一种不含乙醇的难溶性药物浓缩液以及由其制备的胶束溶液的制作方法

1.本发明属于药物制剂领域。具体而言，本发明涉及一种不含乙醇的难溶性药物浓缩液及其制备方法，还涉及由所述浓缩液制备得到的胶束溶液。


背景技术：

2.据统计，目前市场上销售的药物有40％以上属于难溶性药物，处于开发阶段的药物中难溶药物占70％。难溶性药物给药、特别是难溶性药物注射给药一直是药物制剂领域研究的难点和热点之一。主要原因是很多难溶性药物由于溶解度问题不能制备成注射剂，而注射剂在临床上又具有不可替代的作用，因此，增加难溶性药物的溶解度，进而实现难溶性药物注射给药，已经成为药剂学领域最活跃的研究方向之一。
3.近年来，科研工作者已经开发出了很多增加难溶性药物溶解度的方法，包括制成前药、调节ph值、采用共溶剂、使用助溶物、制成乳剂或脂质体、包合技术、胶束增溶、纳米悬浮技术等。其中，应用较为广泛的是使用助溶剂，其中作为助溶剂应用较多的是乙醇。
4.乙醇作为重要的助溶剂，被广泛应用于注射剂中。例如，作为抗肿瘤药物，多西他赛注射液含13％无水乙醇；作为肾上腺皮质激素类药物，氢化可的松注射液含50％乙醇，醋酸氢化可的松注射液(醇型)含50％乙醇；作为心脑血管药物，去乙酰毛花苷注射液含10％乙醇，洋地黄毒苷注射液含10％(v/v)乙醇，尼莫地平注射液含20％(v/v)乙醇，硝酸甘油注射液、地西泮注射液、盐酸吡硫醇注射液、舒血宁注射液也均使用95％乙醇作为辅料；作为抗菌药物，阿奇霉素注射液、阿奇霉素氯化钠注射液、注射用两性霉素b脂质体、注射用伏立康唑也均含乙醇；作为免疫抑制药物，他克莫司注射液每毫升含有638mg乙醇，环孢素注射液的辅料也包括乙醇；作为呼吸系统用药，穿琥宁注射液含乙醇；作为妇产科用药，前列腺素e2注射液也含有乙醇。
5.另外，在难溶性药物的口服给药制剂中，乙醇也被广泛应用。例如，藿香正气水含乙醇40％-50％；十滴水的乙醇含量为60％-70％；复方甘草口服溶液含甘草流浸膏和复方樟脑酊；感冒止咳糖浆含甘草流浸膏和橙皮酊；环孢素口服溶液、左卡尼汀口服溶液均含少量乙醇；地高辛口服溶液含乙醇9％-11％；麦角隐亭咖啡因口服液含5.8％(v/v)的乙醇。此外，以下药物也均含有乙醇：酮咯酸氨丁三醇片/胶囊、硝酸甘油气雾剂、沙丁胺醇气雾剂、盐酸克仑特罗气雾剂、麝香祛痛气雾剂(乙醇量为47％-57％)、宽胸气雾剂(乙醇量为27％(ml/g)-42％(ml/g))、硝酸异山梨酯喷雾剂(含90％乙醇)、骨痛灵酊(乙醇量为45％-55％)、消肿止痛酊(乙醇量为47％-57％)、祛伤消肿酊(乙醇量为50％-60％)、烧伤灵酊(乙醇量为70％-75％)、筋痛消酊(乙醇量为50％-60％)、复方樟脑酊(乙醇量为52％-60％)、颠茄酊(乙醇量为60％-70％)、姜酊(乙醇量为80％-88％)、远志酊(乙醇量为50％-58％)、碘酊(含乙醇45％-55％(ml/ml)、颠茄流浸膏(乙醇量为52％-66％)、浙贝流浸膏(乙醇量为50％-70％)、姜流浸膏(乙醇量为72％-80％)、远志流浸膏(乙醇量为38％-48％)、当归流浸膏(乙醇量为45％-50％)、甘草流浸膏(乙醇量为20％-25％)、大黄流浸膏(乙醇量为40％-50％)、益母草流浸膏(乙醇量为16％-20％)、姜黄消痤搽剂(乙醇量为35％-60％)、骨友灵
搽剂(乙醇量为20％-25％)、麝香舒活搽剂(乙醇量为50％-58％)、麝香祛痛搽剂(乙醇量为47％-57％)、癣宁搽剂(乙醇量不低于60％)、酮洛芬搽剂(乙醇量为65％-75％)、疏痛安涂膜剂(乙醇量为42％-52％)、正骨水(乙醇量为56％-66％)、甘油醇溶液(含2％(v/v)乙醇)、复方醋酸氯己定喷剂等。
6.然而，处方中含乙醇的制剂、特别是注射液在给药后经常产生不良作用，例如，具有强烈的血管刺激性，注入血管时易引起注射部位的疼痛，且反复多次的注射还易造成静脉炎；另外，乙醇对神经系统有影响，导致肌肉不协调、反应迟钝、注意力不集中、自控能力下降、记忆力减退、智力下降等；乙醇还对肝脏会有损伤，对胃也会产生刺激。处方中含乙醇的制剂，对于乙醇过敏的患者则无法使用，导致该部分患者用药受限。此外，含有乙醇的制剂与头孢类或硝基咪唑类药物合用时，极可能导致双硫仑样不良反应，甚至可能诱发胸痛、心肌梗塞、急性心衰、呼吸困难、急性肝损伤、惊厥乃至死亡。因此，从难溶性药物的处方中去掉乙醇意义重大。
7.目前仍然非常需要具有良好稳定性的不含乙醇的难溶性药物组合物、特别是注射用药物组合物。
8.本发明的目的之一是提供一种不含乙醇的难溶性药物浓缩液，避免乙醇带来的上述副作用，为难溶性药物的临床应用提供一个更安全的选择。
9.发明人经过大量的实验研究，惊喜地发现，采用特定的复合乳化剂和助乳化剂可以将临床适用剂量的难溶性药物制备成稳定的组合物，所述组合物能实现对难溶性药物的良好溶解，其是一种浓缩物，为均一透明的溶液，并且制备工艺极其简单。本发明的组合物可在临用前用水性溶媒稀释成胶束溶液，所形成的胶束溶液直接用于对患者进行给药，用药方便，具有优良的稳定性。所述水性溶媒可以是适合注射的水性溶媒(例如，注射用水、5％葡萄糖注射液、0.9％氯化钠注射液等)或适合口服施用的水性溶媒(例如，纯净水等)。而且，由本发明的组合物经稀释获得的胶束溶液完全满足静脉内注射的要求，可通过静脉内注射给药。
10.因此，本发明的浓缩液不仅具有优良的稳定性，而且包含较少种类的赋形剂、制备工艺简单、适用于多种难溶性药物。由本发明的浓缩液经稀释获得的胶束溶液可顺利实现难溶性药物的给药、特别是注射给药，满足了目前未被满足的临床需求。
11.发明简述
12.本发明的目的在于提供一种不含乙醇的难溶性药物浓缩液，并且提供一种制备所述浓缩液的简单、环保、易产业化的方法。此外，本发明的目的还在于提供一种胶束溶液，其可顺利实现难溶性药物的给药、特别是注射给药。
13.在第一个方面，本发明提供了一种不含乙醇的难溶性药物浓缩液，其特征在于，所述浓缩液包含难溶性药物和有助于形成胶束的载体，所述载体由复合乳化剂和助溶剂组成，其中所述复合乳化剂由磷脂与非磷脂乳化剂组成，所述助溶剂选自丙二醇、甘油、peg200、peg300、peg400及它们的混合物，更优选选自丙二醇、peg200、peg300、peg400及它们的混合物，并且所述浓缩液不含油。
14.所述的磷脂优选选自大豆磷脂、蛋黄卵磷脂及它们的混合物，更优选为蛋黄卵磷脂。
15.所述的非磷脂乳化剂优选选自聚氧乙烯蓖麻油(例如聚氧乙烯35蓖麻油、纯的聚
氧乙烯35蓖麻油)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(例如，聚氧乙烯40氢化蓖麻油、聚氧乙烯60氢化蓖麻油)、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、维生素e聚乙二醇1000琥珀酸酯(tpgs)、聚山梨酯(例如聚山梨酯20、21、40、60、61、65、80、81、85、120，特别是聚山梨酯80)及它们的混合物。更优选地，所述的非磷脂乳化剂选自聚氧乙烯40氢化蓖麻油、聚氧乙烯35蓖麻油、纯的聚氧乙烯35蓖麻油、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、聚山梨酯80及它们的混合物。
16.在该方面的一个实施方案中，在本发明的浓缩液中，当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，所述难溶性药物的重量百分比为0.1％～20％，优选0.5％～15％，例如0.5％、1％、1.5％、2％、5％、6％、10％、15％；所述磷脂的重量百分比为0.1％～20％，优选0.5％～10％，例如0.5％、1％、1.5％、2％、3％、4％、5％、10％；所述非磷脂乳化剂的重量百分比为20％～80％，优选30％～70％，例如30％、35％、40％、43％、46％、48％、50％、70％；余量为助溶剂。
17.本发明的浓缩液可以仅由难溶性药物和有助于形成胶束的载体组成，所述载体由复合乳化剂和助溶剂组成，其中所述复合乳化剂由磷脂与非磷脂乳化剂组成，所述助溶剂选自丙二醇、甘油、peg200、peg300、peg400及它们的混合物，优选选自丙二醇、peg200、peg300、peg400及它们的混合物，并且所述浓缩液不含油。
18.或者，本发明的浓缩液还可以含有ph调节剂和/或抗氧化剂。所述的ph调节剂可以选自枸橼酸、枸橼酸盐(如枸橼酸钠)、马来酸、酒石酸、盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸盐(如醋酸钠)、磷酸、磷酸盐(如磷酸一氢钠、磷酸二氢钠或磷酸钠)中的一种或多种。所述的抗氧化剂可以选自α-生育酚琥珀酸酯(α-tocopherol succinate)、棕榈酸抗坏血酸酯(ascorbyl palmitate)、丁基化羟基苯甲醚(butylated hydroxyanisole,bha)、丁化羟基甲苯(butylated hydroxytoluene,bht)中的一种或多种。
19.当本发明的浓缩液含油时，经放置浓缩液发生分层。因此，本发明的浓缩液不含油。所述“油”例如是：植物油，如大豆油、玉米油、椰子油、红花油、紫苏油、橄榄油、蓖麻油、葵花籽油、棉籽油、茶油等；动物油，如鱼油、蛋黄油、羊毛脂等；矿物油，如液体石蜡等；天然或合成的甘油三酯，如中链甘油三酸酯(mct)、长链甘油三酸酯(lct)、结构油等；以及其它公知的油脂。
20.在第二个方面，本发明提供了制备所述的不含乙醇的难溶性药物浓缩液的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将难溶性药物、磷脂、非磷脂乳化剂和助溶剂以任何顺序混合，搅拌均匀，过滤，分装压盖密封。
21.在第三个方面，本发明提供了一种胶束溶液，其是通过将上文所述的不含乙醇的难溶性药物浓缩液用水性溶媒稀释获得的。所得胶束溶液外观均一透明，可用于注射给药。
22.在第四个方面，本发明提供了上文所述的不含乙醇的难溶性药物浓缩液在制备胶束溶液中的用途。所述胶束溶液尤其可用于静脉注射。
23.附图简要说明
24.图1是给予5％葡萄糖注射液的家兔的兔耳的代表性he染色切片的显微镜下观察结果。
25.图2是给予市售尼莫地平注射液的家兔的兔耳代表性he染色切片的显微镜下观察结果。
26.图3是给予本发明的尼莫地平注射液的家兔的兔耳的代表性he染色切片的显微镜
下观察结果。
27.发明详述
具体实施方案
28.实施方案1.一种不含乙醇的难溶性药物浓缩液，其特征在于，所述浓缩液包含难溶性药物和有助于形成胶束的载体，其中：
29.所述载体由复合乳化剂和助溶剂组成，
30.所述复合乳化剂由磷脂与非磷脂乳化剂组成，且所述磷脂选自大豆磷脂、蛋黄卵磷脂及它们的混合物，
31.所述助溶剂选自丙二醇、甘油、peg200、peg300、peg400及它们的混合物，优选选自丙二醇、peg200、peg300、peg400及它们的混合物，
32.并且所述浓缩液不含油。
33.实施方案2.根据实施方案1所述的浓缩液，其中所述非磷脂乳化剂选自聚氧乙烯蓖麻油(例如，聚氧乙烯35蓖麻油、纯的聚氧乙烯35蓖麻油)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(例如聚氧乙烯40氢化蓖麻油、聚氧乙烯60氢化蓖麻油)、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、维生素e聚乙二醇1000琥珀酸酯(tpgs)、聚山梨酯(例如聚山梨酯20、21、40、60、61、65、80、81、85、120，特别是聚山梨酯80)以及它们的混合物。
34.实施方案3.根据实施方案2所述的浓缩液，其中所述的非磷脂乳化剂选自聚氧乙烯40氢化蓖麻油、聚氧乙烯35蓖麻油、纯的聚氧乙烯35蓖麻油、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、聚山梨酯80及它们的混合物。
35.实施方案4.根据实施方案1至3中任意一项所述的浓缩液，其中所述助溶剂选自丙二醇、peg300、peg400及它们的混合物。
36.实施方案5.根据实施方案1至4中任意一项所述的浓缩液，其中当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，所述难溶性药物的重量百分比为0.1％～20％，优选0.5％～15％；所述磷脂的重量百分比为0.1％～20％，优选0.5％～10％；所述非磷脂乳化剂的重量百分比为20％～80％，优选30％～70％；余量为助溶剂。
37.实施方案6.根据实施方案1至5中任意一项所述的组合物，其中所述难溶性药物选自塞来昔布(celecoxib)、伐地昔布(valdecoxib)、依托考昔(etocoxib)、布洛芬(ibuprofen)、右旋布洛芬(dexibuprofen)、丙泊酚(propofol)、氟比洛芬酯(flurbiprofen axetil)、前列地尔(alprostadil)、丁酸氯维地平(clevidipine butyrate)、地塞米松棕榈酸酯(dexamethasone palmitate)、非洛地平(felodipine)、尼莫地平(nimodipine)、硝苯地平(nifedipine)、尼群地平(nitrendipine)、环孢素(cyclosporin)、他克莫司(tacrolimus)、左西孟旦(levosimendan)、阿德福韦酯(adefovir dipivoxil)、红霉素(erythromycin)、罗红霉素(roxithromycin)、泊沙康唑(posaconazole)、伊曲康唑(itraconazole)、伏立康唑(voriconazole)、咪康唑(miconazole)、酮康唑(ketoconazole)、黄体酮(progesterone)、辅酶q10(coenzyme q10)、氯吡格雷(clopidogrel)、紫杉醇(paclitaxel)、多西他赛(docetaxel)、卡巴他赛(cabazitaxel)、依托泊苷(etoposide)、替尼泊苷(teniposide)、羟基喜树碱(hydroxycamptothecin)、伊立替康(irinotecan)、乌苯美司(ubenimex)、顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、卡培他滨
(capecitabine)、奥沙利铂(oxaliplatin)、吉非替尼(gefitinib)、多柔比星(doxorubicin)、长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春西汀(vinpocetine)、长春地辛(vindesine)、吡罗昔康(piroxicam)、螺内酯(spironolactone)、丙戊酸(valproic acid)、他莫昔芬(tamoxifen)、阿奇霉素(azithromycin)、维生素a、维生素d、维生素e、维生素k、非诺贝特(fenofibrate)、吲哚美辛(indomethacin)、瑞德西韦(remdesivir)；优选地，所述难溶性药物选自塞来昔布、布洛芬、右旋布洛芬、丙泊酚、氟比洛芬酯、前列地尔、丁酸氯维地平、地塞米松棕榈酸酯、非洛地平、尼莫地平、硝苯地平、尼群地平、环孢素、他克莫司、左西孟旦、阿德福韦酯、红霉素、罗红霉素、泊沙康唑、伊曲康唑、伏立康唑、黄体酮、辅酶q10、氯吡格雷、紫杉醇、多西他赛、卡巴他赛、依托泊苷、替尼泊苷和依托考昔；最优选地，所述难溶性药物选自尼莫地平、泊沙康唑、多西他赛、氯吡格雷、左西孟旦、他克莫司、环孢素、紫杉醇、布洛芬、辅酶q10、卡巴他赛、塞来昔布和依托考昔。
38.实施方案7.根据实施方案1至6中任意一项所述的浓缩液，其还含有ph调节剂、抗氧化剂或这二者。
39.实施方案8.根据实施方案1至6中任意一项所述的组合物，其中：
40.所述的难溶性药物是尼莫地平，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，尼莫地平的重量百分比为1％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为2％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为46％，丙二醇重量百分比为51％；
41.或者
42.所述的难溶性药物是泊沙康唑，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是peg300，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中泊沙康唑的重量百分比为1％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为3％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为50％，peg300的重量百分比为46％；
43.或者
44.所述的难溶性药物是多西他赛，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中多西他赛的重量百分比为1％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为3％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为48％，丙二醇的重量百分比为48％；
45.或者
46.所述的难溶性药物是氯吡格雷，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中氯吡格雷的重量百分比为15％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为2％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为43％，丙二醇的重量百分比为40％；
47.或者
48.所述的难溶性药物是左西孟旦，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、
助溶剂的重量总计为100重量％时，其中左西孟旦的重量百分比为0.5％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为2％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为50％，丙二醇的重量百分比为47.5％；
49.或者
50.所述的难溶性药物是他克莫司，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中他克莫司的重量百分比为1.5％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为2％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为46％，丙二醇的重量百分比为50.5％；
51.或者
52.所述的难溶性药物是环孢素，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中环孢素的重量百分比为10％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为2％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为43％，丙二醇的重量百分比为45％；
53.或者
54.所述的难溶性药物是紫杉醇，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中紫杉醇的重量百分比为1％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为2％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为46％，丙二醇的重量百分比为51％；
55.或者
56.所述的难溶性药物是布洛芬，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是peg300，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中布洛芬的重量百分比为10％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为2％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为40％，peg300的重量百分比为48％；
57.或者
58.所述的难溶性药物是辅酶q10，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中辅酶q10的重量百分比为5％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为10％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为30％，丙二醇的重量百分比为55％；
59.所述的难溶性药物是卡巴他赛，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是吐温80，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中卡巴他赛的重量百分比为1％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为2％，吐温80的重量百分比为46％，丙二醇的重量百分比为51％；
60.所述的难溶性药物是塞来昔布，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中塞来昔布的重量百分比为6％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为0.5％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为70％，丙二醇的重量百分比为23.5％；
61.或者
62.所述的难溶性药物是依托考昔，所述的磷脂是蛋黄卵磷脂，所述的非磷脂乳化剂是15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯，所述的助溶剂是丙二醇，并且当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，其中依托考昔的重量百分比为5％，蛋黄卵磷脂的重量百分比为5％，15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯的重量百分比为35％，丙二醇的重量百分比为55％。
63.实施方案9.实施方案1至8中任意一项所述的浓缩液在制备用于静脉内注射、特别是静脉内滴注的胶束溶液中的用途。
64.实施方案10.制备实施方案1至8中任意所述的浓缩液的方法，所述方法包括以下步骤：将难溶性药物、磷脂、非磷脂乳化剂和助溶剂以任意顺序混合，搅拌均匀，过滤，分装压盖密封。
65.实施方案11.一种胶束溶液，其是通过将实施方案1至8中任意一项所述的浓缩液用水性溶媒稀释获得的。
66.实施方案12.根据实施方案11所述的胶束溶液，其中所述水性溶媒是注射用水、5％葡萄糖注射液或0.9％氯化钠注射液。
67.实施方案13.根据实施方案12所述的胶束溶液，其用于静脉内注射，特别是静脉内滴注。
68.本发明的组合物及其制备方法
69.发明人令人惊奇地发现可以将难溶性药物例如尼莫地平等用由磷脂和非磷脂乳化剂组成的复合乳化剂以及特定的助溶剂制备成不含乙醇的稳定的组合物，其是一种浓缩液，在临用前用水性溶媒稀释，形成胶束溶液。当用适合注射的水性溶媒例如注射用水、5％葡萄糖注射液或0.9％氯化钠注射液稀释时，所形成的胶束溶液可直接用于注射给药，例如静脉内注射给药。
70.因此，在第一个方面，本发明提供了一种不含乙醇的难溶性药物浓缩液，其特征在于，所述浓缩液包含难溶性药物和有助于形成胶束的载体，其中所述载体由复合乳化剂与助溶剂组成，所述复合乳化剂由磷脂与非磷脂乳化剂组成，所述助溶剂选自丙二醇、甘油、peg200、peg300、peg400及它们的混合物，优选选自丙二醇、peg200、peg300或peg400，并且所述浓缩物不含油。
71.所述的磷脂优选选自大豆磷脂、蛋黄卵磷脂及它们的混合物，更优选是蛋黄卵磷脂。
72.所述的非磷脂乳化剂选自聚氧乙烯蓖麻油(例如聚氧乙烯35蓖麻油、纯的聚氧乙烯35蓖麻油)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(例如聚氧乙烯40氢化蓖麻油、聚氧乙烯60氢化蓖麻油)、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、维生素e聚乙二醇1000琥珀酸酯(tpgs)、聚山梨酯(例如聚山梨酯20、21、40、60、61、65、80、81、85、120，特别是聚山梨酯80)及它们的混合物。优选地，所述的非磷脂乳化剂选自聚氧乙烯40氢化蓖麻油、聚氧乙烯35蓖麻油、纯的聚氧乙烯35蓖麻油、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯、聚山梨酯80及它们的混合物。
73.当本发明的浓缩液含油时，浓缩液经放置发生分层。因此，本发明的组合物不含油。所述“油”例如是：植物油，如大豆油、玉米油、椰子油、红花油、紫苏油、橄榄油、蓖麻油、葵花籽油、棉籽油、茶油等；动物油，如鱼油、蛋黄油、羊毛脂等；矿物油，如液体石蜡等；天然或合成的甘油三酯，如中链甘油三酸酯(mct)、长链甘油三酸酯(lct)、结构油等；以及其它
公知的油脂。
74.在该方面的一个优选的实施方案中，在本发明的浓缩液中，当将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的重量总计为100重量％时，所述难溶性药物的重量百分比为0.1％～20％，优选0.5％～15％，例如0.5％、1％、1.5％、2％、5％、6％、10％、15％；所述磷脂的重量百分比为0.1％～20％，优选0.5％～10％，例如0.5％、1％、1.5％、2％、3％、4％、5％、10％；所述非磷脂乳化剂的重量百分比为20％～80％，优选30％～70％，例如30％、35％、40％、43％、46％、48％、50％、70％；余量为助溶剂。
75.本发明的浓缩液是均一透明的溶液，具有良好的物理和化学稳定性。例如，在室温下放置12个月或者在40℃放置30天，本发明的实施例5中的浓缩液的一直是透明均一的溶液，未见分层，也未见药物析出，难溶性药物的含量和有关物质等均未发生明显变化，符合药品质控标准要求。
76.本发明的浓缩液可以用水性溶媒稀释，从而形成胶束溶液。所述水性溶媒可以是适合注射的水性溶媒(例如，注射用水、5％葡萄糖注射液、0.9％氯化钠注射液等)或适合口服施用的水性溶媒(例如，纯净水等)。用适合注射的水性溶媒例如5％葡萄糖注射液稀释后，本发明的浓缩液所形成的胶束溶液符合静脉内注射剂、甚至是静脉内滴注的注射剂的要求，因此，所述胶束溶液可以直接用于皮下注射、皮内注射、腹膜内注射、静脉内注射，包括静脉内推注和静脉内滴注。
77.在将本发明的浓缩液用水性溶媒稀释后，产生了透明的溶液，其既不浑浊，也不存在任何沉淀物。经过初步检测，估计在该溶液中形成了粒度约10nm或更小的胶束，因此将所形成的溶液称为“胶束溶液”。
78.本发明的浓缩液不仅自身具有良好的稳定性，而且由其稀释获得的胶束溶液也具有良好的稳定性。例如，将本发明的浓缩液用5％葡萄糖注射液稀释后形成的溶液于室温条件下放置24小时，未见药物析出或分层。
79.本发明所述的“难溶性药物”是指已知的在医药领域中可以应用的药物，且相对其有效给药量而言，其在水中的溶解度较低。更具体地，本发明所述的“难溶性药物”是指属于中国药典“凡例”中记载的溶解度为“微溶”(溶质1g(ml)能在溶剂100～不到1000ml中溶解)、“极微溶解”(溶质1g(ml)能在溶剂1000～不到10000ml中溶解)或“几乎不溶或不溶”(溶质1g(ml)在溶剂10000ml中不能完全溶解)的药物。
80.本发明所述的难溶性药物的实例包括、但不限于：塞来昔布、伐地昔布、依托考昔、布洛芬、右旋布洛芬、丙泊酚、氟比洛芬酯、前列地尔、丁酸氯维地平、地塞米松棕榈酸酯、非洛地平、尼莫地平、硝苯地平、尼群地平、环孢素、他克莫司、左西孟旦、阿德福韦酯、红霉素、罗红霉素、泊沙康唑、伊曲康唑、伏立康唑、咪康唑、酮康唑、黄体酮、辅酶q10、氯吡格雷、紫杉醇、多西他赛、卡巴他赛、依托泊苷、替尼泊苷、羟基喜树碱、伊立替康、乌苯美司、顺铂、卡铂、卡培他滨、奥沙利铂、吉非替尼、多柔比星、长春碱、长春新碱、长春西汀、长春地辛、吡罗昔康、螺内酯、丙戊酸、他莫昔芬、阿奇霉素、维生素a、维生素d、维生素e、维生素k、非诺贝特、吲哚美辛、瑞德西韦。优选地，所述难溶性药物选自塞来昔布、布洛芬、右旋布洛芬、丙泊酚、氟比洛芬酯、前列地尔、丁酸氯维地平、地塞米松棕榈酸酯、非洛地平、尼莫地平、硝苯地平、尼群地平、环孢素、他克莫司、左西孟旦、阿德福韦酯、红霉素、罗红霉素、泊沙康唑、伊曲康唑、伏立康唑、黄体酮、辅酶q10、氯吡格雷、紫杉醇、多西他赛、卡巴他赛、依托泊苷、替尼
泊苷和依托考昔。最优选地，所述难溶性药物选自尼莫地平、泊沙康唑、多西他赛、氯吡格雷、左西孟旦、他克莫司、环孢素、紫杉醇、布洛芬、辅酶q10、卡巴他赛、塞来昔布和依托考昔。
81.发明人对本发明的浓缩液中所用的乳化剂进行了筛选，磷脂乳化剂考察了大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂；非磷脂乳化剂考察了聚氧乙烯40氢化蓖麻油(例如kolliphor rh40)、聚氧乙烯35蓖麻油(例如kolliphor el)、15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯(例如kolliphor hs15)、维生素e聚乙二醇琥珀酸酯(tpgs)、聚山梨酯80(例如吐温80)。实验结果显示，使用单独的磷脂乳化剂或非磷脂乳化剂制备得到的浓缩液在稀释后所得的溶液稳定性均较差，在形成溶液后1小时左右便会分层；只有将磷脂和非磷脂乳化剂这二者组合使用时，所得的浓缩液才稳定、均一，并且在稀释成后所得溶液具有良好的稳定性，满足静脉注射给药制剂的所有要求。
82.发明人还对助溶剂进行了筛选，包括丙二醇、甘油、peg200、peg300、peg400等，均能形成均一透明的溶液形式的浓缩液，且浓缩液的物理及化学稳定性良好。但是，与其它几种助溶剂相比，用甘油制备的浓缩液较粘稠。
83.本发明最优选的浓缩液是具有本技术的实施例5中所给出的组分和比例的那些。
84.上文所述的本发明的不含乙醇的难溶性药物浓缩液可以仅由难溶性药物和有助于形成胶束的载体组成，所述载体由复合乳化剂和助溶剂组成，其中所述复合乳化剂由磷脂与非磷脂乳化剂组成，所述助溶剂选自丙二醇、甘油、peg200、peg300、peg400及它们的混合物，优选选自丙二醇、peg200、peg300、peg400及它们的混合物，并且所述浓缩液不含油。
85.或者，上文所述的本发明的不含乙醇的难溶性药物浓缩液还可以含有其它组分，例如ph调节剂和/或抗氧化剂。所述的ph调节剂可以选自枸橼酸、枸橼酸盐(如枸橼酸钠)、马来酸、酒石酸、盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸盐(如醋酸钠)、磷酸、磷酸盐(如磷酸一氢钠、磷酸二氢钠或磷酸钠)中的一种或多种。所述的抗氧化剂可以选自α-生育酚琥珀酸酯、棕榈酸抗坏血酸酯、丁基化羟基苯甲醚(bha)、丁化羟基甲苯(bht)中的一种或多种。
86.在第二个方面，本发明提供了制备所述的不含乙醇的难溶性药物浓缩物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将难溶性药物、磷脂、非磷脂乳化剂和助溶剂以任意顺序混合，搅拌均匀，过滤，分装压盖密封。
87.发明人发现，制备本发明的浓缩液的方法非常简单，各个组分的加入顺序、搅拌时间等对浓缩液的品质没有影响，只要确保难溶性药物溶解即可。
88.本发明采用极其简单的处方工艺，制备出了具有良好稳定性的不含乙醇的难溶性药物浓缩液，其经水性溶媒稀释即可获得直接可用于静脉注射给药的胶束溶液。相比于现有技术，本发明的浓缩液配方简化，制备工艺简单，只需简单的混合、搅拌、过滤、封装即可获得。无需均质机、微射流仪及复杂的配液系统；一般企业都可以实现该工艺。而且，本发明的浓缩液物理、化学稳定性显著提高；储存和运输无需冷链，极大地降低了生产、运输、储存及使用的成本，为临床用药提供巨大方便。
89.在第三个方面，本发明提供了一种胶束溶液，其是通过将上文所述的不含乙醇的难溶性药物浓缩液用水性溶媒稀释获得的。所得胶束溶液外观均一透明，可用于注射给药。
90.所述胶束溶液均一透明，既不浑浊，也不存在任何沉淀物。经初步检测，估计在该溶液中形成了粒度约10nm或更小的胶束，因此将所形成的溶液称为“胶束溶液”，该胶束溶
液接近于真溶液。所述胶束溶液在室温下可以稳定至少24小时。
91.所述胶束溶液由于不含有乙醇而避免了与乙醇相关的副作用，例如，与含有乙醇的相应注射液相比，具有大幅度降低的血管刺激性。
92.所述胶束溶液可以施用于患者，以治疗其中所包含的难溶性药物所能治疗的疾病。例如，包含尼莫地平的浓缩液和胶束溶液可用于改善急性脑血管病恢复期的血液循环、治疗各种原因的蛛网膜下腔出血后的脑血管痉挛以及其所导致的缺血性神经障碍高血压、偏头痛等、治疗血管性痴呆和突发性耳聋等；包含塞来昔布的浓缩液和胶束溶液可用于治疗急性疼痛和炎性疾病例如骨关节炎和类风湿性关节炎；包含紫杉醇或多西他赛的浓缩液和胶束溶液可用于治疗癌症，例如实体瘤，如乳腺癌、卵巢癌、头颈癌、肺癌(包括非小细胞肺癌和小细胞肺癌)、胰腺癌、胃癌、黑色素瘤、软组织肉瘤；包含布洛芬或右旋布洛芬的浓缩液和胶束溶液可用于治疗疼痛，例如头痛、关节痛、偏头痛、牙痛、肌肉痛、神经痛、痛经。本文所述的难溶性药物及其用途均是本领域已知的，描述这些难溶性药物的用途的现有技术文献均视为本技术的一部分。
93.在第四个方面，本发明提供了上文所述的不含乙醇的难溶性药物浓缩液在制备胶束溶液中的用途。所述胶束溶液尤其可用于静脉注射，例如静脉推注和静脉滴注。
94.在本公开内容中，发明人以尼莫地平等多种药物作为难溶性药物的模型，详细考察了影响不含乙醇的难溶性药物浓缩液的形成、物理和化学稳定性、稀释后所得胶束溶液的物理稳定性的主要因素，获得了本发明的浓缩液。该浓缩液可广泛应用于难溶性药物，实现难溶性药物的注射给药，为临床应用提供新的治疗可能。
95.定义
96.在本技术的上下文中，“不含乙醇的难溶性药物浓缩液”、“本发明的组合物”、“本发明的浓缩液”等术语可以互换使用，均指本文所述的包含所述难溶性药物和所述有助于形成胶束的载体的组合物，上下文显示含义并非如此的除外。
97.本文所用的术语“有助于形成胶束的载体”是指在将本发明的浓缩液用水性溶媒稀释时有助于形成胶束溶液的药学上可接受的载体。
98.本文所用的术语“由
……
组成”是指除了所列明的组份外不包含显著量的其它物质。例如，在本发明的浓缩液中，有助于形成胶束的载体由复合乳化剂和助溶剂组成，这意味着除了本文所定义的复合乳化剂和助溶剂之外，不包含显著量的其它有助于形成胶束的物质。
99.本文所用的术语“乙醇”是指式ch3ch2oh的物质。
100.本文所用的术语“中链甘油三酸酯”是指从椰子坚硬干燥的内胚乳或者油椰干燥的内胚乳中提取的非挥发性植物油，是由饱和脂肪酸甘油三酸酯组成的混合物。中链甘油三酸酯可以商购获得，例如从辽宁新兴药业、德国ioi oleo gmbh等商购获得。
101.本文所用的术语“聚氧乙烯蓖麻油”是指由不同量环氧乙烷和蓖麻油反应得到的物质。聚氧乙烯蓖麻油的实例包括、但不限于聚氧乙烯35蓖麻油、纯的聚氧乙烯35蓖麻油。
102.本文所用的术语“聚氧乙烯35蓖麻油”是指由1mol甘油蓖麻酸酯与35mol环氧乙烷反应得到的物质，其中除了聚氧乙烯甘油三蓖麻酸酯之外，还含有少量的聚乙二醇蓖麻酸酯和游离乙二醇。聚氧乙烯35蓖麻油可以商购获得，例如以商品名kolliphor el和kolliphor elp从巴斯夫公司(basf)等商购获得。
103.本文所用的术语“纯的聚氧乙烯35蓖麻油”是指纯化的聚氧乙烯甘油三蓖麻酸酯，基本上不含聚乙二醇蓖麻酸酯和游离乙二醇。
104.本文所用的术语“聚氧乙烯氢化蓖麻油”是指由不同量环氧乙烷和氢化蓖麻油反应得到的物质。聚氧乙烯氢化蓖麻油的实例包括、但不限于聚氧乙烯40氢化蓖麻油、聚氧乙烯60氢化蓖麻油。
105.本文所用的术语“聚氧乙烯40氢化蓖麻油”是指由l mol甘油三羟基硬脂酸与40-45mol环氧乙烷反应得到的物质，其中除了聚氧乙烯甘油三羟基硬脂酸酯之外，还含有少量聚乙二醇三羟基硬脂酸、游离的聚乙二醇。聚氧乙烯40氢化蓖麻油可以商购获得，例如以商品名kolliphor rh40从巴斯夫公司(basf)等商购获得。
106.本文所用的术语“聚氧乙烯60氢化蓖麻油”是指由l mol甘油三羟基硬脂酸与60mol环氧乙烷反应得到的物质，其中除了聚氧乙烯甘油三羟基硬脂酸酯之外，还含有少量聚乙二醇三羟基硬脂酸、游离的聚乙二醇。
107.本文所用的术语“15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯”可以商购获得，例如以商品名kolliphor hs15或solutol hs-15从巴斯夫公司(basf)或sigma-aldrich商购获得。
108.本文所用的术语“维生素e聚乙二醇琥珀酸酯(tpgs)”是一种维生素e的水溶性衍生物，由维生素e琥珀酸酯的羧基与聚乙二醇的羟基反应而成，其可以商购获得，例如以商品名tocofersolan(tpgs)从巴斯夫公司(basf)商购获得。
109.本文所用的术语“聚山梨酯”是指一系列聚氧乙烯去水山梨醇的部分脂肪酸酯，按其每摩尔山梨醇与大约20.5mol或4mol环氧乙烷的比例共聚而成。聚山梨酯的实例包括、但不限于例如聚山梨酯20、21、40、60、61、65、80、81、85、120，特别是聚山梨酯80。聚山梨酯可以商购获得，例如以商品名吐温20、吐温40、吐温80等从南京威尔药业股份有限公司商购获得。
110.本文所用的术语“约”、“大约”、“左右”表示其后所给出的数值可以上下扩展20％。例如，“约100”表示80％至120％。
111.实施例
112.以下实施例用于对本发明进行举例说明，但不以任何方式限制所附的权利要求所定义的范围。
113.除非另有说明，高效液相色谱法是使用岛津lc-20at进行的，所给出的温度单位是摄氏度，未说明温度的操作是在环境温度下进行的。实施例中所用的缩略语的含义如表1所示。
114.表1—缩略语含义
115.缩略语含义来源elp聚氧乙烯35蓖麻油kolliphor elbasfepc蛋黄卵磷脂epc 80lipoidspc大豆磷脂江苏曼氏生物hspc氢化大豆卵磷脂lipoidrh40聚氧乙烯40氢化蓖麻油kolliphor rh40basfhs1515-羟基硬脂酸聚乙二醇酯kolliphor hs15basftween 80吐温80南京威尔药业
tpgs聚乙二醇1000维生素e琥珀酸酯basfmct中链甘油三酸酯辽宁新兴药业lct大豆油辽宁新兴药业
116.实施例1：单一乳化剂的筛选
117.表2—包含单一乳化剂的处方
118.组分处方1处方2处方3处方4处方5处方6处方7处方8尼莫地平0.1g0.1g0.1g0.1g0.1g0.1g0.1g0.1ghs154.6g
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
tween80
‑‑
4.6g
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
elp
‑‑‑‑
4.6g
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
tpgs
‑‑‑‑‑‑
4.6g
‑‑‑‑‑‑‑‑
rh40
‑‑‑‑‑‑‑‑
4.6g
‑‑‑‑‑‑
epc
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
4.6g
‑‑‑‑
spc
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
4.6g
‑‑
hspc
‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑‑
4.6g丙二醇5.3g5.3g5.3g5.3g5.3g5.3g5.3g5.3g总计10g10g10g10g10g10g10g10g
119.工艺：将处方量的各组分加入20ml的小瓶中，磁力搅拌，直至所有组分完全溶解。
120.处方1-5所得的尼莫地平浓缩液均为淡黄色澄清透明的溶液，处方6-8所得的尼莫地平浓缩液为浑浊液，epc、spc及hspc在体系中不溶，无法获得溶液，故不再做稀释后的考察。
121.将按照处方1-5制备的浓缩液取1ml，用100ml 5％葡萄糖注射液稀释。在25℃下放置，观察形成溶液的情况并考察所得溶液的稳定性。
122.实验结果如表3所示。
123.表3—用单一乳化剂制备的尼莫地平浓缩液的外观、经稀释形成溶液的情况以及稀释后形成的溶液的稳定性
[0124][0125]
上述实验数据表明，单独使用磷脂乳化剂epc、spc或hspc无法制备得到透明溶液形式的浓缩液。虽然单独使用非磷脂乳化剂hs15、tween80、elp、tpgs或rh40制备的尼莫地平浓缩液都是透明的溶液，并且用5％葡萄糖注射液按照1:100的体积比稀释后均形成澄清透明的溶液，但是稀释后所获得的溶液在25℃下放置1h左右会出现药物析出的现象，这说明稀释后的溶液不稳定，无法满足临床给药、尤其是注射给药的需求。
[0126]
实施例2：复合乳化剂的筛选
[0127]
表4—包含复合乳化剂的处方
[0128]
组分处方9处方10处方11尼莫地平0.1g0.1g0.1ghs154.6g4.6g4.6gepc0.2
ꢀꢀ
spc 0.2g hspc
ꢀꢀ
0.2g丙二醇5.1g5.1g5.1g总计10g10g10g
[0129]
工艺：将处方量的各组分加入20ml的小瓶中，磁力搅拌，直至所有组分完全溶解。
[0130]
处方9-10所得的尼莫地平浓缩液均为澄清透明的淡黄色溶液，并且观察到这些浓缩液在25℃下放置12月后均不发生分层。
[0131]
处方11所得的尼莫地平浓缩液为浑浊液，hspc在体系中不溶，无法形成溶液，故不再做稀释后的考察。
[0132]
将处方9-10所得浓缩液取1ml，用100ml 5％葡萄糖注射液稀释，形成澄清透明的溶液。将其在25℃下放置，观察稀释后所得的溶液的稳定性。结果显示，在25℃下放置24h，未见有沉淀物析出。
[0133]
实验结果如表5所示。
[0134]
表5—用复合乳化剂制备的尼莫地平浓缩液稀释后形成的溶液的稳定性
[0135][0136]
上述实验结果表明，用hs15与hspc组成的复合乳化剂无法制备得到透明溶液形式的尼莫地平浓缩液，但是用hs15分别与epc和spc组成的复合乳化剂制备的尼莫地平浓缩液均为均一透明的溶液，并且观察到这些浓缩液在25℃下放置12个月后均不发生分层。将处方9和10的浓缩液用5％葡萄糖注射液以1:100的体积比稀释，均形成澄清透明的溶液。如表5所示，将这些溶液在25℃下放置24小时，未见有沉淀物析出，满足静脉注射给药的需求。
[0137]
由此说明，应当使用包含磷脂和非磷脂复合乳化剂的处方，且其中的磷脂不应当是hspc，因为并非所有磷脂乳化剂均能制备得到澄清透明的溶液。
[0138]
实施例3：油的筛选
[0139]
发明人对多种可药用的油进行了考察，具体实验设计如下：
[0140]
表6—包含不同油的处方
[0141][0142]
工艺：将处方量的各组分加入20ml的小瓶中，磁力搅拌，直至所有组分完全溶解。
[0143]
观察按照处方12-21制备的尼莫地平浓缩液的外观。实验结果如表7所示。
[0144]
表7—用处方12-21制备的尼莫地平浓缩液的稳定性
[0145][0146]
由表7的实验结果可见，处方12-21的浓缩液均是浑浊的液体，在室温放置约1h即分层，不是稳定的体系，因此不再考察其稀释液的稳定性。
[0147]
上述实验结果说明，浓缩液中不能含有油，除了处方12-21中考察的mct、lct、橄榄油、鱼油、玉米油、结构油、蓖麻油、葵花籽油、棉籽油、茶油之外，其它性质类似的油脂也均不应包括在本发明的处方中。
[0148]
实施例4：助溶剂的筛选
[0149]
发明人对多种可药用的非乙醇助溶剂进行了考察，具体实验设计如下：
[0150]
表8—包含不同助溶剂的处方
[0151]
组分处方22处方23处方24处方25处方26尼莫地平0.1g0.1g0.1g0.1g0.1ghs154.6g4.6g4.6g4.6g4.6gepc0.3g0.3g0.3g0.3g0.3g丙二醇1.6g
‑‑‑‑‑‑‑‑
peg200
‑‑
1.6g
‑‑‑‑‑‑
peg300
‑‑‑‑
1.6g
‑‑‑‑
peg400
‑‑‑‑‑‑
1.6g
‑‑
甘油
ꢀꢀꢀꢀ
1.6g总计10g10g10g10g10g
[0152]
工艺：将处方量的各组分加入20ml的小瓶中，磁力搅拌，直至所有组分完全溶解。
[0153]
观察按照处方22-26制备的尼莫地平浓缩液的外观。
[0154]
将按照处方22-26制备的尼莫地平浓缩液以1:100的体积比用5％葡萄糖注射液稀释100倍。在25℃下放置24小时，观察形成溶液的情况并考察所得溶液的稳定性。实验结果如表9所示。
[0155]
表9—用处方22-26制备的尼莫地平浓缩液的外观、经稀释形成溶液的情况以及稀释产生的溶液的稳定性
[0156][0157]
由表9的实验结果可见，用所考察的助溶剂制备的浓缩液均为淡黄色澄清透明溶液，处方22-25的浓缩液流动性很好，相比之下，处方26的浓缩液较为粘稠，流动性比处方22-25的浓缩液差。用这些浓缩液稀释后所得的溶液均具有良好的稳定性，在25℃下静置24小时未见有沉淀物析出。
[0158]
实施例5：不含乙醇的难溶性药物组合物的制备(*将难溶性药物、复合乳化剂、助溶剂的总量视为100％)
[0159]
浓缩液1
[0160]
组分重量百分比*用量尼莫地平1％0.1g
hs1546％4.6gepc2％0.2g丙二醇51％5.1g共计100％10g
[0161]
工艺：
[0162]
称取处方量的epc与尼莫地平，放入20ml小瓶中，加入处方量的丙二醇，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌1min。再向其中加入处方量的hs15，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌5min，获得均一透明的溶液。
[0163]
浓缩液2
[0164]
组分重量百分比*用量泊沙康唑1％0.1ghs1550％5.0gepc3％0.3gpeg30046％4.6g共计100％10g
[0165]
工艺：
[0166]
称取处方量的epc、泊沙康唑、peg300、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0167]
浓缩液3
[0168]
组分重量百分比*用量多西他赛1％0.1ghs1548％4.8gepc3％0.3g丙二醇48％4.8g共计100％10g
[0169]
工艺：
[0170]
称取处方量的epc与多西他赛，放入20ml小瓶中，加入处方量的丙二醇，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌10min。再向其中加入处方量的hs15，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌5min，获得均一透明的溶液。
[0171]
浓缩液4
[0172]
组分重量百分比*用量氯吡格雷15％1.5ghs1543％4.3gepc2％0.2g丙二醇40％4.0g共计100％10g
[0173]
工艺：
[0174]
称取处方量的epc、氯吡格雷、丙二醇、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以
2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0175]
浓缩液5
[0176]
组分重量百分比*用量左西孟旦0.5％0.05ghs1550％5.0gepc2％0.2g丙二醇47.5％4.75g共计100％10g
[0177]
工艺：
[0178]
称取处方量的epc、左西孟旦、丙二醇、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0179]
浓缩液6
[0180]
组分重量百分比*用量他克莫司1.5％0.15ghs1546％4.6gepc2％0.2g丙二醇50.5％5.05g共计100％10g
[0181]
工艺：
[0182]
称取处方量的epc、他克莫司、丙二醇、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0183]
浓缩液7
[0184]
组分重量百分比*用量环孢素10％1.0ghs1543％4.3gepc2％0.2g丙二醇45％4.5g共计100％10g
[0185]
工艺：
[0186]
称取处方量的epc、环孢素、丙二醇、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0187]
浓缩液8
[0188]
组分重量百分比*用量紫杉醇1％0.1ghs1546％4.6gepc2％0.2g丙二醇51％5.1g共计100％10g
[0189]
工艺：
[0190]
称取处方量的epc、紫杉醇、丙二醇、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0191]
浓缩液9
[0192]
组分重量百分比*用量布洛芬10％1.0ghs1540％4.0gepc2％0.2gpeg30048％4.8g共计100％10g
[0193]
工艺：
[0194]
称取处方量的epc、布洛芬、peg300、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0195]
浓缩液10
[0196]
组分重量百分比*用量辅酶q105％0.5ghs1530％3.0gepc10％1.0g丙二醇55％5.5g共计100％10g
[0197]
工艺：
[0198]
称取处方量的epc、辅酶q10、丙二醇、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0199]
浓缩液11
[0200]
组分重量百分比*用量卡巴他赛1％0.1gtween8046％4.6gepc2％0.2g丙二醇51％5.1g共计100％10g
[0201]
工艺：
[0202]
称取处方量的epc、卡巴他赛、丙二醇、tween80，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0203]
浓缩液12
[0204]
组分重量百分比*用量塞来昔布6％0.6ghs1570％7.0gepc0.5％0.05g
丙二醇23.5％2.35g共计100％10g
[0205]
工艺：
[0206]
称取处方量的epc、塞来昔布、丙二醇、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0207]
浓缩液13
[0208]
组分重量百分比*用量依托考昔5％0.5ghs1535％3.5gepc5％0.5g丙二醇55％5.5g共计100％10g
[0209]
工艺：
[0210]
称取处方量的epc、依托考昔、丙二醇、hs15，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0211]
浓缩液14
[0212]
组分重量百分比*用量尼莫地平1％0.1gelp46％4.6gepc2％0.2g丙二醇51％5.1g共计100％10g
[0213]
工艺：
[0214]
称取处方量的epc与尼莫地平，放入20ml小瓶中，加入处方量的丙二醇，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌1min。再向其中加入处方量的elp，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌5min，获得均一透明的溶液。
[0215]
浓缩液15
[0216]
组分重量百分比*用量泊沙康唑1％0.1grh4050％5.0gepc3％0.3gpeg30046％4.6g共计100％10g
[0217]
工艺：
[0218]
称取处方量的epc、泊沙康唑、peg300、rh40，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0219]
浓缩液16
[0220]
组分重量百分比*用量
多西他赛1％0.1gtween8048％4.8gepc3％0.3g丙二醇48％4.8g共计100％10g
[0221]
工艺：
[0222]
称取处方量的epc与多西他赛，放入20ml小瓶中，加入处方量的丙二醇，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌10min。再向其中加入处方量的tween80，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌5min，获得均一透明的溶液。
[0223]
浓缩液17
[0224]
组分重量百分比*用量氯吡格雷15％1.5gelp43％4.3gepc2％0.2g丙二醇40％4.0g共计100％10g
[0225]
工艺：
[0226]
称取处方量的epc、氯吡格雷、丙二醇、elp，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0227]
浓缩液18
[0228]
组分重量百分比*用量左西孟旦0.5％0.05ghs1525％2.5gtween8025％2.5gepc2％0.2g丙二醇47.5％4.75g共计100％10g
[0229]
工艺：
[0230]
称取处方量的epc、左西孟旦、丙二醇、hs15、tween80，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0231]
浓缩液19
[0232]
组分重量百分比*用量他克莫司1.5％0.15gelp46％4.6gepc2％0.2g丙二醇50.5％5.05g共计100％10g
[0233]
工艺：
[0234]
称取处方量的epc、他克莫司、丙二醇、elp，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0235]
浓缩液20
[0236]
组分重量百分比*用量左西孟旦0.5％0.05gtween8050％5.0gepc2％0.2g丙二醇47.5％4.75g共计100％10g
[0237]
工艺：
[0238]
称取处方量的epc、左西孟旦、丙二醇、tween80，放入20ml小瓶中，在60℃的水浴中以2000rpm搅拌15min，获得均一透明的溶液。
[0239]
实施例6：本发明的浓缩液的稳定性考察
[0240]
按照《中国药典》2015版四部通则9001中关于原料药与药物制剂稳定性试验指导原则，将实施例5中的浓缩液1在温度25℃
±
2℃、相对湿度60％
±
5％下放置，于第0、3、6、12个月末取样，对相应指标进行考察。
[0241]
1.样品信息：实施例5的浓缩液1，批号20190615
[0242]
2.稳定性试验条件：
[0243][0244]
3.分析方法
[0245]
(1)性状
[0246]
检查方法：目测。
[0247]
(2)有关物质
[0248]
检测方法：hplc法
[0249]
实验条件：
[0250]
色谱柱：c18柱(型号：agilent eclipse xdb-c18，长25cm，内径4.6mm，填料粒径5.0μm)
[0251]
柱温：室温
[0252]
检测器：uv检测器(检测波长235nm)
[0253]
流动相：甲醇-乙腈-水(35:38:27)
[0254]
流速：1.0ml/min
[0255]
进样体积：20μl
[0256]
运行时间：25min
[0257]
系统适应性：系统适应性溶液色谱中，尼莫地平峰与杂质i(2,6-二甲基-4-(3-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸2-甲氧基乙酯异丙酯)峰的分离度应大于3.0。
[0258]
具体实验操作：
[0259]
在各个规定的时间点取放置的浓缩液1，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2mg尼莫地平的溶液，作为供试品溶液；精密量取尼莫地平标准品适量，用甲醇稀释成每1ml中约含2μg尼莫地平的溶液，作为对照品溶液。另取尼莫地平标准品与杂质i标准品适量，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中约含200μg尼莫地平与1μg杂质i的混合溶液，作为系统适应性溶液。在如上所述的条件下用高效液相色谱法测定。避光操作。记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍。系统适应性溶液色谱中，尼莫地平峰与杂质i峰的分离度应大于3.0。
[0260]
精密量取供试品溶液与对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。在供试品溶液色谱图中，除空白溶剂峰外如有杂质峰(最小峰面积3000counts)，按加校正因子的1％自身对照法计算杂质含量，其杂质限度见下表。
[0261][0262]
(3)含量及有关物质
[0263]
检测方法：hplc法
[0264]
实验条件：
[0265]
色谱柱：c18柱(型号：agilent eclipse xdb-c18，长25cm，内径4.6mm，填料粒径5.0μm)
[0266]
柱温：室温
[0267]
检测器：uv检测器(检测波长235nm)
[0268]
流动相：甲醇-乙腈-水(35:38:27)
[0269]
流速：1.0ml/min
[0270]
进样体积：10μl
[0271]
运行时间：10min
[0272]
系统适应性：理论板数按尼莫地平主峰计算不低于8000，尼莫地平与相邻杂质峰的分离度应符合要求，重复进样的相对标准偏差不超过2.0％。
[0273]
具体实验操作：
[0274]
在上述色谱条件下，重复进样的主峰保留时间的相对标准偏差不超过2.0％。
[0275]
取有关物质项下系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，尼莫地平与杂质i峰的分离度应大于3.0。取浓缩液1一支，精密称定，用甲醇溶解并稀释成每1ml中约含2mg尼莫地平的溶液，作为供试品溶液；取尼莫地平标准品，精密称定，加甲醇溶解并稀释成每1ml中约含20μg尼莫地平的溶液，作为对照品溶液。精密量取10μl供试品溶液或对照品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算。
[0276]
4.实验结果
[0277]
表10—实施例5中的浓缩液1的长期稳定性试验(25℃
±
2℃,rh60％
±
5％)考察结
果(批号：20190615)
[0278][0279]
“‑”
表示未检测到该物质，rrt表示相对保留时间
[0280]
以上实验结果显示，实施例5中的浓缩液1在温度25℃
±
2℃、相对湿度60％
±
5％的条件下放置12个月，各项指标均符合要求，物理稳定性和化学稳定性良好。
[0281]
发明人还将实施例5的浓缩液2-13在温度40℃
±
2℃、相对湿度60％
±
5％的条件下进行了稳定性考察，取样时间为0、5、10、30天，考察指标为难溶性药物的含量，结果如表11所示。
[0282]
表11—实施例5的浓缩液2-13的稳定性考察结果
[0283]
制剂0天5天10天30天浓缩液2100％98.2％99.1％96.8％浓缩液3100％98.2％97.6％96.7％浓缩液4100％99.5％97.3％98.1％浓缩液5100％99.6％98.1％96.2％浓缩液6100％100.1％98.9.7％97.7％浓缩液7100％100.1％99.7％98.5％浓缩液8100％100.1％98.4％96.9％浓缩液9100％99.8％98.5％98.1％浓缩液10100％99.5％97.6％97.0％浓缩液11100％100.2％98.5％97.3％浓缩液12100％100.2％101.7％99.5％浓缩液13100％98.6％98.7％97.2％
[0284]
由上述结果可见，实施例5的浓缩液2-13在40℃
±
2℃、rh 60％
±
5％的条件下放
置30天，难溶性药物的含量均保持在90％-110％范围内，具有良好的化学稳定性。
[0285]
此外，将在0、5、10、30天取样的浓缩液2-13用5％葡萄糖注射液以1:100的体积比稀释后，均形成稳定至少24小时的胶束溶液。
[0286]
实施例7：本发明的胶束溶液的刺激性考察
[0287]
1、实验方法
[0288]
1.1给药方案和考察指标
[0289]
市售尼莫地平注射液的用于人给药的日剂量为10mg，按照人的平均体重为60kg，折算成家兔的日剂量为0.47mg/kg。将本发明的尼莫地平注射液、市售尼莫地平注射液、5％葡萄糖注射液分别通过耳缘静脉滴注对家兔给药，每天给药1次，连续给药7天。每天给药前和最后一次给药后48小时，目测观察。在最后一次目测察后将动物安乐死，剪取注射部位及附近处兔耳，进行苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,简称为he染色)，用光学显微镜下观察切片以确定有无血管扩张、充血、出血、血栓形成、管壁增生、炎症细胞浸润、内皮细胞变性坏死、周围组织水肿等病理改变，并且按表12中所示的“血管剖检评分标准”对每只动物进行评分。
[0290]
表12—血管剖检评分标准
[0291]
血管刺激反应评分无明显反应0轻度充血1轻.中度充血、肿胀2中.重度充血、肿胀、耳下垂3轻.中度充血、肿胀，且有轻-中度坏死4轻.中度充血、肿胀，且有中-重度广泛坏死5
[0292]
将同组中的动物的评分求平均值，按照如下标准确定刺激等级。
[0293]
组平均分值刺激等级0～0.4无0.5～1.4极轻微1.5～2.4轻度2.5～3.4中度3.5～4.4重度4.5及以上极重度
[0294]
1.2实验材料
[0295]
1.2.1供试品
[0296]
名称：本发明的尼莫地平浓缩液(将批号为dme-009 2020121701的实施例5的浓缩液1用5％葡萄糖注射液稀释至尼莫地平浓度为0.2mg/ml)
[0297]
浓度：0.2mg/ml
[0298]
性状：澄清透明淡黄色油溶液
[0299]
生产厂家：北京德立福瑞医药科技有限公司
[0300]
1.2.2市售对照
[0301]
名称：尼莫地平注射液(商品名：尼膜同，含有23.7％(v/v)乙醇)，规格：50ml:
10mg。给药前将其用5％葡萄糖注射液稀释至尼莫地平浓度为0.2mg/ml
[0302]
批号：bxjc7a1
[0303]
性状：微黄色澄明液体
[0304]
有效期至：2024.01.28
[0305]
厂家：拜耳医药保健有限公司
[0306]
1.2.3阴性对照
[0307]
名称：5％葡萄糖注射液
[0308]
批号：sd20091515
[0309]
厂家：山东华鲁制药有限公司
[0310]
1.3实验动物
[0311]
品种：家兔
[0312]
级别：spf级
[0313]
数量：18只
[0314]
体重：2～3kg
[0315]
来源：北京金牧阳实验动物养殖有限责任公司
[0316]
1.4剂量和分组
[0317]
给药剂量：0.47mg尼莫地平/kg
[0318]
分组：将家兔随机分为3组，每组6只。将三个组分别给予市售尼莫地平注射液(a组)、本发明的尼莫地平注射液(b组)和5％葡萄糖注射液(c组)。具体见表13。
[0319]
表13—家兔血管刺激性试验设计
[0320][0321]
给药方式：采用注射泵进行的耳缘静脉滴注。
[0322]
2.实验结果
[0323]
2.1目测观察结果
[0324]
实验期间，各组家兔饮食饮水、行为活动、体温、呼吸、被毛、口、鼻、眼和粪便等一般状况良好，均未见异常。所有动物耳部于给药前未见明显异常。
[0325]
2.2注射部位观察及评分结果
[0326]
将如1.1节所述用he染色制备的切片用光学显微镜进行观察。结果如下：
[0327]
c组动物的给药侧耳朵均未见充血、红肿、变性、坏死等局部刺激性反应。在低倍镜下，表皮完整，可见完好的毛囊及皮脂腺结构；在高倍镜下，间质主要由胶原纤维及成纤维细胞组成，其间可见小的毛细血管。结果证明，5％葡萄糖注射液滴注给药对兔耳基本没有刺激性。c组家兔的代表性he染色(100
×
和400
×
)结果见图1。
[0328]
a组动物给药侧兔耳出现充血、肿胀及大面积坏死、变黑。在低倍镜下，观察到全耳严重水肿，血管扩张，局部出血严重，表皮可见一处明显的化脓坏死灶。在高倍镜下，观察到局部结缔组织成纤维细胞增生，其间散在分布少量炎性细胞；表皮区坏死灶可见大量嗜中性粒细胞、淋巴细胞、巨噬细胞等炎性细胞浸润；间质出血严重，散在大量红细胞弥漫性分布。结果证明，含乙醇的市售尼莫地平注射液滴注给药对兔耳产生了严重的刺激性，导致严重的水肿、诱发了炎症并导致大面积皮肤坏死。a组家兔的代表性he染色(20
×
和400
×
)结果见图2。
[0329]
b组动物给药侧兔耳整体完好，只有少量的轻度充血和肿胀。光镜下观察，可见兔耳轻度疏松水肿，未见其他明显异常。结果证明，本发明的尼莫地平注射液刺激性很小，与市售尼莫地平注射液相比刺激性显著改善。b组家兔的代表性he染色(20
×
和200
×
)结果见图3。
[0330]
根据1.1详细的评分标准，各组刺激性评分结果见表14。
[0331]
表14血管刺激性评分
[0332]
组别平均分值刺激等级a5
±
0.2严重b2
±
0.3轻度c0无
[0333]
由以上实验结果可知，本发明的尼莫地平注射液对血管的刺激性显著小于市售尼莫地平注射液，具有极为明显的优势。
[0334]
通过引用将本文所列出的所有专利和非专利文献的全部内容合并入本文，就如同将它们各自的全部内容逐一列出一样。
[0335]
尽管本文提供了具体实施方案和实施例以对本发明进行举例说明，但是这并不是对本发明范围的限制。基于本公开内容，本领域技术人员能在不背离本发明的精神实质的情况下显而易见地获得其它变型或等同方案，这些变型和等同方案均在本发明的范围内。