IL-15组合物及其使用方法与流程

技术特征：
1.一种可激活的前蛋白，其包含第一多肽和第二多肽，其中所述第一多肽和第二多肽各自包含掩蔽模块经由第一接头在c末端可操作地连接于il-15或其变体，其中所述il-15或其变体经由第二接头在c末端连接于il-15rα或其变体，而且其中所述掩蔽模块掩蔽所述前蛋白的活性部分。2.权利要求1的可激活的前蛋白，其中在所述第一多肽或第二多肽上、或者在所述第一多肽和第二多肽两者上的第一接头是可切割的接头。3.权利要求1-2中任一项的可激活的前蛋白，其中在所述第一多肽或第二多肽上、或者在所述第一多肽和第二多肽两者上的第二接头是可切割的接头。4.权利要求1-3中任一项的可激活的前蛋白，其中在第一多肽中的il-15或其变体和il-15rα或其变体以及在第二多肽中的il-15或其变体和il-15rα或其变体包含一个或多个cys取代突变。5.权利要求4的可激活的前蛋白，其中第一多肽中的包含一个或多个cys取代突变的il-15或其变体与第二多肽中的包含一个或多个cys取代突变的il-15rα或其变体形成二硫键，或者其中第二多肽中的包含一个或多个cys取代突变的il-15或其变体与第一多肽中的包含一个或多个cys取代突变的il-15rα或其变体形成二硫键。6.权利要求1-5中任一项的可激活的前蛋白，其中所述前蛋白是二聚体前蛋白。7.权利要求6的可激活的前蛋白，其中所述二聚体前蛋白包含第一多肽和第二多肽，所述第一多肽和第二多肽从n末端到c末端各自包含掩蔽模块经由第一接头连接于il-15或其变体，其中所述il-15或其变体经由第二接头连接于il-15rα或其变体，并且其中第一多肽的掩蔽模块与第二多肽的掩蔽模块形成一个或多个共价二硫键或一个或多个非共价键。8.权利要求1-7中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含一个或多个蛋白结构域。9.权利要求1-8中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块包含一个或多个蛋白结构域。10.权利要求1-9中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块不结合抗原。11.权利要求1-9中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块结合抗原。12.权利要求1-9中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块不结合抗原。13.权利要求1-9中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块结合抗原。14.权利要求1-13中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含抗体恒定(fc)区的ch1、ch2、ch3、ch2ch3或ch1ch2ch3结构域。15.权利要求1-14中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含抗体恒定(fc)区的至少两个不同的ch3变体结构域的一个或多个异型二聚体。16.权利要求1-9和11中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含抗原结合结构域与抗体恒定(fc)区的ch1、ch2、ch3、ch2ch3或ch1ch2ch3结构域的融合物。
17.权利要求1-13中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块包含抗体恒定(fc)区的ch1、ch2、ch3、ch2ch3或ch1ch2ch3结构域。18.权利要求1-13或17中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块包含抗体恒定(fc)区的至少两个不同的ch3变体结构域的一个或多个异型二聚体。19.权利要求1-9和13中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块包含抗原结合结构域与抗体恒定(fc)区的ch1、ch2、ch3、ch2ch3或ch1ch2ch3结构域的融合物。20.权利要求14-19中任一项的可激活的前蛋白，其中抗体fc区来自选自igg1、igg2、igg3、igg4、igd、iga或igm的免疫球蛋白类。21.权利要求10或12中任一项的可激活的前蛋白，其中所述掩蔽模块包含抗体轻链(cl)的恒定结构域，并且其中所述轻链是λ或κ链。22.权利要求11的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含抗原结合结构域。23.权利要求13的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块包含抗原结合结构域。24.权利要求22-23中任一项的可激活的前蛋白，其中所述抗原结合结构域是重链可变结构域(vh)、来自重链抗体的可变结构域(vhh)、或抗原特异肽。25.权利要求22-23中任一项的可激活的前蛋白，其中所述抗原结合结构域包含抗体轻链(lc)和抗体重链(hc)。26.权利要求2-25中任一项的可激活的前蛋白，其中一个或多个所述可切割的接头包含蛋白酶的切割位点。27.权利要求26的可激活的前蛋白，其中所述蛋白酶选自金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶或天冬氨酸蛋白酶或其任意组合。28.权利要求26-27中任一项的可激活的前蛋白，其中蛋白酶的切割位点能被mmp1、mmp2、mmp3、mmp4、mmp5、mmp6、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、tev、matriptase、upa、fap、legumain、psa、激肽释放酶、组织蛋白酶a或组织蛋白酶b蛋白酶切割。29.权利要求1-28中任一项的可激活的前蛋白，其中第一和/或第二多肽中的掩蔽模块阻止第一和/或第二多肽中il-15/il-15rα的复合物在体外或体内与淋巴细胞或血细胞表面上存在的il-15rβ/γc的结合。30.权利要求2-29中任一项的可激活的前蛋白，其中将所述可激活的前蛋白中第一和/或第二多肽的任一个中的掩蔽模块切割导致所述可激活的前蛋白的部分激活。31.权利要求2-30中任一项的可激活的前蛋白，其中将所述可激活的前蛋白中第一和第二多肽两者中的掩蔽模块切割导致所述可激活的前蛋白被完全激活成il-15/il-15rα或其变体的活性复合物。32.权利要求1-30中任一项的可激活的前蛋白，其中所述il-15或其变体是人il-15或从其衍生的氨基酸突变体。33.权利要求1-30中任一项的可激活的前蛋白，其中所述il-15rα或其变体包含人il-15rα、截短的人il-15rα或从人il-15rα衍生的氨基酸突变体。
34.权利要求1-31中任一项的可激活的前蛋白，其中il-15/il-15rα或其变体包含人il-15或从其衍生的氨基酸突变体，和人il-15rα、截短的人il-15rα或从人il-15rα衍生的氨基酸突变体。35.权利要求1-34中任一项的可激活的前蛋白，其中所述可激活的前蛋白包含：如seq id no:26或seq id no:228所列的氨基酸序列或序列表中的序列，包括与序列表中的序列具有至少80、85、90、95、97、98、99％同一性的其变体。36.一种重组核酸分子，其编码权利要求1-35中任一项的可激活的前蛋白。37.一种载体，其包含权利要求36的重组核酸分子。38.一种药物组合物，其包含权利要求1-35中任一项的可激活的前蛋白和药学上可接受的载体。39.一种可激活的前蛋白，其包含第一多肽和第二多肽的融合物，其中所述第一多肽和第二多肽各自包含il-15或其变体经由第一接头在c末端可操作地连接于il-15rα或其变体，其中所述il-15rα或其变体经由第二接头在c末端连接于存在于第一和第二多肽的每个上的掩蔽模块，而且其中所述掩蔽模块掩蔽所述前蛋白的活性部分。40.权利要求39的可激活的前蛋白，其中在所述第一多肽或第二多肽上、或者在所述第一多肽和第二多肽两者上的第一接头是可切割的接头。41.权利要求39-40中任一项的可激活的前蛋白，其中在所述第一多肽或第二多肽上、或者在所述第一多肽和第二多肽两者上的第二接头是可切割的接头。42.权利要求40-41中任一项的可激活的前蛋白，其中在第一多肽中的il-15或其变体和il-15rα或其变体以及在第二多肽中的il-15或其变体和il-15rα或其变体包含一个或多个cys取代突变。43.权利要求42的可激活的前蛋白，其中第一多肽中的包含一个或多个cys取代突变的il-15或其变体与第二多肽中的包含一个或多个cys取代突变的il-15rα或其变体形成二硫键，或者其中第二多肽中的包含一个或多个cys取代突变的il-15或其变体与第一多肽中的包含一个或多个cys取代突变的il-15rα或其变体形成二硫键。44.权利要求39-43中任一项的可激活的前蛋白，其中所述前蛋白是二聚体前蛋白。45.权利要求44的可激活的前蛋白，其中所述二聚体前蛋白包含第一多肽和第二多肽，所述第一多肽和第二多肽从n末端到c末端各自包含il-15或其变体经由第一接头在c末端连接于il-15rα或其变体，其中所述il-15rα或其变体经由第二接头在c末端连接于掩蔽模块，并且其中第一多肽的掩蔽模块与第二多肽的掩蔽模块形成一个或多个共价二硫键或非共价键。46.权利要求39-45中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含一个或多个蛋白结构域。47.权利要求39-45中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块包含一个或多个蛋白结构域。48.权利要求中39-47中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块不结合抗原。49.权利要求中39-47中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块结合抗原。
50.权利要求39-47中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块不结合抗原。51.权利要求39-47中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块结合抗原。52.权利要求40-52中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含抗体恒定(fc)区的ch1、ch2、ch3、ch2ch3或ch1ch2ch3结构域。53.权利要求39-52中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含抗体恒定(fc)区的至少两个不同的ch3变体结构域的一个或多个异型二聚体。54.权利要求39-47和49中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含抗原结合结构域与抗体恒定(fc)区的ch1、ch2、ch3、ch2ch3或ch1ch2ch3结构域的融合物。55.权利要求39-51中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块包含抗体恒定(fc)区的ch1、ch2、ch3、ch2ch3或ch1ch2ch3结构域。56.权利要求39-51或55中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含抗体恒定(fc)区的至少两个不同的ch3变体结构域的一个或多个异型二聚体。57.权利要求39-51和51中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块包含抗原结合结构域与抗体恒定(fc)区的ch1、ch2、ch3、ch2ch3或ch1ch2ch3结构域的融合物。58.权利要求52-57中任一项的可激活的前蛋白，其中抗体fc区来自选自igg1、igg2、igg3、igg4、igd、iga或igm的免疫球蛋白类。59.权利要求48或50中任一项的可激活的前蛋白，其中所述掩蔽模块包含抗体轻链(cl)的恒定结构域，并且其中所述轻链是λ或κ链。60.权利要求54的可激活的前蛋白，其中所述第一多肽中的掩蔽模块包含抗原结合结构域。61.权利要求57的可激活的前蛋白，其中所述第二多肽中的掩蔽模块包含抗原结合结构域。62.权利要求60-61中任一项的可激活的前蛋白，其中所述抗原结合结构域是重链可变结构域(vh)、来自重链抗体的可变结构域(vhh)、或抗原特异肽。63.权利要求60-61中任一项的可激活的前蛋白，其中所述抗原结合结构域包含抗体轻链(lc)和抗体重链(hc)。64.权利要求40-63中任一项的可激活的前蛋白，其中所述第一接头包含26个氨基酸。65.权利要求40-64中任一项的可激活的前蛋白，其中一个或多个可切割的接头包含蛋白酶的切割位点。66.权利要求64的可激活的前蛋白，其中所述蛋白酶选自金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶或天冬氨酸蛋白酶或其任意组合。67.权利要求65-66中任一项的可激活的前蛋白，其中蛋白酶的切割位点能被mmp1、mmp2、mmp3、mmp4、mmp5、mmp6、mmp7、mmp8、mmp9、mmp10、mmp11、mmp12、mmp13、mmp14、tev、matriptase、upa、fap、legumain、psa、激肽释放酶、组织蛋白酶a或组织蛋白酶b蛋白酶切割。
68.权利要求39-67中任一项的可激活的前蛋白，其中第一和/或第二多肽中的掩蔽模块阻止第一和/或第二多肽中il-15/il-15rα的复合物在体外或体内与淋巴细胞或血细胞表面上存在的il-15rβ/γc的结合。69.权利要求40-68中任一项的可激活的前蛋白，其中将所述可激活的前蛋白中第一或第二多肽的任一个中的掩蔽模块切割导致所述可激活的前蛋白的部分激活。70.权利要求40-69中任一项的可激活的前蛋白，其中将所述可激活的前蛋白中第一和第二多肽两者中的掩蔽模块切割导致所述可激活的前蛋白被完全激活成il-15/il-15rα或其变体的活性复合物。71.权利要求39-69中任一项的可激活的前蛋白，其中所述il-15或其变体是人il-15或从其衍生的氨基酸突变体。72.权利要求39-69中任一项的可激活的前蛋白，其中所述il-15rα或其变体包含人il-15rα、截短的人il-15rα或从人il-15rα衍生的氨基酸突变体。73.权利要求39-70中任一项的可激活的前蛋白，其中il-15/il-15rα或其变体包含人il-15或从其衍生的氨基酸突变体，和人il-15rα、截短的人il-15rα或从人il-15rα衍生的氨基酸突变体。74.权利要求39-73中任一项的可激活的前蛋白，其中所述可激活的前蛋白包含seq id no:17或seq id no:73所列的氨基酸序列或序列表中的序列，包括与序列表中的序列具有至少80、85、90、95、97、98、99％同一性的其变体。75.一种重组核酸分子，其编码权利要求39-74中任一项的可激活的前蛋白。76.一种载体，其包含权利要求75的重组核酸分子。77.一种药物组合物，其包含权利要求39-74中任一项的可激活的前蛋白和药学上可接受的载体。78.一种包括对患有癌症的受试者施用权利要求1-35、39-74中任一项的可激活的前蛋白或权利要求39或79中任一项的药物组合物以治疗受试者中的癌症的方法，其中在施用后，所述可激活的前蛋白在癌组织中经由蛋白酶切割被激活。79.一种包括对有需要的受试者施用权利要求1-35、39-74中任一项的可激活的前蛋白或权利要求39或77中任一项的药物组合物以引发或增强受试者中的抗肿瘤免疫应答的方法，其中在施用后，所述可激活的前蛋白在肿瘤中经由蛋白酶切割被激活。80.权利要求1-35、39-74中任一项的可激活的前蛋白或权利要求39或77中任一项的药物组合物用于治疗受试者中的癌症的用途，包括施用所述可激活的前蛋白或药物组合物的步骤，且其中在施用后，所述可激活的前蛋白在癌组织中经由蛋白酶切割被激活。81.权利要求1-35、39-74中任一项的可激活的前蛋白或权利要求39或77中任一项的药物组合物用于引发或增强受试者中的抗肿瘤免疫应答的用途，包括施用所述可激活的前蛋白或药物组合物的步骤，且其中在施用后，所述可激活的前蛋白在肿瘤中经由蛋白酶切割被激活。82.权利要求78-79中任一项的方法或权利要求80-81中任一项的用途，其中蛋白酶切割部分或完全除去了所述可激活的前蛋白中的掩蔽模块，从而使得第一和第二多肽中的il-15/il-il-15rα复合物在体外或体内能结合淋巴细胞或血细胞表面上存在的il-15rβ/γc。
83.权利要求78-79中任一项的方法或权利要求80-81中任一项的用途，其中癌症选自前列腺癌、结肠癌、肾癌、黑色素瘤、肺癌、乳腺癌、甲状腺癌、膀胱癌、胃癌和食道癌、胰腺癌、肝癌、脑癌、头和颈癌、神经母细胞瘤、软组织癌、淋巴瘤、白血病、多发性骨髓瘤或其任何转移。84.权利要求29或68中任一项的可激活的前蛋白，或权利要求84的方法或用途，其中所述淋巴细胞或血细胞是cd4

t细胞、cd8

t细胞、天然杀伤(nk)细胞或b细胞。

技术总结
提供了包含可激活的前蛋白的组合物，所述可激活的前蛋白包含第一IL-15或其变体和第二IL-15Rα或其变体融合于包含抗体Fc区的掩蔽模块，以及使用其用于癌症免疫疗法和其他疗法的方法。的方法。的方法。


技术研发人员：李子娟
受保护的技术使用者：普罗维瓦疗法香港有限公司
技术研发日：2019.12.13
技术公布日：2022/7/12