一种卡巴他赛及其中间体的测定方法与流程

1.本发明涉及药物分析技术领域，尤其涉及一种卡巴他赛及其中间体的测定方法。


背景技术：

2.卡巴他赛的制备方法有很多种，有大致三类。第一类是以10-去乙酰基巴卡亭ⅲ为原料，在各种保护羟基的措施下通过分步实现甲基化的方式得到卡巴他赛，专利us5847170公开的方法就是典型的这类路线。该路线的缺点是路线偏长，总体收率偏低，而且使用的甲基化试剂为传统的碘甲烷，毒性非常大。
3.第二类路线是以10-去乙酰基巴卡亭ⅲ/2’位保护的多西他赛为原料，直接进行7,10位的甲基化，最后和侧链缩合及开环/脱保护等得到卡巴他赛。这类路线的甲基化需要使用三氟甲磺酸甲酯作为甲基化试剂，反应条件非常苛刻，不仅需要较低的温度(-70～-30℃)，所使用的溶剂四氢呋喃还需用二苯甲酮重蒸，非常不利于工业化生产。
4.第三类专利是原研赛诺菲使用的氢化路线，7,10位甲基化是分两步进行，先在dmso/醋酐/醋酸条件下，上2个二甲硫醚键，再通过雷尼镍氢化实现甲基化。雷尼镍本身在干燥状态下就特别容易起火星，配合氢气的存在，危险性非常大，对于放大生产的要求比较高。
5.不管是那种路线，在药物制备和贮存过程中，对合成方法可能产生的杂质，如中间体和副产物等进行检测，对终产品卡巴他赛原料药的生产过程以及质量控制非常重要，先需要一种能准确的测定卡巴他赛中间体，工艺杂质及降解杂质的方法。


技术实现要素：

6.针对上述现有技术的缺点，本发明的目的是提供一种卡巴他赛及其中间体的测定方法，其优点在于中间体和杂质的分离度好，专属性强、检测灵敏度高。
7.本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
8.一种卡巴他赛及其中间体的测定方法，包括：选用硅胶色谱柱，以水相-有机相进行梯度洗脱，洗脱梯度条件为：
9.0min，水相的体积分数范围40％-75％；有机相的体积分数范围60％-25％；
10.5-10min，水相的体积分数范围15％-45％；有机相的体积分数范围85％-55％；
11.20min，水相的体积分数范围10％-35％；有机相的体积分数范围90％-65％；
12.30-40min，水相的体积分数范围0％-10％；有机相的体积分数范围100％-90％。
13.进一步的，所述硅胶色谱柱的固相为c18十八烷基键合硅胶、c8辛烷键合硅胶、苯基键合硅胶中一种或多种的组合。
14.进一步的，所述水相-有机相，其中水相为水、磷酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液中的一种，有机相为乙腈或甲醇、有机相中加入有四氢呋喃。
15.进一步的，0min，水相的体积分数范围65％-75％；有机相的体积分数范围35％-25％；
16.10min，水相的体积分数范围35％-45％；有机相的体积分数范围65％-55％；
17.20min，水相的体积分数范围25％-35％；有机相的体积分数范围75％-65％；
18.35min，水相的体积分数范围0％-10％；有机相的体积分数范围100％-90％。
19.进一步的，所述洗脱梯度条件为：
20.0min，水相的体积分数范围70％；有机相的体积分数范围30％；
21.10min，水相的体积分数范围40％；有机相的体积分数范围60％；
22.20min，水相的体积分数范围30％；有机相的体积分数范围70％；
23.35min，水相的体积分数范围5％；有机相的体积分数范围95％。
24.进一步的，所述洗脱梯度条件为：
25.0min，水相的体积分数范围40％-50％；有机相的体积分数范围60％-50％；
26.5min，水相的体积分数范围20％-30％；有机相的体积分数范围80％-70％；
27.20min，水相的体积分数范围15％-25％；有机相的体积分数范围85％-75％；
28.40min，水相的体积分数范围0％-10％；有机相的体积分数范围100％-90％。
29.进一步的，所述洗脱梯度条件为：
30.0min，水相的体积分数范围45％；有机相的体积分数范围55％；
31.5min，水相的体积分数范围25％；有机相的体积分数范围75％；
32.20min，水相的体积分数范围20％；有机相的体积分数范围80％；
33.40min，水相的体积分数范围5％；有机相的体积分数范围95％。
34.进一步的，所述洗脱梯度条件为：
35.0min，水相的体积分数范围65％-75％；有机相的体积分数范围35％-25％；
36.5min，水相的体积分数范围35％-45％；有机相的体积分数范围65％-55％；
37.10min，水相的体积分数范围15％-25％；有机相的体积分数范围85％-75％；
38.20min，水相的体积分数范围10％-20％；有机相的体积分数范围90％-80％；
39.30min，水相的体积分数范围0％-10％；有机相的体积分数范围100％-90％。
40.进一步的，所述洗脱梯度条件为：
41.0min，水相的体积分数范围70％；有机相的体积分数范围30％；
42.5min，水相的体积分数范围40％；有机相的体积分数范围50％；
43.10min，水相的体积分数范围20％；有机相的体积分数范围80％；
44.20min，水相的体积分数范围15％；有机相的体积分数范围85％；
45.30min，水相的体积分数范围5％；有机相的体积分数范围95％。
46.进一步的，所述硅胶色谱柱填料的颗粒度为2-7um，检测波长为200nm-290nm。
47.综上所述，本发明具有以下有益效果：
48.1.由于卡巴他赛的制备过程中，不同的工艺及物料的选择，甚至不同的反应参数控制均会造成不用的工艺杂质及降解杂质，针对不同的中间可做到精确分离，灵敏度高，具有极高的专属性，有利于监测卡巴他赛合成反应工艺的质量。
49.2.检测时间控制在1小时内，并且检测操作简单，有利于技术人员及时知晓反应产物结果，方便技术人员通过比对检索结果对反应工艺进行相关调整。
附图说明
50.图1是实施例1的hplc色谱图。
51.图2是实施例2的hplc色谱图。
52.图3是实施例3的hplc色谱图。
53.图4是实施例4的hplc色谱图。
54.图5是实施例5的hplc色谱图。
55.图6是实施例6的hplc色谱图。
56.图7是实施例7的hplc色谱图。
57.图8是实施例8的hplc色谱图。
58.图9是实施例9的hplc色谱图。
59.图10是10-去乙酰基巴卡亭ⅲ(10-dab)的紫外吸收图谱。
60.图11是卡巴他赛中间体ⅰ的紫外吸收图谱。
61.图12是卡巴他赛中间体ⅱ的紫外吸收图谱。
62.图13是卡巴他赛中间体ⅲ的紫外吸收图谱。
63.图14是卡巴他赛中间体ⅳ的紫外吸收图谱。
64.图15是卡巴他赛的紫外吸收图谱。
具体实施方式
65.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图和具体实施方式对本发明提出的装置作进一步详细说明。根据下面说明，本发明的优点和特征将更清楚。需要说明的是，附图采用非常简化的形式且均使用非精准的比例，仅用以方便、明晰地辅助说明本发明实施方式的目的。为了使本发明的目的、特征和优点能够更加明显易懂，请参阅附图。须知，本说明书所附图式所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本发明实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本发明所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本发明所揭示的技术内容能涵盖的范围内。
66.本司自制卡巴他赛工艺路线为：
[0067][0068]
其中10-去乙酰基巴卡亭ⅲ(10-dab)初始物料的紫外吸收图谱，详见图10；
[0069]
卡巴他赛中间体ⅰ的紫外吸收图谱，详见图11；
[0070]
卡巴他赛中间体ⅱ的紫外吸收图谱，详见图12；
[0071]
卡巴他赛中间体ⅲ的紫外吸收图谱，详见图13；
[0072]
卡巴他赛中间体ⅳ的紫外吸收图谱，详见图14；
[0073]
卡巴他赛(最终产物)的紫外吸收图谱，详见图15。
[0074]
实施例1：
[0075]
实验材料与仪器条件：
[0076]
卡巴他赛中间体ⅱ，含量为96.87％；杂质ⅱa，含量为94.74％；杂质ⅱb，含量为97.47％；杂质ⅱc，含量为95.43％；杂质ⅱd，含量为96.90％；杂质ⅱe，含量为99.70％；起始物料，含量为99.20％。
[0077]
安捷伦1260，dad检测器，安捷伦openlab cds2.3软件系统，色谱柱：c8辛烷基键合硅胶色谱柱，250mm
×
4.6mm，2um，检测波长200nm，进样量20ul，流速1.0ml/min,柱温35℃，
[0078]
流动相a为水，b为乙腈中加入0.1％四氢呋喃，洗脱梯度表如下：
[0079][0080]
实验步骤：
[0081]
空白溶液：乙腈
[0082]
对照品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅱ及中间体杂质ⅱa、ⅱb、ⅱc、ⅱd、ⅱe和起始物料适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1ug/ml的溶液，作为对照品溶液。
[0083]
供试品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅱ体适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1mg的溶液，作为供试品溶液。
[0084]
分别取上述空白溶液，对照品溶液和供试品溶液进样检测，记录色谱图。色谱图详见图1。
[0085]
该色谱图中，卡巴他赛中间体ⅱ的保留时间为20.152min，杂质ⅱa的保留时间为21.487min，杂质ⅱb的保留时间为28.245min，杂质ⅱc的保留时间为19.069min，杂质ⅱd的保留时间为26.901min，杂质ⅱe的保留时间为12.721min，起始物料的保留时间为5.573min，卡巴他赛中间体ⅱ及中间体杂质与相邻杂质的分离度均大于1.5，有良好的专属性，卡巴他赛及中间体杂质的检测限均小于0.1ug/ml，有良好的检测灵敏度。
[0086]
实施例2：
[0087]
实验材料与仪器条件：
[0088]
卡巴他赛中间体ⅱ，含量为96.87％；杂质ⅱa，含量为94.74％；杂质ⅱb，含量为97.47％；杂质ⅱc，含量为95.43％；杂质ⅱd，含量为96.90％；杂质ⅱe，含量为99.70％；起始物料，含量为99.20％。
[0089]
安捷伦1260，dad检测器，安捷伦openlab cds2.3软件系统，色谱柱：c8辛烷键合复合硅胶色谱柱，250mm
×
4.6mm，5um，检测波长230nm，进样量20ul，流速1.0ml/min,柱温35℃。
[0090]
a为磷酸盐缓冲液，b为甲醇中加入0.1％四氢呋喃，洗脱梯度表如下：
[0091]
[0092][0093]
实验步骤：
[0094]
空白溶液：乙腈
[0095]
对照品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅱ及中间体杂质ⅱa、ⅱb、ⅱc、ⅱd、ⅱe和起始物料适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1ug/ml的溶液，作为对照品溶液。
[0096]
供试品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅱ适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1mg的溶液，作为供试品溶液。
[0097]
分别取上述空白溶液，对照品溶液和供试品溶液进样检测，记录色谱图。色谱图详见图2。
[0098]
该色谱图中，卡巴他赛中间体ⅱ的保留时间为21.929min，杂质ⅱa的保留时间为23.325min，杂质ⅱb的保留时间为29.546min，杂质ⅱc的保留时间为20.933min，杂质ⅱd的保留时间为28.170min，杂质ⅱe的保留时间为13.851min，起始物料的保留时间为6.489min，卡巴他赛中间体ⅱ及中间体杂质与相邻杂质的分离度均大于1.5，有良好的专属性，卡巴他赛及中间体杂质的检测限均小于0.1ug/ml，有良好的检测灵敏度。
[0099]
实施例3：
[0100]
实验材料与仪器条件：
[0101]
卡巴他赛中间体ⅱ，含量为96.87％；杂质ⅱa，含量为94.74％；杂质ⅱb，含量为97.47％；杂质ⅱc，含量为95.43％；杂质ⅱd，含量为96.90％；杂质ⅱe，含量为99.70％；起始物料，含量为99.20％。
[0102]
安捷伦1260，dad检测器，安捷伦openlab cds2.3软件系统，色谱柱：c18十八烷基键合色谱柱，250mm
×
4.6mm，7um，检测波长290nm，进样量20ul，流速1.0ml/min,柱温35℃。
[0103]
a为水，b为甲醇中加入0.1％四氢呋喃，洗脱梯度表如下：
[0104][0105]
实验步骤
[0106]
空白溶液：乙腈
[0107]
对照品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅱ及中间体杂质ⅱa、ⅱb、ⅱc、ⅱd、ⅱe和起始物料适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1ug/ml的溶液，作为对照品溶液。
[0108]
供试品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅱ适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1mg的溶液，作为供试品溶液。
[0109]
分别取上述空白溶液，对照品溶液和供试品溶液进样检测，记录色谱图。色谱图详见图3。
[0110]
该色谱图中，卡巴他赛中间体ⅱ的保留时间为24.306min，杂质ⅱa的保留时间为25.578min，杂质ⅱb的保留时间为31.349min，杂质ⅱc的保留时间为23.447min，杂质ⅱd的保留时间为29.871min，杂质ⅱe的保留时间为15.493min，起始物料的保留时间为7.807min，卡巴他赛中间体ⅱ及中间体杂质与相邻杂质的分离度均大于1.5，有良好的专属性，卡巴他赛及中间体杂质的检测限均小于0.1ug/ml，有良好的检测灵敏度。
[0111]
实施例4：
[0112]
实验材料与仪器条件：
[0113]
卡巴他赛中间体ⅰ，含量为99.11％；杂质ⅰa，含量为96.60％；杂质ⅰb，含量为99.06％；杂质ⅰc，含量为99.23％；杂质ⅰd，含量为95.52％。
[0114]
安捷伦1260，dad检测器，安捷伦openlab cds2.3软件系统，色谱柱：c18十八烷基键合硅胶色谱柱，250mm
×
4.6mm，2um，检测波长200nm，进样量20ul，流速1.0ml/min,柱温35℃，
[0115]
流动相a为碳酸盐缓冲溶液，b为甲醇中加入0.1％四氢呋喃，洗脱梯度表如下：
[0116][0117]
实验步骤
[0118]
空白溶液：乙腈
[0119]
对照品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅰ及中间体杂质ⅰa、ⅰb、ⅰc、ⅰd适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1ug/ml的溶液，作为对照品溶液。
[0120]
供试品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅰ适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1mg的溶液，作为供试品溶液。
[0121]
分别取上述空白溶液，对照品溶液和供试品溶液进样检测，记录色谱图。色谱图详见图4。
[0122]
该色谱图中，卡巴他赛中间体ⅰ的保留时间为17.875min，杂质ⅰa的保留时间为14.476min，杂质ⅰb的保留时间为14.937min，杂质ⅰc的保留时间为23.135min，杂质ⅰd的保留时间为34.59min，卡巴他赛中间体ⅰ及中间体杂质与相邻杂质的分离度均大于1.5，有良好的专属性，卡巴他赛及中间体杂质的检测限均小于0.2ug/ml，有良好的检测灵敏度。
[0123]
实施例5：
[0124]
实验材料与仪器条件：
[0125]
卡巴他赛中间体ⅰ，含量为99.11％；杂质ⅰa，含量为96.60％；杂质ⅰb，含量为99.06％；杂质ⅰc，含量为99.23％；杂质ⅰd，含量为95.52％。
[0126]
安捷伦1260，dad检测器，安捷伦openlab cds2.3软件系统，色谱柱苯基键合硅胶色谱柱，250mm
×
4.6mm，5um，检测波长230nm，进样量20ul，流速1.0ml/min,柱温30℃。
[0127]
a为磷酸盐缓冲液，b为乙腈中加入0.1％四氢呋喃，洗脱梯度表如下：
[0128][0129][0130]
实验步骤
[0131]
空白溶液：乙腈
[0132]
对照品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅰ及中间体杂质ⅰa、ⅰb、ⅰc、ⅰd适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1ug/ml的溶液，作为对照品溶液。
[0133]
供试品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅰ适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1mg的溶液，作为供试品溶液。
[0134]
分别取上述空白溶液，对照品溶液和供试品溶液进样检测，记录色谱图。色谱图详见图5。
[0135]
该色谱图中，卡巴他赛中间体ⅰ的保留时间为15.121min，杂质ⅰa的保留时间为12.246min，杂质ⅰb的保留时间为12.634min，杂质ⅰc的保留时间为19.666min，杂质ⅰd的保留时间为30.707min，卡巴他赛中间体ⅰ及中间体杂质与相邻杂质的分离度均大于1.5，有良好的专属性，卡巴他赛及中间体杂质的检测限均小于0.2ug/ml，有良好的检测灵敏度。
[0136]
实施例6：
[0137]
实验材料与仪器条件：
[0138]
卡巴他赛中间体ⅰ，含量为99.11％；杂质ⅰa，含量为96.60％；杂质ⅰb，含量为99.06％；杂质ⅰc，含量为99.23％；杂质ⅰd，含量为95.52％。
[0139]
安捷伦1260，dad检测器，安捷伦openlab cds2.3软件系统，色谱柱：c8辛基键合复合硅胶色谱柱，250mm
×
4.6mm，7um，检测波长290nm，进样量20ul，流速1.0ml/min,柱温30℃。
[0140]
a为水，b为乙腈中加入0.1％四氢呋喃，洗脱梯度表如下：
[0141][0142]
实验步骤
[0143]
空白溶液：乙腈
[0144]
对照品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅰ及中间体杂质ⅰa、ⅰb、ⅰc、ⅰd适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1ug/ml的溶液，作为对照品溶液。
[0145]
供试品溶液：精密称取卡巴他赛中间体ⅰ适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约1mg的溶液，作为供试品溶液。
[0146]
分别取上述空白溶液，对照品溶液和供试品溶液进样检测，记录色谱图。色谱图详见图6。
[0147]
该色谱图中，卡巴他赛中间体ⅰ的保留时间为13.368min，杂质ⅰa的保留时间为10.829min，杂质ⅰb的保留时间为11.168min，杂质ⅰc的保留时间为17.442min，杂质ⅰd的保留时间为28.246min，卡巴他赛中间体ⅰ及中间体杂质与相邻杂质的分离度均大于1.5，有良好的专属性，卡巴他赛及中间体杂质的检测限均小于0.2ug/ml，有良好的检测灵敏度。
[0148]
实施例7：
[0149]
10-去乙酰基巴卡亭ⅲ(起始物料)，含量为99.20％；卡巴他赛中间体ⅰ，含量为99.32％；卡巴他赛中间体ⅱ，含量为98.69％；卡巴他赛中间体ⅲ，含量为96.87％；卡巴他赛中间体ⅳ，含量为98.26％；卡巴他赛，含量为99.89％。
[0150]
安捷伦1260，dad检测器，安捷伦openlab cds2.3软件系统，色谱柱：c18十八烷基键合硅胶色谱柱，250mm
×
4.6mm，2um，检测波长200nm，进样量20ul，流速1.0ml/min,柱温35℃，
[0151]
流动相a为碳酸盐缓冲溶液，b为甲醇中加入0.1％四氢呋喃，洗脱梯度表如下：
[0152][0153]
实验步骤
[0154]
空白溶液：乙腈
[0155]
供试品溶液：精密称取卡巴他赛中间体适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约10ug的溶液，作为供试品溶液。
[0156]
分别取上述空白溶液和供试品溶液进样检测，记录色谱图。色谱图详见图7。
[0157]
该色谱图中，10-去乙酰基巴卡亭ⅲ(起始物料)的保留时间为7.771min，卡巴他赛的保留时间为12.589min，卡巴他赛中间体ⅲ的保留时间为13.260min，卡巴他赛中间体ⅳ的保留时间为14.797min，卡巴他赛中间体ⅰ的保留时间为15.186min，卡巴他赛中间体ⅱ的保留时间为18.954min，卡巴他赛起始物料、中间体及卡巴他赛中间的分离度均大于1.5，有良好的专属性，起始物料、卡巴他赛及中间体杂质的检测限均小于0.1ug/ml，有良好的检测灵敏度。
[0158]
实施例8：
[0159]
10-去乙酰基巴卡亭ⅲ(起始物料)，含量为99.20％；卡巴他赛中间体ⅰ，含量为99.32％；卡巴他赛中间体ⅱ，含量为98.69％；卡巴他赛中间体ⅲ，含量为96.87％；卡巴他赛中间体ⅳ，含量为98.26％；卡巴他赛，含量为99.89％。
[0160]
安捷伦1260，dad检测器，安捷伦openlab cds2.3软件系统，色谱柱：苯基键合硅胶色谱柱，250mm
×
4.6mm，5um，检测波长230nm，进样量20ul，流速1.0ml/min,柱温35℃。
[0161]
a为磷酸盐缓冲液，b为乙腈中加入0.1％四氢呋喃，洗脱梯度表如下：
[0162][0163][0164]
实验步骤
[0165]
空白溶液：乙腈
[0166]
供试品溶液：精密称取卡巴他赛中间体适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约10ug的溶液，作为供试品溶液。
[0167]
分别取上述空白溶液和供试品溶液进样检测，记录色谱图。色谱图详见图8。
[0168]
该色谱图中，10-去乙酰基巴卡亭ⅲ(起始物料)的保留时间为6.456min，卡巴他赛的保留时间为11.102min，卡巴他赛中间体ⅲ的保留时间为11.771min，卡巴他赛中间体ⅳ的保留时间为13.260min，卡巴他赛中间体ⅰ的保留时间为13.638min，卡巴他赛中间体ⅱ的保留时间为16.939min，卡巴他赛起始物料、中间体及卡巴他赛中间的分离度均大于1.5，有良好的专属性，起始物料、卡巴他赛及中间体杂质的检测限均小于0.1ug/ml，有良好的检测灵敏度。
[0169]
实施例9：
[0170]
10-去乙酰基巴卡亭ⅲ(起始物料)，含量为99.20％；卡巴他赛中间体ⅰ，含量为99.32％；卡巴他赛中间体ⅱ，含量为98.69％；卡巴他赛中间体ⅲ，含量为96.87％；卡巴他赛中间体ⅳ，含量为98.26％；卡巴他赛，含量为99.89％。
[0171]
安捷伦1260，dad检测器，安捷伦openlab cds2.3软件系统，色谱柱：苯基键合与c8辛基键合复合硅胶色谱柱，250mm
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4.6mm，7um，检测波长290nm，进样量20ul，流速1.0ml/min,柱温30℃。
[0172]
a为水，b为乙腈中加入0.1％四氢呋喃，洗脱梯度表如下：
[0173][0174]
实验步骤
[0175]
空白溶液：乙腈
[0176]
供试品溶液：精密称取卡巴他赛中间体适量，用乙腈溶解并稀释成每ml含有约10ug的溶液，作为供试品溶液。
[0177]
分别取上述空白溶液和供试品溶液进样检测，记录色谱图。色谱图详见图9。
[0178]
该色谱图中，10-去乙酰基巴卡亭ⅲ(起始物料)的保留时间为5.516min，卡巴他赛的保留时间为10.038min，卡巴他赛中间体ⅲ的保留时间为10.712min，卡巴他赛中间体ⅳ的保留时间为12.164min，卡巴他赛中间体ⅰ的保留时间为12.543min，卡巴他赛中间体ⅱ的保留时间为15.517min，卡巴他赛起始物料、中间体及卡巴他赛中间的分离度均大于1.5，有良好的专属性，起始物料、卡巴他赛及中间体杂质的检测限均小于0.1ug/ml，有良好的检测灵敏度。
[0179]
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0180]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。