定量包含非离子表面活性剂和多肽的组合物中非离子表面活性剂的层析方法与流程

技术特征：
1.一种用于定量包含非离子表面活性剂和多肽的组合物中的非离子表面活性剂的方法，其中所述方法包括以下步骤:a)将所述组合物施加到混合模式阳离子交换层析材料中，其中将所述组合物加样到包含流动相a和流动相b的溶液中的层析材料上，其中流动相a包含氢氧化铵的水溶液且流动相b包含氢氧化铵的有机溶剂溶液；b)用包含流动相a和流动相b的溶液从所述混合模式阳离子交换层析材料中洗脱所述多肽，其中与步骤a)相比，流动相b与流动相a的比例增加；c)用包含流动相a和流动相b的溶液从所述层析材料中洗脱非离子表面活性剂，其中与步骤c)相比，流动相b与流动相a的比例增加；d)定量所述非离子表面活性剂。2.权利要求1的方法，其中流动相b的有机溶剂是甲醇。3.权利要求1或2的方法，其中步骤a)中流动相b与流动相a的比例为10:90。4.权利要求1-3中任一项的方法，其中在步骤b)中流动相b与流动相a的比例增加至45:55。5.权利要求1-4中任一项的方法，其中在步骤c)中流动相b与流动相a的比例增加至100:0。6.权利要求1-5中任一项的方法，其中流动相a包含2％的氢氧化铵水溶液。7.权利要求1-6中任一项的方法，其中流动相b包含2％的氢氧化铵的甲醇溶液。8.权利要求1-7中任一项的方法，其中层析的流速为1.4ml/分钟。9.权利要求8的方法，其中步骤b)在层析开始后1分钟开始，并在层析开始后4.4分钟结束。10.权利要求8或9的方法，其中步骤c)在层析开始后4.5分钟开始，并在层析开始后7.6分钟结束。11.权利要求1-10中任一项的方法，其中所述非离子表面活性剂是聚山梨醇酯。12.权利要求11的方法，其中所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。13.权利要求11或12的方法，其中所述组合物中聚山梨醇酯的浓度在0.001％至1.0％(w/v)的范围内。14.权利要求1的方法，其中流动相b的有机溶剂是乙腈。15.权利要求14的方法，其中步骤a)中流动相b与流动相a的比例为10:90。16.权利要求14或15的方法，其中步骤b)中流动相b与流动相a的比例增加至40:60。17.权利要求14-16中任一项的方法，其中步骤c)中流动相b与流动相a的比例增加至100:0。18.权利要求14-17中任一项的方法，其中流动相a包含2％的氢氧化铵在水中或在43％甲醇中的溶液。19.权利要求14-18中任一项的方法，其中流动相b包含2％氢氧化铵的乙腈溶液。20.权利要求14-19中任一项所述的方法，其中所述非离子表面活性剂是泊洛沙姆。21.权利要求20的方法，其中所述泊洛沙姆是泊洛沙姆p188。22.权利要求20或21的方法，其中所述组合物中泊洛沙姆的浓度在0.001％至1.0％(w/v)的范围内。
23.权利要求1-22中任一项的方法，其中所述组合物还包含n-乙酰色氨酸和/或甲硫氨酸。24.权利要求23的方法，其中所述组合物中n-乙酰色氨酸的浓度范围为0.1mm至10mm。25.权利要求23的方法，其中所述组合物中甲硫氨酸的浓度范围为0.1mm至100mm。26.权利要求1-25中任一项的方法，其中所述组合物中的多肽浓度为1mg/ml至250mg/ml。27.权利要求1-26中任一项的方法，其中所述制剂具有4.5至7.5的ph。28.权利要求1-27中任一项的方法，其中所述组合物还包含一种或多种选自稳定剂，缓冲剂和张度剂的赋形剂。29.权利要求1-28中任一项的方法，其中所述组合物是适合施用于受试者的药物制剂。30.权利要求1-29中任一项的方法，其中所述多肽是治疗性多肽。31.权利要求30的方法，其中所述治疗性多肽是融合蛋白，多克隆抗体，单克隆抗体，人源化抗体，人抗体，嵌合抗体，多特异性抗体，糖工程化抗体，抗体片段，抗体药物缀合物，thiomab
tm
，thiomab
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药物缀合物。32.权利要求1-31中任一项的方法，其中所述混合模式阳离子交换层析材料包含反相强阳离子交换聚合物。33.权利要求1-32中任一项的方法，其中所述混合模式阳离子交换层析材料包含磺酸部分。34.权利要求1-33中任一项所述的方法，其中所述混合模式阳离子交换层析材料包含固相支持体。35.权利要求1-34中任一项所述的方法，其中所述混合模式阳离子交换层析材料包含在柱中。36.权利要求1-35中任一项的方法，其中所述混合模式阳离子交换层析材料是高效液相层析(hplc)材料。37.权利要求1-36中任一项所述的方法，其中所述混合模式阳离子交换层析材料是mcx层析材料。38.权利要求1-37中任一项所述的方法，其中所述非离子去污剂通过蒸发光散射(elsd)或通过使用带电气溶胶检测器(cad)来定量。

技术总结
本发明涉及定量包含非离子表面活性剂和多肽的组合物中非离子表面活性剂的层析方法。具体而言，本发明提供了用于定量包含多肽和非离子表面活性剂的组合物中的非离子表面活性剂的方法，其中定量表现出非离子表面活性剂与所述多肽之间的降低的干扰。还提供了方法，其中组合物还包含N-乙酰色氨酸，并且定量表现出非离子表面活性剂、所述多肽和N-乙酰色氨酸之间降低的干扰。间降低的干扰。间降低的干扰。


技术研发人员：M
受保护的技术使用者：豪夫迈
技术研发日：2017.08.14
技术公布日：2023/1/13