一种丹蒲颗粒指纹图谱的构建方法

本发明涉及药物分析，特别是涉及一种丹蒲颗粒指纹图谱的构建方法。

背景技术：

1、慢性前列腺炎是泌尿男科常见难治性疾病，发病率高且易复发，严重影响患者生活质量。丹蒲颗粒（公开于专利cn102755563a），由丹参、败酱草、生薏苡仁、赤芍、蒲公英、枸杞子配伍制成，具活血化瘀、解毒通淋之效，临床用于气滞血瘀型慢性前列腺炎，可改善少腹会阴疼痛、尿频尿白等症，药效学证实其抗炎、抑菌及修复前列腺病理损伤作用，临床疗效确切、安全性良好。丹蒲颗粒为中药复方制剂，化学成分复杂，含黄酮、酚酸、蒽醌、多糖等多类活性成分，质量受原料产地、采收加工及生产工艺影响显著。但现行中药复方制剂的质量标准多针对单一指标成分定量，难以全面反映整体质量与药效关联性，制约制剂标准化、产业化及国际化。

2、中药指纹图谱是国际公认的中药整体质量控制核心技术，通过色谱/光谱分离检测，获取能表征化学特征的图谱，可全面反映成分种类与数量，鉴别真伪、评价批次一致性、关联药效物质基础，为中药质量控制提供科学手段。但目前，丹蒲颗粒相关研究集中于药效、临床及制备工艺，尚无指纹图谱构建与整体质量控制方法报道，缺乏能全面表征其内在质量的标准图谱，难以有效控制批次间质量差异，影响临床疗效稳定性与用药安全性。因此，建立丹蒲颗粒专属指纹图谱，明确特征峰归属与质控参数，对完善质量标准、保障制剂稳定、推动现代化应用具有重要现实意义。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种丹蒲颗粒指纹图谱的构建方法，以解决上述现有技术存在的问题。本发明针对丹蒲颗粒构建了hplc指纹图谱，该图谱中包含11个样品共有特征峰，包括没食子酸、原儿茶醛、芍药苷、菊苣酸、木犀草苷、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸b，全面涵盖丹蒲颗粒中的主要活性成分，能够完整、准确地呈现丹蒲颗粒的化学物质基础，为质量评价提供丰富、可靠的信息。

2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

3、本发明提供一种丹蒲颗粒指纹图谱的构建方法，包括如下步骤：

4、（1）制备供试品溶液和对照品溶液；

5、所述供试品溶液的制备方法为：取丹蒲颗粒，加入甲醇水溶液后，经超声处理，得到所述供试品溶液；

6、（2）对所述供试品溶液和所述对照品溶液进行hplc色谱分析，得到由样品共有特征峰构成的丹蒲颗粒指纹图谱；

7、所述hplc色谱分析的条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.05%磷酸水溶液为流动相a，以乙腈为流动相b；洗脱程序为：0-12min，2%-6%b；12-25min，6%-12%b；25-35min，12%-15%b；35-45min，15%-20%b；45-47min，20%-21%b；47-57min，21%-22%b；57-65min，22%-23%b；65-75min，23%-39%b。

8、进一步地，所述丹蒲颗粒由丹参、蒲公英、赤芍、北败酱、薏苡仁和枸杞子制备而成。

9、进一步地，所述供试品溶液的制备方法为：精密称取丹蒲颗粒0.20g，加入70%甲醇水溶液20ml后，在200w、53khz条件下超声处理30分钟，经补重、过滤后，得到所述供试品溶液。

10、进一步地，所述hplc色谱分析的流速为0.4ml/min，检测波长为220nm，柱温为35℃，进样体积为10μl。

11、进一步地，所述对照品溶液包括以70%甲醇水溶液为溶剂制备得到的没食子酸溶液、原儿茶醛溶液、芍药苷溶液、菊苣酸溶液、木犀草苷溶液、迷迭香酸溶液、紫草酸溶液和丹酚酸b溶液。

12、进一步地，所述丹蒲颗粒指纹图谱中包含11个样品共有特征峰，其中，1号峰为没食子酸，4号峰为原儿茶醛，5号峰为芍药苷，6号峰为菊苣酸，7号峰为木犀草苷，9号峰为迷迭香酸，10号峰为紫草酸，11号峰为丹酚酸b。

13、本发明还提供上述构建方法构建得到的丹蒲颗粒指纹图谱在丹蒲颗粒生产过程质量控制、成品质量评价、批次稳定性分析及真伪鉴别中的应用。

14、本发明公开了以下技术效果：

15、本发明针对丹蒲颗粒构建了hplc指纹图谱，该图谱中包含11个样品共有特征峰，包括没食子酸、原儿茶醛、芍药苷、菊苣酸、木犀草苷、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸b，全面涵盖丹蒲颗粒中的主要活性成分，能够完整、准确地呈现丹蒲颗粒的化学物质基础，为质量评价提供丰富、可靠的信息。利用本发明的构建方法构建的多批次丹蒲颗粒样品的指纹图谱相似度均大于0.9，表明该指纹图谱的构建方法稳定性好，能够用于多批次丹蒲颗粒的质量评价和质量控制，为丹蒲颗粒的工厂化生产流程建立提供了坚实的技术支撑。

1.一种丹蒲颗粒指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述丹蒲颗粒由丹参、蒲公英、赤芍、北败酱、薏苡仁和枸杞子制备而成。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为：精密称取丹蒲颗粒0.20g，加入70%甲醇水溶液20ml后，在200w、53khz条件下超声处理30分钟，经补重、过滤后，得到所述供试品溶液。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述hplc色谱分析的流速为0.4ml/min，检测波长为220nm，柱温为35℃，进样体积为10μl。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液包括以70%甲醇水溶液为溶剂制备得到的没食子酸溶液、原儿茶醛溶液、芍药苷溶液、菊苣酸溶液、木犀草苷溶液、迷迭香酸溶液、紫草酸溶液和丹酚酸b溶液。

6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述丹蒲颗粒指纹图谱中包含11个样品共有特征峰，其中，1号峰为没食子酸，4号峰为原儿茶醛，5号峰为芍药苷，6号峰为菊苣酸，7号峰为木犀草苷，9号峰为迷迭香酸，10号峰为紫草酸，11号峰为丹酚酸b。

7.权利要求1-6任一项所述的构建方法构建得到的丹蒲颗粒指纹图谱在丹蒲颗粒生产过程质量控制、成品质量评价、批次稳定性分析及真伪鉴别中的应用。