预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于畜牧兽医技术领域，涉及一种饲料添加剂及其制备方法，具体地说是一种预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂及其制备方法和应用。


背景技术：

2.近年来，消费者对食品安全的关注度不断提升，国家对兽用抗生素的监管也愈发严格。农业农村部公布了《关于2018～2021年开展兽用抗菌药使用减量化行动试点工作的通知》，明确了养殖过程中限抗、禁抗时间表，药物饲料添加剂在2020年开始陆续退出市场。面对国家出台的“限抗”、“禁抗”政策，药物饲料添加剂的退出，导致畜禽生长发育过程中抵抗力变差、腹泻率增加，给养殖业带来极大的损失。因此，开发能够替代抗生素部分功能的产品，具有很大的市场价值。


技术实现要素：

3.本发明的目的，是要提供一种预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂，以解决不使用药物饲料添加剂时，畜禽抵抗力差的问题；
4.本发明的另一个目的，是要提供上述预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂的一种制备方法；
5.本发明的还有一个目的，是要提供上述预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂的一种应用。
6.为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
7.一种预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂，以重量份数计，制成它的有效成分的原料包括：复方氨基酸0.086～0.36份、益生菌粉3～6份、烟酰胺1～3份、壳聚糖0.5～2份、β-环糊精1～3份和富里酸0.5～2份。
8.作为一种限定，以重量份数计，制成所述复方氨基酸的有效成分的原料包括：谷氨酸1～12份、苏氨酸6～18份和甘氨酸1.6～6份。
9.作为另一种限定，以重量份数计，制成所述益生菌粉的有效成分的原料包括：枯草芽孢杆菌菌粉2～4份、地衣芽孢杆菌菌粉1～3份和凝结芽孢杆菌菌粉1～3份；
10.枯草芽孢杆菌购自无锡拜弗德生物科技有限公司；
11.地衣芽孢杆菌购自江苏远山生物技术有限公司；
12.凝结芽孢杆菌购自江苏远山生物技术有限公司；
13.本发明中使用了这些益生菌，但并不限于上述公司的益生菌，应理解为，本发明要求保护的技术方案中所涉及的益生菌为具有相同性能的所有同种同属的益生菌。
14.作为进一步限定，所述预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂中含枯草芽孢杆菌≥1.0
×
106cfu/g、地衣芽孢杆菌添加量≥1.0
×
106cfu/g、凝结芽孢杆菌≥1.0
×
106cfu/g。
15.本发明还提供了上述预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂的一种制备方法，是取所有原料混匀，即得所述预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂。
16.本发明也提供了上述预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂的一种应用，其特征在于，所述预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂用于饲喂动物，以提高免疫力，并预防/治疗腹泻。
17.作为一种限定，所述预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂用于添加至动物饲料中。
18.由于采用了上述技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：
19.本发明通过添加合理配比的复方氨基酸、益生菌粉、免疫增强剂(壳聚糖和富里酸)、保持有益菌稳定的稳定剂(烟酰胺和β-环糊精)，能够有效提高动物的机体免疫力，预防/治疗腹泻，提高生产性能，进而减少/代替抗生素的使用；
20.其中，复方氨基酸中含有谷氨酸、苏氨酸和甘氨酸。谷氨酸是食物蛋白的重要组成成分，在营养代谢、能量供应、免疫响应、氧化应激及信号通路调节等过程中能够发挥重要作用。苏氨酸作为动物生长过程中必不可少的一种氨基酸，在动物营养代谢、免疫应答等过程中起着重要作用，例如由糖蛋白、黏蛋白组成的黏液中就富含大量苏氨酸。甘氨酸在营养代谢、能量供应等过程中起重要作用，还具有拮抗内毒素和热应激的作用。复方氨基酸在为机体提供所需氨基酸的同时，还能够抗热应激反应，提高相应的免疫蛋白含量，进而提高生产性能。复方氨基酸也能够促进益生菌的生长和定植；三种氨基酸相互配合达到抗氧化应激及信号通路调节作用，有助于体内糖蛋白和黏蛋白组成的黏膜免疫组分生成，具有拮抗细菌内毒素和抗热应激作用。而超出本发明的配比或使用其它氨基酸都无法很好的起到上述作用；
21.益生菌粉中含有枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌，能够有效杀灭肠道内致病菌，快速定植肠道，形成生物膜，保护肠道，并能够刺激相应的非特异性免疫功能；枯草芽孢杆菌能够消耗肠道内氧气，产生抑菌物质，具有杀菌作用；地衣芽孢杆菌具有产酶作用，能够促进代谢；凝结芽孢杆菌能够调节肠道菌群失调。三种益生菌相互配合达到上述作用，且制得的预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂中含有的三种菌适合常温保存，进一步降低临床使用成本；
22.烟酰胺能够为机体提供所需的维生素，同时还能够维持肠道内有益菌的稳定性，促进有益菌增殖，提高机体非特异性免疫，增强特异性免疫；
23.壳聚糖和富里酸也能够维持肠道内有益菌的稳定性，促进有益菌增殖，提高机体非特异性免疫和特异性免疫；
24.β-环糊精作为载体，能够包被稳定各组分，维持复方氨基酸和益生菌粉的稳定性；
25.本发明所添加的各组分绿色环保，使用后效果好、无残留，能够替代药物饲料添加剂增强动物免疫力，降低动物腹泻率，尤其是能够增强禽类动物的免疫力，降低禽类动物的腹泻率；
26.本发明的饲料添加剂能够替代部分抗生素，在贯彻落实国家政策的同时，降低养殖业损失，减少药物饲料添加剂通过食物链对人体产生危害，为食品安全保驾护航；
27.本发明原料来源广、成本低廉，能够给养殖企业带来良好的经济效益。
28.本发明的预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂用于添加至动物饲料中饲喂动物，尤其是适用于饲喂禽类动物。
具体实施方式
29.下面通过具体实施例对本发明做进一步详细说明，应当理解所描述的实施例仅用于解释本发明，并不限定本发明。
30.实施例1一种预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂的制备方法
31.本实施例制备预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂，包括依次进行的以下步骤：
32.1)取4kg谷氨酸、9kg苏氨酸和3kg甘氨酸，混合均匀，得复方氨基酸(标记为fa1)。
33.2)取200kg枯草芽孢杆菌菌粉(枯草芽孢杆菌含量为1.0
×
109cfu/g)、100kg地衣芽孢杆菌菌粉(地衣芽孢杆菌含量为1.0
×
108cfu/g)和200kg凝结芽孢杆菌菌粉(凝结芽孢杆菌含量为1.0
×
108cfu/g)，混合均匀，得益生菌粉(标记为j1)。
34.3)取100kg烟酰胺、84kg壳聚糖、230kgβ-环糊精和70kg富里酸，混合均匀，得辅料(标记为m1)。
35.4)取16kg复方氨基酸、500kg益生菌粉和484kg辅料m1，混合均匀，即得预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂(标记为n1)，其中含有2.0
×
108cfu/g枯草芽孢杆菌、1.0
×
107cfu/g地衣芽孢杆菌、2.0
×
107cfu/g凝结芽孢杆菌。
36.本实施例制备的预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂用于添加至动物饲料中饲喂动物，尤其是适用于饲喂禽类动物。
37.实施例2～6预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂的制备方法
38.实施例2～6分别为一种预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂的制备方法，它们的步骤与实施例1基本相同，不同之处仅在于原料用量的不同，具体详见表1：
39.表1预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂各步骤中的原料用量一览表
40.[0041][0042]
实施例2～6其它部分的内容，与实施例1相同。
[0043]
实施例7预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂的应用
[0044]
一)预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂对腹泻的改善效果实验
[0045]
a1)实验动物及设计
[0046]
实施例1～6所提供的预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂n1～n6，分别添加至普通市售蛋鸡产蛋高峰期配合饲料中，混合而成的鸡饲料一一对应标记为sn11～sn16，饲料添加剂n1～n6的添加量均为饲料重量的0.5％。
[0047]
本次试验在河北省某发生腹泻情况的大型鸡场进行。选取3500只300日龄具有腹泻症状的海兰灰蛋鸡，保证相同的腹泻率，随机分成7组，每组500只，分别为对照组和a1～a6组，其中，对照组饲喂普通市售蛋鸡产蛋高峰期配合饲料，a1～a6组分别饲喂鸡饲料sn11～sn16，全天不限量饲喂。试验时间自2020年4月20日起至2020年4月27日止。
[0048]
a2)饲养管理
[0049]
试验采用三层立体笼养，饲喂对应饲料，自由采食与饮水。按照海兰灰蛋鸡常规免疫程序免疫和饲养管理，每日进行鸡舍消毒，保证鸡舍卫生。试验期间每天观察腹泻情况，并进行统计计算腹泻率，具体结果见下表：
[0050]
表2预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂对鸡腹泻的应用效果一览表
[0051]
组别对照组a1组a2组a3组a4组a5组a6组鸡只数(只)500500500500500500500初始腹泻鸡只数(只)278278278278278278278初始腹泻率(％)55.655.655.655.655.655.655.67天后腹泻鸡只数(只)2344345403246447天后腹泻率(％)46.88.69.08.06.49.28.8病死鸡只数(只)35765436病死率(％)7.01.41.21.00.80.61.2
[0052]
由表2可知，饲喂7天后，a1～a6组腹泻降至9.2％以下、病死率低于1.4％，而对照组腹泻率为46.8％、病死率达7.0％，a1～a6组相较于对照组腹泻率和病死率均明显降低。以上实验结果证明本发明制备的预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂能够明显降低腹泻率，改善腹泻症状。
[0053]
二)预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂对抗致病性大肠杆菌的改善效果实验
[0054]
b1)实验动物及设计
[0055]
实施例1～6所提供的预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂n1～n6，分别添加至普通市售蛋鸡产蛋高峰期配合饲料中，混合而成的鸡饲料一一对应标记为sn21～sn26，饲料添加剂n1～n6的添加量均为饲料重量的0.5％。
[0056]
本次试验在河北省某发生致病性大肠杆菌感染的大型鸡场进行。选取700只350日龄感染致病性大肠杆菌的罗曼褐蛋鸡，随机分成7组，每组100只，分别为对照组和b1～b6组，其中，对照组饲喂普通市售蛋鸡产蛋高峰期配合饲料，b1～b6组分别饲喂鸡饲料sn21～sn26，全天不限量饲喂。试验时间自2019年10月14日起至2019年10月21日止。
[0057]
b2)饲养管理
[0058]
试验采用三层立体笼养，饲喂对应饲料，自由采食与饮水。按照海兰灰蛋鸡常规免疫程序免疫和饲养管理，每日进行鸡舍消毒，保证鸡舍卫生。
[0059]
b3)测定指标及方法
[0060]
试验开始和结束时，分别对所有的鸡只通过肛门拭子采集样品，检测抗致病性大肠杆菌的粘膜抗体，并统计计算均值，具体结果见下表：
[0061]
表3预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂对致病性大肠杆菌感染的应用效果一览表
[0062]
组别对照组a1组a2组a3组a4组a5组a6组鸡只数(只)100100100100100100100初始鸡只抗体滴度均值0.1200.1200.1170.1190.1200.1210.1177天后鸡只抗体滴度均值0.1170.1380.1370.1390.1400.1380.139
[0063]
由表3可知，饲喂开始时，对照组和b1～b6组的抗体滴度均值都在0.120左右，饲喂7天后a1～a6组的抗体滴度均值提高到0.137以上，而对照组的抗体滴度均值降低至0.117，变化不大。b1～b6组相较于对照组的抗体滴度值明显提升。以上实验结果证明本发明制备的预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂能够明显提高鸡的免疫力。
[0064]
实施例8预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂的急性毒理学试验
[0065]
实施例1所提供的预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂n1，分别以正常量、10倍量、50倍量和100倍量添加至spf鸡育雏期饲料中，混合而成的鸡饲料一一对应标记为spfn1～spfn4，其中正常量是添加spf鸡饲料重量的0.5％的饲料添加剂n1。
[0066]
选取50只21日龄的spf鸡，随机分成5组，每组10只，分别为对照组和c1～c4组，其中，对照组饲喂spf鸡育雏期饲料，c1～c4组分别饲喂鸡饲料spfn1～spfn4，全天不限量饲喂。试验时间自2020年5月11日起至2020年10月25日止。饲喂过程中观察并记录鸡的临床反应，饲喂结束后分别剖检各组spf鸡只的器官病变情况，结果显示对照组和c1～c4组，spf鸡的各项指标均正常，无病变现象。以上实验结果证明本发明制备的预防腹泻提高免疫力的饲料添加剂不具有急性毒性。