一种基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法与流程

技术特征：
1.一种基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将待测样品杀青烘烤至恒重，并研磨过筛，收集粉末，所述待测样品为半夏块茎或鹞落坪半夏块茎；(2)将步骤(1)所得粉末与乙醇溶液混合，进行热回流提取，并进行减压浓缩，得到有机酸粗提液；(3)将步骤(2)中获得的有机酸粗提液用无水碳酸钠水溶液调节ph值至10～12，用乙酸乙酯反复萃取至萃取液无色，合并萃取液；(4)将步骤(3)所得萃取液用盐酸酸化至ph值2～3，再以乙酸乙酯反复萃取，合并萃取液；(5)将步骤(4)所得萃取液减压蒸干后，用乙醇溶液复溶，得到总游离有机酸待测样品；(6)用超高效液相色谱-串联质谱检测所述总游离有机酸待测样品，并用标准物质数据库和三重四级杆质谱的多反应检测模式mrm，对总游离有机酸待测样品的成分分别进行定性和定量分析；(7)基于步骤(6)中定性和定量分析的结果，获得总游离有机酸的具体成分及其在半夏和鹞落坪半夏中含量的差异。2.根据权利要求1所述的基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于，所述步骤(1)中，杀青温度为100℃～110℃，杀青时间为10～20min；烘烤温度为50℃～60℃，烘烤时间为24～72h；样品粉末过筛目数为50～70目。3.根据权利要求1所述的基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于，所述步骤(2)中，粉末的质量与乙醇溶液的体积比为300～500mg：3～5ml；热回流提取温度为60℃～80℃，提取时间为1～2h，提取次数为2～3次；乙醇溶液浓度为70％～80％。4.根据权利要求1所述的基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，无水碳酸钠水溶液浓度为3％～5％，乙酸乙酯萃取次数为3～5次；所述步骤(4)中，乙酸乙酯萃取次数为3～5次。5.根据权利要求1所述的基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于，所述步骤(6)中色谱检测条件：色谱柱：agilent sb-c18 1.8μm
×
2.1mm
×
100mm；流动相：a相为体积浓度为0.1％的甲酸水溶液，b相为体积浓度为0.1％的甲酸乙腈溶液。6.根据权利要求5所述的基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于：流动相流速：0.35ml/min；色谱柱的柱温40℃；进样量4μl；洗脱梯度：0.00min b相比例为5％，9.00min内b相比例线性增加到95％，并维持在95％1min，10.00～11.10min，b相比例降为5％，并以5％平衡至14min。7.根据权利要求1所述的基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于，所述步骤(6)中质谱检测条件：线性离子阱和三重四极杆扫描在三重四极杆线性离子阱质谱仪，ab4500 qtrap uplc/ms/ms系统上获得的，该系统配备esi turbo离子喷雾接口，由analyst 1.6.3软件控制运行正负两种离子模式。8.根据权利要求7所述的基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于，
电喷雾离子源操作参数为：离子源，涡轮喷雾；源温度550℃；离子喷雾电压5500v/-4500v；离子源气体i，气体ii和帘气分别设置为50、60和25psi，碰撞诱导电离参数设置为高。9.根据权利要求7所述的基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于，在qqq和lit模式下分别用10μmol/l和100μmol/l聚丙二醇溶液进行仪器调谐和质量校准；qqq扫描使用mrm模式，并将碰撞气体氮气设置为中等；通过优化去簇电压和碰撞电压，完成各个mrm离子对的dp和ce；根据每个时期内洗脱的代谢物，在每个时期监测一组特定的mrm离子对。10.根据权利要求1所述的基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，其特征在于，所述步骤(6)中，标准物质数据库具体为mwdb。

技术总结
本发明公开了一种基于有机酸评价半夏和鹞落坪半夏品质的方法，属于中药化学成分分析领域。本发明利用75％乙醇加热回流提取半夏和鹞落坪半夏块茎总有机酸成分，并以乙酸乙酯反复萃取，去除杂质，获得有机酸提取液。采用UPLC-MS/MS对提取液进行检测，通过标准物质数据库对有机酸成分进行定性分析，共鉴定出109种有机酸成分，采用三重四级杆质谱的多反应检测模式MRM进行定量检测，结合大于2倍或小于0.5倍的差异倍数，筛选出91种含量存在显著差异的有机酸成分。本发明为利用有机酸评价半夏和鹞落坪半夏的品质提供了优良的技术手段，在半夏属药物质量控制和种类鉴定具有重要应用价值。价值。价值。


技术研发人员：欧祖兰 焦春燕 王占军 朱小茜 陈倩颖 徐忠东
受保护的技术使用者：合肥师范学院
技术研发日：2021.11.12
技术公布日：2022/2/18