一种病理样本制备与脱氧核糖核酸定量染色仪及其使用方法与流程

1.本发明涉及一种医疗机械技术领域，特别是涉及一种病理样本制备与脱氧核糖核酸定量染色仪。


背景技术：

2.随着现代工业发展对机器人和自动化处理的日益增长的需求，各行各业特别医学，生命科学行业对试验自动化要求越来越高。目前现有脱氧核糖核酸定量染色多为手工操作，或制片与染色分别使用不同的机器实现，严格讲整个过程相当于半自动化，操作较麻烦，增加了人力的成本。脱氧核糖核酸定量染色既是一种特异的染色方法，也是一种特殊的化学反应，温度是影响酸解的关键因素，酸解不充分或过度酸解都将影响脱氧核糖核酸染色效果。故而自动化设备的开发，应重点关注温度控制，以及抗酸防护。


技术实现要素：

3.(一)解决的技术问题
4.本发明要解决的技术问题是一种能够实现病理样本制、染一体，安全环保，使用便捷，全流程覆盖，程序选择弹性灵活的一种病理样本制备与脱氧核糖核酸定量染色仪及其使用方法。
5.(二)技术方案
6.为了达成上述目的，本发明的技术方案是：
7.一种病理样本制备与脱氧核糖核酸定量染色仪，其特征在于，主要由样本制备模块、脱氧核糖核酸定量染色模块、温控模块、系统控制四大模块组成。附属的废物收集模块由废液收集装置、废气收集装置，废固收集装置组成。
8.进一步，所述样本制备模块由多孔的制片板、吸头座、离心管底座、移液器、注液针及与注液针相连的储液罐等组成。制片板用于玻片、沉降仓的装载，移液器用于标本从吸头座取一次性吸头，再从离心管中加注液体并吸取适量标本，转移至沉降仓中；注液针用于吸弃沉降仓废液，及加注清洗液，完成制片。
9.进一步，所述脱氧核糖核酸定量染色模块由注液针及与注液针相连的储液罐、加液泵等组成。注液针用于固定液、酸液、染液、蒸馏水的加注、清洗，并吸弃废液，完成染色过程。注液针材质为哈氏合金。
10.进一步，所述温控模块由加热板、制冷装置、温度感应器、调温装置组成。加热板、制冷装置、温度感应器用于保持染色时沉降仓中染液的温度。调温装置用于预先加热试剂温度。
11.进一步，所述系统控制模块由触摸屏、加载于屏内的程序及附属控制系统组成。机架上内置有控制系统，协调控制各电器元件的运行，由机壳外表面的触摸屏显示控制系统各参数状态，以及参数调节、指令发送、网络互连。
12.进一步，所述底座侧面设置有电源开关。
13.一种病理样本制备与脱氧核糖核酸定量染色仪，其使用方法：“梯度离心 自动转移 自然沉降 独立染色”多功能模块自由组合方式。
14.1、梯度离心 自动转移 自然沉降 巴氏染色，参考图1
15.2、梯度离心 自动转移 自然沉降 dna染色，参考图2
16.3、梯度离心 自动转移 自然沉降，参考图3
17.进一步，所述的使用方法，有多种运行方式：1、用于单独制1张片；2、用于单独制2张片；3、用于制1张片 巴氏染色/dna染色；4、用于制2张片 巴氏染色/dna染色。
18.除上述方法外，也可用于其它生物组织染色技术。
19.(三)有益效果
20.本发明的有益效果是：
21.1)一定的抗腐蚀能力；(挥发性的bs固定液，具有腐蚀性)
22.2)控温精度
±
2℃；
23.3)整机具有良好的气密性；(防止so2外溢)染色后具有收集废气，并过滤的功能；
24.4)移液过程中不滴落液体；
25.5)清洗后，吸废液需彻底；(避免残留bs对染液的污染)
26.6)液封处理：对染色针进行液封保存，防止堵管等情况发生；
27.7)制片过程标准化，自动化使细胞随机均匀分散在载玻片特定圆形区域上，无重叠，去除阻碍观察的红细胞、白细胞、粘液和杂质，较好的保存了背景信息。
28.8)玻片和试剂条码识别管理，并关联质控；
29.9)本地及远程质控与故障排查；
30.10)应急按键：突发情况时，及时按机械应急按键或者紧急关闭电源开关，之后再开机，系统自动复位。
附图说明
31.图1为制备样本并巴氏染色的流程图
32.图2为制备样本并dna染色的流程图
33.图3为单独制备样本的流程图
34.图4为本发明染色仪的示意图
35.图5为本发明制片装置的示意图
36.图6为本发明实施例1效果图
37.图7为本发明实施例4效果图
38.附图标记：多孔制片板1，吸头座2，离心管底座3，移液器4，注液针5，储液罐6，加液泵7，加热板8，制冷装置9，温度感应器10，调温装置11，触摸屏12，机壳13。
具体实施方式
39.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
40.请参阅图1-7所示，本发明提供的一种病理样本制备与脱氧核糖核酸定量染色仪与对其进行操作的6个实施例：
41.一种病理样本制备与脱氧核糖核酸定量染色仪，其特征在于，主要由样本制备模块、脱氧核糖核酸定量染色模块、温控模块、系统控制四大模块组成。附属有废液收集装置、废气收集装置，废固收集装置。所述样本制备模块由多孔制片板1、吸头座2、离心管底座3、移液器4、注液针5及与注液针相连的储液罐6等组成。制片板1用于玻片、沉降仓的装载，移液器4用于标本从吸头座2取一次性吸头，再从离心管中加注液体并吸取适量标本，转移至沉降仓中；注液针5用于吸弃沉降仓废液，及加注清洗液，完成制片。所述脱氧核糖核酸定量染色模块由注液针5及与注液针相连的储液罐6、加液泵7等组成。注液针5用于固定液、酸液、染液、蒸馏水的加注、清洗，并吸弃废液，完成染色过程。注液针材质为哈氏合金。所述温控模块由加热板8、制冷装置9、温度感应器10、调温装置11组成。加热板1、制冷装置9、温度感应器10用于保持染色时沉降仓中染液的温度。调温装置用于预先加热试剂温度。所述系统控制模块由触摸屏12、加载于屏内的程序及附属控制系统组成。机架上内置有控制系统，协调控制各电器元件的运行，由机壳13外表面的触摸屏显示控制系统各参数状态，以及参数调节、指令发送、网络互连。所述底座侧面设置有电源开关。
42.实施例1：
43.模式一：制1张片 巴氏染色(梯度离心 自动转移 自然沉降 巴氏染色)
44.前处理：标本、玻片编号，振荡标本；加4ml分离液至离心管，再加8ml标本；1080r，离心2min，弃上层分离液8ml；再次离心2000r，10min，倒弃余液；加1ml缓冲液，振荡混匀。
45.上机制片：上机，设置机器工作温度25℃，加800ul缓冲液，混匀n次；机械臂转移800ul悬液至沉降仓，沉降10分钟，吸弃沉降仓废液；1ml清洗液清洗3次，最后一次清洗液静置1分钟，吸弃清洗液；1ml缓冲液冲洗3次，吸弃缓冲液，加1ml苏木素静置3分钟；吸弃苏木素，1ml缓冲液清洗2次，最后一次缓冲液静置1分钟；吸弃缓冲液，清洗液冲洗2次，最后一次静置1分钟，吸弃，1mlea染色液静置5分钟，吸弃ea染色液，1ml清洗液冲洗2次，最后一次静置1分钟——吸弃沉降仓残液。
46.手工封片：100％乙醇脱水，二甲苯透明，封片。
47.染色结果：图6
48.实施例2：
49.模式二：制2张片 dna染色(梯度离心 自动转移 自然沉降 dna染色)
50.前处理：标本、玻片编号，振荡标本；加4ml分离液至离心管，再加8ml标本；1080r，离心2min，弃上层分离液8ml；再次离心2000r，10min，倒弃余液；加1ml缓冲液，振荡混匀。
51.上机制片：上机，设置机器工作温度35℃，加800ul缓冲液，混匀n次；机械臂转移800ul悬液至沉降仓1、沉降仓2，沉降10分钟；吸弃沉降仓1、沉降仓2废液；加1ml缓冲液，吸弃；1ml清洗液清洗3次，最后一次清洗液静置1分钟。沉降仓2吸弃清洗液，沉降仓2，1ml固定液静置30分钟；沉降仓2，吸弃固定液，1ml蒸馏水清洗6～8次；沉降仓2，1ml水解溶液静置25分钟；沉降仓2，吸弃水解溶液，1ml蒸馏水清洗6～8次；沉降仓2，3mldna染液静置40分钟；沉降仓2，吸弃dna染液，1ml蒸馏水清洗6～8次；沉降仓2，3ml蒸馏水静置5分钟；吸弃沉降仓1、沉降仓2残液。
52.手工封片：100％乙醇脱水，二甲苯透明，封片。
53.染色结果：
54.标本编号iodcvgyn2002011252.1gyn2002021181.6gyn2002031222.0gyn2002041282.4gyn2002051292.3gyn2002061123.5gyn2002071183.5
55.实施例3：
56.模式三：单独制2张片(梯度离心 自动转移 自然沉降)
57.前处理：标本、玻片编号，振荡标本；加4ml分离液至离心管，再加8ml标本；1080r，离心2min，弃上层分离液8ml；再次离心2000r，10min，倒弃余液；加1ml缓冲液，振荡混匀。
58.上机制片：上机，加800ul缓冲液，混匀n次；机械臂转移800ul悬液至沉降仓1、沉降仓2，沉降10分钟；吸弃沉降仓1、沉降仓2废液；加1ml缓冲液，吸弃；1ml清洗液清洗3次，最后一次清洗液静置1分钟，吸弃清洗液。
59.实施例4：
60.模式四：制2张片 巴氏染色(梯度离心 自动转移 自然沉降 巴氏染色)
61.前处理：标本、玻片编号，振荡标本；加4ml分离液至离心管，再加8ml标本；1080r，离心2min，弃上层分离液8ml；再次离心2000r，10min，倒弃余液；加1ml缓冲液，振荡混匀。
62.上机制片：上机，设置机器工作温度25℃，加800ul缓冲液，混匀n次；机械臂转移800ul悬液至沉降仓1、沉降仓2，沉降10分钟；吸弃沉降仓1、沉降仓2废液；加1ml缓冲液，吸弃；1ml清洗液清洗3次，最后一次清洗液静置1分钟。沉降仓1吸弃清洗液，1ml缓冲液冲洗3次；沉降仓1吸弃缓冲液，1ml苏木素静置3分钟；沉降仓1吸弃苏木素，1ml缓冲液清洗3次，最后一次缓冲液静置1分钟；沉降仓1吸弃缓冲液，1ml清洗液冲洗2次，最后一次静置1分钟；沉降仓1吸弃清洗液，1mlea染色液静置5分钟；沉降仓1吸弃ea染色液，1ml清洗液冲洗3次，最后一次静置1分钟；吸弃沉降仓1、沉降仓2残液。
63.手工封片：100％乙醇脱水，二甲苯透明，封片。
64.染色结果：图7
65.实施例5：
66.模式五：单独制1张片(梯度离心 自动转移 自然沉降)
67.前处理：标本、玻片编号，振荡标本；加4ml分离液至离心管，再加8ml标本；1080r，离心2min，弃上层分离液8ml；再次离心2000r，10min，倒弃余液；加1ml缓冲液，振荡混匀。
68.上机制片：上机，加800ul缓冲液，混匀n次；机械臂转移800ul悬液至沉降仓，沉降10分钟；吸弃沉降仓废液；加1ml缓冲液，吸弃；1ml清洗液清洗3次，最后一次清洗液静置1分钟，吸弃清洗液。
69.实施例6：
70.模式六：制1张片 dna染色(梯度离心 自动转移 自然沉降 dna染色)
71.前处理：标本、玻片编号，振荡标本；加4ml分离液至离心管，再加8ml标本；1080r，
离心2min，弃上层分离液8ml；再次离心2000r，10min，倒弃余液；加1ml缓冲液，振荡混匀。
72.上机制片：上机，设置机器工作温度25℃，加800ul缓冲液，混匀n次；机械臂转移800ul悬液至沉降仓，沉降10分钟；吸弃沉降仓废液；加1ml缓冲液，吸弃；1ml清洗液清洗3次，最后一次清洗液静置1分钟。沉降仓吸弃清洗液，沉降仓，1ml固定液静置50分钟；沉降仓，吸弃固定液，1ml蒸馏水清洗6～8次；沉降仓，1ml水解溶液静置60分钟；沉降仓，吸弃水解溶液，1ml蒸馏水清洗6～8次；沉降仓，3mldna染液静置75分钟；沉降仓，吸弃dna染液，1ml蒸馏水清洗6～8次；沉降仓，3ml蒸馏水静置15分钟；吸弃沉降仓残液。
73.手工封片：100％乙醇脱水，二甲苯透明，封片。
74.染色结果：
75.标本编号iodcvhec 2002011173.6hec 2002021222.8hec 2002031353.1hec 2002041262.7hec 2002051273.0hec 2002061173.4hec 2002071253.9
76.除上述程序外，也可用于其它生物组织染色的程序设置。
77.尽管结合优选实施方案具体展示和介绍了本发明，但所属领域的技术人员应该明白，在不脱离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围内，在形式上和细节上对本发明做出各种变化，均为本发明的保护范围。