究[j].中国药学杂志，2005，40(12):897-899.)
[0021]
1.2实验动物
[0022]
3周龄的spf级雌性sd大鼠200只，饲养于黑龙江中医药大学附属第一医院动物中心。25℃恒温(50％湿度)清洁级饲养，不加饲维生素制品，12h光照和12h黑暗周期性交替进行。
[0023]
2实验方法
[0024]
2.1ir大鼠模型的建立
[0025]
用饲喂高脂高糖饲料的方法建立了胰岛素抵抗大鼠模型。饲料配方(g/100g)：果糖60％、脂肪15％、蛋白质21％、纤维3％、维生素和矿物质1％。
[0026]
2.2大鼠分组及给药方法
[0027]
大鼠经造模成功后，排除未造模成功的大鼠，随机分为：模型组、阳性对照组(罗格列酮1mg/kg/d)、实验组1-5组(按照表1所示的比例将其配置于生理盐水中进行给药)，正常对照组20只常规饲料喂养。共计8组，每组20只。实验组灌胃给药，每次灌胃剂量均为1mg/kg/d，每日1次，持续8周。实验期间大鼠自由饮水进食，每1d记录摄食量，每3天记录体重。末次饲喂后，禁食不禁水10h，心脏取血，常规分离血清，保存于4℃备用。
[0028]
2.3观察指标
[0029]
(1)空腹血糖水平的测定
[0030]
末次饲喂后，大鼠禁食不禁水5h，尾静脉取血10μl加入到0.2ml的蛋白沉淀剂中，室温静置7min，4500r/min，离心15min，取上清150μl，参照葡萄糖试剂盒说明书方法测定空腹血糖水平。
[0031]
(2)口服葡萄糖耐量的测定
[0032]
末次饲喂后,大鼠禁食不禁水5h，灌胃2g/kg的葡萄糖溶液,在灌胃0、0.5、1、2h后分别尾静脉取血10μl测定该时刻血糖水平，按照以下公式计算葡萄糖曲线下面积(areaunder the curve，auc)：
[0033]
auc(h
·
mmol/l)＝0.25
×
a 0.5
×
b 0.75
×
c 0.5
×
d(a、b、c、d分别表示0、0.5、1、2h的血糖水平)
[0034]
(3)血清胰岛素水平的测定
[0035]
末次饲喂后，大鼠禁食不禁水10h，摘眼球取血，室温静置30min后，7500r/min离心15min，取血清10μl，参照elisa试剂盒说明书测定血清胰岛素水平。按照下述公式分别计算模型评估胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,homa-ir)和胰岛素敏感性检测指数(quantitative insulin sensitivity check index,quicki):
[0036]
homa-ir＝空腹血糖水平
×
血清胰岛素水平/22.5
[0037]
quicki＝1/(lg空腹血糖水平 lg血清胰岛素水平)
[0038]
(4)大鼠体重增重测定
[0039]
2.4统计学分析：
[0040]
实验结果以x
±
s表示，采用spss 22.0软件进行单因素one-way anova方差分析，同时用tukeys法进行两两比较，以p﹤0.05作为具有统计学意义上的差异。
[0041]
3实验结果
[0042]
3.1大鼠一般状况
[0043]
正常对照组大鼠皮毛有光泽，精神状态表现良好，动作反应灵敏，行为活跃。
[0044]
模型组大鼠造模成功后皮毛干枯无光泽，精神状态较差，动作迟缓，反应较慢，活动度差，并随着饲养时间程度加重。
[0045]
本发明药物组造模结束后开始灌胃进行药物治疗，与模型组对比，实验各组大鼠行为学表现均有一定改善，其中实验组4最为显著。
[0046]
3.2大鼠的体重增量
[0047]
表1活性化合物对胰岛素抵抗大鼠体重增量的影响(x
±
s)
[0048]
组别n给药(共计1mg/kg/d)摄食量(g)体重增加(g)正常组20-285
±
16105
±
16阳性对照组20罗格列酮226
±
18#167
±
14*模型组20-229
±
20#192
±
15##实验组120化合物1218
±
17#172
±
19*实验组220化合物2225
±
19#183
±
20*实验组320化合物1：化合物2为1：4217
±
15#152
±
15*实验组420化合物1：化合物2为2：3215
±
19#132
±
17**实验组520化合物1：化合物2为3：3223
±
21#149
±
16*
[0049]
注：#p《0.05，##p《0.01，与正常对照组比较。*p《0.05，**p《0.01与模型组比较。
[0050]
3.3活性化合物对胰岛素抵抗大鼠相关指标的影响
[0051]
表2活性化合物对胰岛素抵抗大鼠各个指标的影响(n＝20)
[0052]
组别空腹血糖(mmol/l)血清胰岛素(mu/l)homa-irquick1正常组9.32
±
1.5210.9
±
0.54.56
±
0.420.523
±
0.009阳性对照组10.27
±
1.40**13.2
±
0.8*5.41
±
0.47*0.442
±
0.012*模型组13.48
±
1.24##14.7
±
0.4##8.32
±
0.72##0.382
±
0.015##实验组110.38
±
1.34*13.4
±
0.6*5.95
±
0.58*0.456
±
0.012*实验组210.52
±
1.27*13.8
±
0.7*5.87
±
0.49*0.445
±
0.014*实验组39.98
±
1.30**12.3
±
0.7*4.63
±
0.47*0.491
±
0.015*实验组49.66
±
1.02**11.5
±
0.8*4.56
±
0.57*0.501
±
0.011*实验组510.12
±
1.22**12.1
±
0.9*5.11
±
0.61*0.478
±
0.018*
[0053]
注：##p《0.01与正常对照组比较；*p《0.05与模型组比较。
[0054]
由表2的实验结果可知，模型大鼠空腹血糖水平显著高于正常对照组(p﹤0.01)。活性化合物与模型对照组比较，活性化合物各组大鼠空腹血糖水平显著下降；以实验组4最显著。与阳性对照组比较没有统计学显著性，说明实验组4已能够实现与罗格列酮类似的活性。结果表明实验各个组均能显著降低ri大鼠的空腹血糖水平，实验组4效果最好。由表2的实验结果可知，实验各个组均在降低胰岛素水平、减轻胰岛素抵抗、增加胰岛素敏感性方面有显著效果，实验组4(金丝桃苷：7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇＝2：3)效果最优。
[0055]
以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。
–
tof
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ms to screen anti-arrhythmic components of the total flavonoids in hypericum attenuatum extracts[j].journal of chromatographic science,2020.然而，关于乌腺金丝桃是否存在能够抑制胰岛素抵抗的活性化合物尚未有文献进行报道，本技术的发明人通过对乌腺金丝桃中活性成分的研究，出人意料的发现了能够抑制胰岛素抵抗的活性化合物，并据此完成了本发明。
技术实现要素：
[0006]
为了抑制胰岛素抵抗，本发明提供一种抑制胰岛素抵抗活性的化合物及其应用。具体而言，本发明拟采用如下的技术方案：
[0007]
本发明一方面涉及一种抑制胰岛素抵抗活性的化合物，其选自金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇中的一种或者两种的组合。
[0008]
在本发明的一个优选实施方式中，所述化合物被制备成药学上可接受的制剂。
[0009]
在本发明的另一个优选实施方式中，所述药学上可接受的制剂为口服制剂，例如，片剂、胶囊剂、液体制剂、缓释制剂。
[0010]
在本发明的另一个优选实施方式中，所述药学上可接受的制剂还包括药学上可接受的辅料。
[0011]
本发明另一方面涉及一种抑制胰岛素抵抗活性的组合物，其包括作为活性成分的金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇，其中，金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇的重量比为1：4～3：2；优选为1.8-2.2：2.8-3.2。本发明通过金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇以特定比例进行组合，有助于发挥两者的协同抑制胰岛素抵抗活性作用。
[0012]
本发明另一方面还涉及上述活性化合物或者药物组合物的应用，所述应用是指在制备抑制胰岛素抵抗的药物中的应用。
[0013]
在本发明的一个优选实施方式中，所述药物被用于治疗二型糖尿病。
[0014]
有益效果
[0015]
本发明的金丝桃苷和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇具有抑制胰岛素抵抗活性，特别是两者以特定比例进行组合时，有助于发挥两者的协同抑制胰岛素抵抗活性作用。本发明对于提供一种新的治疗二型糖尿病的药物具有重要意义。
具体实施方式
[0016]
为了进一步理解本发明，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0017]
如无特殊说明，本发明实施例中所涉及的试剂均为市售产品，均可以通过商业渠道购买获得。
[0018]
实施例1
[0019]
1.材料
[0020]
1.1金丝桃苷(下称化合物1)和5，7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇(下称化合物2)按照文献方法采用色谱技术进行分离和纯化(董建勇等，赶山鞭中黄酮类化学成分研究[j].中国药学杂志，2005，40(12):897-899.)
[0021]
1.2实验动物
[0022]
3周龄的spf级雌性sd大鼠200只，饲养于黑龙江中医药大学附属第一医院动物中心。25℃恒温(50％湿度)清洁级饲养，不加饲维生素制品，12h光照和12h黑暗周期性交替进行。
[0023]
2实验方法
[0024]
2.1ir大鼠模型的建立
[0025]
用饲喂高脂高糖饲料的方法建立了胰岛素抵抗大鼠模型。饲料配方(g/100g)：果糖60％、脂肪15％、蛋白质21％、纤维3％、维生素和矿物质1％。
[0026]
2.2大鼠分组及给药方法
[0027]
大鼠经造模成功后，排除未造模成功的大鼠，随机分为：模型组、阳性对照组(罗格列酮1mg/kg/d)、实验组1-5组(按照表1所示的比例将其配置于生理盐水中进行给药)，正常对照组20只常规饲料喂养。共计8组，每组20只。实验组灌胃给药，每次灌胃剂量均为1mg/kg/d，每日1次，持续8周。实验期间大鼠自由饮水进食，每1d记录摄食量，每3天记录体重。末次饲喂后，禁食不禁水10h，心脏取血，常规分离血清，保存于4℃备用。
[0028]
2.3观察指标
[0029]
(1)空腹血糖水平的测定
[0030]
末次饲喂后，大鼠禁食不禁水5h，尾静脉取血10μl加入到0.2ml的蛋白沉淀剂中，室温静置7min，4500r/min，离心15min，取上清150μl，参照葡萄糖试剂盒说明书方法测定空腹血糖水平。
[0031]
(2)口服葡萄糖耐量的测定
[0032]
末次饲喂后,大鼠禁食不禁水5h，灌胃2g/kg的葡萄糖溶液,在灌胃0、0.5、1、2h后分别尾静脉取血10μl测定该时刻血糖水平，按照以下公式计算葡萄糖曲线下面积(areaunder the curve，auc)：
[0033]
auc(h
·
mmol/l)＝0.25
×
a 0.5
×
b 0.75
×
c 0.5
×
d(a、b、c、d分别表示0、0.5、1、2h的血糖水平)
[0034]
(3)血清胰岛素水平的测定
[0035]
末次饲喂后，大鼠禁食不禁水10h，摘眼球取血，室温静置30min后，7500r/min离心15min，取血清10μl，参照elisa试剂盒说明书测定血清胰岛素水平。按照下述公式分别计算模型评估胰岛素抵抗指数(insulin resistance index,homa-ir)和胰岛素敏感性检测指数(quantitative insulin sensitivity check index,quicki):
[0036]
homa-ir＝空腹血糖水平
×
血清胰岛素水平/22.5
[0037]
quicki＝1/(lg空腹血糖水平 lg血清胰岛素水平)
[0038]
(4)大鼠体重增重测定
[0039]
2.4统计学分析：
[0040]
实验结果以x
±
s表示，采用spss 22.0软件进行单因素one-way anova方差分析，同时用tukeys法进行两两比较，以p﹤0.05作为具有统计学意义上的差异。
[0041]
3实验结果
[0042]
3.1大鼠一般状况
[0043]
正常对照组大鼠皮毛有光泽，精神状态表现良好，动作反应灵敏，行为活跃。
[0044]
模型组大鼠造模成功后皮毛干枯无光泽，精神状态较差，动作迟缓，反应较慢，活动度差，并随着饲养时间程度加重。
[0045]
本发明药物组造模结束后开始灌胃进行药物治疗，与模型组对比，实验各组大鼠行为学表现均有一定改善，其中实验组4最为显著。
[0046]
3.2大鼠的体重增量
[0047]
表1活性化合物对胰岛素抵抗大鼠体重增量的影响(x
±
s)
[0048]
组别n给药(共计1mg/kg/d)摄食量(g)体重增加(g)正常组20-285
±
16105
±
16阳性对照组20罗格列酮226
±
18#167
±
14*模型组20-229
±
20#192
±
15##实验组120化合物1218
±
17#172
±
19*实验组220化合物2225
±
19#183
±
20*实验组320化合物1：化合物2为1：4217
±
15#152
±
15*实验组420化合物1：化合物2为2：3215
±
19#132
±
17**实验组520化合物1：化合物2为3：3223
±
21#149
±
16*
[0049]
注：#p《0.05，##p《0.01，与正常对照组比较。*p《0.05，**p《0.01与模型组比较。
[0050]
3.3活性化合物对胰岛素抵抗大鼠相关指标的影响
[0051]
表2活性化合物对胰岛素抵抗大鼠各个指标的影响(n＝20)
[0052]
组别空腹血糖(mmol/l)血清胰岛素(mu/l)homa-irquick1正常组9.32
±
1.5210.9
±
0.54.56
±
0.420.523
±
0.009阳性对照组10.27
±
1.40**13.2
±
0.8*5.41
±
0.47*0.442
±
0.012*模型组13.48
±
1.24##14.7
±
0.4##8.32
±
0.72##0.382
±
0.015##实验组110.38
±
1.34*13.4
±
0.6*5.95
±
0.58*0.456
±
0.012*实验组210.52
±
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±
0.7*5.87
±
0.49*0.445
±
0.014*实验组39.98
±
1.30**12.3
±
0.7*4.63
±
0.47*0.491
±
0.015*实验组49.66
±
1.02**11.5
±
0.8*4.56
±
0.57*0.501
±
0.011*实验组510.12
±
1.22**12.1
±
0.9*5.11
±
0.61*0.478
±
0.018*
[0053]
注：##p《0.01与正常对照组比较；*p《0.05与模型组比较。
[0054]
由表2的实验结果可知，模型大鼠空腹血糖水平显著高于正常对照组(p﹤0.01)。活性化合物与模型对照组比较，活性化合物各组大鼠空腹血糖水平显著下降；以实验组4最显著。与阳性对照组比较没有统计学显著性，说明实验组4已能够实现与罗格列酮类似的活性。结果表明实验各个组均能显著降低ri大鼠的空腹血糖水平，实验组4效果最好。由表2的实验结果可知，实验各个组均在降低胰岛素水平、减轻胰岛素抵抗、增加胰岛素敏感性方面有显著效果，实验组4(金丝桃苷：7，3’，4
’‑
四羟基黄烷醇＝2：3)效果最优。
[0055]
以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。
再多了解一些
本文用于企业家、创业者技术爱好者查询，结果仅供参考。
