一种复方苦参注射液的活性成分含量及指纹图谱的超高效液相色谱检测方法与流程

技术特征：
1.一种复方苦参注射液的活性成分含量及指纹图谱的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件包括色谱柱为acquity uplc csh
tm
c
18
；所述活性成分为苦参碱、氧化苦参碱、甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷、槐果碱、氧化槐果碱以及槐定碱。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件中流动相为0.15％-0.25％磷酸二氢钾溶液-甲醇梯度洗脱，优选0.2％磷酸二氢钾溶液-甲醇梯度洗脱。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件中洗脱梯度如下：4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件包括柱温为28℃-32℃，优选30℃。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件包括流速为0.3ml/min。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件包括检测波长为209nm-213nm，优选211nm。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱条件包括进样量为0.8μl-1.2μl，优选1μl。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱法进一步包括：(1)空白溶液配制：磷酸调节磷酸二氢钾溶液的ph值至3.0，0.2％磷酸二氢钾溶液-甲醇＝85∶15的混合溶液，过滤即得。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱法进一步包括：(2)对照品溶液配制：精密称取苦参碱对照品，氧化苦参碱对照品，氧化槐果碱对照品适量，加空白溶液制成每1ml含苦参碱0.33mg，氧化苦参碱0.85mg，氧化槐果碱0.25mg的混合对照品溶液ⅰ，摇匀，即得；精密称取槐果碱对照品，槐定碱对照品，甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷对照品适量，加空白溶液制成每1ml含槐果碱0.09mg，槐定碱0.08mg，甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷0.08mg的混合对照品溶液ⅱ，摇匀，即得；精密量取混合对照品溶液ⅰ、ⅱ2ml，置10ml量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀即得。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱法进一步包括：
(3)供试品溶液配制：精密量取复方苦参注射液1ml，置50ml量瓶中，加空白溶液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。11.根据权利要求1～10任一所述复方苦参注射液中活性成分含量的检测方法，所述方法包括：超高效液相色谱条件为：超高效液相色谱条件为：(1)空白溶液配制：磷酸调节磷酸二氢钾溶液的ph值至3.0，0.2％磷酸二氢钾溶液-甲醇＝85∶15的混合溶液，过滤即得；(2)对照品溶液配制：精密称取苦参碱对照品，氧化苦参碱对照品，氧化槐果碱对照品适量，加空白溶液制成每1ml含苦参碱0.33mg，氧化苦参碱0.85mg，氧化槐果碱0.25mg的混合对照品溶液ⅰ，摇匀，即得；精密称取槐果碱对照品，槐定碱对照品，甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷对照品适量，加空白溶液制成每1ml含槐果碱0.09mg，槐定碱0.08mg，甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷0.08mg的混合对照品溶液ⅱ，摇匀，即得；精密量取混合对照品溶液ⅰ、ⅱ2ml，置10ml量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀即得；(3)供试品溶液配制：精密量取复方苦参注射液1ml，置50ml量瓶中，加空白溶液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；(4)按空白溶液、对照品、供试品进样顺序，注入液相色谱仪，记录色谱图，外标法计算各活性成分的含量。
12.根据权利要求1～10任一所述复方苦参注射液的指纹图谱的检测方法，其特征在于，所述方法包括构建复方苦参注射液的含有苦参碱、氧化苦参碱、甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷、槐果碱、氧化槐果碱、槐定碱、番石榴酸、槐胺碱以及三叶豆紫檀苷的指纹图谱。13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述方法包括：超高效液相色谱条件为：(1)空白溶液配制：磷酸调节磷酸二氢钾溶液的ph值至3.0，0.2％磷酸二氢钾溶液-甲醇＝85∶15的混合溶液，过滤即得；(2)对照品溶液配制：精密称取苦参碱对照品，氧化苦参碱对照品，氧化槐果碱对照品适量，加空白溶液制成每1ml含苦参碱0.33mg，氧化苦参碱0.85mg，氧化槐果碱0.25mg的混合对照品溶液ⅰ，摇匀，即得；精密称取槐果碱对照品，槐定碱对照品，甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷对照品适量，加空白溶液制成每1ml含槐果碱0.09mg，槐定碱0.08mg，甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷0.08mg的混合对照品溶液ⅱ，摇匀，即得；精密量取混合对照品溶液ⅰ、ⅱ2ml，置10ml量瓶中，用空白溶液稀释至刻度，摇匀即得；(3)供试品溶液配制：精密量取复方苦参注射液1ml，置50ml量瓶中，加空白溶液至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；(4)按空白溶液、对照品、供试品进样顺序进样，构建复方苦参注射液的含有苦参碱、氧化苦参碱、甲基氧化偶氮甲醇樱草糖苷、槐果碱、氧化槐果碱、槐定碱、番石榴酸、槐胺碱、以及三叶豆紫檀苷的指纹图谱；(5)按空白溶液、对照品、供试品进样顺序，注入液相色谱仪，记录色谱图，外标法计算各活性成分的含量。14.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述方法包括：以氧化苦参碱为参考，所述共有特征峰的相对保留时间分别为：槐胺碱的峰相对保留
时间为0.389
±
0.02；甲基氧化偶氮樱草糖苷的峰相对保留时间为0.469
±
0.04；苦参碱的峰相对保留时间为0.637
±
0.04；槐果碱的峰相对保留时间为0.767
±
0.03；槐定碱的峰相对保留时间为0.819
±
0.02；氧化槐果碱的峰相对保留时间为0.925
±
0.02；氧化苦参碱的峰相对保留时间为1.0；番石榴酸的峰相对保留时间为1.055
±
0.03；三叶豆紫檀苷的峰相对保留时间为2.097
±
0.05。

技术总结
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种复方苦参注射液的活性成分含量及指纹图谱的超高效液相色谱检测方法，所述方法采用超高效液相色谱法进行检测，所述超高效液相色谱条件包括色谱柱为ACQUITY UPLC CSH


技术研发人员：段秀梅 海丽娜 王鹏飞 秦文杰 王红宇
受保护的技术使用者：北京振东光明药物研究院有限公司
技术研发日：2020.12.02
技术公布日：2022/6/4