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一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法

2022-05-18 05:00:40 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:获取pm
2.5
颗粒;步骤二:对步骤一的pm
2.5
颗粒的物理化性质进行改造,所述的物理化性质包括pm
2.5
颗粒的电荷或尺寸,得到
neutral
pm
2.5

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pm
2.5
;步骤三:用
neutral
pm
2.5

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pm
2.5
处理不同分化的thp-1细胞,采用elisa法检测il-1β的释放,鉴定炎性体的激活状态;步骤四:通过口咽法使得小鼠吸入
neutral
pm
2.5

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pm
2.5
,并进行massion染色,鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒物对肺部纤维化的影响。2.根据权利要求1所述的一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,所述的步骤二中对pm
2.5
颗粒的电荷进行改造,具体包括:将pm
2.5
水悬浮液与聚赖氨酸混合搅拌,得到的混合物离心,以去除多余的pll,将沉淀物冻干,保存,得到电荷改变后的
neutral
pm
2.5
。3.根据权利要求2所述的一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,所述的pm
2.5
水悬浮液的浓度为250μg ml-1
,聚赖氨酸的浓度为2.5μg ml-1
。4.根据权利要求2所述的一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,所述的pm
2.5
水悬浮液与聚赖氨酸的体积比为4:1。5.根据权利要求1所述的一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,所述的步骤二中对pm
2.5
颗粒的尺寸进行改造,具体包括:将pm
2.5
水悬浮液与pluronic f108溶液混合,并在水浴中超声,然后,将悬浮液离心,以去除多余的pf108,将沉淀冻干,保存,得到尺寸改变后的
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pm
2.5
。6.根据权利要求5所述的一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,所述的pm
2.5
水悬浮液的浓度为1mg ml-1
,pluronic f108溶液的浓度为375μg ml-1
。7.根据权利要求5所述的一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,所述的pm
2.5
水悬浮液与pluronic f108溶液的体积比为1:4。8.根据权利要求5所述的一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,所述的超声温度为25℃,超声时间为30-60min。9.根据权利要求1所述的一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,所述的步骤三具体为:步骤1、细胞培养:thp-1细胞培养在包含10%的胎牛血清、100u ml-1
的青霉素和100mg ml-1
链霉素的rpmi1640培养基中,其培养条件是37℃和5%的co2且每隔一天更换培养基一次;步骤2、elisa检测il-1β的释放:将thp-1细胞以每孔3
×
104个细胞的密度,置于96孔板中,用100μl细胞培养基孵育16h,培养基中含有1μg ml-1
佛波尔12-肉豆蔻酸13-乙酸酯诱导thp-1细胞分化,然后,用
neutral
pm
2.5

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pm
2.5
处理不同分化的thp-1细胞,在脂多糖lps,10ng ml-1
的存在下再处理24小时,收集细胞上清,采用elisa法检测il-1β。
10.根据权利要求1所述的一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,其特征在于,所述的步骤四具体为:将8周龄雌性balb/c小鼠在标准的实验室条件下培养,动物暴露于pm
2.5
是通过niosh描述的口咽抽吸法进行的,50μl pbs包含400μg ml-1neutral
pm
2.5

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pm
2.5
被滴在小鼠的舌头后方,捏住鼻腔让其进入肺部,21天后处死小鼠,并收集肺组织,进行masson染色。

技术总结
本发明提供一种鉴定改变物理化性质后的雾霾颗粒毒性及对肺部纤维化影响的方法,属于雾霾颗粒物PM


技术研发人员:张海元 郑润晓 宋盼盼 韩晓庆 颜姣
受保护的技术使用者:中国科学院长春应用化学研究所
技术研发日:2021.12.27
技术公布日:2022/5/17
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