包含FXR激动剂的治疗的制作方法

包含fxr激动剂的治疗
技术领域
1.本发明涉及用于治疗、预防或改善由法尼醇x受体(fxr)介导的病症的方法，该病症特别是肝病或肠病，这些方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的fxr激动剂，以减轻患有此类疾病或病症的患者的药物诱发型不良副作用；以及涉及此类方案的用途和组合物。


背景技术：

2.非酒精性脂肪性肝病(nafld)是西方世界慢性肝病最常见的原因。nafld的主要阶段是1-单纯性脂肪肝(脂肪变性)；2-非酒精性脂肪性肝炎(nash)，这是nafld的更严重的形式，其中脂肪积聚且伴有炎症和细胞损伤；3-纤维化，其中在肝脏中存在持续炎症，从而导致在肝细胞及血管周围生成纤维瘢痕组织；以及4-硬化，其中损伤是永久性的，并可导致肝衰竭及肝癌(肝细胞癌)。
3.在患有淤胆型障碍(nevens等人,j.hepatol.[肝脏病学杂志]60(1增刊1):347a-348a(2014))、胆汁酸吸收不良性腹泻(walters等人，aliment pharmacol.ther.[营养药理学与治疗学]41(1):54-64(2014))以及非酒精性脂肪性肝炎(nash；neuschwander-tetri等人，2015)的受试者中，fxr激动作用已经显示出临床益处。当在nash患者中进行测试时，奥贝胆酸(oca)(胆汁酸模拟物)显示出功效，特别是nas显著改善，即对脂肪变性有强烈影响并且对小叶炎症和气球样变性有额外的作用。然而，长期施用oca与瘙痒和脂质异常(即增加的低密度脂蛋白(ldl)胆固醇)相关，从而引起了安全性方面的担忧(参见来自以下的结果：regenerate(nct02548351)，一项评价奥贝胆酸治疗nash的国际的、随机的、安慰剂对照的3期研究，easl 2019年4月10-14日，维也纳)。
[0004]
目前在具有纤维化的非酒精性脂肪性肝炎患者中测试fxr激动剂卓匹非索(tropifexor)(参见tully等人,j med chem[药物化学杂志]2017；60:9960-9973)(参见nct02855164研究)。在wo 2012/087519(实例1，第125页表中的化合物1-ib)中首次披露了该化合物，并且它以名称ljn452为人所知。
[0005]
乙酰辅酶a羧化酶(acc)是具有两种同种型(acc1和acc2)的酶，该酶参与从头脂肪生成(内源性脂肪酸的合成)和β-氧化的调节。因此acc的抑制剂具有阻止肝脏内新脂质的产生并刺激脂质分解的潜力。在脂肪肝动物模型中，acc抑制降低了肝脂肪含量、减轻了炎症和纤维化(瘢痕形成)，这些均为nash进展的重要标志。acc抑制剂gs-0976，以其国际非专利名称菲索克斯塔(firsocostat)(2-[1-{(2r)-2-(2-甲氧基苯基)-2-[(噁烷-4-基)氧基]乙基}-5-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)-2,4-二氧代-1,4-二氢噻吩并[2,3-d]嘧啶-3(2h)-基]-2-甲基丙酸，其披露于例如us 8969557、wo 2017151816中)为人所知，正在nash受试者中进行临床试验，并且已经表明可改善脂肪变性和改善mri-pdff；然而，在一些患者中，通过gs-0976进行的acc抑制与升高的血浆甘油三酯(tg)相关(the liver meeting[肝脏会议],abstract[摘要]lb-9,2017)。
[0006]
目前尚无批准用于nash的疗法。仍然需要提供针对纤维化/硬化疾病或障碍(例如
肝病或肝障碍)的治疗，这些治疗可解决需要这种治疗的任何患者的这些复杂病症的不同方面，同时展示出可接受的安全性和/或耐受性特征，并且可能与更有限的副作用相关，这些副作用是由于用acc抑制剂治疗而产生的药物诱发型副作用。


技术实现要素：

[0007]
本发明涉及用于治疗、预防或改善由法尼醇x受体(fxr)介导的病症的方法，该病症特别是肝病或肠病，这些方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的fxr激动剂；其中施用fxr激动剂减轻了所述受试者中药物诱发型不良副作用。
[0008]
在一方面，本发明涉及用于治疗、预防、或改善由法尼醇x受体(fxr)介导的病症例如nash的方法，这些方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的fxr激动剂；其中向所述受试者施用fxr激动剂减少了药物诱发型体重增加，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的体重增加。
[0009]
在另一方面，本发明提供了包含fxr激动剂和acc抑制剂的药物组合。
[0010]
在又另一方面，本发明涉及用于治疗、预防或改善由法尼醇x受体(fxr)介导的病症例如nash的方法，这些方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的具有式
[0011]
的fxr激动剂(化合物i)
[0012]
(即2-[(1r,3r,5s)-3-({5-环丙基-3-[2-(三氟甲氧基)苯基]-1,2-噁唑-4-基}甲氧基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-基]-4-氟-1,3-苯并噻唑-6-甲酸，也以inn为卓匹非索为人所知，呈游离形式)或其药学上可接受的盐或其氨基酸缀合物，其中向所述受试者施用fxr激动剂减轻了所述受试者中药物诱发型不良副作用，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加。在一个实施例中，fxr激动剂的施用发生在晚上。
[0013]
本发明的优点是fxr激动剂增强了acc抑制剂的治疗作用，并且减轻了通常由各种acc抑制剂的使用诱发的不良副作用。副作用如体重增加是接受了acc抑制剂治疗的患者中经常发生的副作用。因此，可以向患者施用较低剂量的acc抑制剂与fxr激动剂的组合，且仍达到了通常与较高剂量的相同acc抑制剂相关的相同有益治疗效果。因此，用acc抑制剂与fxr激动剂的组合治疗患者大大缓解了acc抑制剂相关的副作用，例如体重增加。
[0014]
因此，根据本发明的治疗方案提供了高治疗功效的益处，同时具有低副作用(例如，脂质异常(例如增加的ldl胆固醇))发生率，这些副作用在使用acc抑制剂治疗方案时可观察到。这些治疗方案进一步为受试者提供方便的每日一次给药，因此支持患者依从性。
具体实施方式
[0015]
药物诱发型体重增加是药物的严重副作用，导致治疗的不依从性和与肥胖症有关的共存病症的加重。由于已知体重增加对血糖控制、血压升高和脂质谱恶化存在有害影响，这是疗法的不希望的副作用(ness-abramof等人,drugs of today[今日药物]2005,41(8):547-555)。
[0016]
在接受gs-0976(菲索克斯塔)治疗的nash患者或接受mk-4704(另一种靶向肝的acc抑制剂)治疗的健康志愿者中报告了acc抑制介导的高甘油三酯血症。临床前研究证实，在人类临床试验中观察到的高甘油三酯血症是acc抑制的直接结果。
[0017]
已经发现，向有需要的受试者施用fxr激动剂减轻了所述受试者中药物诱发型不良副作用，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加。共施用法尼醇x受体(fxr)激动剂(例如卓匹非索)减轻了acc抑制剂的不良副作用；此共施用有利于治疗功效和安全性(如减轻脂质异常、减少体重增加和/或减轻外周肥胖症)。与acc抑制相反，用fxr激动剂ljp305(tully等人,j med chem[药物化学杂志]2017；60:9960-9973中描述的化合物)治疗降低了hf/nash饮食诱发的体重增加。ljp305对体重减轻和外周脂肪减少的有益作用不是摄食量减少的结果，因为在研究中甚至观察到摄食量的短暂增加。
[0018]
本文描述了本发明的各种(例举的)实施例。将认识到的是，每个实施例中指定的特征可以与其他指定的特征组合，以提供本披露进一步的实施例。
[0019]
实施例：
[0020]
1.一种用于在有需要的受试者中治疗由法尼醇x受体(fxr)介导的病症的方法，所述病症特别是肝病或肠病，所述方法包括向所述受试者每日一次施用治疗有效量的fxr激动剂；其中向所述受试者施用所述fxr激动剂减轻了所述受试者的药物诱发型不良副作用，如药物诱发型体重增加，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加。
[0021]
2.一种用于在有需要的受试者中预防由法尼醇x受体(fxr)介导的病症的方法，所述病症特别是肝病或肠病，所述方法包括向所述受试者每日一次施用治疗有效量的fxr激动剂；其中向所述受试者施用所述fxr激动剂减轻了所述受试者的药物诱发型不良副作用，如药物诱发型体重增加，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加。
[0022]
3.一种用于在有需要的受试者中治疗、稳定非酒精性脂肪性肝病(nafld)或者减轻其严重程度或进展的方法，所述方法包括向所述受试者每日一次施用治疗有效量的fxr激动剂；其中向所述受试者施用所述fxr激动剂减轻了所述受试者的药物诱发型不良副作用，如药物诱发型体重增加，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加。
[0023]
4.一种用于在有需要的受试者中治疗、稳定肠病或者减轻其严重程度或进展的方法，所述方法包括向所述受试者每日一次施用治疗有效量的fxr激动剂；其中向所述受试者施用所述fxr激动剂减轻了所述受试者的药物诱发型不良副作用，如药物诱发型体重增加，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加。
[0024]
5.一种用于在有需要的受试者中治疗、稳定非酒精性脂肪性肝炎(nash)或者减轻其严重程度或进展的方法，所述方法包括向所述受试者每日一次施用治疗有效量的fxr激动剂；其中向所述受试者施用所述fxr激动剂减轻了所述受试者的药物诱发型不良副作用，如药物诱发型体重增加，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加。
[0025]
6.一种用于在有需要的受试者中减缓、阻止或减少慢性肝病或肝障碍的发展的方法，所述慢性肝病或肝障碍是例如nafld、nash、肝纤维化或pbc，所述方法包括向所述受试者每日一次施用治疗有效量的fxr激动剂；其中向所述受试者施用所述fxr激动剂减轻了所述受试者的药物诱发型不良副作用，如药物诱发型体重增加，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加。
[0026]
7.一种用于在患有疾病的受试者中减少硬化或纤维化的方法，所述疾病是非酒精性脂肪性肝病(nafld)或非酒精性脂肪性肝炎(nash)，所述方法包括向所述受试者每日一次施用治疗有效量的fxr激动剂；其中向所述受试者施用所述fxr激动剂减轻了所述受试者的药物诱发型不良副作用，如药物诱发型体重增加，例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加。
[0027]
8.根据实施例1至7中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括如活动度(nas)评分所定义的受试者nafld未恶化，受试者的脂肪变性、活动度和纤维化(saf)活动度评分未恶化，所述受试者的肝脏脂肪减少，受试者的脂肪变性改善，受试者的气球样变性改善，nafld消退，nafld消退且不伴纤维化恶化，纤维化减少且不伴nafld恶化，所述受试者的alt水平降低，所述受试者的ast水平降低，所述受试者的hba1c水平降低，受试者未向硬化进展，抑制非酒精性脂肪性肝病(nafld)和/或非酒精性脂肪性肝炎(nash)进展，或其任何组合。
[0028]
9.根据实施例1至8中任一项所述的方法，其中所述fxr激动剂选自卓匹非索、奥贝胆酸、尼度非索(nidufexor)、西洛非索(cilofexor)、tern-101、edp-305、pxl007、agn242266和met409。
[0029]
10.根据实施例9所述的方法，其中所述fxr激动剂是奥贝胆酸。
[0030]
11.根据实施例10所述的方法，其中以约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg或约50mg的日剂量施用奥贝胆酸。
[0031]
12.根据实施例9所述的方法，其中所述fxr激动剂是卓匹非索。
[0032]
13.根据实施例12所述的方法，其中以约90μg至约250μg、例如约140μg至约200μg的日剂量施用卓匹非索。
[0033]
14.根据实施例12所述的方法，其中以约90μg/天、约140μg/天、约150μg/天、约160μg/天、约170μg/天、约180μg/天、约190μg/天、约200μg/天、约210μg/天、约220μg/天、约230μg/天、约240μg/天或约250μg/天的剂量施用卓匹非索。
[0034]
15.根据实施例12所述的方法，其中以约140μg的日剂量施用卓匹非索。
[0035]
16.根据实施例9所述的方法，其中所述fxr激动剂是西洛非索。
[0036]
17.根据实施例16所述的方法，其中以约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg或约50mg的日剂量施用西洛非索。
[0037]
18.根据实施例16所述的方法，其中以约30mg的日剂量、每日一次施用西洛非索。
[0038]
19.根据实施例1至18中任一项所述的方法，其中在晚上施用所述fxr激动剂。
[0039]
20.根据实施例19所述的方法，其中所述晚上施用减少了与施用所述fxr激动剂相关的副作用的风险，所述副作用是例如瘙痒。
[0040]
21.根据实施例19所述的方法，其中所述晚上施用减少了与施用所述fxr激动剂相关的副作用的风险，所述副作用是例如脂质异常。
[0041]
22.根据实施例1至21中任一项所述的方法，其中所述施用包括脂肪性肝炎如nash的消退。
[0042]
23.根据实施例1至21中任一项所述的方法，其中所述施用包括肝纤维化的改善。
[0043]
24.根据实施例1至21中任一项所述的方法，其中所述施用包括脂肪性肝炎如nash的消退和肝纤维化的改善。
[0044]
25.根据实施例1至24中任一项所述的方法，其中所述acc抑制剂选自菲索克斯塔、mk-4074和pf-05221304。
[0045]
26.根据实施例25所述的方法，其中所述acc抑制剂是菲索克斯塔。
[0046]
27.根据实施例26所述的方法，其中以约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg或约50mg的剂量施用菲索克斯塔。
[0047]
28.根据实施例26所述的方法，其中以约20mg的日剂量每日一次施用菲索克斯塔。
[0048]
29.根据实施例1至28中任一项所述的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用acc抑制剂和fxr激动剂的组合。
[0049]
30.根据以上列出的实施例中任一项所述的方法或包含acc抑制剂和fxr激动剂的组合的药物组合物，用于治疗或预防非酒精性脂肪性肝炎(nash)，并且其中nash是轻度至中度的，其中纤维化水平为f2-f3。
[0050]
31.根据以上列出的实施例中任一项所述的方法或包含acc抑制剂和fxr激动剂的组合的药物组合物，其中基于肝活检确认nash(也称为活检证实的nash)，并且nash是轻度至中度的，其中纤维化水平为f2-f3。
[0051]
32.根据以上列出的实施例中任一项所述的方法或包含acc抑制剂和fxr激动剂的组合的药物组合物，其中存在以下项证明存在nash：
[0052]
i)根据以上实施例中任一项所述的基于在用fxr激动剂治疗之前2年或更短时间获得的肝活检的nash的组织学证据，其中诊断与nash一致，纤维化水平为f1、f2、f3或f4，没有替代性慢性肝病的诊断，或
[0053]
ii)nash的表型诊断，或
[0054]
iii)非侵入性、疾病特异性生物标志物。
[0055]
33.根据以上列出的实施例中任一项所述的方法或包含acc抑制剂和fxr激动剂的组合的药物组合物，用于减轻由acc抑制剂诱发的不良副作用例如体重增加和外周肥胖症，通过共施用法尼醇x受体(fxr)激动剂如卓匹非索以减轻acc抑制剂如菲索克斯塔的不良副作用。
[0056]
34.一种包含治疗有效量的fxr激动剂和acc抑制剂的组合。
[0057]
35.一种包含治疗有效量的fxr激动剂和acc抑制剂的药物组合，用于同时、顺序或分开施用。
[0058]
36.根据以上列出的实施例中任一项所述的方法、组合或药物组合，其中所述fxr激动剂是卓匹非索。在特定的实施例中，以约90μg至约250μg、例如约140μg至约200μg的剂量(例如，日剂量)施用卓匹非索。
[0059]
37.根据以上列出的实施例中任一项所述的方法、组合或药物组合，其中所述fxr激动剂是奥贝胆酸。在特定的实施例中，以约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg或约50mg的日剂量施用奥贝胆酸。
[0060]
38.根据以上列出的实施例中任一项所述的方法、组合或药物组合，其中所述fxr激动剂是西洛非索。在一些实施例中，以约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg或约50mg的日剂量施用西洛非索。在特定的实施例中，以约30mg的日剂量每日一次施用西洛非索。
[0061]
39.根据以上列出的实施例中任一项所述的方法、组合或药物组合，其中所述fxr
激动剂是菲索克斯塔。在一些实施例中，以约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg或约50mg的日剂量施用菲索克斯塔。在特定的实施例中，以约20mg的日剂量每日一次施用菲索克斯塔。
[0062]
在一些方面，提供了如本文定义的fxr激动剂，用于治疗由fxr介导的疾病或障碍，例如肝病或肝障碍，例如慢性肝病或肝障碍，例如选自由以下组成的组的疾病或障碍：胆汁淤积、肝内胆汁淤积、雌激素诱发型胆汁淤积、药物诱发型胆汁淤积、妊娠胆汁淤积、胃肠外营养相关性胆汁淤积、原发性胆汁性肝硬化(pbc)、原发性硬化性胆管炎(psc)、进行性家族性胆汁淤积(pfic)、非酒精性脂肪性肝病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、药物诱发型胆管损伤、胆结石、肝硬化、酒精诱发型肝硬化、囊性纤维化相关肝病(cfld)、胆管阻塞、胆石症、肝纤维化、肾纤维化、血脂异常、动脉粥样硬化、糖尿病、糖尿病肾病、结肠炎、新生儿黄疸、核黄疸的预防、静脉闭塞性疾病、门静脉高压症、代谢综合征、高胆固醇血症、肠道细菌过度生长、勃起功能障碍、由任何上述疾病或由传染性肝炎引起的肝进行性纤维化(例如nafld、nash、肝纤维化、肝性脂肪变性或pbc)。
[0063]
在又另一方面，药物单位剂型组合物包含约90μg、约140μg、约150μg、约160μg、约170μg、约180μg、约190μg、约200μg、约210μg、约220μg、约230μg、约240μg或约250μg的卓匹非索，适合在晚上、或在就寝时间前不久或在就寝时每日一次口服施用。此类单位剂型组合物可以呈选自以下的形式：液体、片剂、胶囊。这些单位剂型组合物还用于治疗慢性肝病，例如非酒精性脂肪性肝病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、药物诱发型胆管损伤、胆结石、肝硬化、酒精诱发型肝硬化、囊性纤维化、胆管阻塞、胆石症、肝纤维化，例如用于治疗非酒精性脂肪性肝炎(nash)，例如用于治疗表型非酒精性脂肪性肝炎(nash)。
[0064]
在又另一个方面，提供了如本文定义的fxr激动剂，用于预防或延迟慢性肝病或肝障碍进展成更晚期或更严重的病症，例如用于预防或延迟选自下组的慢性肝病或肝障碍的进展，该组由以下组成：nafld、nash、肝纤维化和pbc。定义
[0065]
出于解释本说明书的目的，将应用下面的定义，并且在适宜的情况下，以单数形式使用的术语还包括复数形式，并且反之亦然。
[0066]
如本文所用，术语“约”相对于数值x，意指 /-10％，除非上下文另外规定。
[0067]
如本文所用，“acc抑制剂(acc inhibitor/acc inhibitors)”是指能够抑制乙酰辅酶a羧化酶、能够抑制其两种同种型(acc1和acc2)中至少一种的任何药剂。近年来已经披露了几种系统性acc抑制剂(griffith等人,j med chem[药物化学杂志],2014,57(24),10512-26)。
[0068]
优选地，acc抑制剂选自：
[0069]-菲索克斯塔(也以名称gs-0976或nd-630为人所知；参见lawitz等人,clin gastroenterol hepatol[临床胃肠病学与肝病学],2018,16(12),1983-1991)
[0070][0071]-mk-4074(merck；参见kim等人,cell metab[细胞代谢],2017,26(2),394-406)
[0072][0073]-辉瑞公司(pfizer)(参见freeman-cook等人,j med chem[药物化学杂志],2012,55(2),935-4)；
[0074][0075]-辉瑞公司(2012；参见griffith等人,j med chem[药物化学杂志],2014,57(24),10512-26)
[0076][0077]-辉瑞公司(2014；参见griffith等人,j med chem[药物化学杂志],2014,57(24),10512-26)
[0078]
和
[0079]-pf-05221304(辉瑞公司)
[0080][0081]
如本文所用，“fxr激动剂(fxr agonist/fxr agonists)”是指能够结合和激活法尼醇x受体(fxr)(可以称为胆汁酸受体(bar)或nr1h4(核受体亚家族1，组h，成员4)受体)的任何药剂。fxr激动剂可以充当fxr的激动剂或部分激动剂。例如，药剂可以是小分子、抗体或蛋白，优选是小分子。例如在使用荧光共振能量转移(fret)无细胞测定的体外测定中，可以通过几种不同方法测量fxr激动剂的活性，如pellicciari等人j.med.chem.[药物化学杂志],2002第15卷,第45期:3569-72中所描述的。
[0082]
如本文所用，fxr激动剂是指例如以下文献中披露的化合物：wo 2016/096116、wo 2016/127924、wo 2017/218337、wo 2018/024224、wo 2018/075207、wo 2018/133730、wo 2018/190643、wo 2018/214959、wo 2016/096115、wo 2017/118294、wo 2017/218397、wo 2018/059314、wo 2018/085148、wo 2019/007418、cn 109053751、cn 104513213、wo 2017/128896、wo 2017/189652、wo 2017/189663、wo 2017/189651、wo 2017/201150、wo 2017/201152、wo 2017/201155、wo 2018/067704、wo 2018/081285、wo 2018/039384、wo 2015/
138986、wo 2017/078928、wo 2016/081918、wo 2016/103037、wo 2017/143134。
[0083]
优选地，fxr激动剂选自：卓匹非索、尼度非索、奥贝胆酸(6α-乙基-鹅去氧胆酸)、西洛非索(gs-9674、px-102)、met409、agn242266、
[0084]
tern-101(ly2562175)：
[0085]
pxl007(eyp001)：和
[0086]
edp-305：
[0087]
如本文所用，术语“盐(salt或salts)”是指本发明的化合物的酸加成盐或碱加成盐。特别地，“盐”包括“药学上可接受的盐”，并且两者在本文中可以互换使用。
[0088]
如本文所用，术语“药学上可接受的”意指基本上并不干扰一种或多种活性成分的生物活性的有效性的无毒性材料。
[0089]
如本文所用，术语“前药”是指在体内转化成本发明化合物的化合物。前药是活性的或非活性的。在将前药施用给受试者后，前药通过体内生理作用(例如水解、代谢等)被化学改性成本发明的化合物。制备和使用前药中所涉及的适用性和技术是本领域技术人员所熟知的。适合的前药通常是药学上可接受的酯类衍生物。
[0090]
如本文所用，术语“受试者(subject或subjects)”是指哺乳动物生物体，优选患有目的病症(即疾病或障碍)并且将从治疗受益的人类，例如患者。
[0091]
如本文所用，如果受试者将在生物学上、在医学上或在生活质量上从治疗中获益，则这样的受试者是“需要”这种治疗的。
[0092]
如本文所用，术语“治疗(treat、treating或treatment)”任何疾病或障碍在一个实施例中是指改善疾病或障碍(即减缓或阻止或减少疾病或其至少一种临床症状或病理特征的发展)。在另一个实施例中，“治疗”是指减轻或改善疾病的至少一种身体参数或病理特征，例如，包括不能被受试者辨别的那些。在又另一个实施例中，“治疗”是指在身体上(例如，稳定至少一种可辨别的或不可辨别的症状)或在生理上(例如，稳定身体参数)或在这两个方面调节疾病或障碍。在又另一个实施例中，“治疗”是指预防或延迟疾病或障碍，或与其相关联的至少一种症状或病理特征的发作或发展或进展。在又另一个实施例中，“治疗”是指预防或延迟疾病进展至更晚期或更严重的病症，例如肝硬化；或预防或延迟肝移植的需求。
[0093]
如本文所用，术语“非酒精性脂肪性肝病”(nafld)可以指非酒精性脂肪肝(nafl)、
非硬化nash、和伴随硬化的nash。
[0094]
例如，“治疗”nash可以指改善、减轻或调节至少一种与nash相关联的症状或病理特征；例如肝性脂肪变性、肝细胞气球样变性、肝脏炎症和纤维化；例如可以指减缓进展，减少或终止与nash相关联的至少一种症状或病理特征，例如肝性脂肪变性、肝细胞气球样变性、肝脏炎症和纤维化。还可以指预防或延迟肝硬化或肝移植的需求，例如，减缓疾病进展的进程、终止或逆转疾病进展、以及改善临床结果(即预防进展为硬化和283种硬化并发症、减少肝移植的需求、以及提高生存率)。
[0095]
同样，“治疗”nash可以指减缓疾病进展的进程、终止或逆转疾病进展、以及改善临床结果，即预防进展为硬化和脂肪性肝炎的消退以及无肝纤维化恶化(基于nash临床研究网络(crn)组织学评分)。
[0096]
nash的治疗包括：
[0097]
‑“
脂肪性肝炎的消退”定义为无脂肪性肝病或者不伴脂肪性肝炎的孤立或单纯性脂肪变性，并且炎症的nas评分为0-1，气球样变性的nas评分为0，和脂肪变性的nas评分为任何值；硬化并发症、肝移植的需求减少、以及生存率提高；
[0098]-或肝纤维化改善大于或等于一个阶段(nash crn组织学评分)且脂肪性肝炎未恶化(例如，定义为气球样变性、炎症或脂肪变性的nas没有增加)；
[0099]-或脂肪性肝炎的消退和纤维化的改善(如上所定义)两者。
[0100]
人的nafld或nash的“治疗”包括以下一项或多项：
[0101]
a)降低发展nafld或nash的风险，即在可能易患nafld或nash的受试者中未引起nafld或nash的临床症状发展；
[0102]
b)抑制nafld或nash，即阻止或减少nalfd或nash或其临床症状的发展；和
[0103]
c)缓解nafld或nash，即引起nafld或nash的消退、逆转或改善，或者减少其临床症状的数量、频率、持续时间或严重程度。
[0104]
如本文所用，关于疾病或障碍的术语“预防(prevent、preventing或prevention)”是指对处于发展病症(例如，具体疾病或障碍或其临床症状)风险中的受试者进行预防性治疗，使该受试者发展病症的可能性降低。
[0105]
如本文所用，术语“治疗有效量”是指化合物足以实现所述效果的量。因此，如上文所定义，用于治疗或预防肝病或肝障碍的治疗有效量是足以治疗或预防这种疾病或障碍的量。
[0106]“治疗方案”意指疾病的治疗的模式，例如在疾病或障碍的治疗期间使用的给药的模式。
[0107]
如本文所用，术语“肝病或肝障碍”涵盖以下中的一种、多种或全部：非酒精性脂肪性肝病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、药物诱发型胆管损伤、胆结石、肝硬化、酒精诱发型肝硬化、囊性纤维化相关肝病(cfld)、胆管阻塞、胆石症和肝纤维化。
[0108]
如本文所用，术语nafld可涵盖疾病的不同阶段：肝性脂肪变性、nash、纤维化和硬化。
[0109]
如本文所用，术语nash可涵盖脂肪变性、肝细胞气球样变性和小叶炎症。
[0110]
如本文定义，“组合”是指一个单位剂型(例如，胶囊、片剂或药囊)的固定组合、自由(即非固定)组合、或用于组合施用的部件套组(kit of parts)，其中fxr激动剂(例如卓
匹非索)和一种或多种另外的治疗剂可以在同一时间独立地或在时间间隔内单独地施用，特别是在这些时间间隔允许组合伴侣显示合作作用(例如协同作用)的情况下。
[0111]
如本文所用的术语“共施用”或“组合施用”等意在涵盖向有需要的单一受试者(例如受试者)施用另外的治疗剂，并且该另外的治疗剂旨在包括治疗方案，其中不需要通过相同的施用途径和/或在相同时间施用fxr激动剂和另外的治疗剂。本发明组合的每种组分可以同时或顺序以任意顺序施用。共施用包括同时、顺序、重叠、间隔、连续施用及其任何组合。
[0112]
如本文所用的术语“药物组合”是指由一种以上活性成分组合(例如混合)产生的药物组合物并且包括活性成分的固定组合和自由组合。
[0113]
术语“固定组合”意指活性成分以单个实体或剂量的形式同时施用于受试者。
[0114]
术语“自由组合”意指将如本文所定义的活性成分以不同的实体同时、并行或无特定时间限制地顺序地、且以任何顺序施用于受试者，其中此类施用在受试者体内提供了这些化合物的治疗有效的水平。
[0115]“同时施用”意指在同一天施用如本文所定义的活性成分。活性成分可以同时施用(对于固定或自由组合)或一次施用一种(对于自由组合)。
[0116]
根据本发明，“顺序施用”可意指在两天或更多天的连续共施用期间，在任一给定日仅施用如本文所定义的活性成分中的一种。
[0117]“重叠施用”意指在两天或更多天的连续共施用期间，至少一天进行同时施用以及至少一天仅施用如本文所定义的活性成分中的一种。
[0118]
所谓“连续施用”意指没有任何空白日的共施用时段。如上所述，连续施用可以是同时的、顺序的或重叠的。
[0119]
如本文所用，术语“qd”意指每日施用一次。
[0120]
术语“剂量”是指一次施用的药物的指定量。如本文所用，剂量是引发治疗效果的药物的量。例如，剂量将在产品包装或产品信息单中声明。例如，对于卓匹非索，当与卓匹非索相关而使用时，术语“剂量”是游离形式的卓匹非索的量。由于卓匹非索能以盐或氨基酸缀合物的形式存在，应相应地增加相应的成盐物(例如相应的酸)或氨基酸的量。
[0121]
如本文所用，术语“体重增加”是指可能由药物诱发的身体质量增加。因此，人体重增加可能是向此人施用特定药物的结果。为了确定一个人是否超重或肥胖，使用身体质量指数(bmi)。bmi是用于评价体重相对于身高的量度。因此，bmi可以用于确定人是体重过轻、体重正常、超重或是肥胖。参见成人超重和肥胖症鉴别、评价和治疗临床指南身体质量指数表：证据报告(胰岛素抗性和糖尿病前期，nih公开号：04-4893(2004年5月))。
[0122]
施用模式
[0123]
可以将本发明的药物组合物配制为与其预期施用途径相容(例如口服组合物通常包括惰性稀释剂或可食用载体)。施用途径的其他非限制性实例包括肠胃外(例如，静脉内)、皮内、皮下、口服(例如，吸入)、经皮(局部)、跨粘膜和直肠施用。与每种预期途径相容的药物组合物是本领域熟知的。
[0124]
施用时间
[0125]
在晚上施用如本文在以上列出的实施例中定义的本发明的fxr激动剂。
[0126]
在一个实施例中，术语“在晚上施用”通常被定义为从约6pm至约12pm(例如，从约
8pm至约11pm)的任何时间(优选9pm左右)施用。在晚上施用可以在晚餐前、随晚餐或晚餐后进行。
[0127]
在一个实施例中，术语“在晚上施用”是指在就寝时间前不久或在就寝时间施用。在一个实施例中，术语“在晚上施用”是指在就寝时间前不久施用。在一个实施例中，术语“在晚上施用”是指在就寝时间施用。除非本文另有说明，否则术语“就寝时间”具有人在二十四小时的时间段内进行主要睡眠时间段休息的时间的正常含义。在就寝时间前不久施用意指在人正常休息或睡眠(通常4至10小时)时间段之前约1-2小时内施用如本文定义的fxr激动剂。
[0128]
疾病
[0129]
如上文所定义，纤维化或硬化疾病或障碍可以是肝病或肝障碍，例如，如本文所定义的，或肾纤维化。
[0130]
如上文所定义，肝病或肝障碍可以是胆汁淤积、肝内胆汁淤积、雌激素诱发型胆汁淤积、药物诱发型胆汁淤积、妊娠胆汁淤积、胃肠外营养相关性胆汁淤积、原发性胆汁性肝硬化(pbc)、原发性硬化性胆管炎(psc)、进行性家族性胆汁淤积(pfic)、非酒精性脂肪性肝病(nafld)、非酒精性脂肪性肝炎(nash)、药物诱发型胆管损伤、胆结石、肝硬化、酒精诱发型肝硬化、囊性纤维化相关肝病(cfld)、胆管阻塞、胆石症、肝纤维化、肾纤维化、血脂异常、动脉粥样硬化、糖尿病、糖尿病肾病、结肠炎、新生儿黄疸、核黄疸的预防、静脉闭塞性疾病、门静脉高压症、代谢综合征、高胆固醇血症、肠道细菌过度生长、勃起功能障碍，由任何上述疾病或由传染性肝炎引起的肝进行性纤维化。肝病或肝障碍也可以指肝移植。
[0131]
如上文所定义，肠病可以是特发性炎性肠病，例如，克罗恩病或溃疡性结肠炎。
[0132]
在本发明的一个实施例中，(如本文所定义的)药物组合物用于治疗或预防纤维化疾病或障碍，例如，肝病或肝障碍，例如慢性肝病，例如选自由pbc、nafld、nash、药物诱发型胆管损伤、胆结石、肝硬化、酒精诱发型肝硬化、囊性纤维化相关肝病(cfld)、胆管阻塞、胆石症、肝纤维化组成的组的肝病或肝障碍。在本发明的一个实施例中，(如本文所定义的)药物组合用于治疗或预防纤维化，例如肾纤维化或肝纤维化。
[0133]
根据本发明的一个实施例，肝病或肝障碍是指nafld，例如nafld的任何阶段，例如脂肪变性、nash、纤维化和硬化中的任一种。
[0134]
在本发明的一个实施例中，提供了如本文在以上列出的实施例中定义的包含fxr激动剂和acc抑制剂的组合，用于改善肝纤维化而不使脂肪性肝炎恶化。
[0135]
在本发明的另一个实施例中，提供了如本文在以上列出的实施例中定义的本发明的fxr激动剂，用于在不恶化的情况下获得脂肪性肝炎的完全消退，例如改善肝纤维化。
[0136]
在本发明的另一个实施例中，提供了如本文在以上列出的实施例中定义的包含fxr激动剂和acc抑制剂的组合，用于预防或治疗脂肪性肝炎和肝纤维化。
[0137]
在本发明的在又另一个实施例中，提供了如本文在以上列出的实施例中定义的包含fxr激动剂和acc抑制剂的组合，用于减轻nas评分的至少一个特征，即肝性脂肪变性、肝脏炎症和肝细胞气球样变性之一；例如nas评分的至少两个特征，例如肝性脂肪变性和肝脏炎症，或肝性脂肪变性和肝细胞气球样变性，或肝细胞气球样变性和肝脏炎症。
[0138]
在本发明的另一个实施例中，提供了如本文在以上列出的实施例中定义的包含fxr激动剂和acc抑制剂的组合，用于减轻nas评分和肝纤维化的至少一个或两个特征，例如
用于减轻肝脏炎症和肝纤维化、或肝性脂肪变性和肝纤维化、或肝细胞气球样变性和肝纤维化。
[0139]
在本发明的又另一个实施例中，提供了如本文定义的包含fxr激动剂和acc抑制剂的组合，用于治疗或预防阶段3纤维化至阶段1纤维化，例如，阶段3和/或阶段2和/或阶段1纤维化。
[0140]
在本发明的又一个实施例中，提供了如本文在以上列出的实施例中定义的包含fxr激动剂和acc抑制剂的组合，用于治疗或预防肠病，例如特发性炎性肠病，例如克罗恩病和溃疡性结肠炎。
[0141]
fxr激动剂减少药物诱发型体重增加(例如由施用acc抑制剂或用其治疗诱发的药物诱发型体重增加)的功效可以通过在用fxr激动剂和acc抑制剂治疗前后监测受试者的体重并计算受试者的bmi来确定。受试者可能经历低于预期的体重增加或无体重增加。
[0142]
受试者
[0143]
根据本发明，接受本发明的fxr激动剂或如本文定义的包含fxr激动剂和acc抑制剂的组合的受试者可能受到影响或有纤维化疾病或障碍(例如肝病或肝障碍，例如，如上文所定义的那些)的风险。
[0144]
根据本发明，接受本发明的fxr激动剂或包含fxr激动剂和acc抑制剂的组合的受试者可能具有药物诱发的副作用，例如由用acc抑制剂治疗诱发的副作用，如体重增加，其中体重增加是由用acc抑制剂治疗而导致的药物诱发型副作用。
[0145]
在本发明的一些实施例中，受试者是肥胖的或超重的。
[0146]
在本发明的其他实施例中，受试者可为糖尿病受试者，例如可能患有2型糖尿病。受试者可能有高血压和/或高血胆固醇水平。
[0147]
给药方案
[0148]
根据使用的化合物、目标疾病或障碍以及这种疾病或障碍的阶段，给药方案(即药物组合的每种组分的施用剂量和/或频率)可以变化。给药频率将尤其取决于治疗方案的阶段。
[0149]
根据本发明，以约90μg至约250μg、例如约140μg至约200μg、例如约140μg的剂量施用(如上文所定义的)卓匹非索。此类剂量可以用于口服施用。优选地，以约90μg或约140μg的剂量施用(如上文所定义的)卓匹非索。
[0150]
在一些方面，以约90μg、约100μg、约110μg、约120μg、约140μg、或约200μg的剂量施用(如上文所定义的)卓匹非索。此类剂量特别适用于卓匹非索的口服施用。
[0151]
在一些实施例中，以口服递送约120μg、口服递送约140μg、或口服递送约200μg的剂量施用卓匹非索。
[0152]
在一些实施例中，以约90μg的日剂量施用卓匹非索。
[0153]
在一些实施例中，以约120μg的日剂量施用卓匹非索。
[0154]
在一些实施例中，以约140μg的日剂量施用卓匹非索。
[0155]
在一些实施例中，以约200μg的日剂量施用卓匹非索。
[0156]
在一些方面，以约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约40mg或约50mg的日剂量施用奥贝胆酸。在一些实施例中，以约25mg的日剂量施用奥贝胆酸。
[0157]
acc抑制剂给药
[0158]
在一些实施例中，acc抑制剂的总日剂量选自约10mg、约20mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约150mg、约200mg、约250mg、约300mg、约350mg、约400mg、约450mg、约500mg、约550mg、约600mg、约650mg、约700mg、约750mg、约800mg、约850mg、约900mg、约950mg、约1000mg、约1050mg、约1100mg、约1150mg、约1200mg、约1250mg、约1300mg、约1350mg、约1400mg、约1450mg、约1500mg、约1550mg、约1600mg、约1650mg、约1700mg、约1750mg、约1800mg、约1850mg、约1900mg、约1950mg、约2000mg、约2050mg、约2100mg、约2150mg、约2200mg、约2250mg、约2300mg、约2350mg、约2400mg、约2450mg、约2500mg、约2550mg、约2600mg、约2650mg、约2700mg、约2750mg、约2800mg、约2850mg、约2900mg、约2950mg、或约3000mg。
[0159]
在一些实施例中，acc抑制剂的总日剂量为约10mg至约3000mg之间、约10mg至约2000mg之间、约10mg至约1000mg之间、约20mg至约1000mg之间、约30mg至约1000mg之间、约30mg至约750mg之间、约30mg至约500mg之间、约30mg至约250mg之间、约30mg至约100mg之间、约50mg至约500mg之间、和约50mg至约100mg之间。
[0160]
acc抑制剂的单位剂型
[0161]
acc抑制剂优选地配制成单位剂型，以便于施用和实现剂量均匀性。然而，应理解的是，acc抑制剂及其组合物的总日用量将由主治医生在合理的医学判断范围内决定。用于任何特定患者或生物体的具体有效剂量水平将取决于各种因素，包括正在治疗的障碍和障碍的严重程度；使用的具体组合物；患者的年龄、体重、总体健康状况、性别和饮食；施用时间、施用途径、和给定acc抑制剂的排泄速率；治疗持续时间；与acc抑制剂组合使用或同时使用的药物，以及在医学领域熟知的类似因素。普通技术人员会理解，本文所述单位剂型是指一定量的acc抑制剂，其可以作为游离酸或游离碱或作为其药学上可接受的盐提供。
[0162]
在一些实施例中，以包含约5mg至约1000mg之间的acc抑制剂的单位剂量配制品施用acc抑制剂。在某些实施例中，本发明的单位剂量配制品提供约1mg、约5mg、约10mg、约15mg、约20mg、约25mg、约30mg、约35mg、约40mg、约45mg、约50mg、约55mg、约60mg、约65mg、约70mg、约75mg、约80mg、约85mg、约90mg、约95mg、约100mg、约105mg、约110mg、约115mg、约120mg、约125mg、约130mg、约135mg、约140mg、约145mg、约150mg、约155mg、约160mg、约165mg、约170mg、约175mg、约180mg、约185mg、约190mg、约195mg、约200mg、约225mg、约250mg、约275mg、约300mg、约325mg、约350mg、约375mg、约400mg、约425mg、约450mg、约475mg、约500mg、约550mg、约600mg、约650mg、约700mg、约750mg、约800mg、约850mg、约900mg、约950mg、或约1000mg的acc抑制剂。
[0163]
在一些实施例中，以包含约5mg、约30mg、或约150mg的acc抑制剂的单位剂量配制品施用acc抑制剂。在某些实施例中，本发明的胶囊配制品提供约25mg、约50mg、约75mg、约100mg、约125mg、或约150mg的acc抑制剂。在某些实施例中，以约0.01mg/kg至约50mg/kg并且优选约1mg/kg至约25mg/kg的受试者体重/天的剂量水平、每日一次或多次施用acc抑制剂，以获得期望的治疗效果。
[0164]
实例
[0165]
实例1.动物研究
[0166]
根据瑞士动物实验指导原则进行研究。将成年雄性c57bl/6j小鼠圈养，它们可以任意获取水和食物。给小鼠饲喂hf/nash饮食(40千卡％脂肪，2％胆固醇，40千卡％碳水化
合物，research diets(研究饮食公司)d09100301或ssniff special diets(ssniff特殊饮食公司)，饮用水中补充有果糖-蔗糖溶液(42g/l，按重量计55％果糖和45％蔗糖))。
[0167]
通过核磁共振(nmr)分析总体脂肪和瘦肉质量，并且通过磁共振成像(mri)测量肝脂肪。接受hf/nash饮食的小鼠的体重和总脂肪量未一致增加：在第7周hf/nash饮食中，增加少于10g的体重和少于7g的总体脂肪的小鼠(hf/nash进展缓慢，占所有动物的约15％-20％)从干预研究中排除，但分析其进展至nash和hcc的情况。饮食干预研究：饲喂hf/nash饮食持续8周的小鼠转为普通饮食(nd和水)持续12周。
[0168]
药物治疗研究：暴露于hf/nash饮食持续20周的小鼠口服接受ljp305(1mg/kg)、gs-0976(10mg/kg)或媒介物(0.5％甲基纤维素、0.5％吐温80的水溶液)治疗，每日一次持续12周，同时继续饲喂hf/nash饮食。研究结束时，采集血液和组织样品用于分析。
[0169]
分析肝样品的胶原蛋白(quickzyme)、脂质和甘油三酯(cayman)。通过针对18s(肝)或idh3b(脂肪，回肠)对目的基因的ct值进行归一化来计算相对基因表达。对血清timp-1(研发系统公司(r&d systems inc.))、piii-np(n-末端前胶原iii前肽)(华美生物生物技术公司(cusabio biotech co.))、α-胎蛋白(研发系统公司)、瘦蛋白和脂连蛋白(中观尺度发现公司(meso scale discovery))进行测量。
[0170]
用苏木精/伊红(h&e)和天狼星红对石蜡包埋组织进行染色。将iba1(离子钙结合衔接分子1)-阳性冠样结构(艾博抗公司(abcam)，ab178846)、ly6b(伯乐公司(biorad)，mca771)、ucp-1(艾博抗公司，ab109839)或zo-1(英杰公司(invitrogen)，14-9776-80)染色(ventana discovery xt)，然后进行数字化(aperio scanscope xt，徕卡生物系统公司(leica biosystems))和自动图像分析(halo，印迪卡实验室(indica labs))。
[0171]
饲喂高脂肪饮食并随意食用果糖-蔗糖溶液的c57bl/6j小鼠出现了几种人类疾病中可见的肝组织学特征，包括脂肪变性、炎症和纤维化，伴有纤维化生物标志物和肝损伤酶升高。肥胖症和代谢损伤与肠通透性增加以及进展为腺瘤和肝细胞癌相关。
[0172]
使用acc抑制剂gs-0976或fxr激动剂ljp305的治疗性治疗缓解了已确立的伴纤维化nash，但对肝转录组和外周肥胖症有不同效果：acc抑制导致血甘油三酯升高和外周肥胖症，fxr激活预防nash小鼠的外周肥胖症。
[0173]
令人惊讶的是，与经媒介物治疗的动物相比，尽管摄食量相似，但用acc抑制剂gs-0976长期治疗导致体重显著增加。在12周的治疗结束时，经gs-0976治疗的动物的平均体重比经媒介物治疗的小鼠高7％。一致的是，gs-0976治疗显著增加了总脂肪量(相对于媒介物增加27％)、内脏和皮下脂肪(相对于媒介物增加30％)，并且显著升高了循环的瘦蛋白水平(相对于瘦蛋白升高2倍)。相反，使用fxr激动剂ljp305治疗改善了所有测得的代谢读数，显示为体重增量持续下降(hf/nash第32周时，相对于媒介物下降7％)以及内脏和皮下脂肪减少(相对于媒介物分别减少23％和26％)。在这些实验条件下，就改善大泡性脂肪变性和减轻外周肥胖症而言，fxr激动剂ljp305比acc抑制更有效。
[0174]
在使用acc抑制剂gs-0976的本研究中获得的结果与相关的临床2期nash研究十分相似，其中施用gs-0976持续12周导致肝脂肪、血清timp-1和肝损伤降低。gs-0976诱发了已知在脂质代谢中发挥作用的多个基因，其中有催化单不饱和脂肪酸、二脂酰甘油和甘油三酯合成的基因。脂质代谢中的这种转录偏移可以解释组织病理学发现，并且提供额外的生物学背景以解释为什么acc抑制与脂质微滴减少但脂质粗滴水平稳定相关。
[0175]
鉴于acc抑制和fxr激活对nash肝和肥胖症发挥协同和互补作用，本研究为nash中的acc/fxr组合疗法提供了理论基础。
[0176]
实例2.在12周的疗法后，在患有纤维化nash的患者中，卓匹非索在减少肝脏脂肪和血清丙氨酸转氨酶方面的作用(flight-fxr部分c中期结果)
[0177]
flight-fxr(nct02855164)是一项2期的随机、双盲、安慰剂对照、3部分、适应性设计研究，用来在患有非酒精性脂肪性肝炎(nash)的患者中评估几个剂量的卓匹非索(ljn452)的安全性、耐受性、和功效。
[0178]
在nash患者中进行的研究cljn452a2202的部分a和b已经研究了卓匹非索，其剂量范围为每日10μg至90μg，持续12周。卓匹非索表现出对于靶标接合的明显剂量反应(fgf19)和生物活性(ggt)。与安慰剂相比，在所有卓匹非索剂量(10μg、30μg、60μg和90μg)下，alt和肝脏脂肪分数减少。研究显示，卓匹非索通常在高达每日90μg时是良好耐受的，且没有安全信号。在12周时，来自前两个部分(a和b，研究cljn452a2202)的结果证明60μg和90μg的卓匹非索的抗炎和抗脂肪变性功效(基于生物标志物)和有利的安全性。
[0179]
在部分c，将在患有活检证实的nash和纤维化阶段2-3的患者中，经48周评估更高剂量的卓匹非索对生物标志物和组织学的影响。将总共152个患者(64％女性)随机分组，每日一次接受安慰剂(n＝51)、卓匹非索140μg(n＝50)或卓匹非索200μg(n＝51)。在12周时评估的预先指定的终点包括总体安全性，以及丙氨酸转氨酶(alt)、肝脏脂肪分数(hff)、γ谷氨酰转移酶(ggt)、和体重的改变。
[0180]
结果：剂量为200μg的卓匹非索满足预先指定的终点。功效结果呈现在表1中。
[0181]
表1.在重复测量或协方差分析模型(全分析集)中，估计从基线至第12周的alt、ggt、和体重的绝对改变，以及hff的相对改变的最小二乘均数
[0182][0183]
*测量为磁共振成像-质子密度脂肪分数(mri-pdff)。
[0184]
数据呈现为ls平均改变(se)，且报告针对统计显著性的2侧p值alt，丙氨酸转氨酶；ggt，γ谷氨酰转移酶；hff，肝脏脂肪分数；ls，最小二乘；se，标准误差；
[0185]
在安慰剂、卓匹非索140μg、和卓匹非索200μg组中，分别有20％、32％、和64％的患者实现了≥30％的相对hff减少(没有估算缺失值)。严重不良事件的频率低并且在各组间
相当。在具有瘙痒的患者中，两个卓匹非索组中》60％的患者以及安慰剂组中的所有患者都经历了轻度(等级1)严重程度的事件。因瘙痒中断治疗率较低(卓匹非索140μg：n＝1[2％]；卓匹非索200μg：n＝3[6％]；安慰剂：0％)。观察到低密度脂蛋白-胆固醇(ldl-c)的剂量相关的增加。这些脂质改变都没有导致治疗中止或剂量减少。
[0186]
在部分c的此预先指定的中期分析中，在12周的治疗后，更高剂量的卓匹非索导致alt、hff、和体重的稳健且剂量依赖性的减少，并且具有良好的安全性和耐受性。
[0187]
实例3.根据nash crn组织学评分，对患有nash和纤维化(阶段2或3)的受试者进行功效、安全性和耐受性的临床研究
[0188]
主要目标：如通过治疗患有nash和阶段2或3的纤维化的受试者48周后的组织学改善所评估的，证明卓匹非索的功效。
[0189]
次要目标：
[0190]-治疗48周后纤维化改善至少一个阶段，其中nash没有恶化
[0191]-治疗48周后nash消退，其中纤维化没有恶化
[0192]-纤维化改善至少一个阶段
[0193]-治疗48周后纤维化改善至少两个阶段，其中nash没有恶化
[0194]-治疗48周后与基线相比体重减轻
[0195]-治疗48周后肝脂肪含量变化
[0196]-确定研究治疗和nash中肝脏炎症的标志物(alt和ast)的关系
[0197]-确定研究治疗和ggt(胆汁淤积的标志物)的关系
[0198]
研究由以下组成：1)筛选期、2)从第1天随机化开始至第48周的治疗期、和3)研究治疗最后一次给药后4周的随访期。筛选期从签署知情同意书之时开始，并且在已评价所有纳入/排除标准并已进行所有基线评估后持续长达8周。从研究药物的首次给药开始的研究持续时间为52周。参与的总持续时间可以长达60周。
[0199]
有资格入选本研究的受试者必需满足以下所有标准：
[0200]-必须在进行任何评估之前获得书面知情同意书。
[0201]-18岁或以上(在筛选访视时)的男性和女性受试者
[0202]-在筛选期的期间，存在以下项证明存在nash：使用在随机化前不超过6个月获得的肝活检的nafld活动度评分(nas)和nash crn标准，通过集中读取仪(central reader)评估确认nash，其中纤维化阶段为2或3。
[0203]-能够与研究人员很好地沟通，以了解并遵守研究要求。
[0204]
计划的治疗持续时间为48周。由于不可接受的耐受性、疾病进展和/或由研究人员或受试者决定，受试者可能提前中止治疗。
[0205]
在基线访视时将受试者(n＝70)分配至卓匹非索单一疗法组：卓匹非索140μg，每日一次。受试者应在晚上在餐后和每天大约同一时间服用药物，而在基线和第4周，药物将在早上在诊所服用而不是在晚上服用。
[0206]
功效评估应按以下建议顺序完成：
[0207]-mri。
[0208]-肝功能测试：将评估alt、ast、ggt、总碱性磷酸酶(在研究参与期间，如果总碱性磷酸酶》uln，则为同工酶；如果ggt或总碱性磷酸酶》uln，则为5'核苷酸酶)、总胆红素和白
蛋白。
[0209]-使用somascan进行蛋白质测量。
[0210]-肝纤维化的标志物：最初称为将评估以下项：α2-巨球蛋白、载脂蛋白a1、总胆红素、触珠蛋白、ggt和alt。
[0211]-nafld纤维化评分：将用以下公式计算nafld纤维化评分：-1.675 0.037
×
年龄(岁) 0.094
×
bmi(kg/m2) 1.13
×
ifg(空腹血糖升高)/糖尿病(是＝1，否＝0) 0.99
×
ast/alt比率-0.013
×
血小板(
×
109/l)-0.66
×
白蛋白(g/dl)。
[0212]-空腹胰岛素和血糖：将采集血液样品用于空腹胰岛素和血糖评估。
[0213]-肝活检：受试者必须在随机化前的6个月内的肝活检中证明具有nash和肝纤维化阶段2或3(nash临床研究网络(crn)分阶段标准)的组织学证据。
[0214]
此外，可以在筛选/基线以及第12、24和48周进行瞬时弹性成像根据方案中详述的定义和方法，收集标准安全性参数和测量，包括不良事件和严重不良事件。
[0215]
应理解，本文所述的实例和实施例仅用于举例说明目的，其各种修饰或改变对于本领域技术人员将是明了的，并包括在本技术的精神和范围内和所附权利要求书的范围内。本文引用的所有出版物、专利、和专利申请都出于所有目的，通过引用特此并入。