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一种淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统的制作方法

2022-02-19 13:42:26 来源:中国专利 TAG:


1.本发明涉及血液净化技术领域,更具体地说,涉及一种淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统。


背景技术:

2.进入二十一世纪以来,sars、甲型流感、高致病性禽流感、新型冠状病毒(covid

19)等引起的新发传染病层出不穷,另外,一些长期存在的感染性疾病如重型肝炎、肾综合征出血热、脓毒血症等,和非感染性炎性疾病如系统性红斑狼疮,i型糖尿病、急慢性肾炎,结缔组织疾病等均存在免疫细胞的异常激活,释放炎性介质,介导疾病的发生发展。
3.随着科技的发展,血液净化技术被应用于感染性疾病和非感染性疾病炎性因子和代谢毒素的清除,除了血浆置换、血浆吸附、血液透析滤过清除血浆中炎性介质外,利用干细胞培养液中干细胞所分泌的细胞因子和外泌体等的免疫调控作用,分离感染或非感染性炎性疾病患者外周血淋巴细胞,并对其进行免疫调控,抑制免疫活化,减少致炎因子的产生,也能增强对炎性疾病的治疗作用。
4.干细胞移植的体内干细胞存活时长、靶向定植分化问题,潜在肿瘤风险问题等阻碍着该疗法的临床应用。利用干细胞体外培养时分泌的细胞因子和外泌体等对淋巴细胞进行免疫调控并将调控后的淋巴细胞净化后回输体内,可避免干细胞移植带来的临床风险,又有助于抑制炎性疾病患者的异常免疫激活。
5.综上所述,如何在体外对淋巴细胞进行培养以满足回输体内的需求,以推广免疫细胞调控治疗,是目前本领域技术人员亟待解决的问题。


技术实现要素:

6.本发明的目的是提供一种淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统,在体外采用干细胞培养液对淋巴细胞进行培养以满足回输体内的需求,以推广免疫细胞调控治疗。
7.为了实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
8.一种淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统,包括:血液分离模块,免疫调控模块,透析滤过模块以及回输模块;
9.其中,所述血液分离模块用于采集血液且能够将所述血液中的淋巴细胞分离出并收集,所述免疫调控模块用于采用干细胞培养液培养且免疫调控所述血液分离模块分离出的淋巴细胞,所述透析滤过模块用于对所述免疫调控模块排出的淋巴细胞混合液进行透析滤过,所述回输模块用于将所述透析滤过模块排出的淋巴细胞回输至体内。
10.可选地,所述免疫调控模块包括:混合培养装置,用于将淋巴细胞输入所述混合培养装置的淋巴细胞输入管路,用于向所述混合培养装置输入干细胞培养液的培养液收集管路,以及用于将所述混合培养装置排出的淋巴细胞混合液输入所述透析滤过模块的混合液回输管路;其中,所述混合液回输管路设置有控制其通断的控制部件。
11.可选地,所述免疫调控模块还包括用于培养干细胞的干细胞培养装置,其中,所述培养液收集管路连通所述干细胞培养装置和所述混合培养装置,所述干细胞培养装置设置有用于输入培养液的培养液输入管路。
12.可选地,所述透析滤过模块包括:
13.用于对所述淋巴细胞混合液进行透析滤过的血滤装置;
14.用于将所述免疫调控模块排出的淋巴细胞混合液输入所述血滤装置的输送管路,设置在所述输送管路上的输入泵;
15.能够向所述血滤装置输入透析液的透析液输入管路,设置在所述透析液输入管路上的透析液泵;
16.能够向所述血滤装置输入滤液的滤液输入管路,设置在所述滤液输入管路上的滤液泵;
17.能够将所述血滤装置内的废液输出的废液输出管路,设置在所述废液输出管路上的废液泵;
18.能够将所述血滤装置排出的淋巴细胞输出的连接管路,以及能够将所述血滤装置排出的淋巴细胞返回至所述血滤装置的循环透析管路。
19.可选地,所述循环透析管路和所述滤液输入管路均与所述输送管路连通,且所述循环透析管路与所述输送管路的连通位置、以及所述滤液输入管路与所述输送管路的连通位置均位于所述输入泵的上游;
20.所述透析滤过模块还包括:与所述滤液输入管路连通的滤液存储装置,与所述透析液输入管路连通的透析液存储装置,与所述废液输出管路连通的废液存储装置,依次设置在所述滤液输入管路上的第一液壶和第一加热装置,依次设置在所述透析液输入管路上的第二液壶和第二加热装置。
21.可选地,所述连接管路设置有透析用三通阀,所述循环透析管路通过所述透析用三通阀与所述连接管路连通;
22.其中,若所述透析用三通阀处于第一阀位,仅所述循环透析管路和所述血滤装置连通;若所述透析用三通阀处于第二阀位,所述循环透析管路和所述连接管路均与所述血滤装置连通。
23.可选地,所述血滤装置设置有待透析介质进口、透析液进口、废液出口和处理液出口;其中,所述待透析介质进口位于所述血滤装置的顶部;所述透析液进口和所述废液出口均位于所述血滤装置的侧部,且所述废液出口高于所述透析液进口;所述处理液出口位于所述血滤装置的底部;
24.其中,所述输送管路与所述待透析介质进口连通,所述透析液输入管路与所述透析液进口连通,所述废液输出管路和所述废液出口连通,所述循环透析管路和所述连接管路均能够和所述处理液出口连通。
25.可选地,所述输入泵的泵速为100~200ml/min,所述透析液泵的泵速为50~60ml/min,所述滤液泵的泵速为50~60ml/min,所述废液泵的泵速为100~120ml/min。
26.可选地,所述血液分离模块还能够将所述血液中的血浆和红细胞分离出来并收集所述血浆;
27.所述透析滤过模块还能够对所述血液分离装置分离出的血浆进行透析滤过;
28.所述回输模块还包括用于存储新鲜血浆的血浆存储器,且所述回输装置还能够将所述血浆存储器内的新鲜血浆、所述血液分离装置分离出的红细胞以及所述透析滤过模块排出的净化血浆回输至体内;
29.其中,所述回输模块具有三个状态,分别为将所述血浆存储器内的新鲜血浆和所述血液分离装置分离出的红细胞回输至体内以进行血浆置换的第一状态、将所述透析滤过模块排出的净化血浆和所述血液分离装置分离出的红细胞回输至体内以进行血浆透析滤过的第二状态、以及将所述透析滤过模块排出的淋巴细胞回输至体内以进行免疫细胞经干细胞免疫调控及净化回输的第三状态。
30.可选地,所述血液分离模块包括:血液采集管路,离心分离装置,血浆输出管路,淋巴细胞输出管路,红细胞输出管路,废浆收集装置,以及淋巴细胞收集装置;
31.所述回输模块还包括血浆回输管路和血液回输管路;
32.其中,所述血液采集管路用于向所述离心分离装置输入血液,所述血液采集管路设置有血液采集泵和肝素泵;
33.所述血浆输出管路能够连通所述离心分离装置和所述废浆收集装置,所述血浆输出管路还能够与所述透析滤过模块连通,所述血浆输出管路设置有血浆采集泵;
34.所述淋巴细胞输出管路连通所述离心分离装置和所述淋巴细胞收集装置,所述淋巴细胞输出管路设置有淋巴细胞采集泵;所述淋巴细胞收集装置和所述免疫调控模块连通;所述血浆回输管路连通所述血浆存储器和血液回输管路,所述血浆回输管路设置有血浆回输泵,所述血液回输管路设置有血液回输泵,所述透析滤过模块的处理液出口和所述血浆回输管路连通,所述红细胞输出管路与所述血液回输管路连通。
35.本发明提供的淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统,利用培养干细胞的干细胞培养液体外培养淋巴细胞,干细胞培养液中细胞因子和外泌体等成分对淋巴细胞进行免疫调控;而且,利用透析滤过模块对经过免疫调控的淋巴细胞混合液进行透析滤过,去除分离淋巴细胞时输入的枸橼酸盐和进入体内的多余水分,也去除干细胞培养液,实现了对淋巴细胞进行净化,提高了被免疫调控后的淋巴细胞回输至体内的安全性,减小了不良反应和顾虑,提高了安全性,有效推广了免疫细胞调控治疗。
附图说明
36.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据提供的附图获得其他的附图。
37.图1为本发明实施例提供的淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统的示意图。
具体实施方式
38.下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他
实施例,都属于本发明保护的范围。
39.如图1所示,本发明实施例提供的淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统包括:血液分离模块,免疫调控模块,透析滤过模块以及回输模块。
40.上述血液分离模块用于采集血液且能够将血液中的淋巴细胞分离出并收集,上述免疫调控模块用于采用干细胞培养液培养且免疫调控血液分离模块分离出的淋巴细胞,透析滤过模块用于对免疫调控模块排出的淋巴细胞混合液进行透析滤过,回输模块用于将透析滤过模块排出的淋巴细胞回输至体内。
41.上述干细胞培养液可为间充质干细胞培养液,也可为其他类型的干细胞培养液,本实施例对此不做限定。
42.上述免疫调控模块用于采用干细胞培养液培养淋巴细胞,在培养过程在中,干细胞培养液中的细胞因子和外泌体等成分具有免疫调控特性,实现了对淋巴细胞进行免疫调控。
43.上述透析滤过模块用于对免疫调控模块排出的淋巴细胞混合液进行透析滤过,在透析滤过的过程中去除枸橼酸盐、多余水分以及干细胞培养液,以获得能够回输至体内的淋巴细胞。
44.本发明实施例提供的淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统,利用培养干细胞的干细胞培养液体外培养淋巴细胞,干细胞培养液中细胞因子和外泌体等成分对淋巴细胞进行免疫调控;而且,利用透析滤过模块对经过免疫调控的淋巴细胞混合液进行透析滤过,去除分离淋巴细胞时输入的枸橼酸盐和进入体内的多余水分,也去除干细胞培养液,实现了对淋巴细胞进行净化,提高了被免疫调控后的淋巴细胞回输至体内的安全性,减小了不良反应和顾虑,提高了安全性,有效推广了免疫细胞调控治疗。
45.上述淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统中,对于免疫调控模块的具体结构,根据实际需要进行选择。可选地,上述免疫调控模块包括:混合培养装置32,用于将淋巴细胞输入混合培养装置32的淋巴细胞输入管路,用于向混合培养装置32输入干细胞培养液的培养液收集管路302,以及用于将混合培养装置32排出的淋巴细胞混合液输入透析滤过模块的混合液回输管路33。
46.上述免疫调控模块中,由于体外培养的干细胞可以不断产生免疫调控所需的细胞因子和外泌体,且细胞因子和外泌体会进入干细胞培养液中,淋巴细胞不直接接触干细胞,淋巴细胞只与培养干细胞的干细胞培养液混合。因此,更换淋巴细胞输入管路、混合培养装置32、混合液回输管路33后,培养同一批干细胞可以提供多批次富含细胞因子和外泌体的干细胞培养液给多例患者进行本方案的免疫调控治疗,有效提高了治疗的便利性和及时性,降低了免疫调控治疗的成本。
47.为了便于控制淋巴细胞混合液进入混合培养装置32,上述混合液回输管路33设置有控制其通断的控制部件331,该控制部件331可为阀门或输液夹等,根据实际需要进行选择,本实施例对此不做限定。
48.上述免疫调控模块需要干细胞培养液,为了便于获取干细胞培养液,上述免疫调控模块还包括用于培养干细胞的干细胞培养装置30,其中,培养液收集管路302连通干细胞培养装置30和混合培养装置32,干细胞培养装置30设置有用于输入培养液的培养液输入管路301。
49.可以理解的是,上述培养液为用于培养干细胞的培养液且还未培养干细胞,上述干细胞培养液为培养了干细胞的培养液。
50.对于上述混合培养装置32和干细胞培养装置30的具体结构,根据实际需要进行选择,本实施例对此不做限定。
51.为了输入淋巴细胞,可选择上述淋巴细胞输入管路包括:设置在混合培养装置32上的淋巴细胞进管31,以及与淋巴细胞进管31连通的淋巴细胞连接管路311。可以理解的是,上述淋巴细胞连接管路311和血液分离模块连接,以将血液分离模块分离出的淋巴细胞引入淋巴细胞进管31。
52.可选地,上述免疫调控模块为无菌co2细胞培养箱。无菌co2细胞培养箱内设有若干个叠层排列的干细胞培养装置30,培养液输入管路301和培养液收集管路302均与每个干细胞培养装置30连通。
53.上述淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统中,对于透析滤过模块的具体结构,根据所需功能进行设计。具体地,上述透析滤过模块包括:血滤装置213,输送管路21,设置在输送管路21上的输入泵210,透析液输入管路22,设置在透析液输入管路22上的透析液泵220,滤液输入管路24,设置在滤液输入管路24上的滤液泵240,废液输出管路23,设置在废液输出管路23上的废液泵230,连接管路25,以及循环透析管路26。
54.其中,血滤装置213用于对淋巴细胞混合液进行透析滤过,输送管路21用于将免疫调控模块排出的淋巴细胞混合液输入血滤装置213,透析液输入管路22能够向血滤装置213输入透析液,滤液输入管路24能够向血滤装置213输入滤液,废液输出管路23能够将血滤装置213内的废液输出,连接管路25能够将血滤装置213排出的淋巴细胞输出,循环透析管路26能够将血滤装置213排出的淋巴细胞返回至血滤装置213。
55.在实际应用过程中,连接管路25与回输模块连接,以实现将淋巴细胞回输至体内。
56.上述透析滤过模块中,通过设置循环透析管路26,能够实现高速透析滤过。为了便于循环透析,上述循环透析管路26与输送管路21连通,且循环透析管路26与输送管路21的连通位置位于输入泵210的上游。进一步地,上述滤液输入管路24与输送管路21连通,且滤液输入管路24与输送管路21的连通位置位于输入泵210的上游。
57.在实际应用过程中,也可选择上述循环透析管路26与输送管路21的连通位置、以及滤液输入管路24与输送管路21的连通位置位于其他位置,并不局限于上述实施例。
58.为了便于提供滤液,可选择上述透析滤过模块还包括与滤液输入管路24连通的滤液存储装置241。
59.为了避免气泡进入血滤装置213以及保证滤液温度,上述透析滤过模块还包括依次设置在滤液输入管路24上的第一液壶243和第一加热装置242。其中,第一液壶243靠近滤液存储装置241,第一加热装置242靠近滤液泵240。
60.对于上述滤液存储装置241、第一液壶243和第一加热装置242的类型根据实际需要进行选择,本实施例对此不做限定。
61.相应地,为了收集废液以及提供透析液,上述透析滤过模块还包括与废液输出管路23连通的废液存储装置231,以及与透析液输入管路22连通的透析液存储装置221。
62.为了避免气泡进入血滤装置213以及保证透析液温度,上述透析滤过模块还包括依次设置在透析液输入管路22上的第二液壶223和第二加热装置222。其中,第二液壶223靠
近透析液存储装置221,第二加热装222置靠近透析液泵220。
63.对于上述废液存储装置231、透析液存储装置221、第二液壶223和第二加热装置222的类型根据实际需要进行选择,本实施例对此不做限定。
64.为了便于使用,上述滤液存储装置241为滤液袋,透析液存储装置221为透析液袋,废液存储装置231为废液袋,滤液袋、透析液袋和废液袋均挂在秤钩上以监测重量。图1中并未画出秤钩。
65.上述透析滤过模块在工作过程中,循环透析管路26与血滤装置213的连接状态、以及上述连接管路25与血滤装置213的连接状态存在变化。具体地,对淋巴细胞进行免疫调控过程中,将淋巴细胞混合液输入血滤装置213中,使得循环透析管路26和血滤装置213连通、且连接管路25和血滤装置213不连通,利用血滤装置213对淋巴细胞混合液进行超滤处理,待所有的淋巴细胞混合液都进入血滤装置213后,停止超滤并进行透析滤过;待透析滤过结束后,使得循环透析管路26和连接管路25均与血滤装置213连通,将血滤装置213排出的淋巴细胞回输至体内。
66.为了满足所需的连接状态,可选择上述连接管路25设置有透析用三通阀251,循环透析管路26通过透析用三通阀251与连接管路25连通。其中,若透析用三通阀251处于第一阀位,仅循环透析管路26和血滤装置213连通;若透析用三通阀251处于第二阀位,循环透析管路26和连接管路25均与血滤装置213连通。
67.在实际应用过程中,也可选择上述循环透析管路26设置有透析用三通阀251,连接管路25通过透析用三通阀251与循环透析管路26连通;或者,循环透析管路26和连接管路25均设置有通断阀。
68.上述血滤装置中213,为了便于连接,可选择循环透析管路26、混合液回输管路33和滤液输入管路24均与输入管路21连通。具体地,循环透析管路26、混合液回输管路33、滤液输入管路24和输入管路21通过四通件连通。
69.具体地,上述血滤装置213具有待透析介质进口、透析液进口、废液出口和处理液出口。可以理解的是,经过血滤装置213的淋巴细胞经处理液出口排出。为了便于透析滤过,上述待透析介质进口位于血滤装置213的顶部,透析液进口和废液出口均位于血滤装置213的侧部,且废液出口高于透析液进口,处理液出口位于血滤装置213的底部。
70.可以理解的是,上述输送管路21与待透析介质进口连通,透析液输入管路22和透析液进口连通,废液输出管路23和废液出口连通,连接管路25和循环透析管路26均能够和处理液出口连通。沿血滤装置213的高度方向,待透析介质进口、废液出口、透析液进口和处理液出口依次分布。
71.在进行血滤透析滤过时,可选上述输入泵210的泵速为100~200ml/min,透析液泵220的泵速为50~60ml/min,滤液泵240的泵速为50~60ml/min,废液泵230的泵速为100~120ml/min。进一步地,上述输入泵210的泵速为150~200ml/min。
72.当废液泵230的泵速等于滤液泵240与透析液泵220的泵速之和时,为不超滤;当废液泵230的泵速超过滤液泵240与透析液泵220的泵速之和时,为超滤,废液泵230的泵速和滤液泵240与透析液泵220的泵速之和的泵速差值为超滤速度,一般超滤速度不大于5ml/min。
73.为了增加上述淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统的功能,上述血
液分离模块还能够将血液中的血浆和红细胞分离出来并收集血浆;上述透析滤过模块还能够对血液分离装置分离出的血浆进行透析滤过;上述回输模块还包括用于存储新鲜血浆的血浆存储器421,且回输装置还能够将血浆存储器421内的新鲜血浆、血液分离装置分离出的红细胞以及透析滤过模块排出的净化血浆回输至体内。
74.可以理解的是,上述血液分离模块对血液进行分离的过程中能够分离出淋巴细胞、血浆和红细胞。上述回输模块具有三个状态,分别为将血浆存储器421内的新鲜血浆和血液分离装置分离出的红细胞回输至体内以进行血浆置换的第一状态、将透析滤过模块排出的净化血浆和血液分离装置分离出的红细胞回输至体内以进行血浆透析滤过的第二状态、以及将透析滤过模块排出的淋巴细胞回输至体内以进行免疫细胞经干细胞免疫调控及净化回输的第三状态。
75.需要说明的是,上述回输模块在第一状态时,需要和能够排出体内废弃血浆的废弃血浆排出模块配合使用,从而完成血浆置换。上述新鲜血浆是指包含正常量的全部凝血因子的解冻后的新鲜冰冻血浆,即ffp,在必要时可选择用4%~5%白蛋白部分替代新鲜血浆进行血浆置换,白蛋白用量不超过置换血浆总量的一半。
76.对于血液分离模块的具体结构,根据实际需要进行设计和选择。可选择上述血液分离模块为离心分离模块。具体地,上述血液分离模块包括:血液采集管路11,离心分离装置12,血浆输出管路13,淋巴细胞输出管路14,红细胞输出管路15,废浆收集装置131,以及淋巴细胞收集装置141。上述回输模块还包括血浆回输管路42和血液回输管路41。
77.其中,上述血液采集管路11用于向离心分离装置12输入血液,血液采集管路11设置有血液采集泵110和肝素泵112;血浆输出管路13能够连通离心分离装置12和废浆收集装置131,血浆输出管路13还能够与透析滤过模块连通,血浆输出管路13设置有血浆采集泵130;淋巴细胞输出管路14连通离心分离装置12和淋巴细胞收集装置141,淋巴细胞输出管路14设置有淋巴细胞采集泵140;淋巴细胞收集装置141和免疫调控模块连通。
78.具体地,上述免疫调控模块的淋巴细胞连接管路311和淋巴细胞收集装置141连通。
79.对于上述离心分离装置12的类型,根据实际需要进行选择,例如离心分离装置12为带式血液离心分离装置,本实施例对此不做限定。
80.为了避免气泡进入离心分离装置12内,上述血液采集管路11设置有第三液壶111,肝素泵112通过第三液壶111与血液采集管路11连通。
81.上述血浆回输管路42连通血浆存储器421和血液回输管路41,血浆回输管路42设置有血浆回输泵420,血液回输管路41设置有血液回输泵410,透析滤过模块的处理液出口和血浆回输管路42连通,红细胞输出管路15与血液回输管路41连通。具体地,上述血液回输管路41和透析滤过模块的连接管路25连通。
82.为了保证血浆的温度在设定范围内,上述血液回输管路41设置有第三加热装置412。
83.为了避免气泡进入人体内,上述血液回输管路41设置有第四液壶411。具体地,第四液壶411位于血液回输泵410和第三加热装置412之间。
84.上述淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统中,第一液壶243、第二液壶223、第三液壶111和第四液壶411统称为液壶,上述每个液壶均具有设置有液面检测传感
器,以监测液壶内的液面。
85.上述淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统中,可选择上述血液采集泵110的泵速为40~60ml/min,血液回输泵410的泵速为25~30ml/min。
86.在实际应用过程中,可选择上述血液采集泵110、血液回输泵410的泵速为其他,并不局限于上述实施例。
87.当上述透析滤过模块包括上述血滤装置213时,上述血滤装置213还能够对血液进行透析滤过,透析滤过模块的输送管路21能够与血液分离模块的输送管路21连通,透析滤过模块的连接管路25能够将血滤装置213排出的净化血浆输出,透析滤过模块的循环透析管路26能够将血滤装置213排出净化的血浆返回至血滤装置213。
88.当上述透析滤过模块对血浆进行透析滤过时,经过透析滤过的净化血浆经处理液出口排出。
89.上述系统中,为了便于切换血浆的流向,上述血浆输出管路13设置有血浆用三通阀132,输送管路21通过血浆用三通阀132与血浆输出管路13连通。当血浆用三通阀132处于第一状态时,血浆输出管路13连通血液分离装置12和废浆收集装置131;当血浆用三通阀132处于第二状态时,血浆输出管路13和输送管路21连通,即血液分离装置12和输送管路21连通。
90.当然,也可选择采用两个二通阀代替上述血浆用三通阀132,并不局限于上述实施例。
91.为了更为具体地说明本实施例提供的淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统,下面根据图1所示的淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统来说明其工作过程。
92.为了便于描述,将上述血液分离模块、免疫调控预模块、透析滤过模块以及回输模块统称为模块。上述淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统还包括对每个模块进行监测和控制的控制模块。
93.上述实施例提供的淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统的使用方法如下:
94.治疗前在控制模块的控制下使用肝素生理盐水分别对血液分离模块、透析滤过模块以及回输模块进行管路预充。
95.首先采用干细胞培养装置30体外培养间充质干细胞,具体地,间充质干细胞及无动物血清干细胞的培养液通过培养液输入管路301输入干细胞培养装置30,贴壁培养若干天,从培养液收集管路302收集培养液,对培养液进行离心操作后在光镜下检查有无悬浮细胞,待干细胞贴壁融合至80%以上时,混合培养装置32从培养液收集管路302收集干细胞培养液备用。
96.通过血液分离模块离心分离出淋巴细胞,分离过程中使用枸橼酸抗凝,分离的淋巴细胞通过淋巴细胞输出管路14进入淋巴细胞收集装置141,淋巴细胞收集装置141内的淋巴细胞通过淋巴细胞连接管路311和淋巴细胞进管31进入到混合培养装置32内,将混合培养装置32内的淋巴细胞与干细胞培养液混合培养六小时,混合培养期间关闭混合液回输管路33上的输液夹331。
97.对于上述混合培养时间,根据实际需要进行调整,并不局限于六小时。
98.在淋巴细胞与干细胞培养液混合培养的同时,先进行离心式血浆置换。具体地,血液分离模块离心分离出淋巴细胞的同时分离出血浆和红细胞,分离出的血浆通过血浆输出管路13输送至废浆收集装置,分离出的红细胞通过红细胞输出管路15输送至血液回输管路41,血浆存储器421内的新鲜血浆在血浆回输泵420的作用下进入血浆回输管路42,该新鲜血浆与红细胞汇合后进入血液回输管路41,从而回输至体内。可以理解的是,在采集血浆时,淋巴细胞采集泵140停止运转。血浆置换完后,调节血液用三通阀132,使得血浆输出管路13和输送管路21连通,血浆在血液采集泵110的作用下进入血滤装置213,血滤装置213对血浆进行透析滤过,经过透析滤过的净化血浆的部分通过连接管路25进入血浆回输管路42,该部分血浆与红细胞汇合后回输至体内,经过透析滤过的净化血浆的另一部分通过循环透析管路26返回至输送管路21,然后进入血滤装置213进行循环透析滤过。
99.在淋巴细胞与干细胞培养液混合培养完成后,打开混合液回输管路33上的输液夹331,采用透析用三通阀251连通循环透析管路26和血滤装置213且阻断连接管路25;设置血滤装置213的超滤速度为20ml/min,这样,混合培养装置32内的淋巴细胞与干细胞培养液一起以超滤的速度进入血滤装置213,且进入血滤装置213前与经滤液输入管24来的滤液混合,混合后进入血滤装置213后被透析滤过以清除干细胞培养液、枸橼酸盐以及多余水分,待混合培养装置32内的淋巴细胞悬液全部进入血滤装置213后,关闭输液夹331,停止超滤;此后,淋巴细胞通过循环透析管路26反复进入血滤装置213进行透析滤过以更彻底地清除混杂的干细胞培养液、枸橼酸盐以及多余水分;待清除完成后,将透析用三通阀251置于三通的状态,血滤装置213及循环透析管路26内的淋巴细胞在输入泵210和滤液泵240的驱动下从连接管路25进入血液回输管路41输回体内。
100.上述淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统,既能实现离心式血浆置换以及对血浆进行透析滤过、回输,又能够对淋巴细胞进行免疫调控以及净化回输。具体地,在缺乏血浆或不需要进行血浆置换时,可利用本系统对分离的血浆进行血浆透析滤过,拓展了离心式血浆分离的人工肝治疗模式,使得其对蛋白结合毒素与水溶性毒素均能清除,在其既有安全性的基础上,拓展出更全面的血液净化功能。在不需要进行血浆置换时,也能利用本系统进行淋巴细胞的分离、干细胞免疫调控、净化回输,发挥免疫调节功能,治疗各种感染和非感染性炎性疾病。同时,也能利用透析滤过模块超滤分离淋巴细胞时进入体内的多余水分以及去除枸橼酸盐,减小不利影响。
101.对所公开的实施例的上述说明,使本领域技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域技术人员来说将是显而易见的,本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例,而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。
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