一种用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物、制备方法与用途与流程

一种用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物、制备方法与用途
【技术领域】
1.本发明属于豆甾醇应用技术领域。更具体地，本发明涉及一种用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物，还涉及所述药物组合物的制备方法，还涉及所述药物组合物的用途。


背景技术：

2.随着社会的发展，人民的生活、工作节奏的加快，现代人承受的精神压力也越来越大，长此以往极易发生氧化应激，这是由于过量的活性氧 (ros)与抗氧化酶失衡，过剩的ros在体内堆积导致的。所有需氧细胞都会遭受氧化应激的损伤，其中人脑最为敏感，原因是人脑的高脂质含量与高耗氧量(halliwell b.role of free radicals in the neurodegenerativediseases:therapeutic implications for antioxidant treatment.[j].drugs&aging, 2001,18(9):685-716)。氧化应激导致的神经细胞凋亡可产生的情绪、行为不良等负面影响，导致抑郁、失眠、焦虑等疾病，甚至增加神经退行性疾病发生风险，引发中枢神经系统疾病。药物治疗副作用大，依赖性大以及药物适口性差等缺陷，而天然成分具有早预防、无毒无害、无思想负担的优势，寻找具有改善大脑氧化应激损伤、保护神经的天然物质具有重要意义。
[0003]
豆甾醇是一种天然存在的植物甾醇，可以作为皮质激素、孕酮、雄激素、雌激素和维生素d3的前体，容易通过血脑屏障(kaur n,chaudhary j,jaina,kishore l.stigmasterol:a comprehensive review.int j pharm scires.2011；2(9):2259
–
2265.)。并且豆甾醇的双键结构使其易于被氧化，这也是豆甾醇保护神经的前提。据报道，豆甾醇对东莨菪碱诱导的小鼠氧化应激有显著的改善功能(se jin park et al.the ameliorating effects ofstigmasterol on scopolamine-induced memory impairments in mice[j].europeanjournal of pharmacology,2011,676(1):64-70.)，并且在体外研究中表明，豆甾醇可以维持细胞ros氧化应激诱导细胞凋亡(pratiwi reny et al. mechanisms and neuroprotective activities of stigmasterol against oxidativestress-induced neuronal cell death via sirtuin family.[j].frontiers in nutrition, 2021,8:648995-648995.)。但是，豆甾醇摄入量低，人体内的吸收率只有 4.8％，能起到的作用有限，因此未得到广泛应用。
[0004]
本发明人针对改善大脑氧化应激损伤、保护神经的药物有副作用、依赖性，适口性差，天然成分豆甾醇吸收率低等问题，在总结现有技术的基础之上，通过大量实验研究与分析总结，终于完成了本发明。


技术实现要素：

[0005]
[要解决的技术问题]
[0006]
本发明的目的是提供一种用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物。
[0007]
本发明的另一个目的是提供所述药物组合物的制备方法。
[0008]
本发明的另一个目的是提供所述药物组合物的用途。
[0009]
[技术方案]
[0010]
本发明是通过下述技术方案实现的。
[0011]
本发明涉及一种用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物。
[0012]
该药物组合物的组成如下：以重量份数计
[0013][0014]
根据本发明的一种优选实施方式，该药物组合物的组成如下：以重量份数计
[0015][0016][0017]
根据本发明的另一种优选实施方式，所述豆甾醇的纯度是以重量计 95％以上。
[0018]
根据本发明的另一种优选实施方式，所述的载体是一种或多种选自山药粉、麦芽糊精或变性淀粉的载体；它们的粒度是40～80目。
[0019]
根据本发明的另一种优选实施方式，所述的变性淀粉是抗性淀粉、支链淀粉、直链淀粉或α-淀粉。
[0020]
根据本发明的另一种优选实施方式，所述的粘合剂由羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素按照重量比1：6～10组成。
[0021]
本发明还涉及一种用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物制备方法。
[0022]
所述制备方法的制备步骤如下：
[0023]
a、湿法制粒
[0024]
将20～80重量份豆甾醇、10～30重量份大豆卵磷脂、5～15重量份胆固醇、20～40重量份载体与10～15重量份粘合剂加到湿法制粒机中，在切刀速度1500～2000rpm与搅拌速度100～150rpm的条件下搅拌混合5～10min，得到一种豆甾醇混合物；
[0025]
b、挤出滚圆
[0026]
让步骤a得到的豆甾醇混合物在转速500～1000rmp的条件下通过挤出滚圆机挤出得到直径0.8～1.5mm的颗粒；
[0027]
c、流化床干燥
[0028]
将步骤b得到的豆甾醇混合物颗粒在温度50～70℃与风量700～900m3/h 的条件
下通过流化床干燥设备进行干燥，得到水含量为以重量计1.0％以下的用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物。
[0029]
根据本发明的一种优选实施方式，所述的湿法制粒机是中国航空制造技术研究院hlsg-600型、浙江明天机械有限公司hlsg-100型或常州市海正药化设备有限公司ghl-150型制粒机；所述的挤出滚圆机是创志科技(江苏)股份有限公司gyj-500型、重庆英格制药机械有限公司e-100挤出机 s-700滚圆机或重庆力谱制药机械有限公司re-250挤出机 r500型滚圆机；所述的流化床干燥设备是重庆英格制药机械有限公司gfg-300、山东新马制药装备有限公司lgl-400或常州市阳旭干燥设备有限公司zlg6
×ꢀ
0.9型流化床干燥机。
[0030]
本发明还涉及所述用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物在制备治疗缓解氧化应激损伤与保护神经药物中用途。
[0031]
根据本发明的一种优选实施方式，在服用所述的药物时，每日摄入药物组合物的量为2～5g。
[0032]
下面将更详细地描述本发明。
[0033]
本发明涉及一种用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物。
[0034]
该药物组合物的组成如下：以重量份数计
[0035][0036]
豆甾醇在本发明药物组合物中的基本作用是它通过降低脑内细胞ros 的产生，保持细胞完整和细胞生长，减少细胞被氧化，从而缓解由氧化应激引起的神经变性。
[0037]
本发明使用的豆甾醇是含量为以重量计95％以上的豆甾醇，它都是目前市场上销售的产品，例如由陕西海斯夫生物技术有限公司销售的豆甾醇。
[0038]
大豆卵磷脂在本发明药物组合物中的主要作用是它与豆甾醇协同增效，它与豆甾醇融合后，大豆卵磷脂易于被人体吸收，从而增加豆甾醇在人体内的吸收能力，提高豆甾醇的抗氧化能力。本发明使用的大豆卵磷脂是目前市场上销售的产品，例如由大连华农豆业科技发展有限公司销售的大豆粉末磷脂。
[0039]
胆固醇在本发明药物组合物中的基本作用是与豆甾醇协同增效，提高豆甾醇细胞生长速率的能力，保护身体健康，提高免疫力。本发明使用的胆固醇是目前市场上销售的产品，例如由安徽天启化工科技有限公司销售的胆固醇。
[0040]
在本发明中，载体应该理解是一种承载有效成分的物质。载体在本发明药物组合物中的主要作用是它能载带豆甾醇、胆固醇与大豆卵磷脂，从而使它们在本发明药物组合物中均匀分散。本发明使用的载体是一种或多种选自山药粉、麦芽糊精或变性淀粉的载体。
[0041]
其中，山药粉是以山药为原料经晾晒成干片，经麸炒工艺加工、破碎成粉而制成的粉状物质。本发明使用的山药粉是目前市场上销售的产品，例如焦作市健国怀药有限公司销售的山药粉。
[0042]
麦芽糊精是以淀粉或淀粉质为原料，经酶法低度水解、精制、喷雾干燥所制成的不含游离淀粉的淀粉衍生物，本发明使用的麦芽糊精是目前市场上销售的产品，例如由山东萍聚生物科技有限公司销售的麦芽糊精。
[0043]
淀粉例如是抗性淀粉、支链淀粉、直链淀粉或α-淀粉，它们都是目前市场上销售的产品，例如由山东金泰淀粉有限公司销售的α-淀粉、由辽宁三源健康科技股份有限公司以商品名的抗性淀粉。
[0044]
这些载体的粒度是40～80目。这些载体粒度超过所述的范围是不行的，过小的粒径会影响适口性，增加吞咽难度，而且会增加产品加工的耗电量及电机磨损，增加成本。这个粒度范围能使本发明药物组合物组分混合更均匀，并且有利于提高该药物组合物的吸收率。
[0045]
在本发明中，粘合剂应该理解是一种能将所述组分粘合起来，并且遇到水等溶剂时还能崩解的物质。粘合剂在本发明药物组合物中的主要作用是将该组合物组分粘合起来，形成一种具有一定强度的颗粒。
[0046]
根据本发明，所述的粘合剂由羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素按照重量比1：6～10组成。使用羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素两种组分组成粘合剂的主要目的在于使用高分子壁材包裹粘合豆甾醇、大豆卵磷脂和胆固醇等其他物质。如果羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素的重量比大于1：6，则体系过于黏稠，以利于微囊形成；如果羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素的重量比低于1：10，则包裹性不强，微囊易破裂；因此，羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素的重量比为1：6～10是合适的。
[0047]
本发明使用的羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素都是目前市场上销售的产品，例如由河北志诚纤维素有限公司销售的羟丙基甲基纤维素，由源叶生物科技有限公司销售的微晶纤维素。
[0048]
在本发明中，大豆卵磷脂剂、胆固醇、载体与粘合剂的含量在所述的范围内时，如果豆甾醇的含量低于20重量份，则本发明药物组合物的抗氧化效果不显著；豆甾醇含量过低，而胆固醇含量过高会增加心脑血管疾病患病风险；如果豆甾醇的含量高于80重量份，则豆甾醇高摄入时存在吸收抑制，并不能提高吸收率；因此，豆甾醇的含量为20～80重量份是合理的，优选地是35～65重量份；
[0049]
同样地，豆甾醇、胆固醇、载体与粘合剂的含量在所述的范围内时，如果大豆卵磷脂的含量低于10重量份，则本发明药物组合物的药效不明显；如果大豆卵磷脂剂的含量高于30重量份，则会引起消化不良等肠道问题，并且加工成本增加；因此，大豆卵磷脂剂的含量为10～30重量份是恰当的，优选地是12～26重量份；
[0050]
豆甾醇、大豆卵磷脂剂、载体与粘合剂的含量在所述的范围内时，如果胆固醇的含量低于5重量份，则它与豆甾醇协同作用欠佳；如果胆固醇的含量高于15重量份，则胆固醇比例过高会增加心脑血管疾病患病风，还提高了成本；因此，胆固醇的含量为5～15重量份是合适的，优选地是8～ 12重量份；
[0051]
豆甾醇、大豆卵磷脂剂、胆固醇与粘合剂的含量在所述的范围内时，如果载体的含量低于20重量份，则豆甾醇、胆固醇与大豆卵磷脂混合不均匀；如果载体的含量高于40重量份，则豆甾醇、胆固醇与大豆卵磷脂含量过低，影响其效果；因此，载体的含量为20～40重量份是适当的，优选地是25～35重量份；
[0052]
豆甾醇、大豆卵磷脂剂、胆固醇与载体的含量在所述的范围内时，如果粘合剂的含量低于10重量份，则豆甾醇、大豆卵磷脂剂、胆固醇与载体粘合效果不好，难以形成形状良好的颗粒；如果载体的含量高于15重量份，则使该药物组合物过于黏稠，不能形成颗粒；因此，载体的含量为10～15 重量份是适当的，优选地是11～14重量份；
[0053]
优选地，该药物组合物的组成如下：以重量份数计
[0054][0055][0056]
本发明还涉及一种用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物制备方法。
[0057]
所述制备方法的制备步骤如下：
[0058]
a、湿法制粒
[0059]
将20～80重量份豆甾醇、10～30重量份大豆卵磷脂、5～15重量份胆固醇、20～40重量份载体与10～15重量份粘合剂加到湿法制粒机中，在切刀速度1500～2000rpm与搅拌速度100～150rpm的条件下搅拌混合5～10min，得到一种豆甾醇混合物；
[0060]
有关豆甾醇、大豆卵磷脂剂、胆固醇、载体与粘合剂的情况已经在前面描述过，故在此不再赘述。
[0061]
本发明使用的湿法制粒机是由中国航空制造技术研究院销售的 hlsg-600型制粒机、由浙江明天机械有限公司销售的hlsg-100型制粒机、常州市海正药化设备有限公司销售的ghl-150型制粒机。
[0062]
b、挤出滚圆
[0063]
让步骤a得到的豆甾醇混合物在转速500～1000rmp的条件下通过挤出滚圆机挤出得到直径0.8～1.5mm的颗粒；
[0064]
本发明使用的挤出滚圆机是创志科技(江苏)股份有限公司销售的 gyj-500型、重庆英格制药机械有限公司e-100销售的挤出机 s-700滚圆机、重庆力谱制药机械有限公司销售的re-250挤出机 r500型滚圆机。
[0065]
c、流化床干燥
[0066]
将步骤b得到的豆甾醇混合物颗粒在温度50～70℃与风量700～900m3/h 的条件下通过流化床干燥设备进行干燥，得到水含量为以重量计1.0％以下的用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物。
[0067]
所述药物组合物的水含量是根据gb 5009.3第四法测定得到的。
[0068]
本发明使用的流化床干燥设备是由重庆英格制药机械有限公司销售的gfg-300、由山东新马制药装备有限公司销售的lgl-400、常州市阳旭干燥设备有限公司销售的zlg6
×
0.9型流化床干燥机。
[0069]
本发明还涉及所述用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物在制备治疗缓解氧化应激损伤与保护神经药物中用途。
[0070]
本发明的药物组合物一方面可以通过豆甾醇缓解大脑氧化应激损伤、保护神经，另一方面可以通过豆甾醇、大豆卵磷脂与胆固醇复配降低血液中低密度脂蛋白浓度，保护心脑血管，提高免疫力与健康水平。
[0071]
在服用缓解氧化应激损伤与保护神经药物时，每日摄入本发明药物组合物的量为2～5g。如果本发明药物组合物的摄入量低于2g，则会降低该药物的治疗效果；如果本发明药物组合物的摄入量高于5g，则豆甾醇摄入量太高，存在吸收抑制、不能提高吸收率与会增加患病风险等问题；因此，本发明药物组合物的摄入量为2～5g是合适的。
[0072]
[有益效果]
[0073]
本发明的有益效果是：
[0074]
1、本发明药物组合物可提早预防、无副作用地缓解大脑氧化应激损伤、保护神经；
[0075]
2、本发明将豆甾醇与大豆卵磷脂联合使用，使豆甾醇在体内更好吸收，降低低密度脂蛋白浓度，保护心脑血管；
[0076]
3、本发明将豆甾醇与胆固醇联合使用，增强豆甾醇提高细胞生长速率能力，保护身体健康，提高免疫力。
【具体实施方式】
[0077]
通过下述实施例将能够更好地理解本发明。
[0078]
实施例1：本发明药物组合物的制备
[0079]
该实施例的实施步骤如下：
[0080]
a、湿法制粒
[0081]
将60重量份纯度为以重量计95.2％的豆甾醇、16重量份大豆卵磷脂、 12重量份胆固醇、34重量份粒度40～80目的山药粉载体与12重量份由羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素按照重量比1：9组成的粘合剂加到由中国航空制造技术研究院销售的hlsg-600型湿法制粒机中，在切刀速度2000rpm 与搅拌速度120rpm的条件下搅拌混合8min，得到一种豆甾醇混合物；
[0082]
b、挤出滚圆
[0083]
让步骤a得到的豆甾醇混合物在转速820rmp的条件下通过由创志科技 (江苏)股份有限公司销售的gyj-500型挤出滚圆机挤出得到直径0.8～ 1.5mm的颗粒；
[0084]
c、流化床干燥
[0085]
将步骤b得到的豆甾醇混合物颗粒在温度65℃与风量800m3/h的条件下通过由重庆英格制药机械有限公司销售的gfg-300流化床干燥设备进行干燥，然后根据本技术描述的方法检测水含量，得到水含量为以重量计 0.98％的用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物。
[0086]
实施例2：本发明药物组合物的制备
[0087]
该实施例的实施步骤如下：
[0088]
a、湿法制粒
[0089]
将80重量份纯度为以重量计96.0％的豆甾醇、23重量份大豆卵磷脂、 15重量份胆固醇、40重量份粒度40～80目的直链淀粉载体与14重量份由羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素按照重量比1：6组成的粘合剂加到由浙江明天机械有限公司销售的hlsg-100型湿法制粒
机中，在切刀速度1800rpm 与搅拌速度100rpm的条件下搅拌混合10min，得到一种豆甾醇混合物；
[0090]
b、挤出滚圆
[0091]
让步骤a得到的豆甾醇混合物在转速650rmp的条件下通过由重庆英格制药机械有限公司销售的e-100挤出机 s-700滚圆机挤出得到直径0.8～ 1.5mm的颗粒；
[0092]
c、流化床干燥
[0093]
将步骤b得到的豆甾醇混合物颗粒在温度50℃与风量900m3/h的条件下通过由山东新马制药装备有限公司销售的lgl-400流化床干燥设备进行干燥，然后根据本技术描述的方法检测水含量，得到水含量为以重量计 0.90％的用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物。
[0094]
实施例3：本发明药物组合物的制备
[0095]
该实施例的实施步骤如下：
[0096]
a、湿法制粒
[0097]
将20重量份纯度为以重量计95.8％的豆甾醇、10重量份大豆卵磷脂、 5重量份胆固醇、20重量份粒度40～80目的麦芽糊精载体与10重量份由羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素按照重量比1：8组成的粘合剂加到由中国航空制造技术研究院销售的hlsg-600型湿法制粒机中，在切刀速度 1500rpm与搅拌速度150rpm的条件下搅拌混合5min，得到一种豆甾醇混合物；
[0098]
b、挤出滚圆
[0099]
让步骤a得到的豆甾醇混合物在转速500rmp的条件下通过由重庆英格制药机械有限公司销售的e-100挤出机 s-700滚圆机挤出得到直径0.8～ 1.5mm的颗粒；
[0100]
c、流化床干燥
[0101]
将步骤b得到的豆甾醇混合物颗粒在温度70℃与风量700m3/h的条件下通过由山东新马制药装备有限公司销售的lgl-400流化床干燥设备进行干燥，然后根据本技术描述的方法检测水含量，得到水含量为以重量计 0.86％的用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物。
[0102]
实施例4：本发明药物组合物的制备
[0103]
该实施例的实施步骤如下：
[0104]
a、湿法制粒
[0105]
将40重量份纯度为以重量计95.4％的豆甾醇、30重量份大豆卵磷脂、 8重量份胆固醇、28重量份粒度40～80目的α-淀粉载体与15重量份由羟丙基甲基纤维素与微晶纤维素按照重量比1：10组成的粘合剂加到由浙江明天机械有限公司销售的hlsg-100型湿法制粒机中，在切刀速度1800rpm 与搅拌速度140rpm的条件下搅拌混合6min，得到一种豆甾醇混合物；
[0106]
b、挤出滚圆
[0107]
让步骤a得到的豆甾醇混合物在转速1000rmp的条件下通过由创志科技(江苏)股份有限公司销售的gyj-500型挤出滚圆机挤出得到直径0.8～ 1.5mm的颗粒；
[0108]
c、流化床干燥
[0109]
将步骤b得到的豆甾醇混合物颗粒在温度56℃与风量800m3/h的条件下通过由重
庆英格制药机械有限公司销售的gfg-300流化床干燥设备进行干燥，然后根据本技术描述的方法检测水含量，得到水含量为以重量计 0.94％的用于缓解氧化应激损伤与保护神经的药物组合物。
[0110]
试验实施例1：本发明药物组合物水迷宫实验
[0111]
该试验实施例的实施方式如下：
[0112]
i、试验动物：96只体重20g左右的spf级km小鼠，购自西安交通大学动物实验中心；
[0113]
ii、试验试剂：豆甾醇纯度≥95％，陕西海斯夫工程有限公司销售的产品；大豆卵磷脂纯度≥95％，大连华农豆业科技发展有限公司销售的产品；胆固醇，安徽天启化工科技有限公司销售的产品；东莨菪碱，sigma公司销售的产品。
[0114]
iii、试验方法
[0115]
根据实验动物及人的体表面积比例(剂量换算用)，人体摄入5g/人/天豆甾醇配方粉末时，计算小鼠给药剂量为0.2mg/只/天，然后将小鼠随机分为8组：
[0116]
对照组(c)、模型组(m)、豆甾醇组(d)(0.15mg/只/天)、大豆卵磷脂组(dd)(0.025mg/只/天)、胆固醇组(dg)(0.025mg/只/天)、豆甾醇 大豆卵磷脂组(d dd)(0.15 0.025＝0.175mg/只/天)、豆甾醇 胆固醇组 (d dg)(0.15 0.025＝0.175mg/只/天)、大豆卵磷脂 胆固醇组 (0.025 0.025＝0.05mg/只/天)(dd dg)、豆甾醇 大豆卵磷脂 胆固醇组 (pf)(0.15 0.025 0.025＝0.2mg/只/天)；
[0117]
每组3个重复，每个重复4只，采用灌胃给药的方式，溶剂为0.2ml 生理盐水，每天一次，连续给药3周后开始行为学实验(水迷宫)。行为学实验前1h，除对照组注射生理盐水外，其他组均注射东莨菪碱，注射体积为0.2ml，根据行为学结果确定豆甾醇的协同增效作用。
[0118]
水迷宫实验共6天，前五天为定航实验，最后一天为探索实验。
[0119]
iv、试验结果
[0120]
本发明药物组合物不同组分对东莨菪碱小鼠水迷宫潜伏期的影响结果列于表1中。
[0121]
表1：本发明药物组合物不同组分对定航实验潜伏期的影响
[0122][0123]
注：a,p＜0.05，a,p＜0.01，与对照组相比；b,p＜0.05，b,p＜0.01，与模型组)相比；
[0124]
在本说明书中，在所有表格中符号a、a、b和b均具有上述相同的含义。
[0125]
由表1列出的结果可看出注射东莨菪碱后，模型组小鼠潜伏期延长时间极显著增加，证明建模成功，摄入成分含豆甾醇的小鼠潜伏期有缩短趋势，预饲喂配方组(豆甾醇 大豆卵磷脂 胆固醇组)的小鼠潜伏期比模型组明显缩短，证明该配方效果良好。
[0126]
本发明药物组合物的不同组分对探险实验影响试验结果列于表2中。
[0127]
表2：本发明药物组合物不同组分对探险实验影响试验结果
[0128][0129][0130]
由表2列出的结果可以看出，东莨菪碱处理后，小鼠在实台象限的游泳时间显著减少，摄入含豆甾醇成分的小鼠在该象限的时间明显增加，经配方预饲喂后，该象限逗留时间增加极显著，并且小鼠游泳速度并未收到影响，由此证明本发明药物组合物可以有效缓解
氧化应激损伤，保护神经。
[0131]
本发明药物组合物的不同组分协同系数评价结果列于表3中。
[0132]
表3：本发明药物组合物不同组分的协同系数评价
[0133]
组别ati值(％)tti值(％)ctc作用效果d27.88
±
1.34b‑‑‑
dd26.49
±
2.69
‑‑‑
dg24.74
±
3.57
‑‑‑
d dd30.25
±
3.75b26.815112.81相加作用d dg28.96
±
2.29b26.69108.51相加作用dd dg24.34
±
3.1325.3795.96相加作用pf31.43
±
2.39b26.52120.41增效作用
[0134]
tti＝a
×
pa b
×
pb[0135]
式中：
[0136]
tti-混剂理论毒力指数；a-a药剂效果指数；b-b药剂效果指数；
[0137]
p
a-a药剂在混剂中的百分含量；p
b-b药剂在混剂中的百分含量；
[0138]
ctc＝ati
÷
tti
×
100
[0139]
式中：
[0140]
ctc-共毒系数；ati-混剂实际毒力指数；tti-混剂理论毒力指数。
[0141]
判定标准：
[0142]
ctc》120为增效作用；ctc《80为拮抗作用；80《ctc《120为相加作用。
[0143]
由表3列出的结果可以看出，当豆甾醇加入大豆卵磷脂和胆固醇，配比为5：1：1时，对东莨菪碱诱导的小鼠大脑氧化应激损伤有增效效果，具有明显的作用。实际作用上证明了大豆卵磷脂可以提高豆甾醇在体内的吸收效果以及胆固醇的激活作用。
[0144]
试验实验例2：脑组织生化指标测定
[0145]
在行为学实验结束后，采用颈椎脱臼处死小鼠，摘取小鼠脑组织置于浓度为0.9％生理盐水中，制备以重量计10％的匀浆液，在转速1500rpm下离心分离，移取上清，根据试剂盒说明书测定脑组织匀浆中sod活性，mda 含量及ache活性，其结果列于表4中。
[0146]
表4：本发明药物组合物不同组分的脑组织生化指标
[0147]
组别sod(u/mg prot)mda(nmol/mg prot)ache(u/mg prot)c76.86
±
16.3413.01
±
2.250.30
±
0.05m56.57
±
17.67a17.99
±
3.44a0.57
±
0.17ad60.37
±
6.46a15.73
±
4.180.48
±
0.07add57.82
±
2.72a16.34
±
2.730.55
±
0.12adg53.11
±
7.99a17.03
±
2.64a0.51
±
0.14ad dd63.89
±
4.98a16.77
±
4.330.46
±
0.09
ab
d dg67.11
±
17.6715.93
±
2.790.46
±
0.13
ab
dd dg59.43
±
9.79a16.79
±
3.930.47
±
0.06
ab
pf70.16
±
13.49b13.87
±
3.12b0.37
±
0.11b[0148]
sod活性、mda含量可以综合评价氧化应激水平，sod可以有效表征体内ros，其活性
可以反应大脑抗氧化能力，mda是衡量脑内细胞膜氧化损伤的重要标志，ach是维持高级神经功能的重要介质，检测ache活性直接反应可ach的活性。
[0149]
表4列出的脑组织生化指标表明，含有预饲喂本发明药物组合物可以有效防止东莨菪碱诱导的sod活性降低，mda含量与ache活性的升高。总之，使用本发明药物组合物预饲喂的小鼠对东莨菪碱诱导的氧化应激损伤。