调节胃肠道病症中的WNT信号传导的制作方法

技术特征：

1.一种治疗患有胃肠道病症的个体的方法，其包含向所述个体施用工程化WNT信号传导调节剂。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述工程化WNT信号传导调节剂是工程化WNT激动剂。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述工程化WNT信号传导调节剂选自由以下组成的组：工程化多肽、含有至少一个表位结合结构域的工程化抗体、小分子、siRNA和反义核酸分子。

4.根据权利要求2所述的方法，其中所述工程化WNT激动剂包含结合到一种或多种FZD受体(FZD1-10)的一或多种结合组合物和结合到一或多种LRP受体(LRP5-6)的一或多种结合组合物。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述工程化WNT激动剂的所述结合组合物包含：

a)一种或多种结合到以下的结合组合物：

i)FZD5；

ii)FZD 8；

iii)FZD 1；

iv)FZD 2；

vi)FZD 7；

vi)FZD 5和FZD 8；

vii)FZD 1、FZD 2和FZD 7；

viii)FZD 1、FZD 2、FZD 7、FZD 5和FZD 8；

ix)FZD4；

x)FZD9；或

xi)FZD10；和

b)一种或多种结合到以下的结合组合物：

i)LRP5；

ii)LRP6；或

iii)LRP5/6。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述WNT激动剂包含结合FZD5和FZD8的一种或多种结合组合物，以及结合LRP5或LRP6的一种或多种结合组合物。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述WNT激动剂包含结合到FZD5和FZD8的结合组合物和结合LRP6的结合组合物。

8.根据权利要求5所述的方法，其中所述WNT激动剂包含SEQ ID NO:1、3、5、7、9、11或13的可变重链序列；以及SEQ ID NO:2、4、6、8、10、12或14的可变轻链序列。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述工程化WNT信号传导调节剂修复肠上皮和/或减少表达炎性细胞因子。

10.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述工程化WNT信号传导调节剂包含组织靶向分子。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述组织靶向分子是结合到组织特异性细胞表面抗原的抗体或其片段。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述组织靶向分子选自由以下组成的组：GPA33、CDH17和MUC-13多肽以及其功能片段或变体。

13.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述WNT信号传导调节剂与特异性结合炎性分子的结合组合物一起施用。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述特异性结合所述炎性分子的结合组合物是所述炎性分子的拮抗剂。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述炎性分子的所述拮抗剂是TNFα、IL-12、IL-12和IL-23，或IL-23的拮抗剂。

16.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述胃肠道疾病是炎性肠病。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述炎性肠病选自由以下组成的组：克罗恩氏病(CD)、伴有瘘管形成的CD和溃疡性结肠炎(UC)。

18.一种治疗患有胃肠道病症的个体的方法，其包含向所述个体施用组织特异性WNT信号增强分子。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述WNT信号增强分子是工程化分子，其包含：

a.与一种或多种E3泛素连接酶结合的第一结构域；和

b.与组织特异性受体结合的第二结构域。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述一种或多种E3泛素连接酶选自由以下组成的组：锌和环指蛋白3(ZNRF3)和环指蛋白43(RNF43)。

21.根据权利要求19所述的方法，其中所述第一结构域包含R-spondin(RSPO)多肽。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述RSPO多肽选自由以下组成的组：RSPO-1、RSPO-2、RSPO-3和RSPO-4。

23.根据权利要求21所述的方法，其中所述RSPO多肽包含第一弗林蛋白酶结构域和第二弗林蛋白酶结构域。

24.根据权利要求23所述的方法，其中所述第二弗林蛋白酶结构域是野生型的或突变为与含有富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体4-6(LGR4-6)具有较低的结合。

25.根据权利要求18所述的方法，其中所述WNT信号增强分子包含组织靶向分子。

26.根据权利要求25所述的方法，其中所述组织靶向分子是结合到组织特异性细胞表面抗原的抗体或其片段。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述组织靶向分子选自由以下组成的组：GPA33、CDH17和MUC-13多肽以及其功能片段和变体。

28.根据权利要求27所述的方法，其中所述WNT信号增强分子包含SEQ ID NO:17、20或23的重链序列；以及SEQ ID NO:16、19或22的轻链序列。

29.根据权利要求18至28中任一项所述的方法，其中所述WNT信号增强分子与特异性结合炎性分子的结合组合物一起施用。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述特异性结合所述炎性分子的结合组合物是所述炎性分子的拮抗剂。

31.根据权利要求30所述的方法，其中所述炎性分子的所述拮抗剂是TNFα、IL-12、IL-12和IL-23，或IL-23的拮抗剂。

32.根据权利要求18至28中任一项所述的方法，其中所述胃肠道疾病是炎性肠病。

33.根据权利要求32所述的方法，其中所述炎性肠病选自由以下组成的组：克罗恩氏病(CD)、伴有瘘管形成的CD和溃疡性结肠炎(UC)。

34.一种治疗患有胃肠道病症的个体的方法，所述方法包含向所述个体施用工程化WNT激动剂和工程化组织特异性WNT信号增强组合分子。

35.根据权利要求34所述的方法，其中所述组合分子包含：

a)选自由以下组成的组的工程化WNT激动剂：FZD 5结合组合物、FZD 8结合组合物、FZD 1结合组合物、FZD 2结合组合物、FZD7结合组合物、LRP5结合组合物、LRP6结合组合物和LRP5/6结合组合物；以及

b)所述工程化WNT信号增强分子，其包含结合到一种或多种E3泛素连接酶的第一结构域；和结合到组织特异性受体的第二结构域。

36.根据权利要求35所述的方法，其中所述E3泛素连接酶选自由以下组成的组：锌和环指蛋白3(ZNRF3)和环指蛋白43(RNF43)。

37.根据权利要求35所述的方法，其中所述第一结构域包含R-spondin(RSPO)多肽。

38.根据权利要求37所述的方法，其中所述RSPO多肽选自由以下组成的组：RSPO-1、RSPO-2、RSPO-3和RSPO-4。

39.根据权利要求37所述的方法，其中所述RSPO多肽包含第一弗林蛋白酶结构域和第二弗林蛋白酶结构域。

40.根据权利要求39所述的方法，其中所述第二弗林蛋白酶结构域是野生型的或突变为与含有富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体4-6(LGR4-6)具有较低的结合。

41.根据权利要求34所述的方法，其中所述组合分子并入有组织靶向分子。

42.根据权利要求41所述的方法，其中所述组织靶向分子是结合到组织特异性细胞表面抗原的抗体或其片段。

43.根据权利要求42所述的方法，其中所述组织靶向分子选自由以下组成的组：GPA33、CDH17和MUC-13多肽以及其功能片段和变体。

44.根据权利要求34至42中任一项所述的方法，其中所述组合分子与特异性结合炎性分子的结合组合物一起施用。

45.根据权利要求44所述的方法，其中对所述炎性分子具有特异性的结合组合物是所述炎性分子的拮抗剂。

46.根据权利要求45所述的方法，其中所述炎性分子的所述拮抗剂是TNFα、IL-12、IL-12和IL-23，或IL-23的拮抗剂。

47.根据权利要求34至42中任一项所述的方法，其中所述胃肠道疾病是炎性肠病。

48.根据权利要求47所述的方法，其中所述炎性肠病选自由以下组成的组：克罗恩氏病(CD)、伴有瘘管形成的CD和溃疡性结肠炎(UC)。

49.一种特异性结合卷曲受体5(FZD5)和卷曲受体8(FZD8)的多肽，其中所述多肽包含与SEQ ID NO:33-40中任一者中所示或由SEQ ID NO:33-40中任一者编码的序列具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的一个或多个序列。

50.根据权利要求49所述的多肽，其中所述多肽包含抗体或抗体结合片段。

51.根据权利要求50所述的多肽，其中所述抗体或抗体结合片段包含存在于以下序列组合中的任一者中的至少5个或所有6个CDR：SEQ ID NO:33和34；SEQ ID NO:35和36；SEQ ID NO:37和38；或SEQ ID NO:39和40。

52.根据权利要求50所述的多肽，其中所述多肽包含存在于以下序列组合中的任一者中的所述CDR中的六个：SEQ ID NO:33和34；SEQ ID NO:35和36；SEQ ID NO:37和38；或SEQ ID NO:39和40，其中所述CDR中的一个或多个CDR包含一个、两个或三个氨基酸修饰，任选地点突变、氨基酸缺失或氨基酸插入。

53.一种工程化WNT激动剂，其包含：

(a)结合到FZD5和FZD8的一个或多个结合结构域，其中所述一个或多个结合结构域中的至少一个包含根据权利要求49至52中任一项所述的多肽；和

(b)结合到LRP5、LRP6或LRP5与LRP6两者的一个或多个结合结构域。

54.一种工程化WNT激动剂，其包含与SEQ ID NO:7-14中的任一者具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的多肽序列。

55.根据权利要求54所述的工程化WNT激动剂，其包含：

(a)与SEQ ID NO:7具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的多肽序列和与SEQ ID NO:8具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的多肽序列；

(b)与SEQ ID NO:9具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的多肽序列和与SEQ ID NO:10具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的多肽序列；

(c)与SEQ ID NO:11具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的多肽序列和与SEQ ID NO:12具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的多肽序列；或

(d)与SEQ ID NO:13具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的多肽序列和与SEQ ID NO:14具有至少80％、至少90％或至少95％同源性的多肽序列。

56.一种组合分子，其包含：

a)根据权利要求53至55中任一项所述的工程化WNT激动剂；和

b)工程化WNT信号增强分子，其包含结合到一种或多种E3泛素连接酶的第一结构域；和结合到组织特异性受体的第二结构域。

57.一种药物组合物，其包含根据权利要求49至52中任一项所述的多肽、根据权利要求53至55中任一项所述的工程化WNT激动剂或根据权利要求56所述的组合分子。

58.一种治疗患有胃肠道病症的个体的方法，其包含向所述个体施用根据权利要求53至55中任一项所述的工程化WNT激动剂、根据权利要求56所述的组合分子或根据权利要求57所述的药物组合物。

59.根据权利要求58所述的方法，其中所述胃肠道病症是任选地选自由以下组成的组的炎性肠病：克罗恩氏病(CD)、伴有瘘管形成的CD和溃疡性结肠炎(UC)。

技术总结
本发明提供了用WNT信号传导路径的调节剂治疗胃肠道病症的方法。本发明还提供了给药方法和药物组合物。

技术研发人员：李阳;鲁成钢;海伦·巴里鲍特;叶文琛;谢力勤;王绎杰;孟维旭;
受保护的技术使用者：瑟罗泽恩公司;
技术研发日：2020.03.11
技术公布日：2021.11.05