硬脂酸在制备促进肿瘤免疫原性细胞死亡的药物中的应用

本发明涉及生物医药，特别涉及硬脂酸在制备促进肿瘤免疫原性细胞死亡的药物中的应用。

背景技术：

1、恶性肿瘤是严重威胁人类生命健康的重大疾病。化疗作为经典抗肿瘤治疗方式，仍广泛应用于多种实体瘤的临床治疗过程中。常用化疗药物包括铂类药物、蒽环类药物、紫杉类药物、抗代谢类药物以及拓扑异构酶抑制剂等，其主要通过诱导dna损伤、干扰细胞周期、抑制细胞增殖和激活细胞死亡信号等方式发挥抗肿瘤作用。除直接杀伤肿瘤细胞外，部分化疗药物还可改变肿瘤细胞死亡后的免疫学后果，从而影响抗肿瘤免疫反应及综合治疗效果。

2、肿瘤细胞死亡方式与抗肿瘤免疫应答密切相关。传统凋亡通常表现为细胞皱缩、核碎裂及凋亡小体形成，其细胞膜完整性在较长时间内相对保持，在多数情况下被认为是一种相对免疫沉默的细胞死亡形式。与之不同，免疫原性细胞死亡（immunogenic celldeath，icd）是一类能够促进机体抗肿瘤免疫应答的细胞死亡方式。发生免疫原性死亡的肿瘤细胞可在死亡过程中暴露或释放一系列免疫原性信号，例如钙网蛋白（calreticulin，crt）膜暴露、热休克蛋白hsp70/hsp90表面表达或释放、hmgb1释放、atp释放等。这些信号可促进树突状细胞对肿瘤抗原的摄取、加工和递呈，进而促进t细胞介导的抗肿瘤免疫反应。

3、近年来，化疗诱导免疫原性细胞死亡被认为是连接传统细胞毒性治疗与抗肿瘤免疫反应的重要环节。部分化疗药物在诱导肿瘤细胞死亡的同时，可促进损伤相关分子模式释放和肿瘤抗原暴露，从而增强免疫系统对肿瘤细胞的识别。该过程对于提高化疗本身的免疫效应，以及改善化疗联合免疫治疗的疗效具有重要意义。然而，不同肿瘤细胞对化疗诱导免疫原性死亡的反应存在明显差异，部分肿瘤细胞虽可被化疗药物杀伤，但其免疫原性信号暴露或释放不足，导致死亡后的免疫激活能力有限。

4、脂质代谢是影响肿瘤细胞应激反应、膜结构变化、死亡方式和免疫原性的重要因素。脂肪酸不仅是细胞膜磷脂、鞘脂及其他脂质分子的基础组成成分，还可作为代谢信号分子参与调节线粒体功能、氧化应激、内质网应激、膜流动性、细胞死亡执行及免疫相关信号。不同脂肪酸因碳链长度、饱和程度及代谢去向不同，对肿瘤细胞死亡方式和免疫反应可能产生不同影响。因此，特定脂肪酸能否作为化疗辅助干预因子，用于增强化疗诱导的肿瘤细胞免疫原性死亡，具有进一步研究和应用价值。

技术实现思路

1、本发明目的在于公开了硬脂酸在制备促进化疗药物诱导肿瘤免疫原性细胞死亡的药物中的应用，以解决现有方法中所存在的一个或多个技术问题，提供至少一种有益的选择或创造条件。

2、为实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现：

3、本发明第一方面在于提供硬脂酸在制备促进化疗药物诱导肿瘤细胞免疫原性死亡并增强抗肿瘤免疫应答的辅助药物中的应用。

4、在本发明第一方面的进一步实施方式中，所述辅助药物还包括药学上可接受的盐、酯、衍生物、前药、脂质体制剂、纳米递送制剂、白蛋白结合制剂或其他可在体内或体外提供硬脂酸活性成分的制剂形式。

5、在本发明第一方面的进一步实施方式中，所述化疗药物包括但不限于铂类药物、蒽环类药物、紫杉类药物、抗代谢类药物、拓扑异构酶抑制剂或其他可诱导肿瘤细胞死亡的化疗药物。

6、在本发明第一方面的进一步实施方式中，所述化疗药物包括顺铂、卡铂、奥沙利铂、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、培美曲塞、吉西他滨、5-氟尿嘧啶、依托泊苷或替尼泊苷中的一种或多种；优选地，所述化疗药物为顺铂或阿霉素；更优选地，所述化疗药物为顺铂。

7、本发明第一方面所述应用是指在化疗药物处理肿瘤细胞的基础上，通过给予硬脂酸，提高肿瘤细胞死亡过程中免疫原性信号的暴露或释放，使死亡肿瘤细胞更容易被抗原递呈细胞识别、吞噬、处理和递呈，从而促进后续抗肿瘤免疫应答。免疫原性死亡相关指标包括但不限于crt膜暴露增加、hmgb1释放增加、热休克蛋白hsp70和/或hsp90表面表达或释放增加、atp释放增加、肿瘤细胞膜完整性破坏增强、肿瘤抗原释放增加、树突状细胞吞噬肿瘤细胞能力增强、树突状细胞成熟增强或t细胞介导的抗肿瘤杀伤增强。

8、在本发明第一方面的进一步实施方式中，所述肿瘤包括但不限于肺癌、黑色素瘤、结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、膀胱癌、头颈部肿瘤或其他可接受化疗治疗的实体瘤。优选地，所述肿瘤为肺癌、黑色素瘤或结直肠癌。

9、经过实验验证，所述硬脂酸用于增强化疗处理后肿瘤细胞的免疫原性，而非单纯诱导普通脂毒性应激、普通凋亡或非特异性细胞损伤。所述硬脂酸与化疗药物联合后，可使化疗药物诱导的肿瘤细胞死亡伴随更明显的免疫原性信号暴露或释放，从而提高死亡肿瘤细胞对免疫系统的激活能力。

10、进一步地，所述增强抗肿瘤免疫应答包括但不限于促进树突状细胞成熟、增强抗原递呈、提高cd8+t细胞活化水平、增强t细胞对肿瘤细胞的杀伤能力、增加肿瘤组织中效应t细胞浸润、改善肿瘤免疫微环境，或为进一步联合免疫检查点抑制剂增强抗肿瘤疗效提供免疫学基础。

11、进一步地，所述树突状细胞成熟包括但不限于cd80、cd86、mhc-ii、cd40或其他成熟相关分子表达升高；所述t细胞活化包括但不限于cd69、cd25、ifn-γ、tnf-α、granzymeb、perforin或其他效应功能相关指标升高。

12、本发明第二方面在于提供一种用于促进化疗诱导肿瘤细胞免疫原性死亡的药物组合物。所述药物组合物包括硬脂酸和化疗药物。

13、在本发明第二方面的进一步实施方式中，所述化疗药物为顺铂。

14、在本发明第二方面的进一步实施方式中，所述药物组合物还包括免疫检查点抑制剂。

15、本发明第三方面在于提供一种用于增强化疗相关抗肿瘤免疫应答的联合用药产品，所述联合用药产品包括硬脂酸、化疗药物以及用于说明二者联合或序贯使用以促进肿瘤细胞免疫原性死亡并增强抗肿瘤免疫应答的说明书。

16、在本发明第三方面的进一步实施方式中，所述联合用药产品还可进一步包括免疫检查点抑制剂。

17、本发明第四方面在于提供一种用于评价硬脂酸促进化疗药物诱导肿瘤细胞免疫原性死亡效果的检测试剂或试剂盒，所述检测试剂或试剂盒包括用于检测crt、hmgb1、hsp70、hsp90、atp释放、树突状细胞成熟标志物、t细胞活化标志物或t细胞杀伤功能的试剂。

18、在本发明第四方面的进一步实施方式中，当肿瘤细胞经本发明第二方面所述药物组合物或本发明第三方面所述联合用药产品处理后，与单独化疗药物处理相比，出现crt膜暴露增加、hmgb1释放增加、hsp70和/或hsp90表面表达或释放增加、树突状细胞成熟和/或t细胞杀伤能力增强时，提示硬脂酸可促进化疗药物诱导肿瘤细胞免疫原性死亡并增强抗肿瘤免疫应答。

1.硬脂酸在制备促进化疗药物诱导肿瘤细胞免疫原性死亡并增强抗肿瘤免疫应答的辅助药物中的应用。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述辅助药物还包括药学上可接受的盐、酯、衍生物、前药、脂质体制剂、纳米递送制剂、白蛋白结合制剂或其他可在体内或体外提供硬脂酸活性成分的制剂形式。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述化疗药物包括铂类药物、蒽环类药物、紫杉类药物、抗代谢类药物、拓扑异构酶抑制剂。

4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述化疗药物包括顺铂、卡铂、奥沙利铂、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、培美曲塞、吉西他滨、5-氟尿嘧啶、依托泊苷或替尼泊苷中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述应用，其特征在于，所述化疗药物为顺铂或阿霉素。

6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述化疗药物为顺铂。

7.根据权利要求1至6任一项所述应用，其特征在于，所述肿瘤包括肺癌、黑色素瘤、结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、膀胱癌或头颈部肿瘤。

8.一种用于促进化疗诱导肿瘤细胞免疫原性死亡的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括硬脂酸和化疗药物。

9.根据权利要求8所述药物组合物，其特征在于，所述化疗药物为顺铂。

10.根据权利要求8或9所述药物组合物，其特征在于，还包括免疫检查点抑制剂。