用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针及其制备方法

技术特征：
1.用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针，其特征在于，由两亲性共聚物为外壳包裹有机染料分子构成，所述的有机染料分子包括香豆素衍生物和1,8-萘酰亚胺衍生物，所述的香豆素衍生物为香豆素苯并噻唑衍生物或香豆素吡啶盐衍生物，所述的香豆素苯并噻唑衍生物的结构式为其中r为-h或-och3；所述的香豆素吡啶盐衍生物的结构式为其中r为-h或-och3。2.根据权利要求1所述的用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针，其特征在于，所述的香豆素衍生物的结构式为3.根据权利要求1所述的用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针，其特征在于，所述的1,8-萘酰亚胺衍生物的结构式为4.根据权利要求1所述的用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针，其特征在于，所述的两亲性共聚物为f-127。5.根据权利要求1所述的用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针，其特征在于，所述的香豆素苯并噻唑衍生物的制备方法为：(1)向反应器中加入水杨醛或5-甲氧基水杨醛和苯并噻唑-2-乙腈，加入乙醇溶解，再加入哌啶进行反应，反应结束后冷却析出，得到产物a，其中水杨醛或5-甲氧基水杨醛、苯并噻唑-2-乙腈、哌啶三者的摩尔比为1:1:0.1；(2)向反应器中加入产物a，加入n,n-二甲基甲酰胺溶解，将盐酸羟胺和稀硫酸溶于甲醇，然后加入反应体系中进行反应，反应结束后冷却析出，得到所述的香豆素苯并噻唑衍生
物，其中产物a与盐酸羟胺的摩尔比为1:1.5。6.根据权利要求1所述的用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针，其特征在于，所述的香豆素吡啶盐衍生物的制备方法为：(1)向反应器中加入水杨醛或5-甲氧基水杨醛和2-乙腈吡啶，加入乙醇溶解，再加入哌啶进行反应，反应结束后冷却析出，得到产物b，其中水杨醛或5-甲氧基水杨醛、2-乙腈吡啶、哌啶三者的摩尔比为1:1:0.1；(2)向反应器中加入产物b，加入n,n-二甲基甲酰胺溶解，将盐酸羟胺和稀硫酸溶于甲醇中，然后加入反应体系中进行反应，反应结束后冷却析出，得到产物c，其中产物b与盐酸羟胺的摩尔比为1:1.5；(3)向反应器中加入产物c，加入二氯甲烷溶解，将碘甲烷加入反应体系中进行反应，反应结束后冷却析出，得到所述的香豆素吡啶盐衍生物，其中产物c与碘甲烷的摩尔比为1:2。7.根据权利要求1或3所述的用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针，其特征在于，所述的1,8-萘酰亚胺衍生物的制备方法为：(1)向反应器中加入4-溴-1,8-萘二甲酸酐，加入乙二醇单甲醚溶解体系，加入吗啉进行反应，反应结束后冷却析出，得到产物d，其中4-溴-1,8-萘二甲酸酐与吗啉的摩尔比为1:2；(2)向反应器中加入产物d，加入乙二醇单甲醚溶解体系，加入乙醇胺进行反应，反应结束后冷却析出，得到所述的1,8-萘酰亚胺衍生物，其中产物d与乙醇胺的摩尔比为1:2。8.一种根据权利要求1～7中任一项所述的用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针的制备方法，其特征在于，将1,8-萘酰亚胺衍生物和香豆素衍生物溶于n,n-二甲基甲酰胺中，-10℃～10℃下逐滴加入到两亲性共聚物水溶液中，超声分散，常温搅拌4～12h，-10℃～10℃下过水系滤膜，得到所述的比率型纳米荧光探针。9.根据权利要求8所述的比率型纳米荧光探针，其特征在于，1,8-萘酰亚胺衍生物和香豆素衍生物的质量比为(1～20):1。10.根据权利要求8所述的比率型纳米荧光探针，其特征在于，1,8-萘酰亚胺衍生物和香豆素衍生物的质量比为10:1。

技术总结
本发明公开了用于检测活细胞内次氯酸的比率型纳米荧光探针及其制备方法，属于荧光探针技术领域。本发明的荧光探针由两亲性共聚物为外壳包裹有机染料分子构成，所述的有机染料分子包括香豆素衍生物和1,8-萘酰亚胺衍生物，所述的香豆素衍生物为香豆素苯并噻唑衍生物或香豆素吡啶盐衍生物。该探针利用肟基作为识别位点，与ClO-发生氧化反应，形成羰基，释放出前体荧光信号，制备得到的比率型荧光探针具有良好的灵敏性、特异的选择性及超快的响应速度，在较宽的pH范围内稳定且不受其它相关离子的干扰，是一种检测次氯酸的良好荧光分子探针，可应用于活细胞中外源性/内源性的ClO-荧光成像检测。光成像检测。光成像检测。


技术研发人员：徐莉 王小青 刘志鹏 张晶晶
受保护的技术使用者：南京林业大学
技术研发日：2022.01.24
技术公布日：2022/5/17