一种抗凝血药物关键中间体的制备方法与流程

1.本发明属于药物制备技术领域，涉及一种抗凝血药物关键中间体的制备方法。


背景技术：

2.达比加群酯，化学名称为3-[[[2-[[[4-[[[(己氧基)羰基]氨基]亚氨甲基]苯基]氨基]甲基]-1-甲基-1h-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯，化学式为c
34h41
n7o5，是临床上最前沿的新一代口服抗凝药物直接凝血酶抑制剂(dtis)，用于预防非瓣膜性房颤患者的卒中和全身性栓塞。
[0003]
[2-[[(4-氰基苯基)氨基]-甲基]-1-甲基-1h-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯是达比加群酯合成工艺中的一种主要中间体。
[0004]
2008年，专利cn101600709a报道制备[2-[[(4-氰基苯基)氨基]-甲基]-1-甲基-1h-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯的合成方法为：首先将3-[(3-氨基-4-甲胺基苯甲酰基)(吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯加入至四氢呋喃中，搅拌并加热至47-53℃备用；再将偶联试剂cdi或其类似物与四氢呋喃在32-38℃下搅拌，并在此温度下于1-2h内分批加入n-(4-氰基苯基)甘氨酸，加完后保温搅拌0.5-1h，所得此溶液于2-3h内加入到上述3-[(3-氨基-4-甲胺基苯甲酰基)(吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯的四氢呋喃溶液中，加入过程中保持反应液温度恒定47-53℃；在加完n-(4-氰基苯基)甘氨酸与偶联试剂的溶液后，补加四氢呋喃以稀释反应液，保温搅拌3-6h；减压蒸除四氢呋喃，并用乙酸正丁酯带蒸以完全除去四氢呋喃；随后，残余物以乙酸正丁酯作溶剂，在冰乙酸的作用下，于85-90℃搅拌2-3h；所得混合物冷却至65-75℃，加入氯化钠水溶液搅拌洗涤，60-70℃进行相分离，分离后的水相使用乙酸正丁酯于60-70℃进行萃取，萃取液与乙酸正丁酯相合并，减压蒸除乙酸正丁酯，所得残余物使用异丙醇溶解；于32-38℃加入48％的氢溴酸至溶液ph值为0.6至1.3；所得混合物保温搅拌至少20min后，冷却至7-13℃析晶，最后离心、异丙醇洗涤，并于55℃以下真空干燥，得到[2-[[(4-氰基苯基)氨基]-甲基]-1-甲基-1h-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯的单分子氢溴酸盐，收率80.1-94.9％。此工艺收率较好，但操作繁琐，反应不同阶段使用不同溶剂，且所用溶剂价格较贵，生产成本较高，不利于工业化生产，且最后得到的是[2-[[(4-氰基苯基)氨基]-甲基]-1-甲基-1h-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯的氢溴酸盐。
[0005]
专利cn105330645a公开了一种达比加群酯中间体的制备方法，具有以下步骤：
①
将n-(4-氰基苯基)-甘氨酸和缩合剂溶于混合溶剂中，搅拌加热至回流，保温反应；混合溶剂由二氯甲烷与石油醚组成或者由二氯甲烷与乙醚组成；
②
然后加入3-氨基-4-甲基氨基-苯甲酸-n-(2-吡啶基)-n-(2-乙氧羰基乙基)-酰胺，继续回流进行缩合反应；
③
向上述反应体系中加入乙酸，先减压浓缩蒸除混合溶剂，然后在30～100℃的温度下进行环合反应；
④
反应结束后，将反应体系倒入水中，降温，析晶，抽滤，滤饼经重结晶后，再次抽滤，滤饼经烘干后得到化合物3-[[[2-[[(4-氰基苯基)氨基]甲基]-1-甲基-1h-苯并咪唑-5-基]羰基]吡啶-2-基氨基]丙酸乙酯，该发明采用的溶剂为二氯甲烷与石油醚组成或者由二氯甲烷与乙
醚组成的混合溶剂，并且产物的纯度和收率也有待进一步提高。
[0006]
专利cn108658939a公开了及一种[2-[[(4-氰基苯基)氨基]-甲基]-1-甲基-1h-苯并咪唑-5-基]羰基](吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯的合成方法，包括如下步骤：1)化合物n-(4-氰基苯基)-甘氨酸与偶联试剂cdi在甲苯溶液中反应；2)步骤1)反应结束后，将所得反应液冷却，加入3-[(3-氨基-4-甲胺基苯甲酰基)(吡啶-2-基)氨基]丙酸乙酯的甲苯溶液反应；3)反应结束后，加入乙酸后，继续反应至结束。本发明所提供的合成方法，与现有技术相比，其所用溶剂单一，反应中途无需更换溶剂，操作简便，副产物少，收率高，收率93-96％，纯度99％以上，但是该方法使用的溶剂甲苯毒性较大，并且不环保。


技术实现要素：

[0007]
本发明的目的在于提供一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，属于药物制备技术领域。所述制备方法反应式如下：
[0008][0009]
包括以下步骤：
[0010]
(1)在氮气保护下，化合物dg02与羧酸活化剂cdi在乙腈溶液中反应；
[0011]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至15-20℃，加入化合物dg01，保温15-20℃反应12h；
[0012]
(3)步骤(2)反应结束后，加入乙酸，升温至75-80℃，保温反应1-2h；
[0013]
步骤(3)反应结束后，减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，然后先后加入二氯甲烷、去离子水和碳酸钠提纯目标产物dg03。
[0014]
本发明溶剂乙腈用量少，且制备步骤简单，本发明制备得到的抗凝血药物关键中间体dg03的纯度≥99.2％，收率95％～97％。
[0015]
本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
[0016]
一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，所述制备方法的反应式如下：
[0017][0018]
所述制备方法包括以下步骤：
[0019]
(1)在氮气保护下，化合物dg02与羧酸活化剂cdi在乙腈溶液中反应；
[0020]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至15-20℃，加入化合物dg01，保温15-20℃反应12h；
[0021]
(3)步骤(2)反应结束后，加入乙酸，升温至75-80℃，保温反应1-2h；
[0022]
(4)步骤(3)反应结束后，在75-80℃下减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，蒸馏余料中加入二氯甲烷溶解，然后加入去离子水，搅拌后静置分层，水层保留，有机层再用去离子水洗涤，合并两次水层，用二氯甲烷萃取，合并两次有机层；
[0023]
(5)合并后的有机层滴加饱和碳酸钠溶液，搅拌后静置，测试水层ph值，若ph《9，用固体碳酸钠调节ph≥9；
[0024]
(6)控温20-25℃，搅拌5min，复测水层ph≥9，分层；
[0025]
(7)有机层用去离子水洗涤后分层，有机层减压蒸馏回收二氯甲烷，蒸馏余料中加入乙醇于40-45℃下搅拌50-70min溶解，然后分步冷却析晶并过滤，滤饼继续用乙醇淋洗，最后真空干燥，得到抗凝血药物关键中间体dg03。
[0026]
作为本发明的一种优选技术方案，所述化合物dg01、cdi、dg02、乙酸的摩尔比为：1:1.02-1.10:1.02-1.08:2-5。
[0027]
作为本发明的一种优选技术方案，步骤(1)所述反应温度为20-25℃，所述反应时间为3-5h。
[0028]
作为本发明的一种优选技术方案，所述步骤(2)反应结束后，反应液中dg02残留≤0.1％。
[0029]
作为本发明的一种优选技术方案，所述步骤(3)反应结束后，反应液中中间产物≤0.1％。
[0030]
作为本发明的一种优选技术方案，步骤(4)和步骤(7)所述减压蒸馏的压力≤-0.098mpa。
[0031]
作为本发明的一种优选技术方案，步骤(4)所述搅拌时间控制在10-20min。
[0032]
作为本发明的一种优选技术方案，步骤(5)所述搅拌时间控制在10-20min。
[0033]
作为本发明的一种优选技术方案，步骤(7)所述分步冷却析晶是指先以0.1-0.3℃/min的降温速率冷却至20～25℃析晶2小时，再以0.4-0.6℃/min的降温速率降温到0～5℃析晶3小时。
[0034]
作为本发明的一种优选技术方案，步骤(7)所述真空干燥条件为：真空度≤-0.080mpa，温度43～47℃，干燥10-15h，至水分≤0.1％。
[0035]
本发明的有益效果：
[0036]
(1)本发明与现有技术相比，在产物合成过程中，使用的溶剂乙腈一次性加入，并且乙腈用量少；
[0037]
(2)本发明在产物提纯过程中，使用有机溶剂二氯甲烷和去离子水通过两次分层并且控制搅拌时间和水层ph值，提高二氯甲烷溶剂中产物的纯度，降低杂质含量，产物纯度可达到99.2％以上；
[0038]
(3)本发明在最终的析晶过程中，采用分步析晶的方式，并且控制析晶过程中降温速率，有效提高产物的收率，产物收率达到95％～97％。
具体实施方式
[0039]
为更进一步阐述本发明为实现预定发明目的所采取的技术手段及功效，以下结合
实施例，对依据本发明的具体实施方式、结构、特征及其功效，详细说明如后。
[0040]
实施例1
[0041]
一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0042]
(1)在氮气保护下，往反应瓶中加入乙腈溶剂，然后取1.05摩尔量的化合物dg02与1.05摩尔量的羧酸活化剂cdi加入反应瓶中，在20℃温度下反应5h；
[0043]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至18℃，加入1摩尔量的化合物dg01，保温18℃反应12h，反应结束后反应液中dg02残留≤0.1％；
[0044]
(3)步骤(2)反应结束后，加入3摩尔量的乙酸，升温至75℃，保温反应1.5h，反应结束后，反应液中中间产物≤0.1％；
[0045]
(4)步骤(3)反应结束后，在75℃下且压力≤-0.098mpa条件下，减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，蒸馏余料中加入二氯甲烷溶解，然后加入去离子水，搅拌15min后静置分层，水层保留，有机层再用去离子水洗涤，合并两次水层，用二氯甲烷萃取，合并两次有机层；
[0046]
(5)合并后的有机层滴加饱和碳酸钠溶液，搅拌15min后静置，测试水层ph值，若ph《9，用固体碳酸钠调节ph≥9；
[0047]
(6)控温22℃，搅拌5min，复测水层ph≥9，分层；
[0048]
(7)有机层用去离子水洗涤后分层，有机层在压力≤-0.098mpa条件下减压蒸馏回收二氯甲烷，蒸馏余料中加入乙醇于45℃下搅拌50min溶解，然后先以0.2℃/min的降温速率冷却至22℃析晶2小时，再以0.4℃/min的降温速率降温到2℃析晶3小时，过滤，滤饼继续用乙醇淋洗，最后真在空度≤-0.080mpa，温度为45℃条件下，真空干燥10h，至水分≤0.1％，得到抗凝血药物关键中间体dg03，收率为95.8％。
[0049]
实施例2
[0050]
一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0051]
(1)在氮气保护下，往反应瓶中加入乙腈溶剂，然后取1.02摩尔量的化合物dg02与1.02摩尔量的羧酸活化剂cdi加入反应瓶中，在23℃温度下反应4h；
[0052]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至18℃，加入1摩尔量的化合物dg01，保温18℃反应12h，反应结束后反应液中dg02残留≤0.1％；
[0053]
(3)步骤(2)反应结束后，加入2摩尔量的乙酸，升温至78℃，保温反应1h，反应结束后，反应液中中间产物≤0.1％；
[0054]
(4)步骤(3)反应结束后，在78℃下且压力≤-0.098mpa条件下，减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，蒸馏余料中加入二氯甲烷溶解，然后加入去离子水，搅拌10min后静置分层，水层保留，有机层再用去离子水洗涤，合并两次水层，用二氯甲烷萃取，合并两次有机层；
[0055]
(5)合并后的有机层滴加饱和碳酸钠溶液，搅拌12min后静置，测试水层ph值，若ph《9，用固体碳酸钠调节ph≥9；
[0056]
(6)控温22℃，搅拌5min，复测水层ph≥9，分层；
[0057]
(7)有机层用去离子水洗涤后分层，有机层在压力≤-0.098mpa条件下减压蒸馏回收二氯甲烷，蒸馏余料中加入乙醇于40℃下搅拌60min溶解，然后先以0.1℃/min的降温速率冷却至20℃析晶2小时，再以0.4℃/min的降温速率降温到1℃析晶3小时，过滤，滤饼继续
用乙醇淋洗，最后真在空度≤-0.080mpa，温度为43℃条件下，真空干燥12h，至水分≤0.1％，得到抗凝血药物关键中间体dg03，收率为96.1％。
[0058]
实施例3
[0059]
一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0060]
(1)在氮气保护下，往反应瓶中加入乙腈溶剂，然后取1.08摩尔量的化合物dg02与1.08摩尔量的羧酸活化剂cdi加入反应瓶中，在25℃温度下反应3h；
[0061]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至15℃，加入1摩尔量的化合物dg01，保温15℃反应12h，反应结束后反应液中dg02残留≤0.1％；
[0062]
(3)步骤(2)反应结束后，加入5摩尔量的乙酸，升温至80℃，保温反应2h，反应结束后，反应液中中间产物≤0.1％；
[0063]
(4)步骤(3)反应结束后，在80℃下且压力≤-0.098mpa条件下，减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，蒸馏余料中加入二氯甲烷溶解，然后加入去离子水，搅拌18min后静置分层，水层保留，有机层再用去离子水洗涤，合并两次水层，用二氯甲烷萃取，合并两次有机层；
[0064]
(5)合并后的有机层滴加饱和碳酸钠溶液，搅拌16min后静置，测试水层ph值，若ph《9，用固体碳酸钠调节ph≥9；
[0065]
(6)控温25℃，搅拌5min，复测水层ph≥9，分层；
[0066]
(7)有机层用去离子水洗涤后分层，有机层在压力≤-0.098mpa条件下减压蒸馏回收二氯甲烷，蒸馏余料中加入乙醇于42℃下搅拌65min溶解，然后先以0.3℃/min的降温速率冷却至22℃析晶2小时，再以0.5℃/min的降温速率降温到5℃析晶3小时，过滤，滤饼继续用乙醇淋洗，最后真在空度≤-0.080mpa，温度为47℃条件下，真空干燥15h，至水分≤0.1％，得到抗凝血药物关键中间体dg03，收率为95.6％。
[0067]
实施例4
[0068]
一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0069]
(1)在氮气保护下，往反应瓶中加入乙腈溶剂，然后取1.06摩尔量的化合物dg02与1.06摩尔量的羧酸活化剂cdi加入反应瓶中，在25℃温度下反应3h；
[0070]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至20℃，加入1摩尔量的化合物dg01，保温20℃反应12h，反应结束后反应液中dg02残留≤0.1％；
[0071]
(3)步骤(2)反应结束后，加入2摩尔量的乙酸，升温至79℃，保温反应1h，反应结束后，反应液中中间产物≤0.1％；
[0072]
(4)步骤(3)反应结束后，在76℃下且压力≤-0.098mpa条件下，减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，蒸馏余料中加入二氯甲烷溶解，然后加入去离子水，搅拌12min后静置分层，水层保留，有机层再用去离子水洗涤，合并两次水层，用二氯甲烷萃取，合并两次有机层；
[0073]
(5)合并后的有机层滴加饱和碳酸钠溶液，搅拌18min后静置，测试水层ph值，若ph《9，用固体碳酸钠调节ph≥9；
[0074]
(6)控温25℃，搅拌5min，复测水层ph≥9，分层；
[0075]
(7)有机层用去离子水洗涤后分层，有机层在压力≤-0.098mpa条件下减压蒸馏回收二氯甲烷，蒸馏余料中加入乙醇于45℃下搅拌70min溶解，然后先以0.2℃/min的降温速
率冷却至22℃析晶2小时，再以0.6℃/min的降温速率降温到2℃析晶3小时，过滤，滤饼继续用乙醇淋洗，最后真在空度≤-0.080mpa，温度为47℃条件下，真空干燥15h，至水分≤0.1％，得到抗凝血药物关键中间体dg03，收率为96.5％。
[0076]
对比例1
[0077]
一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0078]
(1)在氮气保护下，往反应瓶中加入乙腈溶剂，然后取1.05摩尔量的化合物dg02与1.05摩尔量的羧酸活化剂cdi加入反应瓶中，在20℃温度下反应5h；
[0079]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至18℃，加入1摩尔量的化合物dg01，保温18℃反应12h，反应结束后反应液中dg02残留≤0.1％；
[0080]
(3)步骤(2)反应结束后，加入3摩尔量的乙酸，升温至75℃，保温反应1.5h，反应结束后，反应液中中间产物≤0.1％；
[0081]
(4)步骤(3)反应结束后，在75℃下且压力≤-0.098mpa条件下，减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，蒸馏余料中加入二氯甲烷溶解，然后加饱和碳酸钠溶液，搅拌15min后静置，测试水层ph值，若ph《9，用固体碳酸钠调节ph≥9；
[0082]
(5)控温22℃，搅拌5min，复测水层ph≥9，分层；
[0083]
(6)有机层用去离子水洗涤后分层，有机层在压力≤-0.098mpa条件下减压蒸馏回收二氯甲烷，蒸馏余料中加入乙醇于45℃下搅拌50min溶解，然后先以0.2℃/min的降温速率冷却至22℃析晶2小时，再以0.4℃/min的降温速率降温到2℃析晶3小时，过滤，滤饼继续用乙醇淋洗，最后真在空度≤-0.080mpa，温度为45℃条件下，真空干燥10h，至水分≤0.1％，得到抗凝血药物关键中间体dg03，收率为94.5％。
[0084]
对比例2
[0085]
一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0086]
(1)在氮气保护下，往反应瓶中加入乙腈溶剂，然后取1.05摩尔量的化合物dg02与1.05摩尔量的羧酸活化剂cdi加入反应瓶中，在20℃温度下反应5h；
[0087]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至18℃，加入1摩尔量的化合物dg01，保温18℃反应12h，反应结束后反应液中dg02残留≤0.1％；
[0088]
(3)步骤(2)反应结束后，加入3摩尔量的乙酸，升温至75℃，保温反应1.5h，反应结束后，反应液中中间产物≤0.1％；
[0089]
(4)步骤(3)反应结束后，在75℃下且压力≤-0.098mpa条件下，减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，蒸馏余料中加入二氯甲烷溶解，然后加入去离子水，搅拌15min后静置分层，水层保留，有机层再用去离子水洗涤，合并两次水层，用二氯甲烷萃取，合并两次有机层；
[0090]
(5)合并后的有机层滴加饱和碳酸钠溶液，搅拌15min后静置，测试水层ph值，若ph《9，用固体碳酸钠调节ph≥9；
[0091]
(6)控温22℃，搅拌5min，复测水层ph≥9，分层；
[0092]
(7)有机层用去离子水洗涤后分层，有机层在压力≤-0.098mpa条件下减压蒸馏回收二氯甲烷，蒸馏余料中加入乙醇于45℃下搅拌50min溶解，然后先以0.4℃/min的降温速率冷却至2℃析晶5小时，过滤，滤饼继续用乙醇淋洗，最后真在空度≤-0.080mpa，温度为45℃条件下，真空干燥10h，至水分≤0.1％，得到抗凝血药物关键中间体dg03，收率为93.1％。
[0093]
对比例3
[0094]
一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0095]
(1)在氮气保护下，往反应瓶中加入乙腈溶剂，然后取1.05摩尔量的化合物dg02与1.05摩尔量的羧酸活化剂cdi加入反应瓶中，在20℃温度下反应5h；
[0096]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至18℃，加入1摩尔量的化合物dg01，保温18℃反应12h，反应结束后反应液中dg02残留≤0.1％；
[0097]
(3)步骤(2)反应结束后，加入3摩尔量的乙酸，升温至75℃，保温反应1.5h，反应结束后，反应液中中间产物≤0.1％；
[0098]
(4)步骤(3)反应结束后，在75℃下且压力≤-0.098mpa条件下，减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，蒸馏余料中加入二氯甲烷溶解，然后加入去离子水，搅拌15min后静置分层，水层保留，有机层再用去离子水洗涤，合并两次水层，用二氯甲烷萃取，合并两次有机层；
[0099]
(5)合并后的有机层滴加饱和碳酸钠溶液，搅拌15min后静置，测试水层ph值，若ph《9，用固体碳酸钠调节ph≥9；
[0100]
(6)控温22℃，搅拌5min，复测水层ph≥9，分层；
[0101]
(7)有机层用去离子水洗涤后分层，有机层在压力≤-0.098mpa条件下减压蒸馏回收二氯甲烷，蒸馏余料中加入乙醇于45℃下搅拌50min溶解，然后先以0.6℃/min的降温速率冷却至2℃析晶5小时，过滤，滤饼继续用乙醇淋洗，最后真在空度≤-0.080mpa，温度为45℃条件下，真空干燥10h，至水分≤0.1％，得到抗凝血药物关键中间体dg03，收率为92.3％。
[0102]
对比例4
[0103]
一种抗凝血药物关键中间体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
[0104]
(1)在氮气保护下，往反应瓶中加入乙腈溶剂，然后取1.05摩尔量的化合物dg02与1.05摩尔量的羧酸活化剂cdi加入反应瓶中，在20℃温度下反应5h；
[0105]
(2)步骤(1)反应结束后冷却至18℃，加入1摩尔量的化合物dg01，保温18℃反应12h，反应结束后反应液中dg02残留≤0.1％；
[0106]
(3)步骤(2)反应结束后，加入3摩尔量的乙酸，升温至75℃，保温反应1.5h，反应结束后，反应液中中间产物≤0.1％；
[0107]
(4)步骤(3)反应结束后，在75℃下且压力≤-0.098mpa条件下，减压蒸馏脱除乙酸和乙腈混合溶剂，蒸馏余料中加入二氯甲烷溶解，然后加入去离子水，搅拌15min后静置分层，水层保留，有机层再用去离子水洗涤，合并两次水层，用二氯甲烷萃取，合并两次有机层；
[0108]
(5)合并后的有机层滴加饱和碳酸钠溶液，搅拌15min后静置，测试水层ph值，若ph《9，用固体碳酸钠调节ph≥9；
[0109]
(6)控温22℃，搅拌5min，复测水层ph≥9，分层；
[0110]
(7)有机层用去离子水洗涤后分层，有机层在压力≤-0.098mpa条件下减压蒸馏回收二氯甲烷，蒸馏余料中加入乙醇于45℃下搅拌50min溶解，然后先以0.4℃/min的降温速率冷却至22℃析晶2小时，再以0.7℃/min的降温速率降温到2℃析晶3小时，过滤，滤饼继续用乙醇淋洗，最后真在空度≤-0.080mpa，温度为45℃条件下，真空干燥10h，至水分≤0.1％，得到抗凝血药物关键中间体dg03，收率为93.9％。
[0111]
产物纯度检测
[0112]
hplc归一化法：色谱柱xbridge c18柱(250
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4.6mm 5μm)；流动相，以0.01mol/l磷酸二氢钾缓冲液(ph3.0)(取1.36g磷酸二氢钾，加水至1000ml，用磷酸调节ph值至3.0)为流动相a，以甲醇为流动相b，梯度洗脱(0-15min：a75％-45％，15-40min：a45％-25％，40-50min：a25％，50-52min：a25％-75％，52-60min：a75％，)检测波长310nm；柱温40℃；流速，1.0ml/min。
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利用上述hplc归一化法对实施例1-4和对比例1-4制备得到的抗凝血药物关键中间体dg03进行纯度测试，其结果如下表1所示：
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表1抗凝血药物关键中间体dg03纯度测试结果
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通过以上抗凝血药物关键中间体dg03的收率和纯度测试结果可知，对比例1在实施例基础上，没有使用去离子水与有机溶剂二氯甲烷进行两次分层，其产物纯度明显偏低，其产物收率也一定程度收到影响；对比例2和对比例3在实施例1基础上，没有进行分步析晶的步骤，其产物收率明显偏低，并且纯度也受到影响；对比例4在实施例1基础上，虽然进行分步析晶，但是降温速率均较快，其产物收率也较低。
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以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭示如上，然而并非用以限定本发明，任何本领域技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的技术内容做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简介修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。