饲料添加剂、包含该饲料添加剂的饲料及其应用的制作方法

1.本发明涉及饲料领域，特别涉及一种饲料添加剂、包含该饲料添加剂的饲料及其应用。


背景技术：

2.动物机体的能量平衡是确保生命和种族繁衍的必须条件，在能量转化代谢过程中，环境和营养等因素的诱发下，机体发生氧化应激、炎症等一系列负面影响，甚至可能更为严重的危害，在人和动物身上表现最突出的为亚健康。营养是保证动物繁殖力的主要外来因素，动物获得必要的营养，不仅使生殖系统发育良好，而且能发挥其繁殖潜能，营养过剩缺乏运动，可使母畜过肥，繁殖性能下降，影响动物健康。
3.机体内脂肪的慢慢积累最终会导致肥胖症、脂肪肝等，易导致机体生殖细胞的凋亡增多，肥胖和脂代谢的异常容易诱发生殖功能障碍，长期肥胖可能影响生殖器官的发育。且在此过程中氧化应激也会随之增加，机体的肥胖可以通过多种途径(如能量代谢、nadph氧化酶和线粒体电子传递链等)影响机体的氧化应激水平，当机体氧化还原体系紊乱时，氧化应激水平升高，可引发生殖细胞发育异常、生殖周期紊乱、生殖器官组织结构破坏和细胞损伤等降低生殖能力的病理反应。
4.因此，开发一种在高脂胁迫下，提高动物(尤其是雌性动物)的繁殖性能、抗氧化能力等的相关饲料添加剂具有非常重要的意义。


技术实现要素：

5.本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种饲料添加剂，能够缓解高脂胁迫导致的动物肥胖病、脂肪肝等的发生；在高脂胁迫下，该饲料添加剂能提高妊娠期和哺乳期动物的繁殖性能和抗氧化能力，改善高脂导致的糖代谢和脂代谢紊乱，减少高脂胁迫导致的组织损伤。
6.本发明的第一个方面，提供一种饲料添加剂，包括类胡萝卜素和γ-氨基丁酸。
7.在本发明的一些实施方式中，所述饲料添加剂由类胡萝卜素和γ-氨基丁酸组成。
8.在本发明的一些实施方式中，所述类胡萝卜素的主要生产方法包括化学合成法、天然提取法和微生物发酵法等。
9.在本发明的一些实施方式中，所述γ-氨基丁酸的主要生产方法包括化学合成法、天然提取法和微生物发酵法等。
10.在本发明的一些实施方式中，所述类胡萝卜素包括β-胡萝卜素、番茄红素、虾青素、叶黄素中的至少一种。
11.在本发明的一些优选的实施方式中，所述类胡萝卜素为β-胡萝卜素。
12.在本发明的一些实施方式中，所述类胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:(0.1-4)。
13.在本发明的一些实施方式中，所述类胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:
(0.2-3)。
14.在本发明的一些实施方式中，所述类胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:(0.5-2)。
15.在本发明的一些优选的实施方式中，所述类胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:1或1:0.5或1:2。
16.在本发明的一些实施方式中，所述饲料添加剂的饲喂对象为雌性动物。
17.在本发明的一些优选的实施方式中，所述饲料添加剂的饲喂对象为处于妊娠期或哺乳期的雌性动物。
18.在本发明的一些优选的实施方式中，所述饲料添加剂的饲喂对象为雌性牲畜。
19.在本发明的一些优选的实施方式中，所述饲料添加剂的饲喂对象为处于妊娠期或哺乳期的雌性牲畜。
20.本发明的第二个方面，提供一种饲料，包括本发明第一方面的饲料添加剂。
21.在本发明的一些实施方式中，每1kg所述饲料中包括20-500mg所述饲料添加剂。
22.在本发明的一些优选的实施方式中，每1kg所述饲料中包括50-300mg所述饲料添加剂。
23.在本发明的一些更优选的实施方式中，每1kg所述饲料中包括100-200mg所述饲料添加剂。
24.在本发明的一些更优选的实施方式中，每1kg所述饲料中包括100mg或200mg所述饲料添加剂。
25.在本发明的一些实施方式中，所述饲料的饲喂对象为雌性动物。
26.在本发明的一些优选的实施方式中，所述饲料的饲喂对象为处于妊娠期或哺乳期的雌性动物。
27.在本发明的一些优选的实施方式中，所述饲料的饲喂对象为雌性牲畜。
28.在本发明的一些优选的实施方式中，所述饲料的饲喂对象为处于妊娠期或哺乳期的雌性牲畜。
29.在本发明的一些实施方式中，所述饲料包括能量饲料、蛋白质饲料、矿物质饲料、维生素预混料和氨基酸中的至少一种。
30.在本发明的一些实施方式中，所述饲料为高脂饲料或普通饲料。
31.在本发明的一些实施方式中，所述饲料为高脂饲料。
32.本发明的第三个方面，提供本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在如下(1)-(8)中至少一种中的应用，包括：
33.(1)用于提高高脂胁迫下动物的生产性能的产品；
34.(2)用于提高高脂胁迫下动物的哺乳性能的产品；
35.(3)制备用于改善高脂胁迫对动物的组织损伤的产品；
36.(4)制备用于改善高脂胁迫下动物的生殖激素水平的产品；
37.(5)制备用于提高高脂胁迫下动物的抗氧化能力的产品；
38.(6)制备用于降低高脂胁迫下动物的血脂的产品；
39.(7)制备用于改善高脂胁迫导致的动物糖代谢紊乱的产品；
40.(8)制备用于缓解高脂胁迫导致的动物肥胖病、脂肪肝发生的产品。
41.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于提高高脂胁迫下动物的生产性能的产品中的应用，所述饲料或所述饲料添加剂中所述β-胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:1或2:1。
42.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于提高高脂胁迫下动物的生产性能的产品中的应用，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸。
43.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于提高高脂胁迫下动物的哺乳性能的产品中的应用，所述饲料或所述饲料添加剂中所述β-胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:2或1:1。
44.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于提高高脂胁迫下动物的哺乳性能的产品中的应用，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
45.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于改善高脂胁迫对动物的组织损伤的产品中的应用，所述饲料或所述饲料添加剂中所述β-胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:1。
46.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于改善高脂胁迫对动物的组织损伤的产品中的应用，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸。
47.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于改善高脂胁迫下动物的生殖激素水平的产品中的应用，所述饲料或所述饲料添加剂中所述β-胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:1。
48.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于改善高脂胁迫下动物的生殖激素水平的产品中的应用，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
49.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于改善高脂胁迫下动物的生殖激素水平的产品中的应用，所述动物为妊娠期动物，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸；所述动物为哺乳期动物，所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
50.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于提高高脂胁迫下动物的抗氧化能力的产品中的应用，所述饲料或所述饲料
添加剂中所述β-胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:1。
51.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于提高高脂胁迫下动物的抗氧化能力的产品中的应用，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
52.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于提高高脂胁迫下动物的抗氧化能力的产品中的应用，所述动物为妊娠期动物，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸；所述动物为哺乳期动物，所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
53.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于降低高脂胁迫下动物的血脂的产品中的应用，所述饲料或所述饲料添加剂中所述β-胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:1。
54.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于降低高脂胁迫下动物的血脂的产品中的应用，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
55.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于降低高脂胁迫下动物的血脂的产品中的应用，所述动物为妊娠期动物，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸；所述动物为哺乳期动物，所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
56.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于改善高脂胁迫导致的动物糖代谢紊乱的产品中的应用，所述饲料或所述饲料添加剂中所述β-胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:1。
57.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于改善高脂胁迫导致的动物糖代谢紊乱的产品中的应用，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
58.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于改善高脂胁迫导致的动物糖代谢紊乱的产品中的应用，所述动物为妊娠期动物，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸；所述动物为哺乳期动物，所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括
100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
59.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于缓解高脂胁迫导致的动物肥胖病、脂肪肝发生的产品中的应用，所述饲料或所述饲料添加剂中所述β-胡萝卜素和所述γ-氨基丁酸的质量比为1:1。
60.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于缓解高脂胁迫导致的动物肥胖病、脂肪肝发生的产品中的应用，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
61.在本发明的一些实施方式中，本发明第一方面的饲料添加剂或本发明第二方面的饲料在制备用于缓解高脂胁迫导致的动物肥胖病、脂肪肝发生的产品中的应用，所述动物为妊娠期动物，所述饲料添加剂中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括50mg所述β-胡萝卜素和50mg所述γ-氨基丁酸；所述动物为哺乳期动物，所述饲料添加剂中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸，或1kg所述饲料中包括100mg所述β-胡萝卜素和100mg所述γ-氨基丁酸。
62.本发明的有益效果是：
63.本发明提供了一种饲料添加剂，该饲料添加剂能够用于饲喂动物，尤其是处于哺乳期和妊娠期的动物，且其制备方法简单，只需要简单混匀即可。γ-氨基丁酸(gaba)可调节激素的分泌、促进生殖，抑制脂肪肝和肥胖发生；β-胡萝卜素(cd)能清除过多的自由基，降低机体的氧化应激，提高动物的生产性能和哺乳性能。在gaba和cd的协同作用下，能够提高高脂胁迫下动物的生产性能，提高初生产仔数、初生产活仔数、初生窝重；能够提高高脂胁迫下动物的哺乳性能，降低断奶个体重，提高断奶成活率；能够改善高脂胁迫对动物的组织损伤，尤其是高脂胁迫对妊娠期动物的肝脏损伤和对哺乳期动物的心脏及结肠损伤；能够改善高脂胁迫下动物的生殖激素水平；能够提高高脂胁迫下动物的抗氧化能力，减少高脂胁迫对动物的氧化应激损伤，降低动物的mda水平，提高t-aoc、sod和gsh-px水平；能够改善动物在高脂胁迫下的脂代谢，降低血脂水平，尤其是降低tg、tc、ldl和hdl的水平，改善肝脏脂肪浸润程度；能够改善高脂胁迫导致的动物糖代谢紊乱，提高glu的水平，降低ins的水平；能够缓解高脂胁迫导致的动物脂肪肝、肥胖病等，有利于抑制高脂膳食动物脂肪肝的发生，防止过度肥胖。
64.本发明提供了一种饲料，含有上述饲料添加剂，能够缓解高脂胁迫导致的动物肥胖病、脂肪肝等的发生，提高高脂胁迫下的妊娠期和哺乳期动物的繁殖性能(包括生产性能和哺乳性能)和抗氧化能力，改善高脂导致的糖代谢和脂代谢紊乱，减少高脂胁迫导致的组织损伤。
65.本发明提供了一种产品，含有上述饲料添加剂或饲料，能够缓解高脂胁迫导致的动物肥胖病、脂肪肝等的发生，提高高脂胁迫下的妊娠期和哺乳期动物的繁殖性能(包括生产性能和哺乳性能)和抗氧化能力，改善高脂导致的糖代谢和脂代谢紊乱，减少高脂胁迫导致的组织损伤。
附图说明
66.下面结合附图和实施例对本发明做进一步的说明，其中：
67.图1为添加本技术饲料添加剂的高脂饲料饲喂母鼠分娩时皮下脂肪组织he染色结果(a：普通饲料；b：高脂饲料；c：饲料1；d：饲料2；e：饲料3；f：饲料4)；
68.图2为添加本技术饲料添加剂的高脂饲料饲喂母鼠分娩时肩胛脂肪组织he染色结果(a：普通饲料；b：高脂饲料；c：饲料1；d：饲料2；e：饲料3；f：饲料4)；
69.图3为添加本技术饲料添加剂的高脂饲料饲喂母鼠断奶时皮下脂肪组织he染色结果(a：普通饲料；b：高脂饲料；c：饲料1；d：饲料2；e：饲料3；f：饲料4)；
70.图4为添加本技术饲料添加剂的高脂饲料饲喂母鼠断奶时肩胛脂肪组织he染色结果(a：普通饲料；b：高脂饲料；c：饲料1；d：饲料2；e：饲料3；f：饲料4)；
71.图5为添加本技术饲料添加剂的高脂饲料饲喂母鼠分娩时肝脏组织he染色结果(a：普通饲料；b：高脂饲料；c：饲料1；d：饲料2；e：饲料3；f：饲料4)；
72.图6为添加本技术饲料添加剂的高脂饲料饲喂母鼠分娩时肝脏组织油红o染色结果(a：普通饲料；b：高脂饲料；c：饲料1；d：饲料2；e：饲料3；f：饲料4)；
73.图7：添加本技术饲料添加剂的高脂饲料饲喂母鼠分娩时肝脏组织he染色结果(a：普通饲料；b：高脂饲料；c：饲料1；d：饲料2；e：饲料3；f：饲料4)；
74.图8：不同饲料饲喂母鼠分娩时肝脏组织油红o染色结果(a：普通饲料；b：高脂饲料；c：饲料1；d：饲料2；e：饲料3；f：饲料4)。
具体实施方式
75.为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例对本发明要求的保护范围不构成限制作用。
76.下列实施例中采用的试剂、方法和设备均为本技术领域常规试剂、方法和设备。下列实施例中未注明具体实验条件的试验方法，通常按照常规实验条件或按照制造厂所建议的实验条件。
77.pb缓冲液的配制方法：称取na2hpo4·
12h2o 731.2g，加重蒸水溶解，定容至1000ml。
78.4％多聚甲醛固定液的配制方法：称取40g多聚甲醛，用0.1mol/l pb缓冲液定容至1l，加热60℃溶解过滤，4℃避光保存，保存不超过1个月。
79.以下实施例中，所用普通饲料和高脂饲料均由北京博泰宏达生物技术有限公司提供，其中，普通饲料按孕鼠营养标准需要配制，高脂饲料的脂肪含量约为40％；所用小鼠均为c57bl/6小鼠，6周龄，体况相近、健康状况良好，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供；所用γ-氨基丁酸(gaba)，由山东正大菱花生物科技有限公司提供，纯度90％，外观为白色结晶粉末；所用β-胡萝卜素(cd)由四川爱绿恒瑞生物科技有限公司提供，纯度10％，外观为橙色粉末。下述实施例中所示的gaba或cd的质量均为实际称取质量乘以纯度后得到的质量。
80.实施例1
81.一种饲料添加剂，其组分为：50mg gaba和50mg cd。
82.实施例2
83.一种饲料添加剂，其组分为：50mg gaba和100mg cd。
84.实施例3
85.一种饲料添加剂，其组分为：100mg gaba和50mg cd。
86.实施例4
87.一种饲料添加剂，其组分为：100mg gaba和100mg cd。
88.试验例
89.向1kg高脂饲料中分别加入实施例1、实施例2、实施例3和实施例4中的饲料添加剂，混匀，并分别记为饲料1、饲料2、饲料3和饲料4。
90.96只母鼠，24只公鼠，均分为6组，每组包括16只母鼠和4只公鼠，6组分别饲喂普通饲料、高脂饲料、饲料1、饲料2、饲料3和饲料4，将公鼠和母鼠按个体数比例1：4进行配种，饲养条件为：温度24-27℃，相对湿度55-65％，自然光照。配种两星期后母鼠腹部凸出明显后，拎出公鼠单独饲养。饲喂母鼠至分娩后21天。
91.分别在母鼠分娩后1-2天、分娩后第21天收集分娩后母鼠和断奶时母鼠的血清、器官、组织等。其中，血清采集方法为摘取眼球采血法，通过摘取眼球采血于2ml离心管中，在室温下凝固2h，然后将上述离心管于4000r/min离心15min，上清液即为待测血清，以检测血液相关指标。器官/组织采集方法为：将小鼠体表75％乙醇浸泡消毒，打开腹腔，取卵巢、子宫、心、肝、脾、肺、肾、小肠、结肠、盲肠、皮下脂肪、腹股沟脂肪、肩胛脂肪、肾周脂肪、腹部脂肪，去除多余的组织，用生理盐水冲洗后，滤纸吸收多余的水分，称重并记录，称重后，分别剪一块肝脏、皮下脂肪组织、肩胛脂肪组织，分别放入4％多聚甲醛溶液固定，以用于制作组织石蜡切片。
92.1.母鼠繁殖性能检测
93.(1)母鼠生产性能检测
94.统计各组母鼠所生产幼鼠的初生个体重、初生产仔数、初生产活仔数和初生窝重，结果如表1所示。
95.表1：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠生产性能的影响
[0096][0097]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0098]
由表1可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组的初生产仔数和初生产活仔数极显著降低。与高脂饲料组相比，饲料1组的初生产仔数显著升高，初生产活仔数和初生窝重极显
著升高；饲料2组初生个体重显著降低，初生产仔数和初生产活仔数显著升高。这表明在高脂胁迫下，在饲料中添加实施例1或实施例2的饲料添加剂能有效提高妊娠期母鼠的生产性能，减少初生个体重，增加初生产仔数、初生产活仔数和初生窝重，其中实施例1的效果最好。
[0099]
(2)母鼠哺乳性能检测
[0100]
统计各组母鼠所生产的幼鼠断奶后的断奶个体重、断奶成活率和断奶窝重，结果如表2所示。
[0101]
表2：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠哺乳性能的影响
[0102][0103]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0104]
由表2可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组的幼鼠的断奶成活率和断奶窝重极显著降低，断奶个体重极显著升高。与高脂饲料组相比，饲料3组和饲料4组的断奶个体重有所降低，断奶成活率显著升高，与普通饲料组相近，其中饲料3组断奶窝重极显著增加，饲料4组断奶窝重显著增加。这表明在高脂胁迫下，在饲料中添加实施例3或实施例4的饲料添加剂能有效提高母鼠的哺乳性能，降低断奶个体重，提高断奶成活率。
[0105]
2.脏器指数检测
[0106]
脏器系数指小鼠某脏器的重量与其体重的比值。
[0107]
(1)分娩时母鼠的脏器指数检测
[0108]
为了研究高脂饲喂体重的增加，机体的代谢紊乱对母鼠分娩时脏器的影响，统计并分析分娩时各组母鼠的脏器指数，统计结果如表3所示。
[0109]
表3：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠分娩时脏器指数的影响
[0110][0111][0112]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0113]
由表3可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠的肝脏指数极显著升高，肺指数显著升高，盲肠指数极显著升高，结肠指数显著降低，其他脏器指数无显著差异。与高脂饲料组相比，饲料1组的母鼠的肝脏指数显著极降低，肺指数显著降低，盲肠指数显著降低，其他脏器指数与普通饲料组母鼠的脏器指数值更为接近。这表明高脂胁迫会损伤妊娠期母鼠的脏器，在饲料中添加实施例1的饲料添加剂，能有效改善高脂胁迫对妊娠期母鼠脏器的影响，尤其是对肝脏的影响。
[0114]
(2)断奶时母鼠的脏器指数检测
[0115]
为了研究高脂饲喂体重的增加，机体的代谢紊乱对母鼠断奶时脏器的影响，统计并分析断奶时各组母鼠的脏器指数，统计结果如表4所示。
[0116]
表4：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠断奶时脏器指数的影响
[0117][0118][0119]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0120]
由表4可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠的肝脏指数显著升高，心脏指数、胃指数、盲肠指数和结肠指数极显著降低，小肠指数显著降低。与高脂饲料组相比，饲料1组的母鼠的心脏指数极显著升高，结肠指数显著升高，其他脏器指数与普通饲料组的脏器指数值更为接近，这表明在饲料中添加实施例1中的饲料添加剂，能有效改善高脂胁迫对哺乳期母鼠的组织损伤，尤其是心脏和结肠的损伤。与高脂饲料组相比，饲料4组的母鼠的肝脏指数显著降低，这表明在饲料中添加实施例4的饲料添加剂，能有效改善高脂饲喂对哺乳期母鼠的肝脏损伤，降低母鼠患脂肪肝的几率。
[0121]
3.生殖激素检测
[0122]
采用小鼠雌二醇(e2)酶联免疫分析试剂盒、小鼠促卵泡素(fsh)酶联免疫分析试剂盒和小鼠孕酮(p)酶联免疫分析试剂盒分别检测血清中e2、fsh和p的浓度(以上试剂盒均由江苏酶标生物科技有限公司提供)。相应检测步骤均严格按照试剂盒说明书进行操作。
[0123]
其中，fsh主要促进卵泡发育和精子发生；e2主要刺激促进子宫内膜增生，子宫平滑肌收缩，促进乳腺导管的发育和增殖；p维持妊娠，促进乳腺腺泡发育，低浓度时与雌激素协同引发发情行为，高浓度抑制发情。
[0124]
(1)分娩时母鼠血清中生殖激素浓度检测
[0125]
分娩时母鼠血清中e2、fsh和p的浓度如表5所示。
[0126]
表5：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠分娩时血清中生殖激素浓度的影响
[0127][0128][0129]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0130]
由表5可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠血清中e2和p的浓度均有所降低，fsh的浓度极显著降低。与高脂饲料组相比，饲料1组母鼠血清中的fsh浓度极显著升高，且e2和p浓度与普通饲料组相近；饲料2组母鼠血清中的fsh浓度显著升高，且e2和p浓度与普通饲料组相近。这表明高脂胁迫会降低妊娠期母鼠血清中的生殖激素水平，而在饲料中添加实施例1或实施例2的饲料添加剂能够有效改善高脂胁迫对妊娠期母鼠生殖激素的影响，其中实施例1的饲料添加剂效果最好。
[0131]
(2)断奶时母鼠血清中生殖激素浓度检测
[0132]
断奶时母鼠血清中e2、fsh和p的浓度如表6所示。
[0133]
表6：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠断奶时血清中生殖激素浓度的影响
[0134][0135]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0136]
由表6可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠血清中e2、fsh和p的浓度均极显著降低。与高脂饲料组相比，饲料1组母鼠血清中e2浓度显著升高，fsh和p的浓度也有所升高；饲料2组母鼠血清中的fsh浓度极显著升高，e2和p的浓度也有所升高；饲料4组母鼠血清中e2和fsh的浓度均极显著升高，p的浓度也有所升高。这表明高脂胁迫会降低哺乳期母
鼠的生殖激素浓度，而在饲料中添加实施例2、实施例3和实施例4的饲料添加剂，能有效改善高脂胁迫对哺乳期母鼠体内生殖激素浓度的影响，其中实施例4的饲料添加剂效果最好。
[0137]
4.抗氧化指标检测
[0138]
采用总抗氧化能力(t-aoc)测定试剂盒、丙二醛(mda)测试盒、谷胱甘肽过氧化酶(gsh-px)测试盒和总超氧化物歧化酶(t-sod)测试盒分别检测血清中t-aoc、mda、gsh-px和sod的浓度(以上试剂盒均由南京建成生物科技有限公司提供)。相应检测步骤均严格按照试剂盒说明书进行操作。
[0139]
(1)分娩时母鼠血清中抗氧化指标检测
[0140]
分娩时母鼠血清中t-aoc、mda、gsh-px和sod的浓度如表7所示。
[0141]
表7：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠分娩时血清中抗氧化指标浓度的影响
[0142][0143]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0144]
由表7可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠血清中的mda的浓度极显著升高，t-aoc、sod和gsh-px的浓度均极显著降低。与高脂饲料组相比，饲料1组母鼠血清中的mda浓度极显著降低，t-aoc、sod和gsh-px的浓度极显著升高；饲料2组母鼠血清中mda浓度极显著降低，gsh-px的浓度极显著升高，t-aoc的浓度显著升高；饲料3组母鼠血清中的mda浓度极显著降低，sod和gsh-px的浓度极显著升高，t-aoc的浓度显著升高；饲料4组母鼠血清中的mda浓度极显著降低，sod浓度极显著升高，t-aoc的浓度显著升高。这表明高脂胁迫会对妊娠期母鼠机体造成较为严重的氧化应激，在饲料中添加实施例1、实施例2、实施例3和实施例4的饲料添加剂能减少高脂胁迫对妊娠期母鼠的氧化应激损伤，其中，实施例1的饲料添加剂效果最好。
[0145]
(2)断奶时母鼠血清中抗氧化指标检测
[0146]
断奶时母鼠血清中t-aoc、mda、gsh-px和sod的浓度如表8所示。
[0147]
表8：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠断奶时血清中抗氧化指标浓度的影响
表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0159]
如表9所示，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠血清中tg、tc、ldl、hdl浓度均升高，其中tg和tc浓度极显著升高，hdl浓度显著升高。与高脂饲料组相比，饲料1组母鼠血清中的tg浓度极显著降低，tc、ldl、hdl浓度也有所降低；饲料2组和饲料3组母鼠血清中的tg浓度显著降低，tc、ldl、hdl浓度也有所降低。这表明高脂胁迫会导致妊娠期母鼠机体血脂升高，在饲料中添加实施例1、实施例2和实施例3的饲料添加剂能有效降低母鼠的血脂浓度，其中实施例1的饲料添加剂效果最好。
[0160]
(2)断奶时母鼠血清中血脂浓度检测
[0161]
断奶时母鼠血清中tc、tg、hdl和ldl的浓度如表10所示。
[0162]
表10：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠断奶时血清中血脂浓度的影响
[0163][0164][0165]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0166]
如表10所示，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠血清中tc、ldl、hdl的浓度均极显著升高，tg的浓度升高但效果不显著。与高脂饲料组相比，饲料2组、饲料3组和饲料4组母鼠血清中tc、ldl、hdl的浓度均极显著降低，tg的浓度有所降低；饲料1组母鼠血清中ldl的浓度极显著降低，tc、tg和hdl的浓度均有所降低。这表明高脂胁迫会导致哺乳期母鼠机体血脂升高，在饲料中添加实施例2、实施例3和实施例4的饲料添加剂能有效降低母鼠的血脂浓度，其中，实施例4的饲料添加剂效果最好。
[0167]
高脂胁迫会导致妊娠期和哺乳期母鼠机体血脂升高，饲喂时间越长，母鼠机体的血脂浓度越高。
[0168]
6.血糖水平检测
[0169]
采用小鼠胰岛素(ins)酶联免疫分析试剂盒和葡萄糖(glu)试剂盒分别检测血清中ins和glu的浓度(小鼠胰岛素(ins)酶联免疫分析试剂盒由江苏酶标生物科技有限公司提供，glu试剂盒由上海科华生物工程股份有限公司提供)。相应检测步骤均严格按照试剂盒说明书进行操作。
[0170]
(1)分娩时母鼠血清中血糖浓度检测
[0171]
分娩时母鼠血清中glu和ins的浓度如表11所示。
[0172]
表11：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠分娩时血清中血糖浓度的影响
[0173][0174]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0175]
如表11所示，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠血清中glu浓度显著降低，ins浓度升高。与高脂饲料组相比，饲料1组母鼠血清中glu浓度升高，ins浓度降低。
[0176]
(2)断奶时母鼠血清中血糖浓度检测
[0177]
断奶时母鼠血清中glu和ins的浓度如表12所示。
[0178]
表12：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠断奶时血清中血糖浓度的影响
[0179][0180]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0181]
如表12所示，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠血清中glu浓度极显著降低，ins浓度升高。与高脂饲料组相比，饲料4组母鼠血清中的glu浓度升高，ins浓度降低，与普通饲料组相近，这表明在母鼠饲料中添加实施例4的饲料添加剂，能改善高脂胁迫导致的哺乳期母鼠糖代谢紊乱。
[0182]
7.母鼠各级卵泡密度检测
[0183]
将母鼠卵巢切片进行he染色，以统计母鼠卵巢中的各级卵泡密度，分析本发明饲料添加剂对高脂饲喂母鼠各级卵泡密度的影响。
[0184]
(1)分娩时母鼠各级卵泡密度检测
[0185]
分娩时母鼠卵巢中的各级卵泡密度统计如表13所示。
[0186]
表13：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠分娩时各级卵泡密度的影响
[0187][0188][0189]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0190]
如表13所示，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠的初级卵泡密度升高，次级卵泡密度、黄体密度降低。与高脂饲料组相比，饲料1组和饲料2组母鼠的初级卵泡密度显著升高，次级卵泡密度和黄体密度有所升高，饲料3组和饲料4组母鼠的初级卵泡密度极显著升高，次级卵泡密度和黄体密度有所升高。这表明在饲料中添加实施例3和实施例4的饲料添加剂能有效改善高脂胁迫对妊娠期母鼠的初级卵泡密度、次级卵泡密度和黄体密度的影响。
[0191]
(2)断奶时母鼠各级卵泡密度检测
[0192]
断奶时母鼠卵巢中的各级卵泡密度统计如表14所示。
[0193]
表14：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠断奶时各级卵泡密度的影响
[0194][0195]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0196]
如表14所示，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠的初级卵泡密度极显著降低(p《0.01)，次级卵泡密度、黄体密度无显著差异。与高脂饲料组相比，饲料1、饲料2和饲料3并未对哺乳期母鼠的初级卵泡密度、次级卵泡密度、黄体密度造成显著影响，而饲料4组母鼠的初级卵泡密度极显著升高，次级卵泡密度和黄体密度降低。这表明饲料中添加实施例4
的饲料添加剂能改善哺乳期母鼠的各级卵泡密度，尤其是初级卵泡密度。
[0197]
8.脂肪组织相关指标检测
[0198]
本试验检测了分娩和断奶时母鼠白色脂肪组织如皮下脂、腹股沟脂、肾周脂、腹脂及肩胛褐色脂肪的重量，并将分娩和断奶时母鼠皮下白色脂肪组织和肩胛褐色脂肪组织切片分别进行he染色。肩胛褐色脂肪“白化”，可直接导致母鼠机体肥胖的发生。
[0199]
(1)分娩时母鼠的脂肪组织相关指标检测
[0200]
分娩时母鼠的脂肪组织重量统计如表15所示。分娩时母鼠皮下白色脂肪组织和肩胛褐色脂肪组织he染色结果分别如图1和图2所示，并统计分娩时母鼠皮下脂肪细胞直径、脂肪细胞平均面积和脂肪细胞密度等数据如表16所示。
[0201]
表15：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠分娩时脂肪组织重量的影响
[0202][0203]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0204]
表16：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠分娩时皮下脂肪细胞的影响
[0205][0206][0207]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0208]
由表15可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠皮下脂肪的重量极显著升高，腹股沟脂、肾周脂、腹脂及肩胛褐色脂肪的重量升高。与高脂饲料组相比，饲料1组、饲料2
组、饲料3组和饲料4组的母鼠皮下脂、腹股沟脂、肾周脂、腹脂及肩胛褐色脂肪的重量均下降，且饲料1组母鼠的各脂肪组织重量均更接近普通饲料组。
[0209]
由图1和表16可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组母鼠的皮下脂肪细胞直径和脂肪细胞平均面积升高，脂肪细胞密度下降；与高脂饲料组相比，饲料1组、饲料2组、饲料3组和饲料4组的母鼠皮下脂肪细胞直径和脂肪细胞平均面积均下降，脂肪细胞密度升高，其中饲料1组母鼠的皮下脂肪细胞各数据更接近普通饲料组。
[0210]
由图2可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组母鼠的肩胛脂肪细胞中的脂滴较大较多，肩胛褐色脂肪“白化”；与高脂饲料组相比，饲料1组母鼠肩胛脂肪细胞中的脂滴较小较少，肩胛褐色脂肪褐变。
[0211]
在饲料中添加实施例1的饲料添加剂，能有效改善高脂胁迫对妊娠期母鼠各脂肪组织的影响，加快脂肪的代谢。
[0212]
(2)断奶时母鼠的脂肪组织相关指标检测
[0213]
断奶时母鼠的脂肪组织重量统计如表17所示。断奶时母鼠皮下白色脂肪组织和肩胛褐色脂肪组织的he染色结果分别如图3和图4所示，并统计断奶时母鼠皮下脂肪细胞直径、脂肪细胞平均面积和脂肪细胞密度等数据如表18所示。
[0214]
表17：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠断奶时脂肪组织重量的影响
[0215][0216][0217]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0218]
表18：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠断奶时皮下脂肪细胞的影响
[0219][0220]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0221]
由表17可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组的母鼠腹脂和肾周脂的重量显著升高，肩胛脂、皮下脂、腹股沟脂的重量无显著差异；与高脂饲料组相比，饲料1组、饲料2组、饲料3组和饲料4组的母鼠皮下脂、腹股沟脂、肾周脂、腹脂及肩胛褐色脂肪的重量并无显著性差异，但饲料4组的母鼠的各脂肪组织重量均更接近普通饲料组。
[0222]
由图3和表18可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组母鼠的皮下脂肪细胞直径、脂肪细胞平均面积极显著升高，脂肪细胞密度极显著降低。与高脂饲料组相比，饲料4组的母鼠皮下脂肪细胞直径显著降低，脂肪细胞平均面积极显著降低，脂肪细胞密度极显著升高，饲料1组、饲料2组和饲料3组的母鼠皮下脂肪细胞情况也有一定程度的改善。
[0223]
由图4可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组母鼠的肩胛褐色脂肪脂滴大且多，褐色脂肪明显“白化”。与高脂饲料组相比，饲料4组的母鼠的肩胛褐色脂肪脂滴小且少，褐色脂肪明显褐变。
[0224]
这说明在饲料中添加实施例4的饲料添加剂，能有效改善高脂胁迫对哺乳期母鼠各脂肪组织的影响。
[0225]
9.肝组织脂肪浸润程度检测
[0226]
本试验将分娩和断奶时母鼠肝组织切片进行he染色和油红o染色，并计算脂滴面积百分比，通过脂滴面积百分比分析肝组织脂肪浸润程度。
[0227]
脂滴面积百分比(％)＝脂滴面积(μm2)/组织面积(μm2)。
[0228]
(1)分娩时母鼠的肝组织脂肪浸润程度检测
[0229]
分娩时母鼠肝组织的he染色结果和油红o染色结果分别如图5和图6所示，脂滴面积百分比统计结果如表19所示。
[0230]
表19：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠分娩时肝组织脂肪浸润程度的影响
[0231][0232]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0233]
由图5可知，普通饲料组肝索整齐排列，肝小叶形态正常，细胞大小和结构均正常；与普通饲料组相比，高脂饲料组母鼠的肝小叶结构紊乱，肝细胞明显肿胀，中央静脉、汇管周围及肝胞质内均可见肝细胞轻度脂肪变性，胞质内可见数量较多，体积较小的圆形空泡，可见脂肪细胞浸润；肝细胞坏死范围较大，胞核固缩深染、破碎或溶解消失，胞质嗜酸性增强。与高脂饲料组相比，饲料1组母鼠的肝小叶结构稍许紊乱，胞质疏松淡染，胞质内极少见体积较小的圆形空泡，肝细胞未见坏死；饲料2组母鼠的肝小叶结构稍许紊乱，胞质疏松淡染，胞质内稍许体积较小的圆形空泡，胞核出现稍许的破碎或溶解消失；饲料3组母鼠的肝小叶结构稍许紊乱，胞质疏松淡染，胞质内有稍许体积较小的圆形空泡，胞核出现破碎或溶解消失；饲料4组母鼠的肝小叶结构稍许紊乱，胞质疏松淡染，胞质有内稍许体积较小的圆形空泡，胞核出现破碎或溶解消失。
[0234]
由图6和表19可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组母鼠肝脏中的脂滴面积极显著升高；与高脂饲料组相比，饲料1组、饲料2组、饲料3组和饲料4组的母鼠肝脏脂肪浸润程度都得到明显的改善，其中饲料1组和饲料2组母鼠的脂滴面积极显著降低，饲料3组母鼠的脂滴面积显著降低，其中饲料1的效果最好。
[0235]
(2)断奶时母鼠的肝组织脂肪浸润程度检测
[0236]
断奶时母鼠肝组织的he染色结果和油红o染色结果分别如图7和图8所示，脂滴面积百分比统计结果如表20所示。
[0237]
表20：饲料添加剂对高脂饲喂母鼠断奶时肝组织脂肪浸润程度的影响
[0238][0239]
注：“*”表示高脂饲料组与普通饲料组相比，“*”表示差异显著(p《0.05)，“**”表示差异极显著(p《0.01)；“#”表示饲料1组、饲料2组、饲料3组、饲料4组与高脂饲料组相比，“#”表示差异显著(p《0.05)，“##”表示差异极显著(p《0.01)。
[0240]
由图7可知，普通饲料组肝索整齐排列，肝小叶形态正常，细胞大小和结构均正常。与普通饲料组相比，高脂饲料组母鼠肝小叶结构紊乱，肝细胞明显肿胀，中央静脉、汇管周围及肝胞质内均可见肝细胞脂肪变性，胞质内可见数量多，体积大的圆形空泡，可见脂肪细胞浸润；肝细胞坏死处多，胞核固缩深染、破碎或溶解消失，胞质嗜酸性增强。与高脂饲料组相比，饲料1组母鼠肝小叶结构紊乱，胞质疏松淡染，胞质内有较多体积较大的圆形空泡，较多处胞核出现的破碎或溶解消失；饲料2组母鼠的肝小叶结构轻微紊乱，胞质疏松淡染，胞质内有体积较大的圆形空泡，胞核出现大面积的破碎或溶解消失；饲料3组母鼠的肝小叶结构轻微紊乱，胞质疏松淡染，胞质内有体积较小的圆形空泡，胞核出现破碎或溶解消失；饲料4组母鼠肝小叶结构紊乱，胞质疏松淡染，胞质内有较多体积小的圆形空泡，胞核出现部分的破碎或溶解消失。
[0241]
由图8和表20可知，与普通饲料组相比，高脂饲料组母鼠的肝脏中的脂滴面积极显著升高；与高脂饲料组相比，饲料1组、饲料2组、饲料3组和饲料4组的母鼠肝脏脂肪浸润程度都得到明显的改善，效果显著，其中饲料3和饲料4效果最好。
[0242]
上面结合附图对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。