癃清制剂指纹图谱的构建方法及其应用与流程

技术特征：
1.癃清制剂指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括采用高效液相色谱分析待测样品，得到癃清制剂指纹图谱；所述癃清制剂指纹图谱包括检测波长230
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2nm条件下的指纹图谱，检测波长274
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2nm条件下的指纹图谱，检测波长327
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2nm条件下的指纹图谱和检测波长345
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2nm条件下的指纹图谱；高效液相色谱的分析条件为：流动相：流动相a为乙腈，流动相b为甲酸水溶液；按体积百分数计，梯度洗脱程序为：0min，流动相a 5
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2％，流动相b 95
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2％；50min，流动相a 45
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5％，流动相b 55
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5％；60min，流动相a 100％，流动相b 0％。2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述癃清制剂为癃清片或癃清胶囊，优选为癃清片。3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述癃清制剂指纹图谱由检测波长230nm的指纹图谱，检测波长274nm的指纹图谱，检测波长327nm的指纹图谱和检测波长345nm的指纹图谱组成。4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，按体积百分数计，梯度洗脱程序为：0min，流动相a 5
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1％，流动相b 95
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1％；50min，流动相a 45
±
1％，流动相b 55
±
1％；60min，流动相a 100％，流动相b 0％；优选地，按体积百分数计，梯度洗脱程序为：0min，流动相a 5％，流动相b 95％；50min，流动相a 45％，流动相b 55％；60min，流动相a 100％，流动相b 0％；优选地，按照体积百分数计，流动相b为0.1％～0.2％甲酸溶液；优选地，按照体积百分数计，流动相b为0.1％甲酸溶液；优选地，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；优选地，色谱柱为aglient extend c18 250mm
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4.6mm，5μm。5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述待测样品包括供试品溶液，所述供试品溶液按照如下方法制得：将癃清制剂制成粉末，经提取溶剂提取后，使用所述提取溶剂补足失重，然后取滤液作为供试品溶液；优选地，所述提取溶剂为乙醇水溶液；优选地，以体积百分比计，所述提取溶剂为30％～60％的乙醇水溶液，优选为60％的乙醇水溶液；优选地，所述提取采用超声处理或加热回流方式提取，优选采用超声处理方式提取。6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述待测样品还包括对照品溶液，所述对照品溶液包括分别含有如下成分的溶液：绿原酸、芍药苷、盐酸药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱和丹皮酚；优选地，绿原酸对照物溶液的浓度为0.1800～0.2100mg/ml，优选为0.2016mg/ml；
优选地，芍药苷对照物溶液的浓度为0.4000～0.5050mg/ml，优选为0.5020mg/ml；优选地，盐酸药根碱对照物溶液的浓度为0.2200～0.2500mg/ml，优选为0.2495mg/ml；优选地，盐酸黄连碱对照物溶液的浓度为0.1900～0.2100mg/ml，优选为0.2060mg/ml；优选地，盐酸巴马汀对照物溶液的浓度为0.3000～0.3600mg/ml，优选为0.3594mg/ml；优选地，盐酸小檗碱对照物溶液的浓度为0.3700～0.4500mg/ml，优选为0.4400mg/ml；优选地，丹皮酚对照物溶液的浓度为0.4500～0.4700mg/ml，优选为0.4672mg/ml。7.根据权利要求1-6任一项所述的构建方法，其特征在于，采用高效液相色谱分析待测样品，待测样品包括供试品溶液和对照品溶液；所述供试品溶液按照如下方法制得：将癃清制剂制成粉末，加入60％的乙醇水溶液，超声提取，使用60％的乙醇水溶液补足失重，然后取滤液作为供试品溶液；所述对照品溶液包括：浓度为0.2016mg/ml的绿原酸对照物溶液，浓度为0.5020mg/ml的芍药苷对照物溶液，浓度为0.2495mg/ml的盐酸药根碱对照物溶液，浓度为0.2060mg/ml的盐酸黄连碱对照物溶液，浓度为0.3594mg/ml的盐酸巴马汀对照物溶液，浓度为0.4400mg/ml的盐酸小檗碱对照物溶液，浓度为0.4672mg/ml的丹皮酚对照物溶液；所述对照品溶液以甲醇作为溶剂；所述高效液相色谱的分析条件为：流动相a为乙腈，流动相b为0.1％甲酸溶液；按体积百分数计，梯度洗脱程序为：0min，流动相a 5％，流动相b 95％；50min，流动相a 45％，流动相b 55％；60min，流动相a 100％，流动相b 0％；色谱柱为aglient extend c18 250mm
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4.6mm，5μm；检测波长分别为230nm、274nm、327nm和345nm。8.根据权利要求1-6任一项所述的构建方法，其特征在于，采用高效液相色谱法对供试品溶液和对照品溶液进行测定，依据对照品溶液高效液相色谱图谱中的色谱峰对供试品溶液高效液相色谱图谱中的主要色谱峰进行确认并确定参照物峰，得到主要色谱峰相对参照物峰的相对保留时间；优选地，所述构建方法还包括提供不同批次的癃清制剂的指纹图谱，标定共有峰并合成对照指纹图谱。9.根据权利要求8所述的构建方法，其特征在于，所述对照指纹图谱由检测波长230nm的对照指纹图谱，检测波长274nm的对照指纹图谱，检测波长327nm的对照指纹图谱和检测波长345nm的对照指纹图谱组成；所述对照指纹图谱中以盐酸小檗碱峰为参照物峰，共有峰的相对保留时间rsd不大于1％；检测波长230nm的对照指纹图谱包含19个共有峰，峰16为参照物峰，共有峰的平均相对保留时间如下：峰1:0.345；峰2：0.353；峰3：0.370；峰4：0.499；峰5：0.511；峰6：0.559；峰7：0.644；峰8：0.655；峰9：0.720；峰10：0.734；峰11：0.855；峰12：0.864；峰13：0.873；峰14：0.885；峰15：0.979；峰16：1.000；峰17：1.060；峰18：1.234；峰19：1.513；检测波长274nm的对照指纹图谱包含16个共有峰，峰15为参照物峰，共有峰的平均相对保留时间如下：峰1:0.124；峰2：0.251；峰3：0.345；峰4：0.371；峰5：0.499；峰6：0.553；峰7：
0.560；峰8：0.644；峰9：0.655；峰10：0.855；峰11：0.864；峰12：0.873；峰13：0.885；峰14：0.979；峰15：1.000；峰16：1.234；检测波长327nm的对照指纹图谱包含18共有峰，峰17为参照物峰，共有峰的平均相对保留时间如下：峰1:0.251；峰2：0.323；峰3：0.345；峰4：0.371；峰5：0.405；峰6：0.499；峰7：0.644；峰8：0.683；峰9：0.711；峰10：0.720；峰11：0.757；峰12：0.855；峰13：0.864；峰14：0.873；峰15：0.885；峰16：0.979；峰17：1.000；峰18：1.234；检测波长345nm的对照指纹图谱包含16共有峰，峰15为参照物峰，共有峰的平均相对保留时间如下：峰1:0.251；峰2：0.323；峰3：0.345；峰4：0.371；峰5：0.499；峰6：0.644；峰7：0.683；峰8：0.710；峰9：0.720；峰10：0.855；峰11：0.864；峰12：0.873；峰13：0.885；峰14：0.979；峰15：1.000；峰16：1.234。10.权利要求1-9任一项所述的癃清制剂的指纹图谱的构建方法在评价癃清制剂中的应用；优选地，所述癃清制剂为癃清片或癃清胶囊；优选地，所述癃清制剂为癃清片；优选地，将待评价癃清制剂的指纹图谱与对照指纹图谱进行比较，计算待评价癃清制剂的指纹图谱与对照指纹图谱间的相似度。

技术总结
本发明提供了一种癃清制剂指纹图谱的构建方法及其应用，涉及药物分析技术领域。该构建方法包括建立癃清制剂230


技术研发人员：闫晓楠 吴潇 周建宇 李萍 陈云霞 谷翠丽
受保护的技术使用者：津药达仁堂集团股份有限公司中药研究院
技术研发日：2022.10.26
技术公布日：2023/2/3