一种具有镇痛活性的东亚钳蝎多肽及其应用

本发明涉及生物医药，尤其涉及一种具有镇痛活性的东亚钳蝎多肽及其应用。

背景技术：

1、疼痛的产生涉及疼痛感受器、传导神经及疼痛中枢的复杂相互作用。机械性压迫、炎症水肿、理化刺激及神经病理性损伤等均可激活痛觉通路，导致中枢神经系统兴奋。当前，临床常用镇痛药物主要包括非甾体抗炎药、阿片类药物及抗惊厥类药物。然而，这些药物分别存在消化道损伤、肝肾毒性、成瘾性、呼吸抑制及过敏反应等严重不良反应，临床应用受到限制。

2、全蝎作为传统药材，具有息风镇痉、通络止痛等功效，其主要入药品种为东亚钳蝎（又称马氏钳蝎）。现代研究表明，东亚钳蝎毒液中富含多种具有药理活性的多肽，其中部分多肽展现出抗微生物、抗肿瘤、抗血栓等药理活性。然而，现有技术多聚焦于东亚钳蝎粗提物或混合组分，具有明确序列且活性显著的单一多肽报道极少，难以满足临床对镇痛药物多样化开发的需求。

技术实现思路

1、本发明从东亚钳蝎基因转录组中识别鉴定到两种镇痛多肽mmtx67和mmtx126，其序列经原核表达获得的重组多肽在体内试验中表现出显著的镇痛活性。基于上述研究成果，从而完成本发明。

2、本发明的技术方案如下：

3、本发明的第一个方面，提供一种东亚钳蝎多肽，所述东亚钳蝎多肽的氨基酸序列如seq id no.1或seq id no.2所示。

4、具体的，多肽mmtx67的氨基酸序列如下：

5、ktscnhlkrcakygfyrnctecckqhkhsggyctmykclcki（seq id no.1）。

6、mmtx126的氨基酸序列如下：

7、smfddgypvkngcriscipdehddlceqfckknkaetggcdfdadackcwgelggmeiwepksseckswndnlitkilen（seq id no.2）。

8、本发明的第二个方面，提供一种编码基因，其编码上述东亚钳蝎来源多肽，所述编码基因的核苷酸序列如seq id no.3或seq id no.4所示。

9、具体的，多肽mmtx67的编码基因的核苷酸序列自5'端至3'端为：

10、aaaactagctgcaatcatttaaagcgatgtgcaaagtatggattttatcgaaattgtaccgaatgctgtaaacaacataaacattcaggaggttattgtacaatgtataaatgcctatgtaaaatataa（seq id no.3）。

11、多肽mmtx126的编码基因的核苷酸序列自5'端至3'端为：

12、tcaatgttcgatgatggatatccagttaaaaacggctgccgaatttcatgcataccagatgagcatgatgatctttgcgaacaattctgcaagaagaataaagcagaaacaggtggatgtgactttgatgcagatgcatgcaaatgttggggagaattaggtggaatggaaatatgggaacctaaatcatcagaatgcaagagttggaatgacaatctaataacaaagattttggaaaattaa（seq id no.4）。

13、本发明对所述编码基因的来源没有特殊限制，采用本领域常规方法制备或者生物公司合成均可。

14、本发明的第三个方面，提供一种重组表达载体，所述重组表达载体包含上述编码基因。

15、具体的，所述重组表达载体通过上述编码基因有效地连接到表达载体上获得。其中，所述表达载体可以为质粒；在本发明的一个具体实施方式中，所述质粒为pet-32a。

16、本发明的第四个方面，提供一种重组菌，其包含上述编码基因或重组表达载体。

17、在本发明中，所述重组菌的出发菌株优选为大肠杆菌，更优选为大肠杆菌bl21(de3)。

18、本发明的第五个方面，提供一种药物组合物，其包含上述东亚钳蝎多肽。

19、进一步的，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体，在此不做具体限定。

20、本发明的第六个方面，提供上述药物组合物在制备镇痛药物中的应用。

21、与现有技术相比，本发明取得了以下有益效果：

22、上述技术方案从东亚钳蝎中鉴定得到的mmtx67、mmtx126多肽序列，经原核表达获得的重组多肽在体内镇痛试验中表现出显著的镇痛活性。在醋酸扭体小鼠模型中，mmtx67在0.5 mg/kg的低剂量下即表现出46.42%的抑制率，在5 mg/kg剂量下抑制率高达93.83%；mmtx126在1 mg/kg剂量下抑制率为92.59%，在5 mg/kg剂量下抑制率达95.56%。表明本发明提供的多肽具有显著的镇痛效果。此外，多肽可通过原核表达系统获得，易于大规模工业化生产，具有制备疼痛相关疾病治疗药物的良好应用前景。

1.药物组合物在制备镇痛药物中的应用，其特征在于，所述药物组合物包含东亚钳蝎多肽，所述东亚钳蝎多肽的氨基酸序列如seq id no.1或seq id no.2所示。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述东亚钳蝎多肽的编码基因的核苷酸序列如seq id no.3或seq id no.4所示。