细胞的制作方法

技术特征：
1.效应免疫细胞，其表达特异性结合靶免疫细胞的抗原识别受体的细胞表面受体或受体复合物，所述效应免疫细胞是工程化的，使得当所述效应免疫细胞和所述靶免疫细胞之间形成突触时，所述效应免疫细胞杀伤所述靶免疫细胞的能力大于所述靶免疫细胞杀伤所述效应免疫细胞的能力。2.根据权利要求1的效应免疫细胞，其是工程化的以对免疫抑制剂有抗性。3.根据权利要求2的效应免疫细胞，其是工程化的以对一种或多种钙调磷酸酶抑制剂有抗性。4.根据权利要求3的效应免疫细胞，其表达：钙调磷酸酶a，其包含参照如seq id no.65所示的突变t351e和l354a；钙调磷酸酶a，其包含参照如seq id no.65所示的突变v314r和y341f；或钙调磷酸酶b，其包含参照如seq id no.66所示的突变l124t和k-125-la-ins。5.根据权利要求2的效应免疫细胞，其是工程化的以对雷帕霉素有抗性。6.根据权利要求2的效应免疫细胞，其表达显性负性的c末端src激酶(dncsk)。7.根据权利要求1的效应免疫细胞，其是工程化的以表达或过表达免疫抑制分子或包含免疫抑制分子的细胞外结构域的融合蛋白。8.根据权利要求7的效应免疫细胞，其中所述免疫抑制分子结合：pd-1、lag3、tim-3、tigit、btla、vista、ceacam1-r、kir2dl4、b7-h3或b7-h4。9.根据权利要求7的效应免疫细胞，其中所述免疫抑制分子选自：pd-l1、pd-l2、hvem、cd155、vsig-3、半乳糖凝集素-9、hla-g、ceacam-1、lsectin、fgl1、b7-h3、b7-h4。10.根据权利要求7至9中任一项的效应免疫细胞，其是工程化的以表达包含免疫抑制分子的细胞外结构域和膜定位结构域的融合蛋白。11.根据权利要求7至9中任一项的效应免疫细胞，其是工程化的以表达包含免疫抑制分子的细胞外结构域和共刺激胞内域的融合蛋白。12.根据权利要求11的效应免疫细胞，其中所述共刺激胞内域包含选自以下的一个或多个胞内域：cd28、icos、ctla4、41bb、cd27、cd30、ox-40、taci、cd2、cd27和gitr。13.根据前述权利要求中任一项的效应免疫细胞，其中所述抗原识别受体是t细胞受体(tcr)或激活杀伤细胞免疫球蛋白样受体(kar)。14.根据前述权利要求中任一项的效应免疫细胞，其中所述细胞表面受体是嵌合抗原受体(car)并且所述抗原识别受体是t细胞受体(tcr)。15.根据权利要求14的效应免疫细胞，其中所述car结合tcrβ恒定区1(trbc1)或trbc2。16.根据权利要求1至12中任一项的效应免疫细胞，其中所述细胞表面受体复合物是工程化的mhc i类或mhc ii类复合物。17.根据权利要求16的效应免疫细胞，其中所述细胞表面受体复合物包含：与细胞内信号传导结构域连接的mhc i类多肽、mhc ii类多肽或β-2微球蛋白。18.根据权利要求17的效应免疫细胞，其中所述细胞表面受体复合物是工程化的mhc i类复合物，其包含具有以下结构的分子：肽-l-b2m-endo其中：“肽”是结合mhc i类α链的肽结合沟的肽；
“
l”是接头；“b2m”是β-2微球蛋白；并且“endo”是细胞内信号传导结构域。19.根据权利要求16的效应免疫细胞，其包含：与tcr/cd3复合物的组分连接的mhc i类多肽、mhc ii类多肽或β-2微球蛋白。20.根据权利要求19的效应免疫细胞，其包含：经由接头肽与cd3-ζ、cd3-ε、cd3-γ或cd3-δ连接的mhc i类多肽、mhc ii类多肽或β-2微球蛋白。21.根据权利要求16的效应免疫细胞，其中所述效应免疫细胞是工程化的以表达双特异性多肽，所述双特异性多肽包含：(i)结合mhc i类多肽、mhcii类多肽或β-2微球蛋白的第一结合结构域；和(ii)与tcr/cd3复合物的组分结合的第二结合结构域。22.根据权利要求16的效应免疫细胞，其包含与细胞内信号传导结构域连接的cd79α和/或cd79β链。23.根据权利要求16的效应免疫细胞，其包含工程化的多肽，所述工程化的多肽包含与细胞内信号传导结构域连接的结合mhc i类多肽或mhc ii类多肽的结合结构域。24.根据权利要求16所述的效应免疫细胞，其包含工程化的多肽，所述工程化的多肽包含与细胞内信号传导结构域连接的cd4的mhc ii类结合结构域或cd8的mhc i类结合结构域。25.核酸构建体，其包含：(i)第一核酸序列，其编码如前述权利要求中任一项所定义的细胞表面受体或细胞表面受体复合物的部分；和(ii)第二核酸序列，其当在细胞中表达时，赋予该细胞以对免疫抑制剂的抗性；和/或(iii)第三核酸序列，其编码免疫抑制分子或包含免疫抑制分子的细胞外结构域的融合蛋白。26.载体，其包含根据权利要求25的核酸构建体。27.载体试剂盒，其包含：(i)第一载体，其包含编码如权利要求1至24中任一项所定义的细胞表面受体或细胞表面受体复合物的部分的核酸序列；和(ii)第二载体，其包含当在细胞中表达时，赋予该细胞以对免疫抑制剂的抗性的核酸序列；和/或(iii)第三载体，其包含编码免疫抑制分子或包含免疫抑制分子的细胞外结构域的融合蛋白的核酸序列。28.药物组合物，其包含多个根据权利要求1至24中任一项的效应免疫细胞。29.根据权利要求28的药物组合物，其用于治疗疾病。30.用于治疗疾病的方法，其包括向受试者施用根据权利要求29的药物组合物的步骤。31.根据权利要求30的方法，其包括以下步骤：(i)向受试者施用药物组合物，所述药物组合物包含多个根据权利要求1的效应免疫细胞，所述效应免疫细胞是工程化的以对免疫抑制剂有抗性；和(ii)向所述受试者施用所述免疫抑制剂。32.多个根据权利要求1至24中任一项的效应免疫细胞在制备用于治疗疾病的药物中
的用途。33.根据权利要求29使用的药物组合物、根据权利要求30或31的方法或根据权利要求32的用途，其中所述疾病是癌症。34.制备根据权利要求1至24中任一项的效应免疫细胞的方法，其包括将根据权利要求25的核酸构建体、根据权利要求26的载体或根据权利要求27的载体试剂盒离体引入细胞的步骤。35.从免疫细胞群中耗竭同种异体反应性免疫细胞的方法，其包括使所述免疫细胞群与多个根据权利要求16至24中任一项的效应免疫细胞接触的步骤。36.治疗或预防同种异体移植后移植物排斥的方法，其包括将来源于供体受试者的多个效应免疫细胞施用给受体受试者以进行所述同种异体移植的步骤，其中所述多个效应免疫细胞表达如权利要求16至24中任一项所定义的工程化的mhc i类或mhc ii类复合物。37.治疗或预防与同种异体移植相关的移植物抗宿主病(gvhd)的方法，其包括使同种异体移植物与施用多个根据权利要求16至24中任一项的效应免疫细胞接触的步骤。38.根据权利要求36或37的方法，其中所述同种异体移植包括同种异体免疫细胞的过继转移。39.同种异体移植物，其已通过根据权利要求35的方法耗竭同种异体反应性免疫细胞。

技术总结
提供了效应免疫细胞，其表达特异性结合靶免疫细胞的抗原识别受体的细胞表面受体或受体复合物，该效应免疫细胞是工程化的，使得当效应免疫细胞和靶免疫细胞之间形成突触时，效应免疫细胞杀伤靶免疫细胞的能力大于靶免疫细胞杀伤效应免疫细胞的能力。还提供了此类细胞在治疗癌症、预防同种异体移植物排斥和GVHD的方法中的用途。的方法中的用途。


技术研发人员：S.科多巴 M.普勒 V.巴尔丹 A.尼科尔森
受保护的技术使用者：奥托路斯有限公司
技术研发日：2021.04.08
技术公布日：2022/11/15