芍药内酯苷在制备治疗高血压及脑/肾损伤药物中的应用

本发明属于医药。更具体地说，本发明涉及一种芍药内酯苷在制备治疗高血压及脑/肾损伤药物中的应用。

背景技术：

1、高血压是全球最常见的慢性心血管疾病之一，也是脑卒中、慢性肾脏病和心血管死亡的重要危险因素。目前临床上使用的降压药物主要包括血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素ii受体拮抗剂、钙通道阻滞剂和利尿剂等。然而，部分患者的长期血压控制效果仍不理想，尤其在存在高盐摄入因素的情况下，血压波动大、靶器官损伤进展快，仍是影响预后的突出问题。

2、高盐饮食是诱发和加重高血压的重要环境因素。高盐摄入可导致水钠潴留、氧化应激增强、炎症反应激活以及内皮功能障碍，进而促进血压进一步升高，并加重脑、肾等靶器官的损伤。现有降压药物虽然能在一定程度上降低血压，但对于高盐诱导的高血压及其伴随的靶器官损伤，尤其是脑血管和肾功能的保护作用仍存在不足。部分药物在长期使用中可能出现耐受性下降或副作用增加的问题，难以满足临床对高盐相关高血压综合治疗的全面需求。

3、在高血压相关的脑损伤方面，现有研究主要关注脑卒中的发生风险，但对高血压早期阶段的脑微血管结构和功能损伤的干预手段相对有限。脑微血管内皮细胞是血脑屏障的重要组成部分，其紧密连接蛋白的完整性对于维持血脑屏障功能至关重要。长期高血压和高盐刺激可引起脑微血管内皮损伤、紧密连接破坏和血脑屏障通透性增加，进而诱发神经元损伤和脑组织病理改变。然而，现有降压药物针对上述脑微血管结构损伤（包括血脑屏障完整性丧失和微血管内皮功能障碍）的保护作用尚不充分，缺乏能够专门改善高血压相关脑微血管损伤的药物。

4、在高血压相关的肾功能损伤方面，高血压可引起肾小球高灌注、高滤过及肾小管间质损伤，表现为肾小球滤过率降低、肾小管重吸收功能异常以及尿蛋白、血清肌酐和尿素氮水平升高等。现有降压药物虽然能在一定程度上延缓肾功能恶化，但对于已经出现的高盐诱导肾功能损伤，尤其是肾小球滤过率降低和肾小管重吸收功能异常的改善效果仍不理想。此外，部分降压药物需要通过肾脏代谢或排泄，在肾功能受损患者中可能存在药物蓄积风险。

5、上述问题的存在，限制了高盐相关高血压及其靶器官损伤的临床治疗效果的进一步提升。

技术实现思路

1、为了实现本发明的这些目的和其它优点，本发明提供了一种芍药内酯苷在制备治疗高血压及脑/肾损伤药物中的应用，所述高血压为高盐诱导高血压；所述脑肾损伤为高盐诱导高血压伴随的脑微血管结构损伤以及肾功能损伤；其中所述脑微血管结构损伤为血脑屏障完整性丧失以及微血管内皮功能障碍；所述肾功能损伤为肾小球滤过率降低以及肾小管重吸收功能异常。

2、高盐诱导高血压的病理机制与水钠潴留、氧化应激、炎症反应及血管内皮功能紊乱密切相关，上述因素可进一步导致脑微血管内皮细胞紧密连接破坏、血脑屏障通透性增加、微血管舒缩功能失衡以及肾小球高滤过和肾小管重吸收障碍。芍药内酯苷作为白芍中的主要单萜苷类成分，具有抗氧化、抗炎和血管保护活性，可针对高盐诱导高血压的上述多重病理环节发挥作用，从而同时实现降压、改善脑微血管结构完整性、恢复内皮功能以及保护肾功能。其有益效果在于：芍药内酯苷能够降低高盐诱导高血压动物的血压，并同时减轻血脑屏障完整性丧失和微血管内皮功能障碍，改善肾小球滤过率降低和肾小管重吸收功能异常，实现了对同一病因（高盐）引发的多器官损伤的综合干预，弥补了现有降压药物在靶器官保护方面的不足，且作为天然单体成分，其药效明确、机制清晰，有利于质量控制。

3、优选的是，所述芍药内酯苷单独施用，或与缬沙坦联合施用，或与芍药苷联合施用。

4、优选的是，所述芍药内酯苷与缬沙坦联合施用时的质量比为1:6至2:1。

5、优选的是，所述芍药内酯苷与芍药苷联合施用时的质量比为1:5至5:1。

6、本发明还公开了一种治疗高血压及脑肾损伤药物的制备方法，包括以下步骤：

7、将干燥的白芍根茎粉碎后以2倍至10倍重量的亲水性溶剂浸泡，所述亲水性溶剂为水、甲醇水溶液、乙醇水溶液、丙醇水溶液以及异丙醇水溶液中的一种且其中醇的体积百分含量低于30%；在5℃至40℃下以1倍至4倍药材重量每小时的流速渗漉，收集6倍至15倍药材重量的渗漉液，浓缩过滤后得到提取液；

8、将所述提取液以0.5bv/h至3bv/h的流速通过非极性大孔吸附树脂柱，药材量与树脂量的质量比为1:1至3:1，弃去流出液，用1bv至5bv的水冲洗后弃去冲洗液，再用3bv至8bv的体积百分含量为30%至70%的醇水溶液进行梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥后得到白芍总苷提取物；

9、将所述白芍总苷提取物溶解后，采用高速逆流色谱进行分离纯化，以正丁醇-乙酸乙酯-水为溶剂体系，所述溶剂体系中正丁醇、乙酸乙酯与水的体积比为1~4:1~4:5，收集富含芍药内酯苷的流份，浓缩干燥后得到芍药内酯苷粗品；

10、将所述芍药内酯苷粗品以8倍至20倍所述芍药内酯苷粗品重量的乙酸乙酯与甲醇体积比3:1至9:1的混合溶剂溶解后通过硅胶柱，以该混合溶剂为洗脱剂进行梯度洗脱，流速为1bv/h至4bv/h，收集流份并以薄层色谱法以芍药内酯苷对照品为参照检视，收集含芍药内酯苷的流份，回收溶剂后用水溶解过滤，干燥后得到芍药内酯苷产物；

11、将所述芍药内酯苷产物与药学上可接受的辅料混合制成制剂，或将所述芍药内酯苷产物与缬沙坦或芍药苷以及与药学上可接受的辅料混合制成制剂，即得所述治疗高血压及脑肾损伤药物。

12、本制备方法针对白芍根茎中芍药内酯苷的理化性质及含量特点，采用多步骤串联的分离纯化策略。第一步采用低温渗漉提取，利用醇含量低于30%的亲水性溶剂在高盐诱导高血压及脑肾损伤药物的制备中，可在常温条件下充分溶出芍药内酯苷等目标成分，同时抑制脂溶性杂质的溶出，避免高温对有效成分的破坏。第二步采用非极性大孔吸附树脂对提取液中的白芍总苷进行选择性富集，利用树脂对目标成分的吸附作用实现与大量水溶性杂质的初步分离，再以适当浓度的醇水梯度洗脱使芍药内酯苷从树脂上解吸并浓缩。第三步采用高速逆流色谱对白芍总苷提取物进行分离，利用目标成分在正丁醇-乙酸乙酯-水两相溶剂体系中的分配系数差异，实现与共存成分的高效分离，该技术避免了固定相死吸附，样品回收率高。第四步采用硅胶柱梯度洗脱对芍药内酯苷粗品进一步纯化，利用目标成分与结构类似物在硅胶上吸附能力的差异，通过逐步增大洗脱剂极性实现精细分离，并经薄层色谱检视准确定位目标流份。上述各步骤依次衔接，从粗提到精制逐步提高目的物的纯度，最终将产物与辅料制成适宜给药剂型。本方法采用低温渗漉避免有效成分降解，大孔树脂富集操作简便且适合规模化生产，高速逆流色谱分离效率高且避免了固定相不可逆吸附，硅胶柱梯度洗脱可有效去除与芍药内酯苷结构相近的杂质，整套工艺条件温和、操作可控、有机溶剂用量合理，所得芍药内酯苷产物纯度高，可直接制成单方制剂或与缬沙坦或芍药苷制成复方制剂，为高盐诱导高血压及脑肾损伤药物的制备提供了质量稳定、适合工业化生产的工艺路径。

13、优选的是，所述非极性大孔吸附树脂柱中的填料为苯乙烯-二乙烯苯共聚物，其交联度为6%至10%，比表面积为450m2/g至550m2/g，平均孔径为8nm至15nm，且该树脂内部具有由聚合物微球相互连接形成的三维网状孔道结构，聚合物微球直径为60nm至500nm。

14、非极性大孔吸附树脂对白芍总苷中芍药内酯苷的吸附效率和选择性取决于树脂的微观结构参数。苯乙烯-二乙烯苯共聚物为非极性骨架，与芍药内酯苷的极性特征相匹配，有利于目标成分的有效吸附。交联度决定树脂骨架的刚性程度和溶胀性能，控制交联度在6%至10%可在保持树脂机械强度的同时获得适宜的孔隙结构。比表面积直接影响树脂与目标成分的接触位点数量，较高的比表面积有利于提高吸附容量。平均孔径需要与芍药内酯苷的分子尺寸相适应，孔径过小会阻碍目标分子进入孔道内部，导致吸附位点浪费，孔径过大则比表面积下降且非特异性吸附增加，8 nm至15 nm的孔径范围与芍药内酯苷的分子尺寸匹配良好。树脂内部由聚合物微球相互连接形成的三维网状孔道结构提供了目标成分在树脂内部扩散的通道，微球直径在60 nm至500 nm范围内可形成均匀的孔道网络，有利于吸附和解吸过程中的传质。通过控制上述参数的组合，使树脂对白芍总苷中芍药内酯苷具有更高的吸附选择性和吸附容量，同时解吸效率良好，减少了目标成分在流出液中的流失和杂质共吸附，显著提高了白芍总苷提取物中芍药内酯苷的含量，为后续纯化步骤提供了质量更好的起始物料。

15、优选的是，所述非极性大孔吸附树脂柱中填料的制备方法为：

16、以纯二乙烯苯计，将苯乙烯单体与二乙烯苯单体按照质量比为1:0.06至1:0.12混合，加入致孔剂以及引发剂，所述致孔剂为甲苯与正庚烷的混合物且甲苯与正庚烷的体积比为2:1至4:1，所述致孔剂的总质量为苯乙烯单体与二乙烯苯单体总质量的80%至120%，所述引发剂为过氧化苯甲酰且其质量为苯乙烯单体与二乙烯苯单体总质量的0.5%至1.5%；

17、将混合所得油相溶液加入到含有质量百分比浓度为0.5%至2%的明胶以及质量百分比浓度为0.5%至1.5%的十二烷基硫酸钠的水相溶液中，油相溶液与水相溶液的体积比为1:3至1:5，在搅拌转速为200rpm至400rpm的条件下升温至75℃至85℃反应2h至4h，再升温至85℃至95℃反应4h至8h，过滤得到树脂初品；

18、将所述树脂初品依次用纯化水洗涤2次至3次、用体积分数为95%的乙醇水溶液以3bv/h至5bv/h的流速进行动态柱洗脱，洗脱体积为10bv至20bv，以除去致孔剂，再用纯化水洗涤至洗涤液中无乙醇残留；

19、收集最后一次洗涤液，采用顶空气相色谱法检测洗涤液中甲苯残留量以及正庚烷残留量，当甲苯残留量低于10mg/l且正庚烷残留量低于10mg/l时，判定致孔剂已去除合格；

20、将洗涤合格的树脂初品在50℃至60℃下真空干燥12h至24h，筛分得到粒径范围为0.315mm至0.630mm的树脂颗粒，即得所述非极性大孔吸附树脂；所述树脂的交联度为6%至10%，所述树脂内部微球直径范围为60nm至500nm，比表面积为450m2/g至550m2/g，平均孔径为8nm至15nm。

21、非极性大孔吸附树脂的分离性能由其微观结构决定，而微观结构受聚合工艺各参数的直接调控。单体配比方面，通过控制苯乙烯与二乙烯苯的质量比在特定范围，可在骨架中引入适量的交联点，使交联度落在目标区间，既保证树脂的机械强度，又赋予其适宜的溶胀行为和孔隙结构。致孔剂的选择和用量方面，采用甲苯与正庚烷的混合物作为致孔剂，利用二者在聚合体系中的相容性差异调控相分离过程，通过调整二者的配比和总用量，可在聚合过程中形成尺寸可控的微球堆积孔和微球内部孔，获得所需的比表面积、平均孔径和孔道结构。引发剂过氧化苯甲酰在升温过程中分解产生自由基引发聚合，其用量需控制在适当范围，以确保聚合反应平稳进行且分子量分布合理。聚合工艺方面，采用明胶和十二烷基硫酸钠作为悬浮稳定剂，在特定油水比和搅拌速度下形成稳定的油滴分散体系，通过分段升温聚合策略，先在较低温度下完成成核和微球生长，再在较高温度下使微球内部进一步交联固化，形成由微球相互连接构成的三维网状孔道结构。后处理方面，先用纯化水洗涤除去树脂表面的分散剂和少量未反应单体，再用95%乙醇以动态柱洗脱方式充分溶出残留在树脂孔道内的甲苯和正庚烷，通过分阶段控制流速延长接触时间，确保致孔剂被彻底去除，最后以顶空气相色谱法定量检测洗涤液中的致孔剂残留量，达到安全阈值后方可判定合格。干燥和筛分获得粒径均一的树脂颗粒，以保证装柱后的层析效果。通过上述步骤的协同控制，所得树脂的交联度、比表面积、平均孔径和内部微球直径均能被调控至目标范围，孔道结构规整且尺寸分布集中，致孔剂残留量符合安全标准，树脂批次间重现性好；应用于上述制备方法时，该树脂对白芍总苷中芍药内酯苷表现出的吸附选择性和吸附容量，有利于提高目标成分的富集效率和产物纯度。

22、优选的是，所述用体积分数为95%的乙醇水溶液以3bv/h至5bv/h的流速进行动态柱洗脱，具体过程为：

23、第一阶段洗脱将体积分数为95%的乙醇水溶液以3bv/h至4bv/h的流速通入树脂初品，洗脱体积为5bv至8bv；

24、在第一阶段洗脱结束后立即开始第二阶段洗脱，将体积分数为95%的乙醇水溶液以4bv/h至5bv/h的流速通入树脂初品，洗脱体积为5bv至12bv，第一阶段洗脱体积与第二阶段洗脱体积的总和为10bv至20bv；

25、在所述第二阶段洗脱结束后，再用纯化水以2bv/h至4bv/h的流速洗涤被洗脱后的树脂初品，洗涤体积为3bv至5bv，洗涤至洗涤液中无乙醇残留。

26、树脂初品在聚合完成后，大量致孔剂（甲苯和正庚烷）残留在树脂内部的三维网状孔道结构中，需采用95%乙醇对其进行动态柱洗脱以充分去除。乙醇能够溶解致孔剂并使其随流动相排出，但树脂孔道内部致孔剂的溶出过程受扩散控制，洗脱流速和洗脱体积的合理分配直接影响去除效率和树脂结构保护。采用分阶段洗脱策略，第一阶段以相对较低的流速通入乙醇，使乙醇有足够时间渗入树脂微球内部的微小孔道，充分浸润并溶解致孔剂，促进致孔剂从树脂内部向表面扩散；第二阶段适当提高流速，加快已溶解致孔剂从树脂表面向液相主体的传质速率，将致孔剂高效带出柱外，同时避免因长时间低速洗脱导致的操作周期过长。两阶段洗脱体积的分配和总和控制在适宜范围内，可确保致孔剂被完全置换而不影响树脂的孔道结构和机械强度。洗脱完成后用纯化水洗涤，一方面置换树脂中残留的乙醇，另一方面进一步去除可能存在的少量水溶性杂质，并使树脂由有机溶剂环境转变为水相环境，为后续在水相体系中的吸附应用做好准备。分阶段动态洗脱方法兼顾了致孔剂的高效去除和树脂结构的完整性，避免了单一流速下可能出现的内部扩散不完全或洗脱效率低下的问题；总洗脱体积的合理控制减少了乙醇的消耗量，降低了后处理成本；后续水洗不仅保证了树脂中无乙醇残留，也避免了有机溶剂对后续吸附过程可能产生的干扰，使树脂的孔道结构和表面性质得到有效保护，从而保持稳定的吸附-解吸性能，并确保致孔剂残留量符合安全标准，提高了树脂使用的安全性。

27、优选的是，所述用3bv至8bv的体积百分含量为30%至70%的醇水溶液进行梯度洗脱的具体过程为：

28、用第一醇水溶液进行洗脱，所述第一醇水溶液的体积百分含量为30%至40%，所述第一醇水溶液的用量为1bv至3bv，洗脱流速为0.5bv/h至3bv/h，弃去第一流出液；

29、用第二醇水溶液进行洗脱，所述第二醇水溶液的体积百分含量为45%至55%，所述第二醇水溶液的用量为3bv至6bv，洗脱流速为0.5bv/h至3bv/h，收集第二流出液作为目标洗脱液；

30、将所述目标洗脱液浓缩干燥后得到白芍总苷提取物。

31、大孔吸附树脂上样并水洗后，树脂上同时吸附有芍药内酯苷、芍药苷以及其他极性和非极性杂质。利用不同组分与树脂之间吸附力的差异，通过依次改变洗脱液的醇浓度可实现分步解吸。先用低浓度醇水溶液（1%至10%）冲洗，可除去残留在树脂表面和孔道中的水溶性杂质，避免这些杂质干扰后续的分离效果。随后用体积百分含量为30%至40%的醇水溶液进行第一段洗脱，该浓度下一些吸附力较弱的非目标成分被优先解吸而排出，弃去该流出液可进一步去除杂质。再用体积百分含量为45%至55%的醇水溶液进行第二段洗脱，该醇浓度下芍药内酯苷能够获得适宜的分配系数而从树脂上有效解吸，同时与结构相近的杂质在解吸时间上形成差异，使芍药内酯苷在第二流出液中集中富集。该设计原理充分利用了梯度洗脱中溶剂的极性递变规律，使不同吸附强度的组分按顺序从树脂上洗脱，避免了等度洗脱时目标成分与杂质同时洗脱造成分离效果不佳的问题。通过上述梯度洗脱方案，目标洗脱液中芍药内酯苷相对于总固形物的含量显著提升，共洗脱的杂质总量减少，获得的白芍总苷提取物中目标成分浓度更高，从而减轻了后续高速逆流色谱和硅胶柱纯化的分离负荷，提高了后续纯化步骤的效率和终产物的收率，同时减少了分离过程中的溶剂消耗和时间成本。

32、优选的是，所述硅胶柱的梯度洗脱按照以下依次进行的步骤实施：

33、在将所述芍药内酯苷粗品以8倍至20倍所述芍药内酯苷粗品重量的乙酸乙酯与甲醇体积比3:1至9:1的混合溶剂溶解并通过硅胶柱之后，在所述硅胶柱上使用所述混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，所述梯度洗脱包括依次进行的洗脱阶段一、洗脱阶段二、洗脱阶段三以及洗脱阶段四；

34、所述洗脱阶段一使用乙酸乙酯与甲醇体积比为9:1的混合溶剂作为第一洗脱剂，所述第一洗脱剂的用量为0.5bv至1.5bv，洗脱流速为1bv/h至2bv/h，弃去第一洗脱阶段流出液；

35、所述洗脱阶段二使用乙酸乙酯与甲醇体积比为7:1至8:1的混合溶剂作为第二洗脱剂，所述第二洗脱剂的用量为1.5bv至3bv，洗脱流速为1bv/h至2bv/h，收集第二洗脱阶段流出液，以薄层色谱法以芍药内酯苷对照品为参照检视，根据检视结果收集含有芍药内酯苷的流份作为中间产物一，不含芍药内酯苷的流份合并后留作备用；

36、所述洗脱阶段三使用乙酸乙酯与甲醇体积比为5:1至6:1的混合溶剂作为第三洗脱剂，所述第三洗脱剂的用量为2bv至4bv，洗脱流速为1bv/h至3bv/h，收集第三洗脱阶段流出液，以薄层色谱法以芍药内酯苷对照品为参照检视，根据检视结果收集含有芍药内酯苷的流份作为中间产物二，不含芍药内酯苷的流份合并后留作备用；

37、所述洗脱阶段四使用乙酸乙酯与甲醇体积比为3:1至4:1的混合溶剂作为第四洗脱剂，所述第四洗脱剂的用量为1bv至2bv，洗脱流速为1bv/h至2bv/h，收集第四洗脱阶段流出液，以薄层色谱法以芍药内酯苷对照品为参照检视，根据检视结果收集含有芍药内酯苷的流份作为中间产物三，不含芍药内酯苷的流份合并后留作备用；

38、将所述中间产物一、所述中间产物二以及所述中间产物三合并，回收溶剂，残留物用水溶解、过滤、干燥，得到芍药内酯苷产物；

39、将所述洗脱阶段一中弃去的第一洗脱阶段流出液、所述洗脱阶段二中不含芍药内酯苷的流份、所述洗脱阶段三中不含芍药内酯苷的流份以及所述洗脱阶段四中不含芍药内酯苷的流份合并，回收溶剂，然后补充乙酸乙酯和/或甲醇将体积比调整至3:1至9:1，用于下一批芍药内酯苷粗品的溶解使用。

40、芍药内酯苷粗品中除目标成分外，还含有与其结构相似的芍药苷等类似物，这些成分在硅胶上的吸附行为相近，单纯等度洗脱难以实现有效分离。本发明采用多阶段梯度洗脱策略，利用洗脱剂极性依次增大（乙酸乙酯与甲醇体积比从9:1逐步降至3:1），使不同吸附强度的组分按顺序从硅胶柱上解吸。第一阶段使用极性最低的洗脱剂，将吸附力最弱的非目标杂质优先洗脱并弃去；第二阶段至第四阶段逐步提高洗脱剂极性，使芍药内酯苷在各阶段中被分段洗脱，同时与结构类似物在洗脱时间上形成错位，从而实现精细分离。薄层色谱法实时检视可准确定位含芍药内酯苷的流份，避免目标成分的遗漏或混杂。此外，将不含芍药内酯苷的流份合并回收溶剂后调整极性比例再循环使用，充分利用了硅胶分离过程中产生的废溶剂。梯度洗脱能够有效分离芍药内酯苷与其结构类似物，所得产物纯度显著提高；多阶段收集并合并含目标成分的流份，保证了目标物的回收率；不含目标成分的流份经溶剂调整后循环利用，大幅降低了溶剂消耗量和生产成本，使该纯化方法兼具高分离度和经济实用性，适合工业化生产。

41、本发明至少包括以下有益效果：本发明首次明确了芍药内酯苷单体对该类型高血压的降压作用，并同时改善其伴随的脑微血管结构损伤以及肾功能损伤，实现了降压与靶器官保护的双重药效，弥补了现有药物在高盐相关高血压综合治疗方面的不足。通过将芍药内酯苷单独施用、与缬沙坦联合施用或与芍药苷联合施用，能够灵活适配不同临床治疗需求，上述比例范围内均可产生协同增效作用，可在降低单一药物用量的同时获得更优的降压和靶器官保护效果，减少了单一药物高剂量可能带来的不良反应风险。本技术还提供了所述治疗高血压及脑肾损伤药物的制备方法，通过将干燥的白芍根茎经渗漉、非极性大孔吸附树脂富集、高速逆流色谱分离及硅胶柱梯度洗脱相结合，实现了从植物原料到高纯度芍药内酯苷产物的完整工艺流程，该方法工艺条件温和、操作可控，获得的芍药内酯苷产物可直接或与缬沙坦或芍药苷混合制成制剂，为所述药物应用提供了质量稳定、可工业化实施的物质基础。通过对非极性大孔吸附树脂的填料组成、交联度、比表面积、平均孔径及内部微球直径进行限定，使树脂在吸附和解吸过程中对白芍总苷中芍药内酯苷具有更高的选择性和容量，显著提高了目标成分的富集效率。该树脂的制备方法采用特定比例的苯乙烯与二乙烯苯单体、混合致孔剂以及引发剂，在特定水相体系中经分段聚合反应制得，并通过动态柱洗脱和残留溶剂检测确保致孔剂去除完全，所得树脂粒径均匀、孔道结构规整、溶剂残留合格，在保证分离效果的同时满足安全性要求。树脂后处理中乙醇的分阶段动态洗脱工艺可在高效去除致孔剂的前提下避免流速冲击对树脂结构的破坏，洗脱完毕后以纯化水洗涤至无乙醇残留，进一步保证了树脂的洁净度。在大孔树脂梯度洗脱步骤中，通过特定浓度梯度程序实现了对芍药内酯苷的选择性富集，显著减少了后续纯化步骤中的杂质干扰，提高了整体工艺效率。在硅胶柱纯化阶段，采用依次增大的极性梯度洗脱使芍药内酯苷与其结构类似物得以有效分离，避免等度洗脱分离不彻底的缺陷，同时将不含目标成分的流份合并回收并调整溶剂比例后循环使用，大幅降低了溶剂消耗量和生产成本，使该纯化方法兼具高分离度和经济实用性。

42、本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。