一种吸入用1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷中有关物质的检测方法与流程

本发明属于药物分析，具体涉及一种吸入用1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷中有关物质的检测方法。

背景技术：

1、1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷（简称p227ea），分子式c3hf7，相对分子质量170.04。在常温常压下为无色气体，在加压下呈液态，具有清洁、低毒、电绝缘性能好、灭火效率高等优点。作为一种化学惰性且不易燃的氢氟烷，七氟丙烷还广泛用于医用喷雾剂，如药物气雾剂、鼻用喷雾剂及其他口服和局部喷雾剂。由于七氟丙烷是经认证的医用气体，它曾被尝试作为常用sf6（1）的替代品，在肺功能测定中七氟丙烷作为示踪气体使用。随着臭氧层保护的需求，七氟丙烷逐步成为药用气雾剂当中淘汰氢氟烷烃的核心替代原料。

2、为了实现逐步淘汰氯氟烃（cfc）类消耗臭氧层物质，全面推广氢氟烷烃（hfa）环保替代产品，在气雾剂应用领域，以七氟丙烷、四氟乙烷替代传统 cfc 抛射剂是重点实施方向之一。同时，为了强化药用氢氟烷烃辅料全流程质量管控，严控生产过程伴生的含氟卤代杂质，建立配套痕量杂质检测标准体系，兼顾臭氧层保护与医药产品临床使用安全，也是重要任务。

3、七氟丙烷作为第三代绿色环保抛射剂，目前在药用领域主要分为外用和吸入两大应用类型。国内现行《中国药典》2025年版已收录七氟丙烷相关标准，但当前标准仅针对外用气雾剂制定，其控制策略与限度指标主要基于外用给药后经皮吸收低、全身暴露量小的特点而制定。然而，氢氟烷烃类抛射剂的国内外标准对比研究表明，吸入气雾剂因药物经呼吸道直接递送至肺部，可经肺泡毛细血管快速且近乎完全地进入体循环，其对抛射剂中水分、酸度及杂质的控制要求应显著高于外用制剂。与此同时，国家药品监督管理局在已上市吸入气雾剂变更抛射剂研究技术要求中亦明确指出，四氟乙烷（hfa-134a）和七氟丙烷（hfa-227ea）作为氯氟烃（cfc）的替代抛射剂用于吸入给药时，需针对有关物质及潜在基因毒性杂质建立更为严格的质控策略。因此，为满足吸入用七氟丙烷的安全性评价需求，有必要在现行标准基础上，建立灵敏度更高、专属性更强的痕量杂质检测方法。

4、目前已公开的七氟丙烷检测方法大多针对灭火剂行业，缺少药用吸入抛射剂专用检测技术。陈彩琴等（陈彩琴,杨波,邵红才,等.七氟丙烷灭火剂国家标准纯度分析方法研究[j].有机氟工业,2023,(04):22-25.）采用气相色谱法对七氟丙烷灭火剂纯度进行分析，优化了色谱操作条件，验证了方法的线性、回收率和精密度。另有研究采用气相色谱-质谱联用法（gc-ms）对七氟丙烷进行定性分析，并采用气相色谱氢火焰离子检测器（fid）以面积归一法测定其纯度，探讨了多种氟利昂类物质与七氟丙烷的色谱分离情况（徐丹, 周良春.七氟丙烷定性分析及纯度的检测[j]. 广州化工, 2019, 47(3).）。杜世娟等（杜世娟, 杨文龙, 李月琪, 范军. gcms结合顶空测定组合聚醚中7种发泡剂[j]. 环境化学, 2020,(9): 2624-2626.）将gc-ms技术应用于组合聚醚中7种发泡剂（含七氟丙烷）的痕量检测，采用选择离子监测（sim）模式采集、内标法定量，证实了质谱检测器在氟碳类化合物低浓度定量中的灵敏度优势。

5、基于此，本发明旨在建立一种灵敏度高、结果准确可靠的气相色谱-质谱联用（gc-ms）方法，为吸入用七氟丙烷的质量控制提供适宜的技术手段。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种吸入用1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷中有关物质的检测方法，所述有关物质为八氟丙烷、三氟甲烷、五氟一氯乙烷、1,1,1,2,2-五氟丙烷、1,2-二氯-1,1,2,2-四氟乙烷、1,1,1,2,3,3-六氟丙烷、八氟环丁烷、五氟乙烷、1,1,1,3,3-五氟丙烯、1,1,1,2-四氟乙烷、1,1,1,3,3,3-六氟丙烷、2-氯-1,1,1,2 -四氟乙烷；

2、采用气相色谱与质谱联用法进行检测，包括如下步骤：

3、步骤1，供试品和工作混合物的制备：

4、取液态本品至真空气体取样袋中，使其自然蒸发成气态后，作为供试品；

5、取一个真空气体取样袋，注入氮气，然后用气密针取八氟丙烷对照品、三氟甲烷对照品、五氟一氯乙烷对照品、1,1,1,2,2-五氟丙烷对照品、1,2-二氯-1,1,2,2-四氟乙烷对照品、1,1,1,2,3,3-六氟丙烷对照品、八氟环丁烷对照品、五氟乙烷对照品、1,1,1,3,3-五氟丙烯对照品、1,1,1,2 -四氟乙烷对照品、1,1,1,3,3,3-六氟丙烷对照品、2-氯-1,1,1,2-四氟乙烷对照品、1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷对照品到气体取样袋中，平衡后得到工作混合物；

6、步骤2，对所述工作混合物和供试品进行检测，其中，所述气相色谱的条件为：

7、色谱柱：两根vf-624ms（0.25mm×60m，1.40μm）色谱柱串联；

8、柱温：起始温度为-15~-17℃，以每分钟2℃~4℃的速率升温至-10℃~-12℃，维持5min~6min，然后以每分钟2℃~4℃的速率升温至15℃~17℃，维持5min~7min，再以每分钟20℃~25℃的速率升温至180℃~200℃，维持5min~10min；

9、进样口温度：80℃；

10、分流比：5:1~6:1；

11、所述质谱采用电子轰击离子源，检测模式为全扫描模式，通过计算响应因子测定其杂质含量。

12、进一步地，所述柱温为：起始温度-15℃，以每分钟2℃的速率升温至-10℃，维持5分钟，然后以每分钟2℃的速率升温至15℃，维持5分钟，再以每分钟20℃的速率升温至180℃，维持5min。

13、进一步地，所述分流比为5:1。

14、进一步地，所述气相色谱的载气为氦气，柱流速为1~1.1ml/min，优选为1.1ml/min。

15、进一步地，所述检测的进样体积为200-300 μl，优选为250μl。

16、进一步地，所述质谱中离子源温度为230℃，四级杆温度为150℃。

17、进一步地，所述工作混合物中各对照品的浓度分别为1.5μg/g、3μg/g、4.5μg/g。

18、在本发明的一个具体实施例中，先将各对照品制成各组分浓度约为300μg/g的贮备混合物；再另取一个真空气体取样袋，注入一定体积的氮气，然后使用气密针量取贮备混合物适量至取样袋中，平衡20~30分钟，制得各组分浓度约为1.5μg/g、3μg/g、4.5μg/g的混合物，即为工作混合物。

19、由于七氟丙烷主成分本身的急性毒性较低，一般认为在常规使用浓度下是安全的（对七氟丙烷灭火剂毒性的探讨[j]. 消防科学与技术, 2004(4).）。然而，其杂质谱的潜在安全隐患不容忽视。动物急性呼吸毒性试验也进一步证实，七氟丙烷杂质的种类和含量与其吸入安全窗口密切相关（赵岩, 李慧. 新灭火剂七氟丙烷的急性呼吸毒性试验[j]. 中国工业医学杂志, 2002, 15(3): 168-170.）。

20、本发明建立的gc-ms法13个组分（含主成分在内）在0.5μg/g~6μg/g内呈良好的线性关系，相关系数r均大于0.99，定量限在0.05~0.2μg/g，检测限在0.02~0.05μg/g，精密度峰面积rsd均小于5%，加标回收率在91.9%~118.6%，回收率良好，可实现低浓度有害工艺杂质的精准检出与有效控制。该方法弥补了现有质控技术的不足，为吸入用七氟丙烷的质量控制、安全评价及临床用药安全保障，提供了准确、可靠、实用的分析技术支撑。