一种注射用磷酸肌酸钠粉针剂及其制备方法与流程

1.本发明涉及磷酸肌酸钠领域，特别涉及一种注射用磷酸肌酸钠粉针剂及其制备方法。


背景技术：

2.化学名称：n-[亚氨基(膦氨基)甲基]-n-甲基甘氨酸二钠盐四水合物。本品适用于心脏手术时加入心脏停搏液中保护心肌缺血状态下的心肌代谢异常。磷酸肌酸在肌肉收缩的能量代谢中发挥重要作用。它是心肌和骨骼肌的化学能量储备，并用于atp的再合成，atp的水解为肌动球蛋白收缩过程提供能量。氧化代谢减慢导致的能量供给不足是心肌细胞损伤形成和发展的重要因素。磷酸肌酸水平不足在心肌收缩力和功能恢复能力的损伤中具有重要的临床意义。实际上，在心肌损伤中，细胞内高能磷酸化合物的数量，与细胞的存活和收缩功能恢复能力之间存在紧密关系。所以保持高能磷酸化合物的水平成为各种限制心肌损伤方法的基本原则，同时也是心脏代谢保护的基础。
[0003]
中国专利cn201210014132.0磷酸肌酸钠组合物注射用粉针剂，由磷酸肌酸钠和盐酸多利卡因为原料制得，该发明制得的粉针剂在使用过程中能够减轻注射的疼痛效果；cn200710039651.1一种磷酸肌酸钠粉针剂的制备工艺，将磷酸肌酸钠溶解于水中，过滤、灌装、冷冻干燥、压塞得到磷酸肌酸钠粉针剂，该工艺制得磷酸肌酸钠粉针剂未记载有效期。由于磷酸肌酸钠极具引湿性，因此需要制备一种有效期长、复溶性好，注射后短时间内提高组织中的血药浓度。


技术实现要素：

[0004]
鉴以此，本发明提出一种注射用磷酸肌酸钠粉针剂的制备方法，提高注射用磷酸肌酸钠粉针剂稳定性，延长有效期，注射后短时间内提高组织中的血药浓度。
[0005]
本发明的技术方案是这样实现的：一种注射用磷酸肌酸钠粉针剂，按重量份计，包括20-25份磷酸肌酸钠、40-50份脱氧胆酸钠、1-3份a-生育酸琥珀酸酯、28-32份聚乳酸、35-37份蛋黄卵磷脂和60-70份注射用水。
[0006]
进一步的，注射用磷酸肌酸钠粉针剂的制备方法，包括以下步骤：
[0007]
(1)将脱氧胆酸钠、a-生育酸琥珀酸酯、聚乳酸、蛋黄卵磷脂和无水乙醇混合，使用磁力搅拌锅进行搅拌，料液质量比为1:2-4，过滤，制得混合物1；
[0008]
(2)将磷酸肌酸钠和注射用水混合，制得磷酸肌酸钠溶液；
[0009]
(3)将混合物1加入磷酸肌酸钠溶液中，调节ph值为6.5-7.5，制得混合物2；
[0010]
(4)将混合物2使用高压均质机混合，将混合后的混合物2分装、除菌、冻干干燥制得成品。
[0011]
进一步的，步骤(1)中，所述搅拌为先使用30-40℃搅拌30-40min，搅拌速率为350-400r/min，再升高温度至65-70℃搅拌2-3h，搅拌速率为100-120r/min。
[0012]
本发明中选用不同的搅拌速率和温度进行分段搅拌，将原料充分溶解于无水乙醇
中，在无水乙醇挥发初期提高溶液中形成微球的数量，升高温度进行长时间的搅拌，不仅能够将混合液中的乙醇去除，而且提高混合液的粘度，进一步提高成品的包封率。
[0013]
进一步的，步骤(1)中，所述过滤为依次经过0.8μm和0.22μm的微孔滤膜过滤。
[0014]
本发明中选用0.8μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，不仅可以过滤原料中不溶性杂质，而且可以调控混合物中粒子的粒径和均匀度。
[0015]
进一步的，步骤(3)中，所述混合物1加入速率为5-15ml/10s。
[0016]
本发明中控制混合物1滴加速率，有利于混合物1和磷酸肌酸钠混合，提高聚乳酸的载药量和微乳的包封率。
[0017]
进一步的，步骤(3)中，搅拌速率为80-100r/min。
[0018]
进一步的，步骤(3)中，所述调节ph值采用摩尔浓度为0.1-1mol/l的氢氧化钠溶液。
[0019]
进一步的，步骤(4)中，所述高压均质机压力为80-90mpa，均质次数为4-6次，均质时间为5-10min。
[0020]
进一步的，步骤(4)中，所述冻干干燥为：
[0021]
s1：预冻：预冻温度为-28～-24℃，预冻时间为3-5h；
[0022]
s2：升华：升华温度为-8～-4℃，升华时间为10-12h；
[0023]
s3：干燥：干燥温度为30-35℃，干燥时间为2-2.5h。
[0024]
进一步的，按重量份计，包括23份磷酸肌酸钠、45份脱氧胆酸钠、2份a-生育酸琥珀酸酯、30份聚乳酸、36份蛋黄卵磷脂和65份注射用水。
[0025]
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
[0026]
本发明中以磷酸肌酸钠、脱氧胆酸钠、a-生育酸琥珀酸酯、聚乳酸、蛋黄卵磷脂和注射用水为原料制备注射用磷酸肌酸钠粉针剂，提高粉针剂的稳定性，尤其由于磷酸肌酸钠原料本身具有引湿性容易导致成品稳定性下降。本发明原料中协同作用，以聚乳酸作为载体，脱氧胆酸钠具有稳定成品结构的作用，调节ph值至6.5-7.5，有利于磷酸肌酸钠和聚乳酸、蛋黄卵磷脂吸附，提高包封率。本发明制得的注射用磷酸肌酸钠粉针剂具有对心肌、骨骼肌等细胞具有很好的渗透效果，注射后20min心肌组织中的药物浓度为13.5nmol/ml。
具体实施方式
[0027]
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
[0028]
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0029]
本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0030]
实施例1注射用磷酸肌酸钠粉针剂的制备方法
[0031]
(1)按重量份计，称取以下原料：23份磷酸肌酸钠、45份脱氧胆酸钠、2份a-生育酸琥珀酸酯、30份聚乳酸、36份蛋黄卵磷脂和65份注射用水，备用。
[0032]
(2)将脱氧胆酸钠、a-生育酸琥珀酸酯、聚乳酸、蛋黄卵磷脂和无水乙醇混合，使用磁力搅拌锅进行搅拌，所述搅拌为先使用35℃搅拌35min，搅拌速率为380r/min，再升高温度至68℃搅拌2.5h，搅拌速率为110r/min，料液质量比为1:3，过滤，所述过滤为依次经过0.8μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，制得混合物1；
[0033]
(3)将磷酸肌酸钠和注射用水混合，制得磷酸肌酸钠溶液；
[0034]
(4)将混合物1加入磷酸肌酸钠溶液中，所述混合物1加入速率为10ml/10s，搅拌速率为90r/min，使用摩尔浓度为0.5mol/l的氢氧化钠溶液调节ph值为7.0，制得混合物2；
[0035]
(5)将混合物2使用高压均质机混合，所述高压均质机压力为85mpa，均质次数为5次，均质时间为8min，将混合后的混合物2分装、除菌、冻干干燥制得成品，所述冻干干燥步骤为s1：预冻：预冻温度为-26℃，预冻时间为4h；s2：升华：升华温度为-6℃，升华时间为11h；s3：干燥：干燥温度为33℃，干燥时间为2.3h。
[0036]
实施例2注射用磷酸肌酸钠粉针剂的制备方法
[0037]
(1)按重量份计，称取以下原料：20份磷酸肌酸钠、40份脱氧胆酸钠、1份a-生育酸琥珀酸酯、28份聚乳酸、35份蛋黄卵磷脂和60份注射用水，备用。
[0038]
(2)将脱氧胆酸钠、a-生育酸琥珀酸酯、聚乳酸、蛋黄卵磷脂和无水乙醇混合，使用磁力搅拌锅进行搅拌，所述搅拌为先使用30℃搅拌30min，搅拌速率为350r/min，再升高温度至65℃搅拌2h，搅拌速率为100r/min，料液质量比为1:2，过滤，所述过滤为依次经过0.8μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，制得混合物1；
[0039]
(3)将磷酸肌酸钠和注射用水混合，制得磷酸肌酸钠溶液；
[0040]
(4)将混合物1加入磷酸肌酸钠溶液中，所述混合物1加入速率为5ml/10s，搅拌速率为80r/min，使用摩尔浓度为0.1mol/l的氢氧化钠溶液调节ph值为6.5，制得混合物2；
[0041]
(5)将混合物2使用高压均质机混合，所述高压均质机压力为80mpa，均质次数为4次，均质时间为5min，将混合后的混合物2分装、除菌、冻干干燥制得成品，所述冻干干燥步骤为s1：预冻：预冻温度为-28℃，预冻时间为3h；s2：升华：升华温度为-8℃，升华时间为10h；s3：干燥：干燥温度为30℃，干燥时间为2h。
[0042]
实施例3注射用磷酸肌酸钠粉针剂的制备方法
[0043]
(1)按重量份计，称取以下原料：25份磷酸肌酸钠、50份脱氧胆酸钠、3份a-生育酸琥珀酸酯、32份聚乳酸、37份蛋黄卵磷脂和70份注射用水，备用。
[0044]
(2)将脱氧胆酸钠、a-生育酸琥珀酸酯、聚乳酸、蛋黄卵磷脂和无水乙醇混合，使用磁力搅拌锅进行搅拌，所述搅拌为先使用40℃搅拌40min，搅拌速率为400r/min，再升高温度至70℃搅拌3h，搅拌速率为120r/min，料液质量比为1:4，过滤，所述过滤为依次经过0.8μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，制得混合物1；
[0045]
(3)将磷酸肌酸钠和注射用水混合，制得磷酸肌酸钠溶液；
[0046]
(4)将混合物1加入磷酸肌酸钠溶液中，所述混合物1加入速率为15ml/10s，搅拌速率100r/min，使用摩尔浓度为1mol/l的氢氧化钠溶液调节ph值为7.5，制得混合物2；
[0047]
(5)将混合物2使用高压均质机混合，所述高压均质机压力为90mpa，均质次数为6次，均质时间为10min，将混合后的混合物2分装、除菌、冻干干燥制得成品，所述冻干干燥步骤为s1：预冻：预冻温度为-24℃，预冻时间为5h；s2：升华：升华温度为-4℃，升华时间为12h；s3：干燥：干燥温度为35℃，干燥时间为2.5h。
[0048]
对比例1
[0049]
在实施例1的基础上调整步骤(1)中的原料组分，具体为：按重量份计，称取以下原料：23份磷酸肌酸钠、45份海藻多糖、2份维生素e、30份聚乳酸、36份大豆卵磷脂和65份注射用水，备用。
[0050]
对比例2
[0051]
在实施例1的基础上调整步骤(1)中原料的使用量，具体为：按重量份计，称取以下原料：23份磷酸肌酸钠、30份脱氧胆酸钠、2份a-生育酸琥珀酸酯、50份聚乳酸、45份蛋黄卵磷脂和65份注射用水，备用。
[0052]
对比例3
[0053]
在实施例1的基础上调整步骤(2)中的搅拌参数，具体为：将脱氧胆酸钠、a-生育酸琥珀酸酯、聚乳酸、蛋黄卵磷脂和无水乙醇混合，使用磁力搅拌锅进行搅拌，所述搅拌为在35℃下使用380r/min搅拌4h，料液质量比为1:3，过滤，所述过滤为依次经过0.8μm和0.22μm的微孔滤膜过滤，制得混合物1。
[0054]
对比例4
[0055]
在实施例1的基础上调整步骤(4)中的ph值，具体为：将混合物1加入磷酸肌酸钠溶液中，所述混合物1加入速率为10ml/10s，搅拌速率为90r/min，使用摩尔浓度为0.5mol/l的氢氧化钠溶液调节ph值为9.0，制得混合物2。
[0056]
试验例1
[0057]
参照《中国药典》2020年版第二部中磷酸肌酸钠检测标准，检测0天、加速试验、长期试验样品含量、有关物质、性状和澄清度。
[0058]
表1 0天注射用磷酸肌酸钠粉针剂质量检测结果
[0059]
名称含量(％)总杂(％)性状澄清度实施例199.90.106白色疏松块状物澄清无色实施例2100.20.115白色疏松块状物澄清无色实施例399.90.110白色疏松块状物澄清无色对比例199.70.233白色疏松块状物澄清无色对比例299.60.256白色疏松块状物澄清无色对比例399.80.199白色疏松块状物澄清无色对比例4100.30.304白色疏松块状物澄清无色
[0060]
表2加速试验6月注射用磷酸肌酸钠粉针剂质量检测结果(40℃
±
2℃，rh75％
±
5％)
[0061]
[0062][0063]
表3长期试验36月注射用磷酸肌酸钠粉针剂质量检测结果(25℃
±
2℃，rh60％
±
10％，避光)
[0064]
[0065][0066]
通过实验结果表明，本发明制得的注射用磷酸肌酸钠粉针剂，性质稳定，有效期长达36个月。通过加速试验、长期试验和0天样品检测结果对比，对比例1改变原料组分，导致杂质增长过快，含量下降，本发明原料和辅料合理搭配，稳定分子间结构，提高制剂稳定性，对比例2改变组分配比，杂质明显增加，含量下降，性状略有结块，磷酸肌酸钠具有吸湿性，通过合理的原料配比，增强磷酸肌酸钠的亲脂性，注射后在体内分散成细小的囊泡结构有利于透过细胞膜，提高制剂质量和生物利用度；对比例3改变制备工艺，本发明搅拌工艺有利于将原料充分溶解于无水乙醇中，在无水乙醇挥发初期提高溶液中形成微球的数量，升高温度进行长时间的搅拌，不仅能够将混合液中的乙醇去除，而且提高混合液的粘度，进一步提高成品的包封率，提高制剂质量；对比例4改变ph值，导致原料结合效果下降，进一步影响制剂稳定性。
[0067]
试验例2注射用磷酸肌酸钠粉针剂药理试验
[0068]
(1)取大鼠35只，平均分为7组，分别采用实施例1-3和对比例1-4制得的注射用磷
酸肌酸钠粉针剂进行试验，给药剂量为10mg/kg-1
，给药方式为静脉注射，注射部位为大鼠尾部，注射后20min处死大鼠，取心肌组织，使用高效液相色谱仪检测药物浓度。
[0069]
名称药物浓度(nmol/ml)实施例114.5实施例213.9实施例314.1对比例17.4对比例29.2对比例310.3对比例49.9
[0070]
实验结果表明本发明制得的注射用磷酸肌酸钠粉针剂具有很好的效果，在注射后20min心肌组织中的药物浓度为13.5nmol/ml。
[0071]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。