治疗癌症的方法与流程

治疗癌症的方法
1.优先权要求
2.本技术要求于2019年8月8日提交的国际申请序列号pct/cn2019/099754的优先权和权益。前述申请的全部内容通过援引并入本文。
发明领域
3.本公开内容涉及治疗癌症的方法及涉及可用于此种治疗中的组合。


背景技术：

4.有效治疗过度增殖性病症(包括癌症)是肿瘤学领域的持续目标。一般而言，癌症是由于控制细胞分裂、分化及凋亡性细胞死亡的正常过程失调所致且其特征是恶性细胞的增殖，其具有无限增长、局部扩增及全身转移的潜力。正常过程的失调包括信号转导途径的异常、及/或基因转录调节的异常、和/或对因子(例如生长因子)的反应与正常细胞中的不同。
5.前列腺癌的特征在于对雄激素信号传递途径的依赖性。雄激素受体中某些特定基因改变可活化雄激素信号传递途径且促进前列腺癌细胞生长。转移性前列腺癌的治疗的主要模式历来聚焦于靶向雄激素-雄激素受体信号传导，通过减少可用来结合至雄激素受体的配体(雄激素)的量或阻断雄激素受体与其配体结合(临床中使用的两种主要类型的抗前列腺癌药物)。
6.第一种抗前列腺癌药物为雄激素拮抗剂，也称为抗雄激素。抗雄激素通过阻断受体，竞争细胞表面上的结合位点或影响雄激素的产生来改变雄激素途径。最常见的抗雄激素为雄激素受体拮抗剂，其作用于靶细胞水平且竞争性结合至雄激素受体。通过与循环雄激素竞争前列腺细胞受体上的结合位点，抗雄激素促进细胞凋亡且抑制前列腺癌生长。
7.第二种抗前列腺癌药物为雄激素合成酶的抑制剂。细胞色素p45017a1(也称为17α-羟化酶/c17,20裂解酶(cyp17a1))为产生孕激素、矿皮质素、糖皮质素、雄激素及雌激素的途径中的关键酶。抑制cyp17a1为靶向雄激素受体(ar)信号传导途径提供有效治疗工具；然而，当该途径在受体配体结合后水平或通过非激素介导机制被活化时，cyp17a1抑制剂可能不足。在无意受任何特定理论约束下，此意指额外的因素可能参与前列腺癌细胞生长且可能与使用cyp17a1抑制剂后耐药性的发展有关。(rini,b.i.及small,e.j.，hormone-refractoryprostate cancer.cuf.treat.options oncol.2002；3:437；singh,p.、yam,m.、russell,p.j.及khatri,a.，molecular and traditional chemotherapy:a united front against prostate cancer.cancer lett.2010；293:1)。
8.许多前列腺癌的特征还在于磷酸肌醇3-激酶(pi3k)信号传导途径的组成性或其他异常活化。pi3k途径是人类癌症中最常被活化的途径之一且在致癌作用中的重要性已得到充分确立(samuels y及ericson k.oncogenic pi3k and its role in cancer.current opinion in oncology，2006；18:77-82)。信号传导的引发以磷脂酰肌醇-4,5-双磷酸酯(pip2)的磷酸化开始以产生磷脂酰肌醇-3,4,5-p3(pip3)。pip3为关键第二信使，其将含有
普列克底物蛋白(pleckstrin)同源结构域的蛋白质募集至在那里它们被活化的细胞膜。这些蛋白质中研究最多的是蛋白激酶b(akt)，其促进细胞存活、生长及增殖。已显示在许多情况下，前列腺癌中pi3k信号传导的活化机制是肿瘤抑制蛋白磷酸酶及张力蛋白(tensin)(pten)的功能缺陷。
9.雄激素剥夺疗法仍然是晚期前列腺癌的治疗的护理标准。尽管最初反应良好，但几乎所有患者均不可避免地发展为更具侵袭性的去势抗性表型。证据表明，去势抵抗性前列腺癌的发展与雄激素受体的持续信号传导因果相关。不管去势雄激素水平(《50ng/ml)而进展的前列腺癌称为去势抵抗性前列腺癌(crpc)。阿比特龙(abiraterone)及恩杂鲁胺(enzalutamide)为经批准用于治疗化学疗法后转移性去势抵抗性前列腺癌(mcrpc)的药物。阿比特龙为cyp17的不可逆抑制剂，是肾上腺及肿瘤内雄激素两者合成的关键酶，而恩杂鲁胺为雄激素受体拮抗剂。阿比特龙及恩杂鲁胺均可降低患者的雄激素信号水平以阻断前列腺癌生长。然而，大多数对阿比特龙及恩杂鲁胺反应的患者最终发展出抗性。针对于此类癌症的目前可用的治疗是限于在先前治疗失败的mcrpc患者中具有约2.8至4.0个月的中值pfs的轮换阿比特龙、恩杂鲁胺及化学疗法(de bono等人，eur urol.2018；74(1):37-45；caffo等人，eur urol.2015；68(1):147-53.)。然而，最近在文献中报导紫杉烷类(多烯紫杉醇(docetaxel)及卡巴他赛(cabazitaxel))与ar靶向剂阿比特龙及恩杂鲁胺之间的交叉抗性，这使得针对治疗抗性mcrpc患者的当前治疗策略的临床管理甚至更具挑战性(van soest等人，eur jcancer.2013；49(18):3821-30.；shiota等人，cancer sci.2018；109(10):3224-34.doi:10.1111/cas.13751.)。因此，对开发针对治疗抗性mcrpc患者的新疗法存在大的未被满足的医学需求。


技术实现要素：

10.本技术尤其提供治疗患者中的去势抵抗性前列腺癌的方法，其中所述患者对一种或多种前列腺癌治疗具有抗性，所述方法包括向患者施用：
11.(i)n-{(1s)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1h-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(阿氟色替(afuresertib))或其药学上可接受的盐；
[0012]
(ii)1-(2-氯-吡啶-4-基)-3-(4-甲基-吡啶-3-基)-咪唑烷-2-酮(cfg920)或其药学上可接受的盐；以及
[0013]
(iii)任选的皮质类固醇，诸如泼尼松(prednisone)。
[0014]
本发明的一个或多个实施方案的详细内容阐述于以下描述中。由所述描述及权利要求书，本发明的其他特征、目的及优点将是明显的。
附图说明
[0015]
图1a至1d是显示cfg920及阿氟色替在minipdx小鼠模型中的mdx191210的治疗中的抗肿瘤效力的图。值表示为平均值
±
sem。图1a显示每个研究组的相对发光单位(rlu)值，如在cell titer-glo(ctg)测定中确定。图1b显示每个研究组的相对肿瘤增殖值(％)。图1c显示每个研究组的体重变化(以克计)。图1d显示每个研究组中的相对体重变化(rcbw，报告为自第0天起的百分比变化)。
[0016]
图2a至2c是显示cfg920及阿氟色替在人类患者中的抗肿瘤效力的图。图2a显示接
受研究治疗之前和之后患者的psa水平变化(截止日：2020年7月23日)。图2b显示研究治疗下的患者的睪酮水平变化。图2c显示研究治疗下的患者的醛固酮水平变化。
[0017]
详细描述
[0018]
cfg920是细胞色素17a1(cyp17a1)(一种用于睪酮合成的酶)及cyp11b2(醛固酮合成酶)的新颖非类固醇可逆双重抑制剂。诺华制药公司(novartis pharmaceuticals)已在转移性去势抵抗性前列腺癌(mcrpc)患者中实施人类首次(first-in-human)i/ii期研究。(参见clinicaltrials.gov identifier:nct01647789)。该研究评估安全性、推荐的ii期剂量(rp2d)、药代动力学数据(pk)及药效动力学数据(pd)，且达成在mcrpc患者中通过证实在该研究中前列腺特异性抗原(psa)自基线下降≥50％的未经证实的比率对于先前接受过化学疗法的患者及未接受过化学疗法的患者而言分别为28％(57位中16位；95％置信区间[ci]：17至42)及26％(124位中32位；95％ci：18至34)的概念证明。对于mcrpc患者，随着恩杂鲁胺及乙酸阿比特龙的批准，最常用的药物已改变(beer等人，j clin oncol.2014；32(suppl_4)，abs lba1.；scher等人，n engl j med.2012；367(13):1187-97.；shore等人，lancet oncol.2016；17(2):153-63.；de bono等人，n engl j med.2011；364:1995-2005.；ryan等人，n engl j med.2013；368(2):138-48.)。然而，在有限数量的患有mcrpc的患者中观察到在多烯紫杉醇及恩杂鲁胺进展后对阿比特龙的反应更温和，包括仅8％的患者在随后的阿比特龙中psa下降≥50％。阿比特龙治疗后的中值进展时间(psa，客观或症状性)仅15.4周(95％ci 10.7至20.2)(loriot等人，ann oncol.2013；24(7):1807-12.；noonan等人，ann oncol.2013；24(7):1802-7.)。
[0019]
在无意受限于任何特定理论下，恩杂鲁胺及阿比特龙加上泼尼松治疗后mcrpc患者中的低psa反应率及短无疾病进展生存期(pfs)的潜在原因之一为雄激素-信号途径以外的其他因素也有助于前列腺癌细胞生长及分化。磷脂酰肌醇3-激酶(pi3k)/akt途径已被牵扯到前列腺癌发生及去势抗性，尽管pi3k/akt途径的确切功能尚待充分阐明(chen等人，front biosci(landmark编).2016；21:1084-91.)。经活化的akt易位至细胞质及细胞核且活化除了迁移及入侵(vo等人，endocrinology.2013；154(5):1768-79.)外与前列腺癌细胞的存活(wegie等人，int j cancer.2008；122(7):1521 9.；lee等人，mol cancer.2004；3:31.doi:10.1186/1476-4598-3-31.)、增殖(gao等人，biochem biophys res commun.2003；310(4):1124 32.)及凋亡(kim等人phytother res.2014；28(3):423-31.)有关的下游靶标。10号染色体上的肿瘤抑制磷酸酶及张力蛋白同源物(pten)缺失被认为是pi3k及akt(sansal等人j clin oncol.2004；22(14):2954-63.；carnero等人，curr cancer drug targets.2008；8(3):187-98.)途径的主要抑制剂且常常在人类肿瘤中缺失。前列腺癌是最常受pten异常影响的癌症之一(sulis等人，trends cell biol.2003；13(9):478 83.)。pi3k/akt途径活化及pten状态的生物标志物显示为前列腺癌中的胰岛素生长因子结合蛋白2(mehrian-shai等人，proc natl acad sci usa.2007；104(13):5563-8.)。已研究硼替佐米(bortezomib)用于体外前列腺癌治疗，其中发现硼替佐米使磷酸化akt去磷酸化，导致pi3k/akt/mtor信号的抑制，从而导致诱导前列腺癌细胞生长停滞及凋亡(befani等人，j mol med(berl).2012；90(1):45-54.)。另外，在根除性前列腺切除术的约16％至20％的原发性前列腺肿瘤样本及》50％的去势抗性肿瘤中鉴别出通过缺失或突变的pten的失活(hamid等人eur urol.2019年7月；76(1):89-97；jamaspishvili等人nat rev urol.2018；
15(4):222-234.)。先前多烯紫杉醇治疗失败的mcrpc患者的》60％中存在pten缺失，因此意指在先前标准治疗失败后pten缺失引起的akt途径活化在mcrpc的进展中起着至关重要的作用(de bono等人annals of oncology.2016；27(suppl_6):243-265.)。
[0020]
据临床研究报告，约超过70％的crpc患者最初对阿比特龙或恩杂鲁胺的第一线治疗反应(de bono等人，n engl j med.2011；364:1995
–
2005)。然而，在约15个月时在几乎所有反应者中均发生后续psa增加或肿瘤进展(de bono等人，eur urol.2018；74(1):37-45)。随着crpc的进展，pten缺失的患者的百分比增加导致pi3k/akt途径的活化，其可能作为阿比特龙抗性及/或恩杂鲁胺抗性的主要机制发挥关键作用。
[0021]
本技术提供治疗患者中的去势抵抗性前列腺癌的方法，其包括向患者施用：
[0022]
(i)n-{(1s)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1h-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺(阿氟色替)或其药学上可接受的盐；
[0023]
(ii)1-(2-氯-吡啶-4-基)-3-(4-甲基-吡啶-3-基)-咪唑烷-2-酮(cfg920)或其药学上可接受的盐；以及
[0024]
(iii)任选的皮质类固醇；
[0025]
其中该患者对一种或多种前列腺癌治疗具有抗性。
[0026]
阿氟色替具有以下化学结构：
[0027][0028]
cfg920具有以下化学结构：
[0029][0030]
在一些实施方案中，患者对一种或多种先前的前列腺癌治疗具有抗性。前列腺癌治疗可包括使用一种或多种抗雄激素剂、化学治疗剂、或其组合的治疗。在一些实施方案中，患者是对一种或多种前列腺癌治疗的护理标准(其可包含抗雄激素剂、化学治疗剂、或其组合中的一种或多种)具有抗性。在一些实施方案中，患者是对包含抗雄激素剂、化学治疗剂、或其组合中的一种或多种的治疗具有抗性。在一些实施方案中，患者是对至少两种抗雄激素剂具有抗性。在一些实施方案中，患者是对至少一种抗雄激素剂及至少一种化学治疗剂具有抗性。在一些实施方案中，抗雄激素剂包含阿比特龙、恩杂鲁胺、阿帕鲁胺(apalutamide)及达洛鲁胺(darolutamide)中的一种或多种或其药学上可接受的盐或前药。在一些实施方案中，化学治疗剂包含多烯紫杉醇及卡巴他赛中的一种或多种或其药学上可接受的盐或前药。在一些实施方案中，患者罹患去势抵抗性前列腺癌且具有磷酸酶及张力蛋白同源物(pten)缺失。在一些实施方案中，基于先前治疗结果确定患者为抗性。例如，通过识别已与一种或多种治疗疗法的抗性相关的一种或多种生物标志物确定患者为抗性。在一些实施方案中，通过基因组分析确定患者为抗性。在一些实施方案中，透过活体外测试活检组织样本确定患者为抗性。
1841788。iupac名称为n-((s)-1-(3-(3-氯-4-氰基苯基)-1h-吡唑-1-基)丙-2-基)-5-(1-羟乙基)-1h-吡唑-3-甲酰胺。cas号1297538-32-9。达洛鲁胺首先在pct专利申请公开案wo 2011/051540中描述，该案的内容是以引用的方式并入本文中。
[0040][0041]
多烯紫杉醇及其药学上可接受的盐为通常用于治疗各种癌症(包括乳癌、肺癌、前列腺癌、胃癌、头颈癌及卵巢癌)的基于紫杉烷的化学治疗剂。多烯紫杉醇可以自sanofi-aventis商购得且首先在法国专利申请公开案fr2601675a1中公开。iupac名称为[(1s,2s,3r,4s,7r,9s,10s,12r,15s)-4-乙酰氧基-1,9,12-三羟基-15-[(2r,3s)-2-羟基-3-[(2-甲基丙-2-基)氧基羰基氨基]-3-苯基丙酰基]氧基-10,14,17,17-四甲基-11-氧代-6-氧杂四环[11.3.1.0
3,10
.0
4,7
]十七-13-烯-2-基]苯甲酸酯。cas号114977-28-5。
[0042][0043]
卡巴他赛及其药学上可接受的盐为基于紫杉烷的化学治疗剂。卡巴他赛可以自sanofi-aventis商购得且首先在pct申请公开案wo 96/30355中公开。iupac名称为(2α,5β,7β,10β,13α)-4-乙酰氧基-13-({(2r,3s)-3-[(三丁氧基羰基)氨基]-2-羟基-3-苯基丙酰基}氧基)-1-羟基-7,10-二甲氧基-9-氧代-5,20-环氧紫杉-11-烯-2-基苯甲酸酯。cas号183133-96-2。
[0044][0045]
制备阿氟色替的方法在美国专利第8,410,158号及第8,609,711号中描述。在一些实施方案中，阿氟色替是呈盐酸盐的形式。在一些实施方案中，阿氟色替是呈盐酸盐的形式，其具有例如n-{(1s)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1h-吡唑-5-基)-2-噻吩甲酰胺与盐酸的1:1化学计量比。在一些实施方案中，阿氟色替是呈结晶n-{(1s)-2-氨基-1-[(3-氟苯基)甲基]乙基}-5-氯-4-(4-氯-1-甲基-1h-吡唑-5-基)-2-噻
吩甲酰胺盐酸盐的形式。在一些实施方案中，结晶盐酸盐具有如使用cu kα辐射在粉末x射线衍射图中测得的一个或多个以2θ(
±
0.3
°
)表示的选自7.2
°
、14.4
°
、17.9
°
、18.5
°
、20.8
°
、21.5
°
、22.4
°
、22.9
°
、23.7
°
、24.5
°
、24.7
°
、25.1
°
、25.7
°
、27.3
°
、28.2
°
、28.8
°
、30.4
°
、32.4
°
、32.7
°
、35.2
°
、36.1
°
、40.0
°
、41.3
°
及41.7
°
的特征衍射峰。在一些实施方案中，结晶盐酸盐具有在约220℃下具有吸热峰的dsc热曲线图。制备结晶阿氟色替及其盐的方法在美国专利第8,609,711号中描述。
[0046]
制备cfg920的方法在美国专利第re45,173号中描述。在一些实施方案中，cfg920是呈游离碱的形式。在一些实施方案中，cfg920是呈结晶形式。在一些实施方案中，cfg920为呈无水结晶形式的游离碱。在一些实施方案中，无水结晶游离碱具有使用cu kα辐射在粉末x射线衍射图中测得的一个或多个以2θ(
±
0.3
°
)表示的选自12.7
°
、13.5
°
、15.7
°
、17.2
°
、18.7
°
、19.1
°
、20.0
°
、20.6
°
、22.2
°
、24.1
°
、25.6
°
、26.1
°
、26.5
°
、27.1
°
及27.8
°
的特征衍射峰。在一些实施方案中，无水结晶游离碱具有在约175℃下具有吸热峰的dsc热曲线图。
[0047]
在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐是以以下(基于游离碱计)的总的每日剂量施用至患者：
[0048]
(i)约1mg至约1,000mg；或
[0049]
(ii)约1mg至约500mg；或
[0050]
(iii)约10mg至约500mg；或
[0051]
(iv)约20mg至约400mg；或
[0052]
(v)约30mg至约300mg；或
[0053]
(vi)约40mg至约250mg；或
[0054]
(vii)约50mg至约200mg；或
[0055]
(viii)约75mg至约150mg；或
[0056]
(ix)约75mg至约100mg。
[0057]
在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐是以基于游离碱计约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约75mg、约80mg、约90mg、约100mg、约110mg、约120mg、约125mg、约130mg、约140mg或约150mg的总的每日剂量施用至患者。在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐是以基于游离碱计约75mg、约100mg、约125mg或约150mg的总的每日剂量施用至患者。
[0058]
在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐是每日一次(qd)施用至患者。在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐是每日一次以基于游离碱计约75mg至约150mg的剂量施用至患者。在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐是每日一次以基于游离碱计约10mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约75mg、约80mg、约90mg、约100mg、约110mg、约120mg、约125mg、约130mg、约140mg或约150mg的剂量施用至患者。在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐是每日一次以基于游离碱计约75mg、约100mg、约125mg或约150mg的剂量施用至患者。
[0059]
在一些实施方案中，cfg920或其药学上可接受的盐是以以下(基于游离碱计)的总的每日剂量施用至患者：
[0060]
(i)约1mg至约1,000mg；或
[0061]
(ii)约1mg至约750mg；或
[0062]
(iii)约10mg至约750mg；或
[0063]
(iv)约20mg至约500mg；或
[0064]
(v)约30mg至约400mg；或
[0065]
(vi)约40mg至约300mg；或
[0066]
(vii)约50mg至约300mg；或
[0067]
(viii)约75mg至约300mg；或
[0068]
(ix)约100mg至约250mg；或
[0069]
(x)约125mg至约200mg；或
[0070]
(xi)约150mg至约200mg；或
[0071]
(xii)约75mg至约200mg。
[0072]
在一些实施方案中，cfg920或其药学上可接受的盐是以基于游离碱计约10mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约75mg、约80mg、约90mg、约100mg、约110mg、约120mg、约125mg、约130mg、约140mg、约150mg、约160mg、约170mg、约175mg、约180mg、约190mg、约200mg、约210mg、约220mg、约225mg、约230mg、约240mg、约250mg、约260mg、约270mg、约275mg、约280mg、约290mg或约300mg的总的每日剂量施用至患者。在一些实施方案中，cfg920或其药学上可接受的盐是以约150mg或约200mg的总的每日剂量施用至患者。
[0073]
在一些实施方案中，cfg920或其药学上可接受的盐是每日两次(bid)施用至患者。例如，cfg920的150mg的总的每日剂量可每日两次以每次剂量75mg施用。在一些实施方案中，cfg920或其药学上可接受的盐是以以下(基于游离碱计)的剂量施用至患者：
[0074]
(i)每日两次每次剂量约1mg至约1,000mg(总的每日剂量为约2mg至约2,000mg)；或
[0075]
(ii)每日两次每次剂量约1mg至约500mg(总的每日剂量为约2mg至约1,000mg)；或
[0076]
(iii)每日两次每次剂量基于游离碱计约10mg至约500mg(总的每日剂量为约20mg至约1,000mg)；或
[0077]
(iv)每日两次每次剂量基于游离碱计约20mg至约400mg(总的每日剂量为约40mg至约800mg)；或
[0078]
(v)每日两次每次剂量基于游离碱计约30mg至约300mg(总的每日剂量为约60mg至约600mg)；或
[0079]
(vi)每日两次每次剂量基于游离碱计约40mg至约250mg(总的每日剂量为约80mg至约500mg)；或
[0080]
(vii)每日两次每次剂量基于游离碱计约50mg至约200mg(总的每日剂量为约100mg至约400mg)；或
[0081]
(ix)每日两次每次剂量基于游离碱计约75mg至约125mg(总的每日剂量为约150mg至约250mg)；或
[0082]
(x)每日两次每次剂量基于游离碱计约75mg至约100mg(总的每日剂量为约150mg至约200mg)。
[0083]
在一些实施方案中，cfg920或其药学上可接受的盐是以基于游离碱计每次剂量约10mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约75mg、约80mg、约90mg、约
100mg、约110mg、约120mg、约125mg、约130mg、约140mg或约150mg的每日两次剂量施用至患者。在一些实施方案中，cfg920或其药学上可接受的盐是以每次剂量约75mg或约125mg的每日两次剂量(约150mg或约250mg的总的每日剂量)施用至患者。在一些实施方案中，cfg920或其药学上可接受的盐是以每次剂量约75mg或约100mg的每日两次剂量(约150mg或约200mg的总的每日剂量)施用至患者。
[0084]
在一些实施方案中，皮质类固醇为泼尼松。在一些实施方案中，泼尼松是以约10mg的总的每日剂量施用至患者。在一些实施方案中，泼尼松是每日两次(bid)施用至患者。在一些实施方案中，泼尼松是以每次剂量约5mg的每日两次剂量施用至患者。
[0085]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约50mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约100mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约75mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0086]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约50mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约100mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约100mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0087]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约50mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约100mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约125mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0088]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约75mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约150mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约75mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0089]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约75mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约150mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约100mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0090]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约75mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约150mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约125mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0091]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约100mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约200mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约100mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0092]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约100mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约200mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约125mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0093]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约100mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约200mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约150mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0094]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约125mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约250mg)或其药学上可接受的盐；以及每次剂量基于游离碱计约150mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0095]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约50mg的每日两次剂量的
cfg920(总的每日剂量为约100mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约75mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0096]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约50mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约100mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约100mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0097]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约50mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约100mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约125mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0098]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约75mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约150mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约75mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0099]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约75mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约150mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约100mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0100]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约75mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约150mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约125mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0101]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约100mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约200mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约100mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0102]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约100mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约200mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约125mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0103]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约100mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约200mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约150mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0104]
在一些实施方案中，患者被施用每次剂量基于游离碱计约125mg的每日两次剂量的cfg920(总的每日剂量为约250mg)或其药学上可接受的盐；每次剂量约5mg的每日两次剂量的泼尼松(总的每日剂量为约10mg)；以及每次剂量基于游离碱计约150mg的每日一次剂量的阿氟色替或其药学上可接受的盐。
[0105]
在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐及cfg920或其药学上可接受的盐被同时施用。在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐及cfg920或其药学上可接受的盐被依序施用。在一些实施方案中，皮质类固醇及cfg920或其药学上可接受的盐被同时施用。在一些实施方案中，皮质类固醇及cfg920或其药学上可接受的盐是共同配制的，由此将皮质类固醇及cfg920一起配制为单一药物组合物的部分。在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐被每日一次施用及cfg920或其药学上可接受的盐被每日两次施用，其中阿氟色替或其药学上可接受的盐与cfg920或其药学上可接受的盐的其中一个剂量同时施用。
[0106]
在一些实施方案中，向患者施用本文所公开的治疗方案长达数月的时间段。在一些实施方案中，向患者施用本文所公开的治疗方案直至前列腺癌已进展。在一些实施方案中，向患者施用本文所公开的治疗方案直至不再耐受不良反应。在一些实施方案中，向患者施用本文所公开的治疗方案直至该患者死亡。在一些实施方案中，向患者施用本文所公开的治疗方案直至该患者撤回对继续治疗的同意。在一些实施方案中，患者被施用本文所公开的治疗方案直至已确定前列腺癌处于缓解。「缓解」定义为癌症的征兆及症状的减少或消失。在一些实施方案中，患者被施用本文所公开的治疗方案持续一个或多个约28天的治疗周期。
[0107]
在一些实施方案中，将阿氟色替或其药学上可接受的盐口服施用至患者。在一些实施方案中，将cfg920或其药学上可接受的盐口服施用至患者。在一些实施方案中，泼尼松被口服施用至患者。
[0108]
在一些实施方案中，若已识别患者展现与一种或多种治疗紧急不良事件(teaes)相关的一种或多种症状，则可降低阿氟色替或其药学上可接受的盐；cfg920或其药学上可接受的盐；或二者的剂量。该一种或多种治疗紧急不良事件可包括低血钠症、高血钾症、高血糖症、低血镁症、无力、疲劳、嗜睡、失眠、贫血、记忆损伤、健忘症、皮肤感染、上呼吸道感染、肺炎、血碱性磷酸酶增加、背痛、骨痛、腹痛、便秘、头晕、恶心、呕吐、腹泻、消化不良、食欲下降、吞咽困难、呼吸困难、进食障碍、发热、体重减轻、胃食道逆流疾病、胃肠道损伤、血小板减少症、软组织坏死、血小板计数减少、中性粒细胞减少症、发热性中性粒细胞减少症、咽痛、瘙痒、肌痛、口腔炎、周围神经病变、皮疹、脱发、败血症、肝功能检查异常、心脏毒性、alt升高、关节痛、ast升高、心房颤动、带状疱疹、脂肪酶升高、鳞状细胞癌、排尿困难及尿道感染中的一种或多种。
[0109]
在一些实施方案中，对患者额外施用雄激素剥夺疗法。在一些实施方案中，雄激素剥夺疗法是促黄体素释放激素(lhrh)激动剂或拮抗剂。在一些实施方案中，患者在本公开内容的治疗方法的整个过程中保持雄激素剥夺疗法。在一些实施方案中，患者已经历手术性睾丸切除术。在某些实施方案中，向患者施用足以维持去势血清睪酮水平小于约50ng/dl血清睪酮水平或小于约1.7nmol/l血清睪酮水平的雄激素剥夺疗法。
[0110]
当用作药物时，本公开内容的化合物可呈药物组合物的形式施用。这些组合物可以医药技术中熟知的方式制备，且可通过多种途径施用，取决于是否需要局部或全身性治疗及待治疗的区域。施用可是局部的(包括经皮、表皮、眼部及黏膜(包括鼻内、阴道及直肠施用))、肺部(例如通过吸入或吹入粉末或气雾剂，包括经由雾化器；气管内或鼻内)、口服、或肠胃外。肠胃外施用包括静脉内、动脉内、皮下、腹膜内的肌肉内的或注射或输注；或颅内
(例如鞘内或脑室内)施用。肠胃外施用可以以单次推注剂量的形式，或可例如通过连续灌注泵。用于局部施用的药物组合物及制剂可包含经皮贴剂、软膏、洗剂、霜剂、凝胶、滴剂、栓剂、喷雾剂、液体及粉剂。常见药物载剂，水性、粉末或油性基质，增稠剂等可是必需或期望的。
[0111]
本公开内容也包括药物组合物，其含有与一种或多种药学上可接受的赋形剂组合的作为活性成分的本公开内容的化合物或其药学上可接受的盐。在制备本公开内容的组合物中，通常将活性成分与赋形剂混合，经赋形剂稀释或封闭在此赋形剂中呈例如胶囊、小袋、纸或其他容器的形式。当赋形剂用作稀释剂时，其可为固体、半固体或液体材料，其用作活性成分的媒介物、载剂或介质。因此，组合物可呈片剂、丸剂、粉剂、含片、袋装剂、扁囊剂、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液、糖浆、气雾剂(呈固体或于液体介质中)、含有例如多达10重量％活性化合物的软膏、软及硬明胶胶囊、栓剂、无菌注射溶液及无菌包装粉剂形式。
[0112]
在制备制剂时，活性化合物可在与其他成分组合前被研磨以提供适宜粒度。若活性化合物基本上不可溶，则可将其研磨至小于200筛目的粒度。若活性化合物基本上可溶于水，则可通过研磨来调整粒度以提供基本上均匀分布于制剂中，例如约40筛目。
[0113]
本公开内容的化合物可使用已知的研磨程序诸如湿磨来研磨以获得适合于片剂形成及其他制剂类型的粒度。本公开内容的化合物的细分(纳米颗粒)制剂可通过本领域中已知的方法来制备，例如参见国际申请案第wo 2002/000196号。
[0114]
适宜赋形剂的一些实例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶(gum acacia)、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯啶酮、纤维素、水、糖浆及甲基纤维素。制剂可额外包含：润滑剂，诸如滑石、硬脂酸镁及矿物油；润湿剂；乳化剂及悬浮剂；防腐剂，诸如羟基苯甲酸甲酯及羟基苯甲酸丙酯；甜味剂；以及矫味剂。通过采用本领域中已知的程序，可配制本公开内容的组合物以在施用至患者后提供活性成分的快速、持续或延迟释放。
[0115]
可将组合物配制成单位剂型。术语“单位剂型”是指适合作为人类患者及其他哺乳动物的单位剂量的物理上离散单位，每个单位含有与适宜药物赋形剂联合的预定量的经计算产生所需治疗效果的活性物质。
[0116]
为制备固体组合物，诸如片剂，将主要活性成分与药物赋形剂混合以形成含有本公开内容的化合物的均质混合物的固体预制剂组合物。当将这些预制剂组合物称为均质时，通常将活性成分均匀地分散在整个组合物中使得该组合物可容易地细分为同等有效的单位剂型，诸如片剂、丸剂及胶囊。然后将该固体预制剂细分为以上所述类型的单位剂型。
[0117]
可将本公开内容的片剂或丸剂包衣或以其他方式复合以提供给予延长作用优点的剂型。例如，片剂或丸剂可包含内部剂量及外部剂量组分，后者是呈前者上的包封的形式。该两种组分可由肠层分开，该肠层用于抗胃中的崩解且允许内部组分完整地进入十二指肠中或延迟释放。多种材料可用于此类肠层或包衣，此类材料包括多种聚合酸及聚合酸与诸如虫胶、鲸蜡醇及乙酸纤维素的材料的混合物。
[0118]
在一些实施方案中，阿氟色替或其药学上可接受的盐是经配制为进一步包含一种或多种药学上可接受的赋形剂的药学上可接受的组合物的部分。在一些实施方案中，包含阿氟色替或其药学上可接受的盐的药物组合物是适于口服施用。在一些实施方案中，包含阿氟色替或其药学上可接受的盐的药物组合物进一步包含微晶纤维素、甘露醇、交联羧甲
基纤维素钠及硬脂酸镁中的一种或多种。在一些实施方案中，包含阿氟色替或其药学上可接受的盐的药物组合物是呈以下制剂的形式：
[0119][0120][0121]
在一些实施方案中，阿氟色替被配制成具有以下组成的片剂：
[0122][0123]
在一些实施方案中，cfg920或其药学上可接受的盐是配制为进一步包含一种或多种药学上可接受的赋形剂的药学上可接受的组合物的部分。在一些实施方案中，包含cfg920或其药学上可接受的盐的药物组合物是适于口服施用。在一些实施方案中，包含cfg920或其药学上可接受的盐的药物组合物进一步包含泼尼松。在一些实施方案中，包含cfg920或其药学上可接受的盐的药物组合物进一步包含微晶纤维素、甘露醇、硬脂酸镁、乙
醇酸淀粉钠及胶态二氧化硅中的一种或多种。在一些实施方案中，包含cfg920或其药学上可接受的盐的药物组合物是呈以下制剂的形式：
[0124][0125][0126]
在一些实施方案中，cfg920被配制成具有以下组成的片剂：
[0127][0128]
可并入本公开内容的化合物及组合物以用于口服施用或通过注射施用的液体形
是指任何动物，包括哺乳动物，优选小鼠、大鼠、其他啮齿动物、兔子、狗、猫、猪、牛、羊、马或灵长类动物，且最优选人类。
[0137]
如本文所用，术语“治疗(treating/treatment)”是指以下中的一种或多种：(1)抑制疾病；例如，抑制正在经历或展现疾病、病况或病症的病理或症状的个体中的疾病、病况或病症(也即，阻止病理及/或症状的进一步发展)；以及(2)改善疾病；例如，改善正在经历或展现疾病、病况或病症的病理或症状的个体的疾病、病况或病症(也即，逆转病理及/或症状)，诸如降低疾病的严重度。在一些实施方案中，术语“治疗(treating/treatment)”是指抑制或改善疾病。
[0138]
本文也提供预防疾病的方法。例如，预防可能易患该疾病、病况或病症但尚未经历或展现该疾病的病理或症状的个体的疾病、病况或病症。
[0139]
如本文所用，“约”在指代可测量值(诸如量、剂量、时间长度等)时意指涵盖
±
10％的变化。在某些实施方案中，“约”可包括从指定值的
±
5％、
±
1％或
±
0.1％的变化及其之间的任何变化，因为此种变化适合于进行所公开的方法。
[0140]
所有化合物及其药学上可接受的盐可与其他物质(诸如水及溶剂(例如呈水合物及溶剂化物的形式))一起存在或可被分离。在一些实施方案中，本公开内容的化合物或其盐实质上被分离。“实质上被分离”意指该化合物与形成或检测到该化合物的环境至少部分地或实质上分离。部分分离可包括例如富含本公开内容的化合物的组合物。实质分离可包括含有至少约50重量％、至少约60重量％、至少约70重量％、至少约80重量％、至少约90重量％、至少约95重量％、至少约97重量％或至少约99重量％的本公开内容的化合物或其盐的组合物。用于分离化合物及其盐的方法在本领域中是常规的。
[0141]
词语“药学上可接受的”在本文中用于指在合理医学判断范围内适用于与人类及动物的组织接触而没有过度毒性、刺激、过敏反应、免疫原性或其他问题或并发症(与合理效益/风险比相称)的那些化合物、材料、组合物及/或剂型。
[0142]
本公开内容也包括本文所述的化合物的药学上可接受的盐。如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过将现有的酸或碱部分转化为其盐形式而被修饰。药学上可接受的盐的实例包括，但不限于，碱性残基(诸如胺)的矿物盐或有机酸盐；酸性残基(诸如羧酸)的碱性盐或有机盐；等等。本公开内容的药学上可接受的盐包括例如由非毒性无机酸或有机酸形成的母体化合物的非毒性盐。本公开内容的药学上可接受的盐可自含有碱性或酸性部分的母体化合物通过常规化学方法来合成。一般而言，可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量量的适宜碱或酸在水中或在有机溶剂中或在二者的混合物(一般而言，非水介质，如醚、乙酸乙酯、醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇或丁醇)或乙腈(acn)是优选的)中反应来制备此类盐。适宜盐的清单可见于remington's pharmaceutical sciences，第17版，mack publishing company，easton,pa.，1985，第1418页及journal of pharmaceutical science，66，2(1977)，其各自通过引用整体并入本文中。
[0143]
如本文所用，词语“药学上可接受的赋形剂”是指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，诸如液体或固体填充剂、稀释剂、溶剂或封装材料。赋形剂一般是安全、非毒性的且即不是在生物学上也不是在其他方面不良的并且包括兽用以及人类药用可接受的赋形剂。在一个实施方案中，如本文所定义，每种组分是“药学上可接受的”。参见，例如，remington:
the science and practice of pharmacy，第21版；lippincott williams&wilkins:philadelphia,pa.，2005；handbook of pharmaceutical excipients，第6版；rowe等人编；the pharmaceutical press and the american pharmaceutical association:2009；handbook of pharmaceutical additives，第3版；ash和ash编；gower publishing company:2007；pharmaceutical preformulation and formulation，第2版；gibson编；crc press llc:boca raton，fla.，2009。
[0144]
应理解，本公开内容的为清晰起见描述于不同的实施方案的上下文中的某些特征也可在单个实施方案中以组合方式提供(同时实施方案旨在进行组合，如书写成多项从属形式)。相反地，本公开内容的为简洁起见描述于单个实施方案的上下文中的各种特征也可单独提供或以任何适宜子组合提供。
[0145]
如本文所用，“qd”意指每日一次施用至患者的剂量。“bid”意指每日两次施用至患者的剂量。
[0146]“不良事件”(ae)定义为被施用药品的临床研究患者的任何不希望出现的医学情形，其不一定与该治疗有因果关系。
[0147]
本文可使用以下缩写：
[0148]
ae＝不良事件；ctcae＝不良事件的常用术语标准；dcr＝疾病控制率；dor＝反应的持续时间；ecg＝心电图；mcrpc＝转移性去势抵抗性前列腺癌；orr＝总反应率；os＝总生存期；pcwg3＝前列腺癌工作组3；psa＝前列腺特异性抗原；pten＝磷酸酶及张力蛋白同源物；recist 1.1＝第1.1版实体肿瘤中的反应评估标准；rpfs＝放射性无进展生存期。
[0149]
将通过具体实施例更详细地描述本发明。出于例示性目的提供以下实施例，而无意以任何方式限制本发明。本领域技术人员将容易地认识到可被改变或修改以产生基本上相同结果的各种非关键参数。应理解，本发明的为清晰起见描述于不同的实施方案的上下文中的某些特征也可在单个实施方案中以组合方式提供。相反地，本发明的为简洁起见描述于单个实施方案的上下文中的各种特征也可单独提供或以任何适宜子组合提供。
[0150]
本领域技术人员由前述描述当可明了本发明的除了本文所述的那些以外的各种修改。此类修改也意欲落在所附权利要求书的范围内。本公开内容中引用的每个参考文献(包括所有专利、专利申请案及公开案)均通过引用整体并入本文中。、
实施例
[0151]
实施例a：小鼠mini-pdx模型研究
[0152]
一般研究设计
[0153]
本研究的目标是评估cfg920及阿氟色替在mdx191210mini-pdx模型中的体内治疗效力。肿瘤样本取自一名63岁的男性患者，该患者经诊断患有阿比特龙抗性前列腺癌。
[0154]
动物
[0155]
雄性balb/c裸小鼠购自nanjing biomedical research institute of nanjing university(nanjing，china，scxk(su)2018-0008)，证书：201806774。物种：家鼷鼠(mus musculus；)；品系：balb/c裸；年龄：6至8周；性别：雄性；体重：20g至25g；动物数量：6只小鼠。在整个研究期期间，动物可自由取得经辐射灭菌的干燥颗粒食物。动物可自由取得无菌饮用水。
[0156]
将小鼠以每个笼子两只动物饲养在恒定温度及湿度下的无特定病原体的房间内。圈养条件：温度：20℃～26℃；湿度：40％～70％；光周期：光照12小时及黑暗12小时。笼子由聚碳酸酯制成(325mm x210mm x 180mm)。垫料为玉米芯，每周更换两次。每个笼子的识别标签均含有以下信息：动物数量、性别、品系、接收日期、治疗、研究编号、组号及治疗开始日期。动物是通过耳朵编码标记。
[0157]
mini-pdx装置
[0158]
mini-pdx胶囊装置是经改进的微囊化及中空纤维培养系统(oncoveelide biotech)。胶囊由孔径允许小于500kda的分子通过的中空纤维膜制成。纤维系统以类似于体内传递血液穿过毛细血管网络的方式将介质传递至细胞。关于mini-pdx装置的操作的额外信息可在zhang等人，cancer communications，38，60，2018中找到，其通过引用并入本文中。
[0159]
方法
[0160]
将前列腺肿瘤组织储藏在生物安全柜中的10cm培养皿中。用汉克氏平衡盐溶液(hank’s balanced salt solution)(hbss)洗涤肿瘤组织及移除非肿瘤组织及坏死肿瘤组织。使用手术刀将肿瘤切成1～3mm3片段，且然后将切碎的组织转移至50ml锥形瓶。添加胶原酶溶液(10
×
)至该瓶至1
×
的最终浓度。用盖封闭管及用封膜(parafilm)包裹盖以防止潜在细菌/酵母污染。将该管侧放在37℃的振荡器中以200rpm速度放置1至2小时。在室温下以500
×
g离心该管5min以沉淀细胞。将沉淀物重悬于200μl hbss中且使用抗纤维母细胞微珠(miltenyi，目录号：130-050-601)、抗cd45微珠(miltenyi，目录号：130-045-801)、ls柱(ls column)(miltenyi，目录号：130-042-401)及quadromacs磁体(miltenyi，目录号：130-091-051)耗尽免疫细胞及基质细胞。收集剩余的肿瘤细胞且用hbss洗涤然后填充至mini-pdx胶囊装置(oncoveelide biotech)中。经由小的皮肤切口将胶囊皮下植入至balb/c裸小鼠的两侧，每只小鼠3个胶囊用于mini-pdx效力研究。这些研究的治疗期为7天。在研究终止时，对所有小鼠实施安乐死，移除所植入的胶囊且如由制造商所说明使用celltiter glo发光细胞活力检测试剂盒(g7571，promega，madison，wi，us)来评估肿瘤细胞增殖。使用分光光度计(spectramax m3，molecular devices，sunnyvale，ca，us)以相对亮度单位(rlu)来测量发光。相对活力(％)使用以下公式计算：
[0161]
肿瘤相对增殖值(％)＝(治疗组在第7天的平均rlu-在第0天的平均rlu)/(媒介物组在第7天的平均rlu-在第0天的平均rlu)
×
100％
[0162]
每个研究组中的测试药物施用及动物数量概述于以下实验设计中
[0163]
(表1)。
[0164][0165][0166]
表3.测试化合物及制剂及制备
[0167][0168][0169]
每周制备给药溶液。针对体重调整给药体积(给药体积＝0.1ml/10g)观察
[0170]
在研究期间，动物的护理及使用根据实验室动物护理评估及认证协会(the association for assessment and accreditation of laboratory animal care)
(aaalac)的规定实施。mini-pdx装置接种后，每日检查动物的发病率及死亡率。在常规监测时，对动物检查治疗对正常行为诸如活动性、目测估计的食物及水消耗、体重增加/减少、眼睛/毛发消光的任何影响及任何其他异常影响。
[0171]
终点
[0172]
使用肿瘤相对增殖率(％)作为抗肿瘤活性的指标。肿瘤相对增殖率(％)＝vt7/vc
7 x 100％(vt7：治疗组在第7天的细胞活力；vc7：媒介物对照组在第7天的细胞活力)。
[0173]
每日测量小鼠的体重，且根据以下公式计算每只小鼠的相对体重变化：rcbw(％)＝(bwi–
bw0)/bw0×
100，bwi为在给定日治疗后的体重，bw0为第一天治疗的体重。
[0174]
结果
[0175]
效力研究的目标是评估cfg920及阿氟色替在mdx191210mini-pdx模型中的治疗效力。终止时，媒介物对照、阿氟色替75mg/kg及阿氟色替75mg/kg cfg920 300mg/kg的治疗组的ctg值分别为42459
±
4790、24516
±
2133及14701
±
1790(图1a)。阿氟色替75mg/kg及阿氟色替75mg/kg cfg920 300mg/kg组的肿瘤相对增殖值(％)为53.37％及27.86％(图1b)。当与媒介物对照相比时，如通过ctg测定所监测，阿氟色替75mg/kg及阿氟色替75mg/kg cfg920 300mg/kg治疗导致mdx191210肿瘤细胞活力的统计学显著性降低(p《0.01)。数据表明阿氟色替75mg/kg及阿氟色替75mg/kg cfg920 300mg/kg治疗抑制mdx191210肿瘤细胞的增殖。在该研究中，阿氟色替75mg/kg及阿氟色替75mg/kg cfg920 300mg/kg治疗组未导致显著体重减轻(体重减轻《10％)(图1c)。在第5天及第6天，阿氟色替75mg/kg cfg920 300mg/kg组中的一只小鼠的》15％的体重减轻可归因于个体差异。数据表明动物良好耐受阿氟色替75mg/kg或阿氟色替75mg/kg cfg920 300mg/kg(表2)。
[0176]
总而言之，在mdx191210minipdx模型中，阿氟色替75mg/kg及阿氟色替75mg/kg cfg920 300mg/kg治疗组显示显著抗肿瘤活性且治疗耐受性良好。
[0177]
实施例b：遵循标准护理治疗的患有转移性去势抵抗性前列腺癌的患者中cfg920及泼尼松加上阿氟色替的剂量递增及效力研究
[0178]
整体设计
[0179]
该研究的i期部分是在进展或不耐受任何抗雄激素疗法(诸如阿比特龙、恩杂鲁胺、阿帕鲁胺或后来批准的任何其他雄激素受体(ar)拮抗剂)的两种先前治疗或以上抗雄激素治疗加上选自多烯紫杉醇及卡巴他赛的化学疗法中的一种(不论pten状态)的转移性去势抵抗性前列腺癌(mcrpc)患者中确定cfg920及泼尼松 阿氟色替的组合疗法的推荐ii期剂量(rp2d)的剂量递增研究。该研究的ii期部分在进展或不耐受任何抗雄激素的两种先前治疗(如以上所述)或以上抗雄激素治疗中的一种加上选自多西紫杉醇及卡巴他赛的化学疗法中的一种的患有pten缺失的mcrpc患者中评估cfg920和泼尼松 阿氟色替的组合疗法与阿氟色替单一疗法相比的初步效力及安全性。
[0180]
i期：该研究在每个剂量递增阶段采用3 3设计。最大耐受剂量(mtd)评估或rp2d是基于患者中的观察到的安全性、pk及pd。基于在该特定剂量水平下观察到的安全性、pk及pd做出剂量递增决定。以组合疗法的起始剂量入选三名患者。若患者经历剂量限制毒性(dlt)，如以下剂量递增指导表中所述，则停止剂量递增，且将群组扩大至六名患者。基于不同癌症适应症(诸如前列腺癌、卵巢癌或胃癌)中cfg920、泼尼松及阿氟色替的先前的i期/ii期单一疗法研究来选择起始剂量。推荐的组合剂量递增如下，除第1周期第1天(c1d1)以
外，其中所有患者均仅接受指定剂量的单剂量cfg920及泼尼松以及每日一次(qd)阿氟色替。
[0181]
表4a：剂量递增指导
[0182][0183]
表4b：剂量
[0184]
[0185][0186]
*若群组1(cfg920 75mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd)中》33.3％患者及扩展群组1中》33.3％患者经历dlt，则组合剂量将减少至(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd)也即群组-1
[0187]
**若群组-1(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd)中《33.3％患者及扩展群组-1中《33.3％患者经历dlt，则患者的下一剂量水平将为(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替125mg qd)也即群组-2a
[0188]
***若群组-1(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd)中》33.3％患者及扩展群组-1中》33.3％患者经历dlt，则患者的下一剂量水平将为(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替75mg qd)也即群组-2b
[0189]
****若群组2(cfg920 75mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替125mg qd)中》33.3％患者及扩展群组2中》33.3％患者经历dlt，则组合剂量将减少至(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替125mg qd)也即群组-2a
[0190]
若群组-2b中》33.3％患者及组合的扩展群组-2b(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替75mg qd)中》33.3％经历dlt，则该研究将暂时停止及由研究医学顾问/监测者及研究者组成的src将召开临时会议以决定如何最佳地进行。
[0191]
存在3个组合剂量去递增水平：群组-1(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd)；群组-2a(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替125mg qd)及群组-2b(cfg920 50mg bid 泼尼松5mg bid 阿氟色替75mg qd)。
[0192]
治疗周期将由28天组成。dlt将分为血液dlt及非血液dlt。dlt定义为经评估为与疾病、疾病进展、间发病或合并用药无关且至少可能与发生在i期时期的第一个周期(28天)内的cfg920 泼尼松 阿氟色替治疗相关的不良事件(ae)或实验室异常值且满足任何以下所包括标准：
[0193]
表4c.
[0194][0195][0196]
此外，≥3级贫血、血小板减少症、疲劳、恶心及呕吐以及高血钾症/低血钾症、高血钠症/低血钠症及高血压/低血压的发生率被认为是特殊关注的ae(aesi)及将分别分析其
发生率。
[0197]
替换因dlt以外的任何原因而中断研究的患者及在i期时期的第一个治疗周期(28天)期间已接受《21天或错过cfg920及泼尼松或阿氟色替的计划剂量》25％的患者。
[0198]
基于在c1d1及c1d15的不同时间点获得的cfg920及阿氟色替的血浆水平及在后续周期第1天的给药前测量来评估cfg920及泼尼松 阿氟色替治疗的pk。通过在指定时间点定期测量某些肾上腺激素、睪酮及血液磷酸化糖原合成酶激酶3β(pgsk3β)的水平来评估cfg920及泼尼松 阿氟色替的pd。
[0199]
mtd定义为在cfg920及泼尼松 阿氟色替的组合疗法的第一个周期中≤33％的患者经历dlt的最高组合药物剂量。通过src审查后，已经治疗6名患者及≤33％的患者经历dlt的最高组合剂量进入ii期群组作为rp2d。
[0200]
如目标及终点部分中所描述，在i期中评估cfg920及泼尼松 阿氟色替的组合疗法在mcrpc患者中的初步效力。
[0201]
ii期：一旦已确立cfg920及泼尼松 阿氟色替的rp2d，由已进展或不耐受任何抗雄激素(诸如阿比特龙、恩杂鲁胺、阿帕鲁胺、或后来批准的任何其他ar拮抗剂)的两种先前标准治疗或以上抗雄激素治疗中的一种加上选自多烯紫杉醇或卡巴他赛的化学疗法中的一种的患有pten缺失的50名mcrpc患者组成的群组入选ii期以评估cfg920及泼尼松 阿氟色替(在rp2d下)及阿氟色替150mg qd单一疗法的初步效力及安全性。将入选患者以1:1比随机分为两个治疗组cfg920及泼尼松bid 阿氟色替qd及阿氟色替单一疗法。cfg920及泼尼松 阿氟色替及阿氟色替单一疗法的初步效力通过测量放射性无进展生存期(rpfs)、总反应率(orr)、反应的持续时间(dor)、疾病控制率(dcr)、总生存期(os)、根据前列腺癌工作组3(pcwg3)的前列腺特异性抗原(psa)监测及放射影像学肿瘤评估(基于pcwg3的骨病变及基于第1.1版实体肿瘤反应评估标准(response evaluation criteria in solid tumors version 1.1)[recist 1.1]的其他病变)来评估。
[0202]
在整个研究期间，在mcrpc患者中密切监测组合疗法及单一疗法的安全性及耐受性。
[0203]
患者数量：
[0204]
i期：若最多4个上调的剂量递增群组及2个下调的群组需要入选至多6名患者/每个群组(rp2d或mtd决策需要6名患者)，则该研究可在i期中入选最多24名患者。若探索更多的剂量水平，则入选患者的数量可超过该数量。除了因dlt而中断的患者外，额外患者可入选以替换退出者。
[0205]
ii期：在ii期部分中，入选50名患者且以1:1比随机分为2个治疗组，每组25名患者，以评估利用cfg920及泼尼松 阿氟色替的组合疗法及阿氟色替单一疗法对mcrpc患者的初步效力；随机分组通过先前化学疗法(是/否)进行分层。在ii期部分中不允许替换。
[0206]
治疗组及持续时间：
[0207]
研究治疗以dlt观察周期进行施用，每个周期28天。cfg920以25mg及/或100mg胶囊口服施用。阿氟色替以50mg及/或75mg片剂口服施用。泼尼松以5mg片剂口服施用。cfg920及泼尼松bid施用，但i期第1周期第1天仅施用每种药物的一次早晨剂量。阿氟色替qd施用(在与早晨cfg920剂量相同的时间，对于cfg920及泼尼松 阿氟色替治疗)。
[0208]
患者依标记的施用说明继续接受促黄体素释放激素(lhrh)激动剂或拮抗剂。密切
监视肾上腺机能不全及醛固酮过量相关实验室测试及aesi，及研究者基于临床实验室测试结果应用必要的临床管理。
[0209]
研究持续时间：
[0210]
当所有患者均已完成至少6个月的治疗、进展、退出研究(由于诸如icf退出、研究者决定或不依从的原因)或因任何原因死亡时，进行主要数据分析及报告。ii期研究的结束定义为ii期研究中至少有90％的患者已进展、退出研究(由于诸如icf退出、研究者决定或不依从的原因)或因任何原因死亡的时间。
[0211]
研究群体：
[0212]
研究患者是选自年龄≥18岁的男性，具有已记录的前列腺腺癌的组织学或细胞学证据(不包括神经内分泌分化或小细胞组织学)。在入选研究之前，患者必须具有基于“美国前列腺癌泌尿学协会指导(guidelines of american urological association for prostate cancer)”的转移性疾病的放射影像学证据。(https://www.auanet.org/guidelines/prostate-cancer-castration-resistant-guideline)且能够提供肿瘤活检样本用于pten免疫组织化学(ihc)染色。有效的pten ihc结果必须在筛选访视的2个月内采集且通过中央实验室测试予以证实(pten ihc结果“无效”或“失败”的参与者不允许入选)。患者必须患有基于pcwg3标准的进行性疾病。pcwg3标准包括1)仅基于总psa升高而进展的患者应已具有至少1周时间间隔的连续3次情况的一系列升高值(若第三次测量不大于第二次测量，则第四次测量必须采用间隔至少一周且必须大于第二次测量)且应具有2.0ng/ml最低进入水平；2)依recist 1.1记录疾病进展的患者有资格独立于psa；3)根据pcwg3的仅骨骼进展的患者(也即，骨扫描显示出现≥2个新病变)。患者必须已具有先前psa反应，然后有记录的先前激素治疗中的psa进展。患者必须具有去势睪酮水平(《50ng/dl或1.7nmol/l)。在入选研究之前，患者必须已经历雄激素剥夺疗法(adt)(诸如睾丸切除术)或已接受lhrh激动剂或拮抗剂至少3个月。接受lhrh激动剂/拮抗剂的患者必须在研究持续时间维持这些药剂。患者必须具有≤1的东部肿瘤合作组(eastern cooperative oncology group)(ecog)体能状态。入选前28天内，患者必须经当地实验室确认具有足够的造血功能，如通过以下证实：绝对中性粒细胞计数≥1,500/μl，血小板计数≥75,000/μl，血红蛋白≥9g/dl。入选前28天内总血清胆红素≤1.5
×
uln(在具有已知吉尔伯特氏综合症(gilbert’s syndrome)的患者中，总胆红素≤3
×
uln且直接胆红素≤1.5
×
uln)。天冬胺酸转胺酶及丙胺酸转胺酶≤2.5
×
uln，在入选前28天内必须具有≤5
×
uln的ast及alt的具有肝脏肿瘤累及的患者除外。入选前28天内，患者必须具有如通过血清肌酐≤1.5
×
参考实验室的uln或肌酐清除率≥50ml/min所证实的足够肾功能(由cockcroft-gault公式或24小时尿液采集计算)。入选前28天内血清钾≥3.5mmol/l且《uln。空腹血浆葡萄糖[空腹定义为至少8小时无热量摄入]：对于先前没有诊断出2型糖尿病的那些患者，≤126mg/dl或≤7.0mmol/l；对于先前诊断出2型糖尿病、糖基化血红蛋白(hba1c)≤8.0％的那些患者，≤167mg/dl或≤9.3mmol/l。
[0213]
对于i期，患者必须患有在接受任何抗雄激素(诸如阿比特龙、恩杂鲁胺、阿帕鲁胺，或在后来批准的任何其他ar拮抗剂)的两种先前治疗(在一些情况下至少一种先前治疗)或以上抗雄激素治疗中的一种加上选自多西紫杉醇或卡巴他赛的化学疗法中的一种后已进展或不耐受的mcrpc。患者在其筛选访视前必须具有至少3周的任何抗雄激素的治疗
及/或已完成至少4个周期的多烯紫杉醇或卡巴他赛治疗。
[0214]
对于ii期，患者必须患有在仅接受任何抗雄激素(诸如阿比特龙、恩杂鲁胺、阿帕鲁胺，或在后来批准的任何其他ar拮抗剂)的2种先前治疗或以上抗雄激素治疗中的一种加上选自多西紫杉醇或卡巴他赛的化学疗法中的一种后进展的或不耐受的mcrpc。患者在其筛选访视前必须具有至少3周的任何抗雄激素的治疗及/或已完成至少4个周期的多烯紫杉醇或卡巴他赛治疗。由于该组合疗法是靶向mcrpc的第三线疗法，因此仅允许2种先前治疗。
[0215]
若患者在研究治疗前28天内已经历大手术或若患者已用下列任何一种治疗，则排除该患者：入选前6周内第二线adt(包括(但不限于)酮康唑(ketoconazole)及胺基格鲁米特(glutethimide))；入选3个月内西普鲁塞-t(sipuleucel-t)治疗；入选前6周内抗雄激素剂，诸如氟他胺(flutamide)比卡鲁胺(bicalutamide)或尼鲁米特(nilutamide)入选3个月内5-α还原酶抑制剂，诸如菲那雄胺(finasteride)制剂，诸如菲那雄胺(finasteride)或度他雄胺(dutasteride)入选前3个月内镭ra 223二氯化物或来昔决南(lexidronam)钐sm153皮质类固醇或另一免疫抑制剂，但每日使用多达10mg泼尼松(或等效物)或低剂量类固醇以控制恶心及呕吐、使用局部类固醇或使用吸入类固醇除外；耗钾型利尿剂；已接受除指定用于治疗前列腺癌的那些外的任何研究药剂在该药剂的5个半衰期内的患者；若不知该药剂的半衰期，则患者必须在入选前4周停用研究性疗法(应优选二者中较短者)；在研究入选4周内已针对靶病变接受姑息性及其他放射疗法的患者；具有从前列腺癌的症状性或已知中枢神经系统转移的患者或处在高脊髓压迫风险的患者；具有下丘脑、垂体或肾上腺功能不全的病史的患者；研究入选时需要胰岛素的患有糖尿病的患者；当前临床上显著或当前需要主动干预的另一原发性恶性肿瘤病史；研究入选前28天期间至多3次测量且间隔至少5分钟后，未被充分控制的高血压(例如收缩压≥160mmhg或舒张压≥95mmhg)或低血压(例如收缩压≤80mmhg或舒张压≤50mmhg)；具有活动性心脏疾病或心脏功能障碍病史(包括下列任一种)的患者：a.研究入选前6个月内严重或不稳定的心绞痛或急性冠状动脉综合症或中风，b.症状性心包炎，c.研究入选前6个月内记录的心肌梗塞或动脉血栓事件，d.记录的充血性心力衰竭病史(纽约健康协会功能分类iii至iv(new york health association functional classification iii to iv))，e.记录的心肌病史，f.入选前28天内通过多次门控采集扫描(gated acquisition scan)或超声波心电图确定的已知左心室射血分数《50％，g.临床上显著心律失常史，如由研究者确定；筛选心电图(ecg)时经fridericia校正的qt(qtcf)时间间隔》450ms(使用qtcf公式)的患者，其具有短/长qt综合症或qt延长/尖端扭转型室性心动过速(torsades de pointes)病史；具有在入选前10天内需要全身性疗法的活动性感染(病毒、细菌或真菌)史(包括但不限于结核病)的患者；具有活动性人类免疫缺陷病毒(hiv)、乙型肝炎或丙型肝炎感染的患者；当前正在接受使用已知为同功酶cyp1a的中度或强力抑制剂或诱导剂的药物(包括但不限于：α-萘黄酮(naphthoflavone)、呋喃茶碱(furafylline)、奥美拉唑(omeprazole)、兰索拉唑(lansoprazole))及同功酶cyp3a的中度或强力抑制剂或诱导剂的药物(包括但不限于：伊曲康唑(itraconazole)、酮康唑、阿扎木林(azamulin)、醋竹桃霉素
(troleandomycin)、维拉帕米(verapamil)、利福平(rifampicin))的治疗的患者。患者必须在研究入选前至少2周停用中度或强力诱导剂且必须在研究入选前至少1周停用中度或强力抑制剂。应停用螺内酯、强力胆盐输出泵(bsep；strong bile salt export pump)抑制剂、葡萄柚汁、草药(诸如圣约翰草(st.john’s wort)、卡瓦(kava)、麻黄、银杏叶(gingko biloba)、去氢表雄酮、育亨宾(yohimbe)、锯棕榈(saw palmetto)及人参)；在整个研究过程中及停止治疗后16周内不愿意使用避孕套的性活跃男性。男性患者不得在该期间生孩子。经输精管结扎的男性以及在与男性伴侣性交期间也需要使用避孕套以防止药物经由精液递送；患有任何其他医学病况、精神病性病况或社会病况(包括药物滥用)的患者，其在研究者的观点中将排除参与该研究；在先前的3个月中具有在研究者的观点中可影响患者参与试验的上消化道出血史或不可控的消化性疾病史的患者；先前已接受akt或pi3激酶途径或mtor抑制剂的患者。
[0216]
统计方法：
[0217]
该研究的i期部分没有进行假设检验。因此，统计分析的方法是描述性的。对于该研究的ii期部分，进行以下主要分析：
[0218]
使用kaplan-meier方法来估计中值rpfs且分别为组合治疗组及阿氟色替单一药剂治疗组提供单侧90％布鲁克梅耶-克劳利(brookmeyer-crowley)置信区间(ci)。中值rpfs≥5.5个月且相关1侧90％ci极限》3.5个月被认为是临床意义的改善。对于治疗组间的比较，没有进行统计学假设检验。出于探索目的，应用cox比例风险回归模型以分析2个治疗组的rpfs，其中治疗及先前化学疗法(是/否)为自变量。
[0219]
安全性评估
[0220]
安全性评估包括ae(包括dlt)、实验室参数、生命体征(脉搏、血压、呼吸速率及体温)、身高和体重、身体检查和ecg。
[0221]
效力评估
[0222]
基于以下标准确定组合疗法(i期及ii期)及阿氟色替单一疗法(仅ii期)的治疗效力：放射性无进展生存期；总体客观反应率(仅ii期)；总生存期(仅ii期)；反应的持续时间；疾病控制率(仅ii期)；在预指定时间点采集的psa水平；psa反应及到psa进展的时间；以及在预指定时间点的放射影像学肿瘤评估。
[0223]
基于靶向病变及非靶向病变的反应评估，遵循recist 1.1及pcwg3中的说明，将抗肿瘤活性分为完全反应(cr)、部分反应(pr)、进行性疾病(p.d.)及稳定疾病(s.d.)。针对靶向病变的反应的定义是：
[0224]-完全反应(cr)：所有靶标病变消失。任何病理性淋巴结(无论是靶标还是非靶标)的短轴均必须减小至《10mm。
[0225]-部分反应(pr)：以基线总和直径作为参考，靶标病变的直径总和减少至少30％。
[0226]-进行性疾病(p.d.)：以研究时的最小总和(若基线总和在研究时为最小，则包括该基线总和)作为参考，靶标病变的直径总和增加至少20％。除了20％的相对增加外，总和也必须展现至少5mm的绝对增加。(备注：一或多个新病变的出现也被视作进展)。
[0227]-稳定疾病(s.d.)：以研究时的最小总和直径作为参考，既没有足够的收缩来符合pr资格也没有足够的增加来符合pd资格。
[0228]
根据recist 1.1(附录6)及/或pcwg3标准，测量放射性无进展生存期(rpfs)作为
自疗法开始直至疾病进展或由于任何原因所致的死亡(以先发生者为准)的时间。测量总生存期(os)作为自疗法开始直至由于任何原因所致的死亡的时间。客观反应率(orr)是达成经确认的cr或pr的最佳总体反应(bor)的患者的比例。疾病控制率(dcr)是达成经确认的cr、pr或sd的bor的患者的比例。总体反应的持续时间是自首次确定反应(cr或pr)之日至客观记录复发或进行性疾病的第一日的时间。
[0229]
通过获得最短1周时间间隔的一系列值来确定与psa相关的效力。psa反应定义为psa自基线降低≥50％且可通过随后的两次psa评估(具有最短3周时间间隔)来确认。继发性psa反应定义为psa自基线至研究治疗后≥12周降低≥30％且可在4周后通过再检查来确认。
[0230]
剂量的选择及时间安排
[0231]
在第1周期第1天施用单剂量的cfg920及泼尼松。在第1周期第2天(采集24小时pk样本后)开始且在该研究的每个治疗周期中，口服给与bid cfg920，其中每次给药间隔约12小时。泼尼松与cfg920同时施用，口服给与，bid。阿氟色替每日一次与cfg920的早晨剂量同时施用。
[0232]
胶囊是整体与200ml水一起摄入且不应咀嚼或打开。cfg920的剂量是在餐前至少1小时或餐后2小时在禁食状态下施用。若患者呕吐，则在下一计划剂量之前不允许再给药。
[0233]
在i期的第1周期第13天，现场工作人员联系患者以提醒他们：bid给药计划应保持尽可能接近12小时的给药计划；在第1周期第14天及第15天，其应在cfg920给药时间附近维持一段足够时间的禁食；以及其需在第1周期第15天早晨的适宜时间向现场报告，以便可抽取给药前样本且在当天的计划时间施用早晨剂量。记录以下天数的给药日期及时间：第1周期第1天，第1周期第2天(早晨剂量)，第1周期第14天(早晨及晚上剂量)，第1周期第15天(早晨及晚上剂量)，及第1周期第16天(早晨剂量)。对于其他bid给药天数，若在第一剂量之后12小时(
±
2小时)未服用第二剂量，则跳过该第二剂量。记录第1周期第1天与第1周期第15天之间的任何错过的或跳过的剂量。对于第1周期第1天及第1周期第15天的早晨剂量，也记录患者在剂量施用前最近一次进食的日期及时间以及患者在剂量施用后下一次进食的日期及时间。
[0234]
警告及注意事项
[0235]
基于动物研究结果，针对阿比特龙报告的初步临床安全性数据及临床数据、对经施用cfg920及阿氟色替的患者的潜在毒性分别概述于下文。在cfg920及阿氟色替的临床评估期间，监测患者的ae及实验室测试结果变化以确保其安全性。
[0236]
使用cfg920的患者中的潜在毒性包括：血液学毒性；高血糖症；肝脏影响；皮质醇减少及相关影响；生殖器官变化；以及临床检验变化。使用阿氟色替的患者中的潜在毒性包括：胃肠道毒性；内分泌/代谢毒性；肝毒性；皮肤毒性；以及甲状腺毒性。
[0237]
伴随疗法
[0238]
患者必须在入选前已经历睾丸切除术或已接受lhrh激动剂/拮抗剂至少3个月。接受lhrh激动剂/拮抗剂的患者必须在研究持续时间维持这些药剂。
[0239]
一般而言，在研究期间允许使用任何伴随药物/疗法(包括被认为对患者的护理有必要的非处方(over-the-counter)药物)且适当地记录在电子病例报告表(ecrf)中。
[0240]
已接受抗雄激素剂(诸如氟他胺比卡鲁胺或
尼鲁米特个月的患者须要在入选前停止治疗6周且证明停药后psa持续升高。接受抗雄激素剂≤3个月的患者须要停药2周。
[0241]
已接受镭ra 223二氯化物的患者必须在入选前停止疗法7周或已接受来昔决南钐sm 153的患者必须在研究入选前停止疗法至少2周。
[0242]
当前正在接受使用已知为同功酶cyp1a的中度或强力抑制剂或诱导剂的药物(包括但不限于：α-萘黄酮、呋喃茶碱、奥美拉唑、兰索拉唑)及同功酶cyp3a的中度或强力抑制剂或诱导剂的药物(包括但不限于：伊曲康唑、酮康唑、阿扎木林、醋竹桃霉素、维拉帕米、利福平)的治疗的患者。在开始治疗之前，这些药物必须已停用强力诱导剂至少2周且必须已停用强力抑制剂至少1周。
[0243]
若在入选前剂量及肾功能已稳定至少12周且在研究药物治疗前至少4周内没有相关≥2级副作用，则允许伴随使用双膦酸盐及其他骨支持剂。
[0244]
使用贝特类(fibrates)及hmg-coa还原酶抑制剂的伴随疗法与表现为横纹肌溶解、肌酸磷酸激酶(cpk)水平及肌红蛋白尿显著升高、急性肾衰竭及有时死亡的罕见但严重的骨骼肌毒性的风险增加相关联。应基于个别患者的高血脂症的心血管及/或胰脏并发症的风险来确定其使用该疗法的风险与效益。
[0245]
从入选前1周起及治疗期间，不允许使用葡萄柚、塞维利亚柑橘(seville oranges)及其产品(果汁等)。
[0246]
剂量修改
[0247]
下表提供cfg920及阿氟色替的剂量修改的指导。
[0248]
表5a.i期第1周期血小板减少症的剂量修改指导
[0249][0250]
表5b.研究的i期(第2周期及以后)及ii期的剂量修改指导
[0251]
[0252][0253]
表6a i期部分的计划的研究评估的时间表
[0254]
[0255][0256][0257]
缩写：alt＝丙胺酸转胺酶，ast＝天冬胺酸转胺酶，bid＝每日两次，crpc＝去势抵抗性前列腺癌，cxdx＝第x周期第x天，ct＝计算机断层扫描，ecg＝心电图，ecog＝东部肿瘤合作组，eot＝治疗结束，hiv＝人类免疫缺陷病毒，mri＝磁共振成像，pgsk3β＝磷酸化糖原
合成酶激酶3β，psa＝前列腺特异性抗原，pten＝磷酸酶及张力蛋白同源物，qd＝每日一次。
[0258]
备注：一个周期＝28天。
[0259]
a.获得知情同意书之前，不应进行研究具体程序。
[0260]
b.医学病史应与当前研究相关且包括初始诊断时的格里森(gleason)评分、癌症的诊断及程度、前列腺癌病史、伴随疾病及先前药物/治疗(诸如先前的crpc治疗、先前的放射疗法或过去的手术)。
[0261]
c.研究期间将采集生命体征(脉搏、血压、呼吸速率、体温)。将以患者坐下且然后站立1分钟后来获得脉搏及血压。休息至少2分钟后，应以患者坐下来测量2次血压记录。然后患者应站立1分钟且然后应进行2次血压测量以监测高血压或低血压的发展。
[0262]
d.所有ecg将进行两份，间隔5分钟。若迹线不正常，则需要第三份。
[0263]
e.全血计数将由白细胞计数、血红蛋白、白细胞计数(差值)及血小板计数的测定组成。在剂量限制毒性评估期间将每周评估全血计数且对于第2周期、第3周期、第4周期每两周进行评估，然后对于剩下的后续周期及eot访视每月一次进行评估。
[0264]
f.血清化学将由钠、钾、氯离子、碳酸氢根、血尿素氮、肌酐、葡萄糖、alt、ast、碱性磷酸酶、总胆红素、直接胆红素、钙、镁、磷、白蛋白、总蛋白质、尿酸的血清水平的测定组成。在剂量限制毒性评估期间将每周评估血清化学且对于第2周期、第3周期、第4周期每两周进行评估，然后在剩下的后续周期及eot访视每月一次进行评估。
[0265]
g.尿液分析将由ph及比重的测定；以及葡萄糖、酮、蛋白质、胆红素及血液的试纸(dipstick)测定组成。若任何试纸测定为2 或更大，则还应进行尿液的显微检查。
[0266]
h.用于测量cfg920及阿氟色替pk血浆浓度的血液样本将在c1d1及c1d15(给药前、及早晨剂量之后0.5小时、1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、12小时及24小时)及在后续周期的第1天(早晨剂量之前)采集。
[0267]
备注：在c1d15的12小时样本应在当天的下一cfg920剂量之前采集，且在c1d1及c1d15的24小时样本分别应在c1d2及c1d16的早晨cfg920及阿氟色替剂量之前采集。应劝告患者，在c1d2及c1d16其应在已访视研究单位且已采集pk样本之后，才服用其早晨剂量。
[0268]
第1天的给药前样本应在给药前1小时内采集，及第15天的给药前样本应在早晨给药前10分钟内采集。对于其他时间点，可以在有待在剂量后≤1小时采集的样本的计划采样时间的
±
2分钟内、有待在剂量后》1且≤8小时采集的样本的计划采样时间的
±
5分钟内、有待在剂量后》8且≤24小采集的样本的计划采样时间的
±
30分钟内获得样本。
[0269]
i.药效动力学分析将由总睪酮、皮质醇、醛固酮、促肾上腺皮质激素及血浆肾素活性的测定组成。将在第1周期的第1天、第8天及第15天，以及第3周期、第8周期及第24周期的第1天在cfg920及阿氟色替的早晨剂量之前(给药前)1小时内获得血液样本。第1天的给药前样本应在给药前1小时内采集，以及其他天的给药前样本应在早晨给药前10分钟内采集。
[0270]
j.肿瘤评估应包括所有相关成像程序以识别转移性疾病的区域，在整个研究中应使用具有相同规格的肿瘤评估的相同方法(例如ct、mri或骨扫描)。
[0271]
k.将在c1d13联系患者，以提醒其在c1d14及c1d15维持cfg920的约12小时给药间隔及阿氟色替的24小时给药间隔，以在cfg920给药时间附近维持足够的禁食时间段，且记录在c1d14的自我管理剂量的给药日期及时间。也将提醒患者在c1d15的正确时间向研究单位报到，以便可采集给药前样本和按时(也即在c1d14的cfg920的晚上剂量之后约12小时)
施用的cfg920及阿氟色替的早晨剂量。
[0272]
l.第15天访视及后续周期的评估仅针对第2周期、第3周期、第4周期、第6周期。
[0273]
m.将在最后剂量之后15(
±
3)天进行eot访视。
[0274]
n.针对性的身体检查，集中于前列腺癌或不良事件所涉及的区域(应仅在筛选时进行数字直肠检查)。
[0275]
o.仅槽(trough)样本(也即在早晨剂量之前)。
[0276]
p.确定疾病程度的肿瘤评估将在第2周期、第4周期、第6周期结束时(第28
±
7天)获得；并且也在第6周期之后的每3个治疗周期在治疗结束时获得，患者在eot的28天内已完成肿瘤评估除外。非因疾病进展或因任何原因所致的死亡而终止研究治疗的患者，如果患者同意，应保持eot后的肿瘤评估时间表。
[0277]
q.身高将仅在该研究的筛选时采集。
[0278]
r.在第1天的5天内进行的筛选期间实施的程序也可用作第1天给药前评估且无需重复。
[0279]
表6b ii期部分的计划的研究评估的时间表
[0280]
[0281]
[0282][0283]
缩写：alt＝丙胺酸转胺酶，ast＝天冬胺酸转胺酶，bid＝每日两次，crpc＝去势抵抗性前列腺癌，cxdx＝第x周期第x天，ct＝计算机断层扫描，ecg＝心电图，ecog＝东部肿瘤合作组，eot＝治疗结束，hiv＝人类免疫缺陷病毒，mri＝磁共振成像，psa＝前列腺特异性抗原，pten＝磷酸酶及张力蛋白同源物，qd＝每日一次。
[0284]
备注：一个周期＝28天。
[0285]
a.获得知情同意书之前，不应进行研究具体程序。
[0286]
b.医学病史应与当前研究相关且包括初始诊断时的格里森(gleason)评分、癌症的诊断及程度、前列腺癌病史、伴随疾病及先前药物/治疗(诸如先前的crpc治疗、先前的放射疗法或过去的手术)。
[0287]
c.研究期间将采集生命体征(脉搏、血压、呼吸速率、体温)。将以患者坐下且然后站立1分钟后来获得脉搏及血压。休息至少2分钟后，应以患者坐下来测量2次血压记录。然后患者应站立1分钟且然后应进行2次血压测量以监测高血压或低血压的发展。
[0288]
d.所有ecg将进行两份，间隔5分钟。若迹线不正常，则需要第三份。
[0289]
e.全血计数将由白细胞计数、血红蛋白、白细胞计数差值及血小板计数的测定组成。在剂量限制毒性评估期间将每周评估全血计数且对于第2周期、第3周期、第4周期每两周进行评估，然后对于剩下的后续周期每月一次进行评估。
[0290]
f.血清化学将由钠、钾、氯离子、碳酸氢根、血尿素氮、肌酐、葡萄糖、alt、ast、碱性磷酸酶、总胆红素、直接胆红素、钙、镁、磷、白蛋白、总蛋白质、尿酸的血清水平的测定组成。在剂量限制毒性评估期间将每周评估血清化学且对于第2周期、第3周期、第4周期每两周进
行评估，然后在剩下的后续周期每月一次进行评估。
[0291]
g.尿液分析将由ph及比重的测定；以及葡萄糖、酮、蛋白质、胆红素及血液的试纸(dipstick)测定组成。若任何试纸测定为2 或更大，则还应进行尿液的显微检查。
[0292]
h.肿瘤评估应包括所有相关成像程序以识别转移性疾病的区域，在整个研究中应使用具有相同规格的肿瘤评估的相同方法(例如ct、mri或骨扫描)。
[0293]
i.第15天访视及后续周期的评估仅针对第2周期、第3周期、第4周期。
[0294]
j.将在最后剂量之后15(
±
3)天进行eot访视。
[0295]
k.针对性的身体检查，集中于前列腺癌或不良事件所涉及的区域(应仅在筛选时进行数字直肠检查)。
[0296]
l.确定疾病程度的肿瘤评估将在第2周期、第4周期、第6周期结束时(第28
±
7天)获得；并且也在第6周期之后的每3个治疗周期在治疗结束时获得，患者在eot的28天内已完成肿瘤评估除外。非因疾病进展或因任何原因所致的死亡而终止研究治疗的患者，如果患者同意，应保持eot后的肿瘤评估时间表。
[0297]
m.身高将仅在该研究的筛选时采集。
[0298]
n.在第1天的5天内进行的筛选期间实施的程序也可用作第1天给药前评估且无需重复。
[0299]
实施例c：cfg920 阿氟色替在人类患者中的组合疗法的效力及安全性概述
[0300]
实施例b中研究的目标之一是评估在群组1中接受cfg920 75mg 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd的组合疗法剂量的患者。该患者在接受cfg920 泼尼松 阿氟色替治疗的组合疗法后展现抗癌效力，如通过前列腺特异性抗原(psa)所评估。该患者的临床表现概述于下文以支持本专利申请。
[0301]
医学病史：此研究涉及一位79岁高加索人，其具有心房颤动、高血压、酸反流、失眠及青光眼的过去医学病史；且分别针对于各上述病症用地高辛(digoxin)、利西普利(lisinopril)/美托洛尔(metoprolol)、氢氧化铝/聚甲硅康(simethicone)、替马西泮(temazepam)、替莫洛尔(timolol)/曲妥普前列素(travoprost)治疗。其在66岁时经诊断患有前列腺癌。其在其前列腺癌被诊断后不久就接受根治性前列腺切除术，尽管其接受雄激素剥夺疗法(adt)，但8年后其前列腺癌进展为转移性去势抵抗性前列腺癌(mcrpc)(包括骨转移)。此后，该患者接受多线抗癌治疗，诸如阿比特龙、卡巴他赛、恩杂鲁胺、镭223(xofigo)、多烯紫杉醇(taxotere)及地诺单抗(denosumab)(xgeva)，但在入选实施例b中所描述的研究之前其肿瘤仍进展。
[0302]
研究治疗：在其满足所有纳入及排除标准后，该患者作为群组1的患者入选该研究的i期阶段以接受cfg920 75mg 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd的起始组合疗法剂量。不幸地，由于操作错误，自第57天至第85天(第3周期)，总共28天，该患者接受cfg92075mg 泼尼松5mg bid 阿氟色替150mg qd的更高阿氟色替剂量。错误经纠正且在第4周期的第1天(第85天后)将剂量恢复至cfg920 75mg 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd，概述如下：
[0303]
·
第1周期(第1天至第28天)：cfg920 75mg bid 阿氟色替100mg qd
[0304]
·
第2周期(第29天至第56天)：cfg920 75mg bid 阿氟色替100mg qd
[0305]
·
第3周期(第57天至第85天)：cfg920 75mg bid 阿氟色替150mg qd
[0306]
·
第4周期(第86天至第114天)：cfg920 75mg bid 阿氟色替100mg qd
[0307]
·
第5周期(第115天至第118天)：cfg920 75mg bid 阿氟色替100mg qd(截止日期为2020年7月23日，第118天)
[0308]
组合疗法的抗癌效力：psa是衡量前列腺癌进展的主要替代标志物(scott williams.surrogate endpoints in early prostate cancer research.transl androl urol.2018年6月；7(3):472
–
482)。在研究期间，根据前列腺癌工作组3(pcwg3)标准，psa反应定义为自基线下降≥50％(howard i.scher、michael j.morris、walter michael stadler、celestia s.higano、susan halabi、matthew raymond smith等人，the prostate cancer working group 3(pcwg3)consensus for trials in castration-resistant prostate cancer(crpc).journal of clinical oncology，2015，第33卷，第15期_增刊)。
[0309]
对于截止日期2020年7月23日，患者的psa水平自第2周期第1天(也即第29天)至第5周期第1天(也即第115天)自基线psa水平降低超过50％，如图2a中所显示。显示于图2a中的组合疗法的抗癌效力主要是通过cfg920 75mg 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd的剂量来实现，因为cfg920 75mg 泼尼松5mg bid 阿氟色替150mg qd治疗的更高的组合剂量仅在第3周期第1天(也即第57天)开始，其是自第2周期的第1天的初始psa下降日期(也即第29天)起4周后。在第3周期第1天至第3周期第28天期间，尽管经cfg920 75mg 泼尼松5mg bid 阿氟色替150mg qd的更高的组合剂量治疗，但与第1周期及第2周期中的psa水平相比，患者psa水平并没有进一步降低，反而略有增加。
[0310]
另一重要肿瘤进展评估是基于pcwg3的肿瘤影像研究，该研究使用骨扫描、psa反应及前列腺癌的1.1版实体肿瘤反应评估标准(recist)(lawrence h.schwartz、lesley seymour、saskia liti
è
re等人recist 1.1
–
standardisation and disease-specific adaptations:perspectives from the recist working group.eur j cancer.2016年7月；62:138
–
145)。在该研究中，基于recist 1.1的肿瘤影像评估是该研究的主要终点。基于recist 1.1标准，该患者的肿瘤影像评估经报告为研究治疗期间疾病病况稳定。患者展现确凿的psa反应(《基线水平的50％)及在cfg920 泼尼松 阿氟色替的组合疗法的治疗下通过pcwg3标准评估其前列腺癌的稳定病况持续超过112天。
[0311]
药效动力学标志物：雄激素激素被广泛接受以调节前列腺癌的增殖、凋亡、血管生成、转移及分化(takashi imamoto、hiroyoshi suzuki、masashi yano、koji kawamura、naoto kamiya、kazuhiro araki、akira komiya、naoki nihei、yukio naya及tomohiko ichikawa.the role of testosterone in the pathogenesis of prostate cancer.international journal of urology(2008)15，472
–
480)。睪酮(主要雄激素激素中之一)在许多研究中是用于前列腺癌的抗雄激素治疗的广泛使用的药效动力学标志物。研究治疗下睪酮水平的变化显示于图2b中。结果证实cfg920 泼尼松 阿氟色替的组合疗法可有效抑制该患者中睪酮产生。该药效动力学标志物提供cfg920 75mg 泼尼松5mg bid 阿氟色替100mg qd的组合抗癌疗法的有效性的进一步证据，尽管其只是该研究中的起始剂量，但结果显示该组合及剂量可有效降低该患者中psa及雄激素二者的水平。
[0312]
cfg920抑制cyp11b及cyp17a1二者：cfg920是cyp11b及cyp17a1二者的双重酶抑制剂，其不仅抑制具有抗癌活性的雄激素产生，而且抑制醛固酮合成以预防醛固酮增多症。醛固酮增多症是具有多种严重临床症状的病症，包括高血压、低血钾症、疲劳、头痛、肌肉无力及麻木。图2b的结果展示自基线(研究治疗之前)至第3周期第1天，除第2周期第1天(其为与
基线中醛固酮水平相似的醛固酮水平)外，不同时间点的醛固酮水平均低于基线水平。此外，该患者未报告任何不良事件(ae)，如醛固酮增多症的症状(参见表7)。图2b、图2c及表7的结果提供cfg920具有双重酶抑制且在使用组合疗法的治疗期间不引起醛固酮增多症的任何临床症状的确凿的证据。
[0313]
组合疗法的安全性：该患者报告严重度等级为1级/轻度的4种ae，如下表7中所显示。尽管在第3周期期间患者接受更高剂量的阿氟色替(150mg qd)，但在仔细评估ae的天数及研究治疗的剂量之后，由于所有4种ae均发生在第1周期中，而150mg qd的更高剂量的阿氟色替在第3周期中被服用，因此ae发生时间与研究治疗剂量之间没有相关性。ae与患者服用更高剂量的阿氟色替之间存在超过1个月的间隙。此外，尽管第3周期是患者接受150mg qd的更高剂量的阿氟色替的周期，但在此周期中并未报告ae。此外，在该研究中，所有4种报告的ae性质上均为良性且严重度为轻度，无任何与该研究中的组合疗法相关的显著临床后果。
[0314]
表7.患者的不良事件(ae)列表
[0315][0316]
本领域技术人员由前述描述当可明了本发明的除了本文所述的那些之外的各种修改。此类修改也旨在落在所附的权利要求的范围内。本技术中引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请案及公开案)通过引用整体并入本文中。