枸橼酸森他喹冻干注射制剂及其制备方法与流程

本技术涉及一种稳定的冻干注射制剂，所述制剂包括森他喹或其水溶性盐，可以经由静脉内途径给药，并且适用于治疗低血容量性休克。

背景技术：

1、枸橼酸森他喹是一种白色结晶粉末，分子式为c28h33n3o7，分子量为523.58。枸橼酸森他喹的化学名称为2-[2-[4-(3-甲基苯基)-1-哌嗪基]乙基]喹啉柠檬酸盐（图1）。游离碱形式的森他喹不溶于水且可能不适合开发用于静脉内使用的制剂，而柠檬酸盐是水溶性的。

2、

3、图1：枸橼酸森他喹的化学结构

4、“枸橼酸森他喹”的粒径大小可显著影响其冻干注射制剂在制备过程中的溶解度。枸橼酸森他喹的粒径为5 µm至500 µm。具体地，10%的颗粒的粒径为5 µm-8 µm，50%的颗粒的粒径为100 µm至250 µm，并且90%的颗粒的粒径为200 µm-500 µm。

5、森他喹游离碱是不吸湿的结晶无水物。森他喹盐被开发，其具有不同的多晶型形式，其中a型是单meoh（甲醇）溶剂化物，并且当暴露于高于75% rh的湿度时会潮解，而b型是不吸湿的无水物。在水溶液（具有低、中和高水活性）中鉴定出稳定的晶体形式，并且在有机系统中，在不同的溶剂系统下进行热力学固体形式筛选，溶剂系统包括丙酮:水；dmso（二甲基亚砜）:水；meoh；ipac（乙酸异丙酯）；丙酮。基于热力学多晶型筛选结果，a型是meoh溶剂化物，并且它仅从meoh系统中获得；而b型是无水物，并且可从单meoh系统中获得。临界溶剂活性在室温和60℃下，于不同体系中测定临界溶剂活性，体系包括meoh/h2o、meoh/ipac、meoh/ipac/h2o和meoh/丙酮。当meoh活性在室温下等于或小于0.2并且在60℃下等于或小于0.4时，b型无水物更稳定。为了提高溶解度，选择了几个温度点，并且选择50℃作为最终的第一轮结晶温度；为了提高产率，设置了几个规模批次，并且获得了溶解度大约大于100mg/ml的无水物相。

6、研究显示，较低剂量的森他喹可提高失血动物的血压。该结果促使研究人员开展进一步的研究，证实森他喹确实是一种高效的低血容量性休克复苏剂。易溶于水的森他喹制剂非常适合用作低血容量性休克的复苏剂（reniguntala等人，2015年）。

7、与其他用于复苏的药剂相比，森他喹具有独特的作用模式。它可通过刺激2b肾上腺素能受体发挥作用，从而诱导静脉收缩，这增强了血液从静脉循环到心脏的回流。心室收缩增强使心脏血量增加，进而导致更多血液被泵出。此外，森他喹作用于2a肾上腺素能受体，使交感驱动力降低，并且减慢心率，从而使心脏充满更多血液。此外，森他喹不具有β肾上腺素能激动剂活性，因此降低了发生心律失常的风险（gulati等人，2019年和2021年）。森他喹是一种有前景的用于患者复苏的治疗剂，因为它可以将静脉的非应激血容量转化为应激血容量，从而增加心输出量，并且改善低血容量性休克状态下的血液循环。该作用机制使森他喹成为改善危重患者的血流动力学状态的合适候选物。

8、对于低血容量性休克的患者，应在1小时内以0.01 mg/kg体重的剂量静脉输注溶于100 ml生理盐水中的1.0 mg的枸橼酸森他喹冻干注射液。如果收缩压降至90 mmhg以下或持续低于90 mmhg，则应给药下一剂森他喹注射液，但不得在前一剂的4小时之前给药，并且每天的总剂量数应不超过3剂。必要时可继续给药森他喹注射液，给药时长为两日，但治疗初始48小时内最多给药6次。

9、监管局执行严格的标准来确保药物产品的质量。生产商需要提供证据证明他们的产品几乎不含杂质，任何杂质都在允许的限度内，并且每批可注射药物产品均符合这些标准。为了确定活性药物成分（api）或药物组合物的安全性和功效，需要进行几项测试，包括纯度测定、有关物质测试、含量均匀度测试、渗透压测试和水分含量测试。测定试验用于确定测试产品的纯度，以与已知纯度的标准品进行比较。有关物质测试用于定量产品中存在的所有杂质。最后，进行含量均匀度测试，以确保各批可注射产品含有均匀量的药物或api。评估api或药物制剂或组合物的优选方法通常是高效液相色谱法（hplc）。

10、reniguntala等人合成并表征了森他喹的柠檬酸盐，通过hplc测定了其纯度，并且评估了其对麻醉雄性sprague-dawley大鼠的各种心血管参数的影响。结果表明，枸橼酸森他喹的心血管活性高于森他喹游离碱，平均动脉压、脉压、心率、心输出量、搏出量和搏出功下降幅度更大，证实该结论。该研究的结论是，与森他喹相比，枸橼酸森他喹可能是一种更有效的心血管药剂（reniguntala等人，2015年）。

11、使用双盲、随机和安慰剂对照的方法在i期临床研究中评估森他喹的安全性和耐受性（ctri/2014/06/004647；nct02408731）。该研究涉及单次和多次递增剂量，并且表明了健康男性志愿者对药物耐受性良好，没有任何严重的不良事件。一些非严重不良事件发生在比治疗剂量（0.01 mg/kg）高10倍至15倍的剂量下，包括低血压、高乳酸、呼吸频率下降、口干和嗜睡，但它们是暂时的，并且无需任何干预即可消退（gulati等人，2016年；gulati等人，2020年）。

12、gulati等人（2021年）进行了临床试验（ctri/2019/01/017196，nct04045327），以评估森他喹在患有低血容量性休克的患者中的安全性和有效性。该研究招募了患有低血容量性休克的患者。对照组与森他喹组患者的人口统计学资料及基线生命体征具有可比性。该研究发现，与对照组相比，用森他喹进行复苏后，血乳酸和碱缺乏得到改善的患者数量显著增加。在复苏的前48小时期间，森他喹组的升压药使用较少，并且每搏输出量得到改善，如脉压显著增加所指示。此外，从复苏的1小时至4小时，森他喹组的休克指数显著降低。该研究显示，森他喹改善了急性呼吸窘迫综合征（ards）和多器官功能障碍综合征（mods），并且在森他喹组中观察到28天全因死亡率绝对降低8.8%。该研究表明，森他喹是治疗低血容量性休克的有效复苏剂（gulati等人，2021年）。

13、申请目的

14、本技术的主要目的是提供一种注射组合物的生产方法。所述注射组合物包括可在给药前使用稀释剂（如生理盐水（氯化钠注射液0.9% w/v）或注射用水）进行复溶的枸橼酸森他喹冻干注射液。

15、另一个目的是以在水溶液中表现出高溶解度特性的方式配制枸橼酸森他喹，从而使其适合肠胃外给药。

16、本技术的另一个目的是引入一种创新的方法来检测枸橼酸森他喹、其杂质和相关化合物，而不会遇到通常的困难。

技术实现思路

1、本技术涉及一种稳定无菌药物制剂，其包括1.0 mg的冻干枸橼酸森他喹注射液。该制剂由几种成分构成，包括乙二胺四乙酸钠（edta）、聚山梨醇酯80（吐温80）、甘露醇、磷酸钠、无水磷酸氢二钠、柠檬酸钠二水合物、柠檬酸和注射用水（wfi）。为了开发医用溶液，将药物制剂溶解在水性介质中。

2、制剂中包括的各种组分（如edta和吐温80）用作增溶剂。甘露醇（一种糖醇）充当填充剂，而无水磷酸氢二钠和柠檬酸钠用作缓冲剂并调节制剂的ph。柠檬酸用于调节ph，并且也可用作防腐剂。因此，该药物制剂经过精心设计，以实现最佳稳定性、功效和安全性。

3、该冻干制剂可含有适量的森他喹，尽管希望它含有治疗有效剂量的森他喹。具体地，优选的是，将枸橼酸森他喹的冻干品以 1.0 mg 的浓度加入制剂中。该冻干制剂中的森他喹主要以枸橼酸森他喹的形式存在。

4、本技术提供了稳定无菌药物产品的生产方法，这些药物产品含有森他喹，特别是游离碱或柠檬酸盐、乙酸盐、盐酸盐形式的森他喹，如“枸橼酸森他喹”或“乙酸森他喹”或“盐酸森他喹”，但不限于这些及其不同的多晶型形式（a型-单meoh溶剂化物，b型无水物，但不限于这些）。生产含有冻干森他喹的稳定的无菌药物产品的方法包括制备含有“枸橼酸森他喹或乙酸森他喹或盐酸森他喹”的组合物并将其冻干。生产含有冻干枸橼酸森他喹的稳定的无菌药物制剂的方法包括在水性溶剂中制备含有枸橼酸森他喹和赋形剂的液体组合物。然后将该组合物冷却，并在约-40℃的温度下冷冻至少120分钟至600分钟。随后，对冷冻混合物进行一次干燥，在此期间，施加真空以去除水性溶剂，同时将温度改变至-30℃至25℃的一次干燥温度，持续至少30分钟至1320分钟。在一次干燥之后，对第一中间体进行二次干燥，在此期间，施加真空以从中间体中去除水性溶剂。将温度改变至约40℃的第一二次干燥温度，持续至少30分钟，然后将中间体在相同温度下保持至少180分钟。然后在相同温度下再次继续二次干燥过程，持续另外120分钟。冻干循环总共耗时约93.5小时以冻干组合物，其中一次干燥耗时约76小时，并且二次干燥耗时约5.5小时以生产冻干药物制剂。总的来说，该方法提供了一种用于生产含有枸橼酸森他喹的稳定无菌药物产品的可靠且有效的方法。

5、另外，本技术还提供了该冻干制剂的制备方法，该方法可提高制剂的稳定性。本技术还提供了提高枸橼酸森他喹注射液溶解度的方法。

6、另外，本技术涵盖一种用于治疗有需要的患者中的医学病症的技术。该方法包括在10 ml氯化钠注射液（0.9% w/v）或注射用水中复溶后，向患者给药合适治疗量的上述药物制剂，然后在1小时内静脉输注100 ml生理盐水或任何其他用于复苏的液体，如晶体、胶体、血液产品，但不限于这些。

7、通过研究和实验，已开发并验证了一种新的且可重现的hplc分析方法，用于分析冻干制剂中的枸橼酸森他喹原料药。该方法特别适用于在制备过程中和储存过程中出现的药物产品和有关物质中药物物质（api）的鉴定和定量。这种创新的方法有助于提高枸橼酸森他喹的分析能力，这导致更好地了解药物的行为、性质和潜在应用。该方法采用了由一种或多种液体组分的流动相，并且这些液体的比例被修改至预定的梯度。

8、本技术的另一个方面涉及一种用于评估枸橼酸森他喹样品或含有枸橼酸森他喹的药物剂型中的杂质的浓度的技术。该技术包括分析样品以检测是否存在本技术中描述的任何化合物（杂质）a和b。本技术的另一个方面提供了一种通过利用hplc技术检测和分析枸橼酸森他喹中的杂质来鉴定化合物（有关物质或杂质）a和b的方法。

9、本技术的其他方面包括提供两种流动相，称为流动相a和流动相b。流动相a由25mm的正磷酸二氢钾（kh2po4）构成并包括ph调节剂，或者是1 m的氢氧化钾（koh）溶液，或者是稀释的正磷酸溶液（opa，85%）。流动相a的ph保持在3.0。流动相b选自一组溶剂，包括甲醇、乙腈、异丙醇、丙醇或它们的混合物。其中，乙腈是首选，作为替代品，可以选择甲醇或其共混物。

10、本技术涉及一种hplc技术，该技术使用具有用于有关物质的梯度编程策略的流动相。该程序从由流动相a和流动相b组分的流动相开始。梯度程序的全面细节描述于具体实施方式中。

11、在替代方面，根据本技术的hplc技术在单个分析程序内熟练地鉴定和测量所有杂质，包括但不限于化合物a，即1-(3-甲基苯基)哌嗪，和化合物b，特别是2-乙烯基喹啉。

12、本技术涉及一种测试枸橼酸森他喹的纯度的方法，其中待测试的样品可以由(a)森他喹api(b)森他喹制剂或(c)森他喹的盐形式或(d)森他喹盐的制剂组分。理想地，使用该方法测试的样品品质优良，可用于制备药物组合物。