用于治疗孤独症谱系障碍的氨基甲酰基环己烷衍生物的制作方法

1.本发明涉及用于治疗孤独症谱系障碍的症状的反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲(卡利拉嗪(cariprazine))、其盐、相近类似物、衍生物、药物组合物、代谢物及组合。


背景技术：

[0002]
孤独症谱系障碍(asd)是一种复杂、非常具有挑战性且普遍存在的神经发育疾病，2014年在美国十一个州的小儿人口中的发生频率高达1:34
‑
1:77(平均1:59)(cdc发病率和死亡率每周报告监察摘要，4月27日，2018/67(6):1
‑
23“cdc morbidity and mortality weekly report surveillance summaries,april 27,2018/67(6):1
‑
23”)。根据多项流行病学研究，2012年asd的患病率估计值的中位数为62/10,000(elsabbagh等人,autism res.2012,5:160
‑
179)。因此，asd现今被认为是一种全球性、常见、终生的神经发育障碍，其影响约1％的儿童和成人(brugha等人,arch.gen.psychiatry.2011,68:459
‑
465；murphy等人,neuropsychiatr.dis.treat.2016,12:1669
‑
1686)。
[0003]
该疾病的特征为社会交际功能障碍的两个核心症状以及限制性(重复性、刻板)行为和思维(精神障碍的诊断和统计手册，第五版，第50至59页“diagnostic and statistical manual of mental disorders,fifth edition,pp.50
‑
59”)。社交缺损包含异常的社交方式、无法正常来往联络、无法发起和进行互动。联络缺陷可能包括不良整合的语言及非语言联络、眼神交流及肢体语言异常、手势理解缺陷、缺乏面部表情。通常，可能存在建立、维持及理解关系、适应社会状况、分享想象性游戏的障碍，以及对同伴缺乏兴趣。关于其他核心症状群，可以鉴别出刻板或重复性运动移动、坚持相同性和常规性、强度或注意力集中异常的高度固定兴趣、以及异常的感觉反应。
[0004]
除了所述核心症状外，asd还常常伴有相关或合并的症状，包括智力残疾、注意力缺乏、活动过强、情绪障碍、癫痫发作、睡眠问题等。另一个经常相关的症状群为易怒，其包含发怒、对他人攻击、自我损伤行为和情绪波动。
[0005]
由于目前尚无可用于治疗asd的核心症状的药理学治疗，因此asd的尚未满足的医疗需求仍极大。虽然尚无被批准用于治疗核心症状的药物，但美国食品和药品监督管理局已批准同类许多可利用药物中仅仅两种抗精神病药—利培酮(risperidone)和阿立哌唑(aripiprazole))—用于治疗5至16岁儿童的与asd相关的易怒。日本亦已批准阿立哌唑用于此目的。尽管已经在临床研究中进行了很大的努力，但直到现在尚无有效的药理学治疗被鉴别以缓解asd的核心症状群。
[0006]
利培酮和阿立哌唑为非典型的抗精神病药，在体外具有不同的受体特征。已发现利培酮与5
‑
羟色胺5
‑
ht
2a
受体的结合具有高亲和力并作为该受体的拮抗剂发挥作用，而阿立哌唑则对多巴胺d2、d3、5
‑
ht
1a
及5
‑
ht
2b
受体具有高亲和力，并且其表现为多巴胺d2、d3及5
‑
羟色胺5
‑
ht
1a
受体的部分激动剂(shahid等人,j.psychopharmacol.2009,23:65
‑
73；tadori等人eur.j.pharmacol.2011,668:355
‑
365；shapiro等人,neuropsychopharmacol.2003,
28:1400
‑
1411)。重要的是要注意，阿立哌唑和利培酮二者都在人脑中占据多巴胺d2受体(muly等人,j.pharmacol.exp.ther.2012,341:81
‑
89；gr
ü
nder等人,am.j.psychiatry 2008,165:988
‑
995)。然而，这两种化合物均未被发现显示占据人体中多巴胺d3受体(graff
‑
guerrero等人,arch.gen psychiatry 2009,66:606
‑
615)。
[0007]
尽管利培酮和阿立哌唑被用于治疗与asd相关的易怒，但这些抗精神病的化合物既未获得批准也未用于治疗asd的核心症状群。关于利培酮和阿立哌唑在治疗核心症状的有效性的临床研究结果是矛盾的，显示阿立哌唑缺乏疗效，而利培酮为混合结果。以开放标签性试验对阿立哌唑进行了研究，而其并未改善异常行为检查表的冷漠/社会脱离分量表(ichikawa等人,child psychiary hum.dev.2017,48:796
‑
806；leclerc等人,pharma.ther.2015,40:389
‑
397；posey等人,child adolesc.psychiatry clin.n.am.2008,17:787
‑
798)。用利培酮的研究提示，其可能使具有表现高水平基线易怒的综合性精神发育障碍的儿童的核心症状有适度改善，但尚不清楚在没有易怒的情况下利培酮是否仍可改善这些症状(leclerc等人,pharma.ther.2015,40:389
‑
397；posey等人,child adolesc.psychiatry clin.n.am.2008,17:787
‑
798)。因此，对于阿立哌唑，其对于治疗asd中社会交际功能障碍的有效性没有来自人类研究的任何支持。对于利培酮，亦缺乏可靠的证据证明对asd受试者的社交行为的功效。
[0008]
利培酮和阿立哌唑的药效学作用亦已在孤独症动物模型中进行了研究，并产生了混合结果。在数个临床前asd小鼠模型中，包括产前丙戊酸盐模型(auclair等人,国际神经心理药理学院世界大会“world congress of the international college of neuropsychopharmacology”2014,lp
‑
03
‑
011)、cntnap2基因剔除小鼠(penagarikano等人,cell 2011,147:235
‑
246)、nmda受体nr1亚基亚效等位基因小鼠(teng等人,neuropharmacology 2016,105:61
‑
71)及btbr小鼠品系(chadman,pharm.biochem.behav.2011,97:586
‑
594)，阿立哌唑和利培酮二者都无法改善社交行为缺陷。在另一项研究中，在小鼠中利用产前丙戊酸盐处理，利培酮和阿立哌唑二者慢性给药后皆改善了核心行为缺陷，而急性治疗无效(hara等人,psychopharmacology 2017,234:3217
‑
3228)。hara等人讨论了由慢性利培酮和阿立哌唑治疗引起的类asd症状改善背后的可能机制，并强调了在额叶前部皮质中多巴胺释放后的多巴胺d1和d2受体激活的作用。这些作者并未提及多巴胺d3受体在利培酮或阿立哌唑可能缓解产前丙戊酸盐处理的行为影响的分子机制中的任何作用。
[0009]
专利申请wo 2005/012266a1公开了氨基甲酰基环己烷衍生物，它们是多巴胺d3/d2受体部分激动剂。值得注意的是，wo 2005/012266a1公开了对应于式1的反式
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n
‑
[4
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[2
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[4
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(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲(卡利拉嗪)及其盐酸盐。后来确定，卡利拉嗪(美国：欧洲：)是一种多巴胺d3优选的d3/d2受体和5
‑
羟色胺5
‑
ht
1a
受体部分激动剂(kiss等人,j.pharmacol.exp.therap.2010,333:328
‑
340)，其已被批准用于治疗精神分裂症(美国和欧洲)及与i型双相性精神障碍症有关的躁狂或混合发作(美国)。卡利拉嗪的活性代谢产物不排他性地包括去甲基卡利拉嗪和二去甲基卡利拉嗪(wo 2008/142461a1)。另有专利申请描述了卡利拉嗪的盐酸盐(wo 2008/139235a2)和卡利拉嗪的氘化衍生物(wo 2011/060363a2)。wo 2005/012266a1亦公开了卡利拉嗪的相近
类似物，它们被列在该专利申请第21至22页上。这些相近类似物亦包括反式
‑
n
‑
[4
‑
{2
‑
[4
‑
(2,3
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二氯
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苯基)
‑
哌嗪
‑1‑
基]
‑
乙基}
‑
环己基]
‑
吗啉
‑4‑
甲酰胺(化合物2)。
[0010][0011]
在由氨基甲酰基环己烷衍生物治疗和/或预防的疾病中，wo2005/012266a1、wo2008/139235a2、wo2008/141135a1、wo2009/020897a1及wo2010/009309a1要求保护孤独症本身的治疗。如前所述，就其在人类患者中的表现而言，asd是一种非常复杂的疾病；它的核心症状包括社会交际缺陷和严重程度可变的限制性/重复性行为以及许多种共病症状。下文所定义的所选择的与asd相关的症状在上述专利申请中既未具体说明亦未得到任何科学证据支持。这些症状特别包括社会交际缺损、限制性及重复性行为、注意力缺陷及活动过强以及易怒。
[0012]
与利培酮和阿立哌唑相比，卡利拉嗪具有独特的受体特征(shahid等人,j.psychopharmacol.2009,23:65
‑
73；kiss等人,j.pharmacol.exp.therap.2010,333:328
‑
340)。卡利拉嗪对多巴胺d3、d
2l
和d
2s
受体表现出低于毫微摩尔浓度的亲和力(k
i
值分别为0.09、0.5及0.7nm)，相对于d2受体，对多巴胺d3受体具有约8倍的偏好性。在功能上，该化合物是多巴胺d3和d2受体的部分激动剂。此外，卡利拉嗪对5
‑
羟色胺5
‑
ht
2b
和5
‑
ht
1a
受体表现出毫微摩尔浓度的亲和力(k
i
分别为0.6及2.6nm)，其中它分别作为完全拮抗剂和弱的部分激动剂起作用。卡利拉嗪的相近类似物(化合物2)显示出与卡利拉嗪非常相似的分子药理学特征。其对多巴胺d3、d
2l
和d
2s
受体亦具有低于毫微摩尔浓度的亲和力(k
i
分别为0.17、0.4及0.52nm)。在功能上，化合物2是多巴胺d3和d2受体的部分激动剂。此外，化合物2对5
‑
羟色胺5
‑
ht
2b
和5
‑
ht
1a
受体表现出毫微摩尔浓度的亲和力(k
i
分别为1.11及5.73nm)，其中分别作为完全拮抗剂和弱的部分激动剂起作用。考虑到此种受体亲和力及功能性的组合时，卡利拉嗪及其相近类似物(化合物2)是特殊的，并与其他可利用的抗精神病药明显不同。
[0013]
尽管当时可得的遗传相关研究结果(martineau等人,dev.med.child neurol.1994,36:688
‑
697；persico and napolioni,behav.brain res.2013,251:95
‑
112)并未暗示多巴胺d3受体参与了asd的发病机制，但pierre fabre medicament的研究人员首先对多巴胺d3受体拮抗剂进行了研究并发现其在asd动物模型中有效。pierre fabre medicament提交一个与用作治疗asd的药物的色酮衍生物有关的专利申请(wo 2015/
086836a1)。wo 2015/086836a1中的色酮衍生物是多巴胺d3受体完全拮抗剂，其在对人类重组多巴胺d3受体的map激酶活性测试中显示不具有任何内在活性。该发明的色酮衍生物显示出改善了在子宫内生存期间暴露于丙戊酸钠的大鼠的受损社交行为。尽管其在前述asd动物模型中的有益作用，但迄今为止没有可获得的临床证据表明专利申请wo 2015/086836a1中公开的色酮化合物或相关化合物可在人类患者中用于治疗这种疾病。
[0014]
鉴于卡利拉嗪事多巴胺d2和d3受体的部分激动剂(kiss等人,j.pharmacol.exp.therap.2010,333:328
‑
340；tadori等人eur.j.pharmacol.2011,668:355
‑
365)，并且根据wo 2015/086836a1，pierre fabre medicament专利的色酮衍生物被定义为多巴胺d3拮抗剂，因此本领域技术人员不会认为这两种化合物具有类似的效果。
[0015]
首先，在化学结构之间存在明显差异。这两种碱化合物之间的结构差异对物理化学性质、分子药理学、药效学和药物动力学性质上的差异具有重要影响。
[0016]
其次，尽管pierre fabre化合物在细胞系统中未产生刺激活性(erk1/2磷酸化测定法)(heusler等人,eur.neuropsychopharm.2016,26(s2):s490
‑
s491)，但卡利拉嗪刺激了表达d3受体的中国仓鼠卵巢细胞中的erk1/2磷酸化(未发表的数据，公司档案文件中的数据)。这意味着这两种化合物在体外功能测定法中表现完全不同。
[0017]
第三，这两种化合物具有不同的受体特征(heusler等人,eur.neuropsychopharm.2016,26(s2):s490
‑
s491；kiss等人,j.pharmacol.exp.therap.2010,333:328
‑
340)。pierre fabre色酮衍生物对多巴胺d3受体具有低于毫微摩尔浓度的亲和力(k
i 0.16nm)，对多巴胺d
2l
和d
2s
受体具有毫微摩尔浓度的亲和力(k
i
分别为12.6及6.3nm)。因此，与在卡利拉嗪的情况下相比，在pierre fabre化合物的情况下显示出对多巴胺d3受体比d2受体有更大偏好性。所述的色酮衍生物具有相当大的5
‑
羟色胺5
‑
ht
1a
受体亲和力(k
i 0.13nm)，而卡利拉嗪对此受体显示的亲和力较低(k
i 2.6nm)。卡利拉嗪、其相近类似物(化合物2)及pierre fabre化合物皆为5
‑
羟色胺5
‑
ht
1a
受体的部分激动剂，但尽管pierre fabre色酮衍生物具有相当大的内在活性(57
‑
75％)(heusler等人,eur.neuropsychopharm.2016,26(s2):s490
‑
s491)，卡利拉嗪和化合物2均仅为弱的部分激动剂，其内在活性分别为38和30％(kiss等人,j.pharmacol.exp.therap.2010,333:328
‑
340,及未发表的数据，公司档案文件中的数据)。
[0018]
如前所述，卡利拉嗪具有特殊的受体特征，其包括多巴胺d3/d2受体部分激动作用、弱的5
‑
羟色胺5
‑
ht
1a
受体部分激动作用及5
‑
羟色胺5
‑
ht
2b
受体完全拮抗作用。lim等人发现，用选择性5
‑
羟色胺5
‑
ht
2b
受体激动剂bw723c86处理fmr1基因剔除小鼠导致认知能力的改善(lim等人,gene.dev.2014,28:273
‑
289)。进一步的研究报道，asd患者的外周及大脑中5
‑
羟色胺5
‑
ht2型(未具体说明)受体的功能也降低了(mcbride等人,arch.gen.psychiatry 1989,46,213
‑
221)。考虑到以上结果，不会预期5
‑
羟色胺5
‑
ht
2b
受体拮抗剂诸如卡利拉嗪在asd的动物模型中有效。
[0019]
此外，oblak等人(autism res.2013,6:571
‑
583)发现，在孤独症患者死后皮质样品中，在有助于社交情感行为表现的边缘皮质网络的两个区域中的5
‑
羟色胺5
‑
ht
1a
受体结合显著降低。鉴于这些降低的5
‑
羟色胺5
‑
ht
1a
受体水平，不太可能这些受体的弱的部分激动剂诸如卡利拉嗪在asd模型中有效。
[0020]
除了一般治疗孤独症的需求外，还存在治疗孤独症的一种或多种症状的需求。此
外，还存在治疗病况诸如阿斯波哥尔综合征、非典型孤独症(又称为没有其它说明的综合性精神发育障碍；pdd
‑
nos)、雷特(rett)综合征、儿童期分裂障碍、注意缺陷多动症(adhd)及感觉整合功能障碍的需求。
[0021]
发明概述
[0022]
在一方面，本技术涉及反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
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二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲(卡利拉嗪)、其盐、相近类似物、衍生物、药物组合物、代谢物及组合，其用于治疗孤独症谱系障碍的症状。在另一方面，本技术涉及卡利拉嗪、其盐、相近类似物、衍生物、药物组合物、代谢物及组合用于治疗病况的用途，所述的病况选自阿斯波哥尔综合征、非典型孤独症(又称为没有其它说明的综合性精神发育障碍；pdd
‑
nos)、雷特综合征、儿童期分裂障碍、注意缺陷多动症(adhd)、病理性需求回避(pda)、脆性x综合征(fxs)、安吉尔曼(angelman)综合征、结节性硬化复征、费伦麦克德米德(phelan mcdermid)综合征及感觉整合功能障碍。
[0023]
发明的详细说明
[0024]
在一方面，本技术涉及wo 2005/012266a1中公开的反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)以及反式
‑
n
‑
[4
‑
{2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯
‑
苯基)
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哌嗪
‑1‑
基]
‑
乙基}
‑
环己基]
‑
吗啉
‑4‑
甲酰胺盐酸盐(化合物2)。卡利拉嗪在动物模型中显示出对asd症状的很大益处。这些结果表明，卡利拉嗪、其相近类似物及其衍生物对抗人类患者asd的症状可能具有治疗作用。
[0025]
在一方面，本技术涉及卡利拉嗪、其盐、相近类似物、衍生物、药物组合物、代谢物及组合用于治疗病况的用途，所述的病况选自阿斯波哥尔综合征、非典型孤独症(又称为没有其它说明的综合性精神发育障碍；pdd
‑
nos)、雷特综合征、儿童期分裂障碍、注意缺陷多动症(adhd)、病理性需求回避(pda)、脆性x综合征(fxs)、安吉尔曼综合征、结节性硬化复征、费伦麦克德米德综合征及感觉整合功能障碍的疾病。
[0026]
在一个优选的实施方案中，卡利拉嗪或其药学上可接受的盐用于治疗与asd相关的社会交际及社交互动中的持续性缺陷；用于治疗与asd相关的限制性或重复性行为；用于治疗与asd相关的刻板或重复性运动；和/或用作与asd相关的社交情绪互助的缺陷的治疗。
[0027]
在一个优选的实施方案中，卡利拉嗪或其药学上可接受的盐用于治疗asd之一种或多种症状，该症状选自社会交际缺陷、限制性兴趣及重复性行为。在一些实施方案中，卡利拉嗪或其药学上可接受的盐用于治疗asd之一种或多种症状，该症状选自限制性、重复性及刻板的行为、兴趣和活动模式。
[0028]
在asd的产前丙戊酸盐模型中研究了卡利拉嗪及化合物2。如实施例中所述，卡利拉嗪盐酸盐及化合物2盐酸盐能够逆转已在其子宫内生存期间暴露于丙戊酸盐的大鼠的行为缺陷。结果显示以上两种化合物均适用于治疗asd的症状。
[0029]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
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二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲和/或其相近类似物和/或其衍生物和/或其代谢物和/或其药学上可接受的盐用于治疗作为孤独症谱系障碍的核心症状的社会交际缺陷的用途。
[0030]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及反式
‑
n
‑
[4
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[2
‑
[4
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(2,3
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二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲和/或其相近类似物和/或其衍生物和/或其代谢
物和/或其药学上可接受的盐用于治疗作为孤独症谱系障碍的核心症状的限制性及重复性行为的用途。
[0031]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及反式
‑
n
‑
[4
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[2
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[4
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(2,3
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二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲和/或其相近类似物和/或其衍生物和/或其代谢物和/或其药学上可接受的盐用于治疗与孤独症谱系障碍相关的易怒的用途。
[0032]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
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(2,3
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二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲和/或其相近类似物和/或其衍生物和/或其代谢物和/或其药学上可接受的盐用于治疗与孤独症谱系障碍相关的注意力缺乏及活动过强的用途。
[0033]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合物，其中孤独症谱系障碍的核心症状为社会交际缺陷。
[0034]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合物，其中孤独症谱系障碍的核心症状为限制性及重复性行为。
[0035]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合物，其中被治疗的病况是与孤独症谱系障碍相关的易怒。
[0036]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合物，其中被治疗的病况是与孤独症谱系障碍相关的注意力缺乏及活动过强。
[0037]
本发明还涉及治疗孤独症谱系障碍的方法，其中该方法包括施用如上所定义的药物组合物。
[0038]
根据本技术的组合物可以通过经口、透皮、肠胃外、鼻内和直肠途径进行给药。该组合物尤其可以通过经口途径以合适的制剂给药。可以调整本技术的组合物中化合物(反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
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[4
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(2,3
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二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
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n’,n
’‑
二甲基脲)或其相近类似物、盐、衍生物、或代谢物的剂量以得到导致所需治疗反应的活性物质的量。因此，剂量水平取决于所需要的治疗反应、给药途径、预期的治疗持续时间以及其他因素诸如患者的年龄、性别或体重。剂量可以为每日0.01至12mg且可滴定以达效果。
[0039]
卡利拉嗪也可与至少一种已经用于治疗asd并发症状的其他活性成分(例如，精神兴奋剂、抗精神病药、抗抑郁剂、抗焦虑剂、抗高血压药、抗癫痫药、麻醉剂、解痉药或其他药剂)联合使用。
[0040]
精神兴奋剂包括，但不限于，中枢作用型拟交感神经药(苯丙胺、哌甲酯(methylphenidate)、莫达非尼(modafinil)、阿托西汀(atomoxetine))、促智药或其他精神兴奋剂(长春西汀(vinpocetine)、多奈哌齐(donepezil)、美金刚(memantine))。
[0041]
抗精神病药包括，但不限于，典型和非典型的抗精神病药，诸如氟哌啶醇(haloperidol)、匹莫齐特(pimozide)、氯氮平(clozapine)、奥氮平(olanzapine)、喹硫平(quetiapine)、舍吲哚(sertindole)、齐拉西酮(ziprasidone)、鲁拉西酮(lurasidone)、利培酮(risperidone)、阿立哌唑(aripiprazole)、依匹哌唑(brexpiprazole)、伊潘立酮(iloperidone)、帕潘立酮(paliperidone)、锂。
[0042]
抗抑郁剂包括，但不限于，非选择性单胺再摄取抑制剂(地昔帕明(desipramine)、丙米嗪(imipramine)、氯米帕明(clomipramine)、阿米替林(amitriptyline)、去甲替林(nortriptyline))、5
‑
羟色胺调节剂和刺激剂(维拉佐酮(vilazodone)、伏硫西汀
(vortioxetine))、选择性5
‑
羟色胺再摄取抑制剂(氟西汀(fluoxetine)、帕罗西汀(paroxetine)、舍曲林(sertraline)、氟伏沙明(fluvoxamine)、西酞普兰(citalopram)、艾司西酞普兰(escitalopram))、非酰肼单胺氧化酶抑制剂(吗氯贝胺(moclobemide))或其他药剂(米安色林(mianserin)、曲唑酮(trazodone)、奈法唑酮(nefazodone)、米氮平(mirtazapine)、噻奈普汀(tianeptine)、文拉法辛(venlafaxine)、米那普仑(milnacipran)、瑞波西汀(reboxetine)、度洛西汀(duloxetine)、阿戈美拉汀(agomelatine)、安非他酮(bupropion)、吉哌隆(gepirone))。
[0043]
抗焦虑剂包括，但不限于，苯二氮类(地西泮(diazepam)、氯地西泮(chlorodiazepoxide)、奥沙西泮(oxazepam)、劳拉西泮(lorazepam)、阿普唑仑(alprazolam))、氮杂螺二酮类(丁螺环酮(buspirone))。
[0044]
抗高血压药包括，但不限于，咪唑啉受体激动剂(可乐定(clonidine)、胍法辛(guanfacine))以及这些物质与利尿剂的组合。
[0045]
抗癫痫药包括，但不限于，巴比妥类及其衍生物(苯巴比妥(phenobarbital))、乙内酰脲衍生物(苯妥英(phenytoin))、琥珀酰亚胺衍生物(乙琥胺(ethosuximide))、苯二氮衍生物氯硝西泮(clonazepam)、羧酰胺衍生物(卡巴马平(carbamazepine)、奥卡西平(oxcarbazepine))、脂肪酸衍生物(丙戊酸(valproic acid)、丙戊酰胺(valpromide)、氨己烯酸(vigabatrin)、噻加宾(tiagabine))和其他抗癫痫药(拉莫三嗪(lamotrigine)、托吡酯(topiramate)、加巴喷丁(gabapentin)、左乙拉西坦(levetiracetam)、唑尼沙胺(zonisamide)、普瑞巴林(pregabalin))。
[0046]
麻醉剂包括，但不限于，巴比妥类(戊巴比妥(pentobarbital))、苯二氮类(咪达唑仑(midazolam))、环吡咯酮苯二氮类衍生物(佐匹克隆(zopiclone)、唑吡坦(zolpidem))、褪黑激素受体激动剂(褪黑激素、雷美替胺(ramelteon))。
[0047]
解痉药或抗痉挛药包括，但不限于，中枢作用型药剂(巴氯芬(baclofen)、阿巴氯芬(arbaclofen)、托哌酮(tolperisone))及罂粟碱(papaverine)。
[0048]
其他药剂包括，但不限于，药物产品(益生菌、消化助剂/消化剂、草药萃取物)、维生素(水溶性及脂溶性二者，诸如，但不限于，维生素a、d3、e、k、b1、b5、b6、b12、c或它们的衍生物)及营养补充品(辅酶例如q10、类黄酮例如白藜芦醇、卵磷脂、不饱和脂肪酸，包括脂肪酸ω3和ω6)。
[0049]
因此，本发明还涉及用于治疗孤独症谱系障碍的药物组合物，其包含
[0050]
1)反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲和/或其相近类似物和/或其衍生物和/或其代谢物和/或其药学上可接受的盐，以及
[0051]
2)至少一种辅助治疗剂，其选自由精神兴奋剂/促智药、抗精神病药、抗抑郁剂、抗焦虑剂、抗高血压药、抗癫痫药、麻醉剂及解痉药组成的组，以及
[0052]
3)一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂及赋形剂。
[0053]
同时，本技术还涉及一种药物组合，其包含反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲和/或其相近类似物和/或其衍生物和/或其代谢物和/或其药学上可接受的盐以及至少一种辅助治疗剂，其用于治疗孤独症谱系障碍。
[0054]
在一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合，其中至少一种辅
助治疗剂选自由精神兴奋剂/促智药、抗精神病药、抗抑郁剂、抗焦虑剂、抗高血压药、抗癫痫药、麻醉剂及解痉药组成的组。
[0055]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合，其中所述的精神兴奋剂/促智药选自包含苯丙胺、哌甲酯、莫达非尼、阿托西汀、长春西汀、多奈哌齐及美金刚的清单。
[0056]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合，其中所述的抗精神病药选自包含氟哌啶醇、匹莫齐特、氯氮平、奥氮平、喹硫平、舍吲哚、齐拉西酮、鲁拉西酮、利培酮、阿立哌唑、依匹哌唑、伊潘立酮、帕潘立酮及锂的清单。
[0057]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合，其中所述的抗抑郁剂选自包含地昔帕明、丙米嗪、氯米帕明、阿米替林、去甲替林、维拉佐酮、伏硫西汀、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、氟伏沙明、西酞普兰、艾司西酞普兰、吗氯贝胺、米安色林、曲唑酮、奈法唑酮、米氮平、噻奈普汀、文拉法辛、米那普仑、瑞波西汀、度洛西汀、阿戈美拉汀、安非他酮及吉哌隆的清单。
[0058]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合，其中所述的抗焦虑剂选自包含地西泮、氯地西泮、奥沙西泮、劳拉西泮、阿普唑仑及丁螺环酮的清单。
[0059]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合，其中所述的抗高血压药选自可乐定及胍法辛。
[0060]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合，其中所述的抗癫痫药选自包含苯巴比妥、苯妥英、乙琥胺、氯硝西泮、卡巴马平、奥卡西平、丙戊酸、丙戊酰胺、氨己烯酸、噻加宾、拉莫三嗪、托吡酯、加巴喷丁、左乙拉西坦、唑尼沙胺及普瑞巴林的清单。
[0061]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合，其中所述的麻醉剂选自包含戊巴比妥、咪达唑仑、佐匹克隆、唑吡坦、褪黑激素及雷美替胺的清单。
[0062]
在另一个优选的实施方案中，本技术涉及如上所定义的药物组合，其中所述的解痉药选自包含巴氯芬、阿巴氯芬、托哌酮及罂粟碱的清单。
[0063]
在一个实施方案中，卡利拉嗪或其药学上可接受的盐用于治疗年龄约5至12岁的儿科患者；或年龄约13至17岁的青少年患者；或年龄约18岁或更大的成年患者。
[0064]
药物组合物的制备
[0065]
以下制剂实施例说明本技术的代表性药物组合物。本技术包括以下药物组合物。
[0066]
a)固体口服剂型
[0067]
a.片剂
[0068]
b.胶囊剂
[0069]
c.颗粒剂
[0070]
b)液体口服剂型
[0071]
a.糖浆剂
[0072]
c)其他剂型
[0073]
a.栓剂
[0074]
b.透皮贴剂
[0075]
c.鼻喷雾剂、气溶胶
[0076]
定义
[0077]
术语“亲和力”意指药物对生物靶标的吸引；其为化学术语，用于量化药物
‑
靶标相互作用的强度。
[0078]
术语“完全激动剂”意指产生生物系统完全最大反应的化合物。
[0079]
术语“部分激动剂”意指与受体结合且相对于完全激动剂仅对该受体具有部分功效的化合物。
[0080]
术语“拮抗剂”意指与受体结合且不产生反应或阻止由相同受体的激动剂产生的反应的化合物。
[0081]
术语“相近类似物”意指基于其化学结构的相似性以及其体外药理学特性而与某个化合物相关的化合物。
[0082]
术语“盐”意指本发明化合物的无毒的碱加成盐，其通常通过使该酸与合适的有机或无机碱反应进行制备。
[0083]
术语“活性代谢物”意指通过不同生物转化途径产生的这类代谢物，其生物活性与母体化合物的生物活性相似。
[0084]
术语“衍生物”意指通过对卡利拉嗪及其相近类似物进行化学修饰(其不排他性地导致前药、氘化化合物、生物电子等排体等)而产生的这类化合物。
[0085]
术语“活性成分”意指卡利拉嗪、其相近类似物、盐、活性代谢物及衍生物。
[0086]
术语“药学上可接受的”描述成分，其可用于制备药物组合物且通常是安全、无毒的并且在生物学上或其他方面都不是不合乎需求的，并且包括对于人类制药用途可接受的成分。
[0087]
术语“药物组合物”是指本发明的化合物与其他化学组分，诸如药学上可接受的赋形剂(例如稀释剂或载体)的混合物。药物组合物促成该化合物对个体的给药。
[0088]
术语“赋形剂”定义促进化合物掺入细胞或组织的化合物。
[0089]“核心症状”包括精神障碍诊断和统计手册(diagnostic and statistical manual of mental disorders)第五版(2013)中所述的社会交际功能障碍以及限制性(重复性、刻板)行为和思维。
[0090]
根据精神障碍诊断和统计手册第五版(2013)，术语“并发症”意指可能与asd相关但并非核心症状的症状。
[0091]
如本技术中所用，术语“治疗”意指使用有效的疗法以减轻、缓解或消除与asd相关的症状。
[0092]
术语“患者”是指接受asd诊断的人。
[0093]
产前丙戊酸盐模型
[0094]
已知产前丙戊酸盐(丙戊酸，vpa)暴露会增加人类发生asd的风险(christensen et al,jama 2013,309)。还已知啮齿动物在子宫内生存期间vpa暴露会导致后代出现孤独症样表现型(roullet et al,neurotox.teratol.2013,36,45
‑
56)。啮齿动物中vpa通常在胚胎发育第12天左右给予，这时正发生神经管闭合以及颅神经核和小脑的建立。vpa的组蛋白脱乙酰酶抑制作用干扰上述发育步骤并因此在后代中导致孤独症样表现型。孤独症样表现型不排他性地包含大鼠幼崽的交流受损、青春期大鼠社交玩耍行为受损、成年大鼠的3室试验中活动过强、过度刻板行为以及欠缺社交能力。由于产前vpa模型的生理起源和症状与
人类状况显示出良好的匹配性，因此这是一种被广泛接受的具有高度转译价值的asd啮齿动物模型。
[0095]
如前所述，产前vpa模型具有优良的建构及表面有效性，因此它是一种被广发接受的asd疾病模型。在此方法中，在妊娠第12.5天，对定时交配的雌性wistar大鼠给予单剂量vpa(300
‑
600mg/kg,i.p.)。根据标准实验室条件饲养后代直到进行行为测试之时。于常规笼中将动物分成数组饲养，4只一组，以标准12小时光照/黑暗周期保持在22至24℃，食物和水可自由获得。经过研究性药物治疗后，在与孤独症行为评估有关的试验中对后代进行行为检查。这些试验包括母爱剥夺引起的大鼠幼崽超声波发声、社交玩耍、社交偏好及开场。
[0096]
母爱剥夺引起的大鼠幼崽超声波发声是一种社会交际功能的读数，其在产前暴露于vpa后在后代中受到损害(gandal等人,biol.psychiatry 2010,68,1100
‑
1106)。为诱发超声波呼叫，将经过产前vpa处理的大鼠幼崽单独放入笼里并用蝙蝠麦克风记录呼叫。使用音频过滤器将呼叫数字化并使用sonotrack软件(荷兰metris bv.)记录和量化超声波发声。在出生后第11至12天测量10分钟基线发声。基于基线发声将动物分入均质组。在出生后第13天，于测量前60分钟使用适当剂量的药物或载体对动物进行p.o.处理，然后将它们放回巢中直至记录。超声波呼叫计数记录10分钟。使用非参数kruskal
‑
wallis检验及事后dunnett检验对超声波呼叫计数进行统计分析。
[0097]
社交玩耍是一种类型的社会互动，其在包括啮齿动物及人类的青春期哺乳动物中非常典型(vanderschuren and trezza,curr.topics behav.neurosci.2014,16:189
‑
212)。社交玩耍行为表示成年生活中的社交功能并且在后代进行产前vpa处理后会有缺陷(schneider and przewlocki neuropsychopharmacology 2005,30:80
‑
89)。在出生后第30天，以试验化合物治疗8天后，评估产前vpa处理的大鼠的青春期活动行为。用来自同一治疗组的数对动物在一个新颖的测试环境中进行这项测验，试验历时15分钟。通过社交玩耍行为的持续时间测量，对动物的玩耍活动进行评分。统计分析采用单向anova及事后dunnett检验。
[0098]
在3室装置中的社交偏好是大鼠完整社交行为的另一个指标。同种个体对无生命的物体的偏好以及区分熟悉和新的同种个体之间的能力对于正常的社交功能是必需的，并且在大鼠产前vpa模型中是有缺陷的(bambini
‑
junior等人,brain res.2011,1408:8
‑
16)。社交偏好及社交认知记忆是在3室装置中进行研究的。在出生后第59天，经口服试验化合物治疗8天后，对产前vpa处理的大鼠进行了社交偏好评估。在出生后第60天，经口服试验化合物治疗9天后，评估了相同大鼠的社交认知记忆。采用双因素anova、学生(student)t检验及dunnett检验进行统计分析。
[0099]
除了社会交际受损，重复性行为是asd的另一个核心症状群。在子宫内生存期间暴露于vpa的动物中发现了活动过强和过度重复性行为(schneider和przewlocki neuropsychopharmacology 2005,30:80
‑
89)。在出生后第31至32天，经口服试验化合物治疗9天后，于开场试验空间中在10分钟试验中对动物的运动活动及探索行为进行评分。分析活动的重复性/刻板行为的读数，诸如移动的总距离及转圈行为的频率。统计分析采用单因素anova及事后dunnett检验。
附图说明
[0100]
图1：反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)的急性口服给药逆转了产前丙戊酸盐处理引起的社会交际缺陷(###p<0.001；与“vpa veh”对比的dunnett多重比较检验)。在0.003、0.03及0.1mg/kg的剂量下，卡利拉嗪的作用是统计学显著的(*,**p<0.05，<0.01；与“vpa veh”对比的dunnett测验)。veh veh意指产前载体处理合并行为测试之前载体处理。vpa veh动物接受产前vpa合并行为测试之前载体处理。vpa car/0.003、car/0.01、car/0.03及car/0.1组接受了产前vpa，接着分别接受了0.003、0.01、0.03及0.1mg/kg的卡利拉嗪。
[0101]
图2：反式
‑
n
‑
[4
‑
{2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯
‑
苯基)
‑
哌嗪
‑1‑
基]
‑
乙基}
‑
环己基]
‑
吗啉
‑4‑
甲酰胺盐酸盐(化合物2)的急性口服给药逆转了产前丙戊酸盐处理引起的社会交际缺陷(###p<0.001；与“vpa veh”对比的dunnett多重比较检验)。在两个研究的剂量下化合物2的作用均是统计学显著的(*p<0.05；与“vpa veh”对比的dunnett测验)。veh veh意指产前载体处理合并行为测试之前载体处理。vpa veh动物接受产前vpa合并行为测试之前载体处理。vpa comp2/0.002及comp2/0.2组接受了产前vpa，接着分别接受了0.002及0.2mg/kg的化合物2。
[0102]
图3：反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)的重复(每天治疗持续8天)口服给药逆转了产前丙戊酸盐处理引起的社交玩耍缺陷。在0.1mg/kg的剂量下，卡利拉嗪的作用是统计学显著的(*p<0.05；与“vpa veh”对比的dunnett测验)。veh veh意指产前载体处理合并行为测试之前载体处理。vpa veh动物接受产前vpa合并行为测试之前载体处理。vpa car/0.003、car/0.01、car/0.03及car/0.1组接受了产前vpa，接着分别接受了0.003、0.01、0.03及0.1mg/kg的卡利拉嗪。
[0103]
图4：反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)的重复(每天治疗持续9天)口服给药逆转了产前丙戊酸盐处理引起的活动过强。在0.1mg/kg的剂量下，卡利拉嗪的作用是统计学显著的(*p<0.05；与“vpa veh”对比的dunnett测验)。veh veh意指产前载体处理合并行为测试之前载体处理。vpa veh动物接受产前vpa合并行为测试之前载体处理。vpa car/0.003、car/0.01、car/0.03及car/0.1组接受了产前vpa，接着分别接受了0.003、0.01、0.03及0.1mg/kg的卡利拉嗪。
[0104]
图5：反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)的重复(每天治疗持续9天)口服给药逆转了产前丙戊酸盐处理引起的过度转圈行为。在卡利拉嗪的所有剂量，卡利拉嗪的作用皆是统计学显著的(*p<0.05；与“vpa veh”对比的dunnett测验)。veh veh意指产前载体处理合并行为测试之前载体处理。vpa veh动物接受产前vpa合并行为测试之前载体处理。vpa car/0.003、car/0.01、car/0.03及car/0.1组接受了产前vpa，接着分别接受了0.003、0.01、0.03及0.1mg/kg的卡利拉嗪。
[0105]
图6：反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)的重复(每天治疗持续8天)口服给药逆转了产前丙戊酸盐处理引起的社交偏好缺陷。在0.1mg/kg的剂量下，卡利拉嗪的作用是统计学显著的(*p<0.05；与“vpa veh”对比的dunnett测验)。veh veh意指产前载体处理合并行为测试之前载体处理。vpa veh动物接受产前vpa合并行为测试之前载体处理。vpa car/0.003、car/0.01、car/0.03及
car/0.1组接受了产前vpa，接着分别接受了0.003、0.01、0.03及0.1mg/kg的卡利拉嗪。
[0106]
以下实施例说明本发明而不限制其范围。
[0107]
实施例1
[0108]
产前丙戊酸盐处理的大鼠中对大鼠幼崽交流测试了反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)。母爱剥夺引起了大鼠幼崽超声波发声(usv)。卡利拉嗪的急性给药对大鼠幼崽交流的影响显示在图1中。所呈现的数据为每组13至24只大鼠幼崽的usv发声的平均数
±
sem(雄性和雌性大鼠幼崽皆包括在内)。在0.003、0.03及0.1mg/kg的剂量下，经口给予的卡利拉嗪增加且完全逆转了丙戊酸盐处理的后代中隔离引发的发声。因此，卡利拉嗪能够减少产前丙戊酸盐处理引起的社会交际缺陷。
[0109]
实施例2
[0110]
在产前丙戊酸盐处理的大鼠中对大鼠幼崽交流测试了反式
‑
n
‑
[4
‑
{2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯
‑
苯基)
‑
哌嗪
‑1‑
基]
‑
乙基}
‑
环己基]
‑
吗啉
‑4‑
甲酰胺盐酸盐(化合物2)。母爱剥夺引起了大鼠幼崽超声波发声(usv)。化合物2的急性给药对大鼠幼崽交流的影响显示在图2中。所呈现的数据为每组13至24只大鼠幼崽的usv发声的平均数
±
sem(雄性和雌性大鼠幼崽皆包括在内)。在所检查的每个剂量下，经口给予的化合物2增加且完全逆转了丙戊酸盐处理的后代中隔离引发的发声。因此，化合物2能够减轻产前丙戊酸盐处理引起的社会交际缺陷。
[0111]
实施例3
[0112]
在产前丙戊酸盐处理的大鼠中对大鼠的社交玩耍行为测试了反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)。卡利拉嗪的反复给药的效果显示在图3中。所呈现的数据为每组4对大鼠的玩耍所花费的平均时间
±
sem(仅测试了雄性后代)。经口施用的卡利拉嗪增加且尽管部分但明显逆转了产前丙戊酸盐处理引起的社交玩耍缺陷。因此，卡利拉嗪能够减轻产前丙戊酸盐处理引起的社会交际缺陷。
[0113]
实施例4
[0114]
在产前丙戊酸盐处理的大鼠中在开场试验中对大鼠运动测试了反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)。卡利拉嗪的反复给药的效果显示在图4中。所呈现的数据为每组8只大鼠移动的平均距离
±
sem(仅测试了雄性后代)。经口施用的卡利拉嗪减少且完全逆转了产前丙戊酸盐处理引起的过度运动。因此，卡利拉嗪能够减少产前丙戊酸盐处理引起的活动过强。
[0115]
实施例5
[0116]
在产前丙戊酸盐处理的大鼠中在开场试验中对大鼠刻板行为测试了反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)。卡利拉嗪的反复给药的效果显示在图5中。所呈现的数据为每组8只大鼠的360度转动的平均数
±
sem(仅测试了雄性后代)。经口施用的卡利拉嗪减少且完全逆转了产前丙戊酸盐处理引起的过度转圈行为。因此，卡利拉嗪能够减少产前丙戊酸盐处理引起的刻板行为。
[0117]
实施例6
[0118]
在产前丙戊酸盐处理的大鼠中在3室试验中对大鼠社交偏好行为测试了反式
‑
n
‑
[4
‑
[2
‑
[4
‑
(2,3
‑
二氯苯基)哌嗪
‑1‑
基]乙基]环己基]
‑
n’,n
’‑
二甲基脲盐酸盐(卡利拉嗪)。
卡利拉嗪的反复给药的效果显示在图6中。所呈现的数据为每组8只大鼠的社会探索的平均持续时间
±
sem(仅测试了雄性后代)。经口施用的卡利拉嗪增加且几乎完全逆转了产前丙戊酸盐处理引起的社交缺陷。因此，卡利拉嗪能够减轻产前丙戊酸盐处理引起的社会交际缺陷。