一种无离心前处理的全血血小板检测操作方法与流程

本发明涉及血小板功能检测，具体涉及一种无离心前处理的全血血小板检测操作方法。

背景技术：

1、血小板聚集功能检测用于评价血小板受到血小板聚集诱导剂作用后的聚集反应。现有检测方式中，过滤网压力法能够直接采用抗凝全血进行检测，通过向抗凝全血中加入不同浓度的血小板聚集诱导剂，使形成的血小板聚集块随全血通过微孔过滤网，并根据血小板聚集块对微孔过滤网产生堵塞时形成的压力响应评价血小板聚集程度。在进行多个浓度的检测时，通常将抗凝全血分配形成多个诱导反应样本，并按照预设检测顺序依次完成多个诱导反应样本的压力响应采集。

2、但是，现有多个诱导反应样本按照预设检测顺序依次进行检测时，前序诱导反应样本需要占用样本位置切换、过滤网吸引机构定位、样本吸取、压力采集以及样本排出所需的时间，使不同诱导反应样本实际首次到达微孔过滤网的时刻存在先后差异；当多个诱导反应样本同时或者按照与实际检测节拍无关的固定时间间隔启动诱导时，不同诱导反应样本对应的实际有效反应时长存在差异，使不同浓度的血小板聚集诱导剂对应的压力响应同时受到反应时间差异的影响，降低多个压力响应之间的可比性以及全血血小板聚集功能检测结果的稳定性。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明提供一种无离心前处理的全血血小板检测操作方法，解决现有多个不同浓度的诱导反应样本按照预设检测顺序依次进行检测时，由于不同诱导反应样本实际首次到达微孔过滤网的时刻存在先后差异，使不同诱导反应样本的实际有效反应时长不一致，进而导致不同浓度的血小板聚集诱导剂对应的压力响应受到反应时间差异干扰的问题。

2、为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种无离心前处理的全血血小板检测操作方法，包括：

3、s1、获取抗凝全血，在不对所述抗凝全血进行离心处理的条件下，将所述抗凝全血分配形成多个诱导反应样本，并使多个所述诱导反应样本分别对应不同浓度的血小板聚集诱导剂；

4、s2、按照预设检测顺序确定各所述诱导反应样本预计首次到达微孔过滤网的预计过滤时刻以及对应的当前预计检测完成时刻，设置目标有效反应时长，并根据所述预计过滤时刻和所述目标有效反应时长反向确定各所述诱导反应样本的诱导启动时刻；

5、s3、按照各所述诱导启动时刻使对应的所述诱导反应样本与所述血小板聚集诱导剂混合，并按照所述预设检测顺序使各所述诱导反应样本依次通过所述微孔过滤网，采集对应的压力响应，记录实际诱导启动时刻、实际首次到达所述微孔过滤网的时刻和实际检测完成时刻；

6、s4、将前序诱导反应样本的所述实际检测完成时刻与所述当前预计检测完成时刻进行比较，得到本次时间偏移，根据所述本次时间偏移修正尚未启动诱导的后续诱导反应样本的所述预计过滤时刻和所述当前预计检测完成时刻，并根据修正后的所述预计过滤时刻重新确定对应的所述诱导启动时刻；

7、s5、根据各所述诱导反应样本的所述实际诱导启动时刻和所述实际首次到达所述微孔过滤网的时刻确定实际有效反应时长，将所述实际有效反应时长与所述目标有效反应时长进行比较，并根据实际有效反应时长满足预设允许范围的多个所述压力响应获得全血血小板聚集功能检测结果。

8、进一步地，所述目标有效反应时长为所述血小板聚集诱导剂与对应的所述诱导反应样本完成混合的时刻至所述诱导反应样本首次到达所述微孔过滤网的时刻之间的持续时间。

9、进一步地，所述预计过滤时刻根据样本位置切换、过滤网吸引机构定位、样本吸取、压力采集以及样本排出对应的预计占用时间确定，所述预计占用时间根据检测装置执行对应检测动作获得的检测时序参数确定。

10、进一步地，确定所述诱导启动时刻时，以对应的所述预计过滤时刻为基准向前回溯所述目标有效反应时长，使按照所述预设检测顺序越靠后的所述诱导反应样本具有越晚的所述诱导启动时刻。

11、进一步地，所述当前预计检测完成时刻为经过此前时间修正后当前采用的预计检测完成时刻；根据所述本次时间偏移修正所述后续诱导反应样本的所述预计过滤时刻后，同步更新对应的所述当前预计检测完成时刻，并以更新后的所述当前预计检测完成时刻作为下一次所述本次时间偏移的比较基准。

12、进一步地，确定所述实际首次到达所述微孔过滤网的时刻时，在样本吸取前获取压力基线及压力基线波动范围，在样本吸取开始后建立过滤事件识别时间窗口，并在所述过滤事件识别时间窗口内连续采集所述压力响应，当连续获得的压力采样结果开始持续偏离所述压力基线波动范围时，将首次满足持续偏离条件的压力采样时刻确定为所述实际首次到达所述微孔过滤网的时刻。

13、进一步地，当任一所述诱导反应样本的所述实际有效反应时长与所述目标有效反应时长之间的偏差超过所述预设允许范围时，将对应的所述诱导反应样本标记为时序异常通道，并使所述时序异常通道对应的所述压力响应不参与所述全血血小板聚集功能检测结果的确定。

14、进一步地，当仅一个所述诱导反应样本被标记为所述时序异常通道时，对所述时序异常通道执行重新检测；当多个所述诱导反应样本被标记为所述时序异常通道且剩余所述压力响应不足以获得所述全血血小板聚集功能检测结果时，重新执行多个所述诱导反应样本的检测。

15、进一步地，所述预设允许范围通过在血小板聚集诱导剂浓度、抗凝全血体积、检测温度、搅拌条件、压力采集条件和微孔过滤网条件保持一致的情况下改变所述实际有效反应时长，并根据不同实际有效反应时长对应的所述压力响应是否满足重复性要求以及所述全血血小板聚集功能检测结果是否发生改变确定。

16、进一步地，多个所述诱导反应样本包括第一诱导反应样本、第二诱导反应样本、第三诱导反应样本和第四诱导反应样本，分别对应反应终浓度为0.5 μm、1.0 μm、2.0 μm和4.0 μm的二磷酸腺苷，并按照所述二磷酸腺苷的浓度由低至高确定所述预设检测顺序。

17、本发明提供了一种无离心前处理的全血血小板检测操作方法。具备以下有益效果：

18、1、本发明根据各诱导反应样本的预计过滤时刻和目标有效反应时长反向确定诱导启动时刻，并根据前序诱导反应样本产生的本次时间偏移对尚未启动诱导的后续诱导反应样本进行增量修正，使不同诱导反应样本实际首次到达微孔过滤网时的实际有效反应时长趋于一致，从而降低顺序检测造成的反应时间差异对不同浓度的血小板聚集诱导剂对应压力响应的干扰，提高多个压力响应之间的可比性以及全血血小板聚集功能检测结果的稳定性。

19、2、本发明以经过此前时间修正后当前采用的当前预计检测完成时刻作为本次时间偏移的比较基准，并在每次修正后同步更新后续诱导反应样本的当前预计检测完成时刻，使每次获得的本次时间偏移仅反映当前检测过程新增的时间变化，避免连续多个诱导反应样本发生检测时间变化时重复累计已经完成补偿的历史时间偏移。

20、3、本发明通过在样本吸取前获取压力基线及压力基线波动范围，并在过滤事件识别时间窗口内根据压力采样结果持续偏离压力基线波动范围的实际压力物理事件确定实际首次到达微孔过滤网的时刻，使实际有效反应时长的确定建立在实际过滤状态基础上，降低单纯采用预设设备时刻造成的过滤时刻判定偏差。

21、4、本发明根据实际诱导启动时刻和实际首次到达微孔过滤网的时刻确定实际有效反应时长，并利用预设允许范围对压力响应进行有效性筛选，使时序异常通道对应的压力响应不参与全血血小板聚集功能检测结果的确定，减少异常检测时序对最终检测结果的影响。

22、5、本发明直接采用抗凝全血形成多个诱导反应样本，在检测过程中不对抗凝全血进行离心处理，无需制备富血小板血浆和乏血小板血浆，在保持过滤网压力检测原理不变的基础上减少样本前处理环节。