一种推测药剂厂家来源的反向工程方法与流程

技术特征：
1.一种推测药剂厂家来源的反向工程方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)将包括待反向药剂、作为内标物质的壬酸甲酯和第一无机碱的物料在第一溶剂中进行第一水浴回流，然后将所得物料用第二溶剂洗涤，取含有所述第二溶剂的液层并对其进行干燥，得到待反向药剂供试品溶液；(2)将辛酸甲酯、癸酸甲酯、作为内标物质的壬酸甲酯和第三溶剂混合得到混合对照品溶液；(3)将多个目标厂家的中链脂肪酸甘油酯分别参照步骤(1)的方法配制得到厂家供试品溶液；(4)将所述待反向药剂供试品溶液、所述厂家供试品溶液和所述混合对照品溶液分别用气相色谱仪进行检测；(5)基于检测图谱所得各成分的峰面积，进行第一计算、第二计算和第三评估；所述第一计算包括：分别计算待反向药剂供试品溶液和各目标厂家的厂家供试品溶液中的辛酸甲酯的量和癸酸甲酯的量；所述第二计算包括：分别计算待反向药剂供试品溶液和各目标厂家的厂家供试品溶液中的辛癸比，所述辛癸比为辛酸甲酯的量和癸酸甲酯的量的比例；所述第三评估包括：对比待反向药剂供试品溶液的辛癸比与多个目标厂家的厂家供试品溶液的辛癸比的大小关系，当待反向药剂供试品溶液的辛癸比与某个厂家供试品溶液的辛癸比的相差在5％以内时，推测该厂家为待反向药剂的厂家来源；否则，做出所有目标厂家均不为厂家来源的结论；所述步骤(1)、(2)和(3)顺序不限地进行或同时进行。2.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤(1)中，所述第一溶剂为甲醇；优选地，所述第一碱为氢氧化钠和/或氢氧化钾，所述第一无机碱以溶于所述第一溶剂所得的溶液的形式加入，相对于1g的所述待反向药剂，该溶液的加入量为0.3
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1ml；该溶液中第一无机碱的含量为3
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10重量％；优选地，所述第一水浴回流包括：将待反向药剂分散在第一溶剂中，并与所述第一无机碱溶解于所述第一溶剂所得的溶液、壬酸甲酯液体相混合，将混合物料进行水浴回流20
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50min。3.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤(1)中，所述第二溶剂为能够与所述第一溶剂分层，且能够溶解辛酸甲酯、癸酸甲酯和壬酸甲酯的有机溶剂；优选地，所述第二溶剂和所述第三溶剂均为正己烷；优选地，所述步骤(1)还包括：在所述所得物料用第二溶剂洗涤之前，先对物料进行冷却；以及，在干燥之后将固体干燥剂通过过滤除去。4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述步骤(1)的过程包括：将待反向药剂置回流瓶中，加入第一溶剂，超声使分散，并加入内标液体、第一无机碱溶解于所述第一溶剂所得的溶液，置水浴回流后取出，用第二溶剂洗涤，并合并洗涤液，用固体干燥剂对正己烷层进行干燥，过滤，即得到待反向药剂供试品溶液。5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述步骤(2)的过程包括：将辛酸甲酯、癸酸甲酯和作为内标物质的壬酸甲酯的混合对照品溶液：称取辛酸甲酯、癸酸甲酯置容量瓶中，加入正己烷溶剂并稀释至刻度，摇匀，作为辛酸甲酯与癸酸甲酯混合母液；精密量取内标溶液、
辛酸甲酯与癸酸甲酯混合母液置量瓶中，用正己烷稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液。6.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤(4)中，色谱柱的填充剂为固定性聚乙二醇，尺寸为(20
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60)m
×
(0.18
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0.53)mm
×
(0.25
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0.5)μm；优选地，所述气相色谱仪的条件包括：载气为惰性气体，流速为1
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4.5ml/min，进样量为1
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5μl，分流比为(10
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100):1；优选地，所述气相色谱仪的条件还包括：使用的检测器为氢火焰离子化检测器，进样口温度为250～300℃，检测器温度为250～320℃；优选地，柱温采用程序升温，条件包括：起始温度40
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60℃，升温速度为30
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40℃/min，升温终止温度为250
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270℃，保持时间10
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20min。7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述气相色谱仪的条件包括：色谱柱为30m
×
0.32mm
×
0.25μm的agilent hp
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innowax，载气为氮气，流速为3ml/min，进样量为1μl，分流比为50:1，检测器为氢火焰离子化检测器，进样口温度为250℃，检测器温度为260℃；程序升温条件包括：起始温度50℃、35℃/min升至250℃，保持15min。8.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤(5)中，所述第一计算的方法为加内标的外标法；优选地，通过内标物质壬酸甲酯进行校正，从而消除误差。9.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤(5)中，计算辛酸甲酯和癸酸甲酯的总量，即为中链脂肪酸甘油酯的量。10.根据权利要求1所述的方法，其中，在步骤(5)中，所述方法还包括第四计算，该第四计算包括：将待反向药剂中辛酸甲酯和癸酸甲酯的总和在待反向药剂中的百分比除以厂家来源中辛酸甲酯和癸酸甲酯的总百分比，计算得到待反向药剂中中链脂肪酸甘油酯的百分比。

技术总结
本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种推测药剂厂家来源的反向工程方法，包括：(1)得到待反向药剂供试品溶液；(2)得到混合对照品溶液；(3)得到厂家供试品溶液；(4)用气相色谱仪进行检测；(5)进行第一计算包括：计算辛酸甲酯的量和癸酸甲酯的量；第二计算包括：计算辛癸比为辛酸甲酯的量和癸酸甲酯的量的比例；第三评估包括：对比待反向药剂供试品溶液与多个目标厂家的厂家供试品溶液的辛癸比，推测厂家来源。本发明的方法能够较为准确地推测出需反向工程制剂中中链脂肪酸甘油酯的厂家来源，并能够更加准确地计算出中链脂肪酸甘油酯的含量；本发明为药品研发中的反向工程提供了有效的研究手段。研究手段。研究手段。


技术研发人员：全丹毅 丁美娟
受保护的技术使用者：江苏集萃新型药物制剂技术研究所有限公司
技术研发日：2021.10.11
技术公布日：2021/12/14