一种槲皮素脂质小球协同禁食暂养减少草鱼脂质沉积与改善肉品质的方法

本发明属于水产养殖与食品加工，具体涉及一种槲皮素脂质小球协同禁食暂养减少草鱼脂质沉积与改善肉品质的方法。

背景技术：

1、草鱼是重要的大宗淡水养殖鱼类。近年来，随着高密度养殖和配合饲料投喂模式的普及，商品草鱼在上市前常存在腹部脂肪和肌肉脂质沉积偏高、肉质松散、风味下降及品质稳定性不足等问题。为改善草鱼上市品质，生产中通常采用禁食暂养、吊水瘦身、盐水暂养或循环水暂养等方式，使鱼体通过自然代谢消耗部分储能物质并减少异味物质积累。然而，单纯禁食暂养主要依赖鱼体自身代谢，其对肌肉脂质沉积、肉质品质和脂质代谢状态的调控效果受暂养时间、水体环境和鱼体初始状态影响较大，缺少针对性功能干预手段。

2、现有技术中，围绕商品鱼上市前品质改善，已有较多禁食暂养、吊水瘦身和水质调控类技术。例如，cn116584417a 公开了一种高品质草鱼瘦身养殖方法，通过停食吊水、换水清污和增氧管理降低鱼肉脂肪含量并改善肌肉品质；cn116235806a 公开了一种提高商品规格草鱼肌肉品质的方法，通过将草鱼置于一定盐度水体中暂养，以改善上市前草鱼肌肉品质。上述技术均属于草鱼上市前暂养调控方向，能够在一定程度上改善草鱼品质，但其调控作用主要依赖禁食、盐度、水质管理以及鱼体自身代谢过程，缺少在禁食暂养阶段针对脂质沉积和肉质品质的功能性递送手段。

3、此外，现有技术中也有将槲皮素等天然活性物质用于水产动物调控的方案。例如，cn104171594b 公开了一种含槲皮素、壳聚糖、大蒜素和 α-硫辛酸等组分的罗非鱼饲料添加剂，用于降低重金属吸收和残留并改善抗氧化状态。该类技术说明槲皮素在水产动物品质调控或健康调控中具有一定应用基础，但其主要通过饲料摄食途径发挥作用，并不适用于草鱼禁食暂养阶段。尤其是在禁食暂养条件下，草鱼不再摄食，槲皮素难以通过饲料添加方式进入干预体系；

4、槲皮素是一类具有脂质代谢调控潜力的天然黄酮类物质，但其水溶性较差，若直接以普通形式加入暂养水体，易出现分散不均、局部浓度偏高、有效浓度维持不足以及换水后作用浓度下降等问题。基于此，有必要构建一种适用于草鱼禁食暂养水体的槲皮素载体化递送方式，通过食品级脂质材料将槲皮素制备为脂质小球或固体脂质纳米粒分散液，并配合周期性补充、分散控制、部分换水、水质复稳及换水后浓度重建等操作，实现草鱼禁食暂养期间槲皮素的连续水体干预，为降低草鱼脂质沉积和改善肉质品质提供新的技术途径。

技术实现思路

1、为解决现有草鱼上市前禁食暂养主要依赖鱼体自身代谢、不同暂养阶段脂质动员与肉品质变化不易稳定控制，以及槲皮素直接加入暂养水体时存在分散性不足、周期补充和换水后有效浓度难以维持等问题，本发明提供一种槲皮素脂质小球协同禁食暂养减少草鱼脂质沉积与改善肉品质的方法。

2、本发明以分阶段持续禁食暂养为基础，在草鱼停止人工投喂的条件下，通过前期禁食、后续暂养环境稳定、持续增氧与水体循环管理、必要的过滤净化和部分换水，维持禁食暂养过程的连续性；在后续禁食阶段引入槲皮素脂质小球水体干预，并通过周期性补充、分散投加、过滤净化运行配合以及换水后浓度重建，使禁食暂养过程与槲皮素功能干预形成连续衔接。

3、本发明提供的槲皮素脂质小球协同禁食暂养减少草鱼脂质沉积与改善肉品质的方法，包括如下步骤：

4、s1、选择健康草鱼，将其置于暂养容器中进行前期禁食暂养，前期禁食暂养期间不进行投喂，且不向暂养水体中补充槲皮素；

5、s2、构建用于后期禁食暂养的循环暂养水体环境，所述循环暂养水体环境具有增氧、水体循环、过滤净化和水质监测功能；

6、s3、将经 s1 处理后的草鱼转入 s2 所述循环暂养水体环境中，进行后期禁食暂养，在后期禁食暂养期间，不进行投喂；但向暂养水体中周期性补充槲皮素脂质小球分散液，每次补充槲皮素脂质小球分散液时，使槲皮素在暂养水体中的终浓度达到设定范围；

7、s4、后期禁食暂养期间，按照预设周期对循环暂养水体进行部分换水，每次换水后根据暂养水体实际体积重新计算槲皮素脂质小球分散液补充量，并使终浓度补充至设定范围；

8、s5、持后期禁食暂养，直至达到预设天数。

9、进一步地，s1前期禁食暂养时，选择体表完整、无明显机械损伤、规格相对一致且健康状态良好的商品规格或接近商品规格草鱼，将其置于暂养环境中进行前期禁食暂养；暂养期间停止人工投喂，不向暂养水体中补充槲皮素，并持续观察草鱼游动、呼吸、体表及群体分布状态。优选地，前期禁食暂养持续时间为 15～25 d，优选地，时间为20 d。

10、进一步地，在前期禁食暂养结束前，使后续暂养水体完成增氧、循环混合和必要的过滤净化，并根据水质监测结果确认其处于稳定运行状态；草鱼由前期暂养环境转入后续暂养环境时采用渐进式水环境过渡，转入后继续停止人工投喂，待游动、呼吸和群体分布状态稳定后进入槲皮素干预阶段。

11、进一步地，s2所述循环暂养水体环境配备有暂养容器、增氧单元、水体循环单元、过滤净化单元和水质监测单元；水质监测单元用于实时或定期检测暂养水体的水质指标；水体循环单元用于驱动暂养水体在暂养容器与各处理单元之间循环流动；增氧单元用于向暂养水体中补充溶解氧；过滤净化单元用于去除暂养水体中的悬浮颗粒、代谢废物和有害物质，维持水质清洁。

12、进一步地，所述循环暂养水体环境的温度控制为 18～26 ℃，优选为 20～24 ℃；溶解氧不低于 6.0 mg/l，优选不低于 7.0 mg/l；ph 为 6.5～8.5，优选为 7.0～8.2；总氨氮浓度不高于 0.5 mg/l，亚硝酸盐氮浓度不高于 0.05 mg/l。

13、进一步地，s2 所述过滤净化单元为固液分离装置、泡沫分离装置、物理过滤装置或生物净化装置中的一种或多种；所述水质监测单元用于监测暂养水体的温度、溶解氧、ph、盐度、氨氮和亚硝酸盐氮中的一种或多种。

14、进一步地，s3 中槲皮素脂质小球分散液每隔 1～3 d 补充一次；每次补充时，使槲皮素在暂养水体中的终浓度按槲皮素当量计为 5～20 μg/l。

15、进一步地，s5 中部分换水周期为每隔 5～10 d 一次，优选为每隔 7 d 一次；每次换水量为暂养水体体积的 50%～70%；换水后待水温、溶解氧、ph 和含氮代谢物浓度恢复至设定范围后，再补充槲皮素脂质小球分散液，并使槲皮素在暂养水体中的终浓度按槲皮素当量计为 5～20 μg/l，优选为8～12 μg/l，更优选为10 μg/l。

16、进一步地，每次补充槲皮素脂质小球分散液前，对所述槲皮素脂质小球分散液进行搅拌、振荡或曝气混合；补充时采用多点泼洒、沿水流方向缓慢加入或在循环回水口附近加入中的一种或多种方式。

17、进一步地，每次补充槲皮素脂质小球分散液后，暂停或降低过滤净化单元运行，保留增氧单元运行，使槲皮素脂质小球在暂养水体中分散 2～8 h，优选为 4～6 h；分散完成后恢复过滤净化单元正常运行。

18、进一步地，所述槲皮素脂质小球包括脂质载体、包埋或分散于所述脂质载体中的槲皮素以及乳化稳定组分；所述脂质载体包括甘油三酯类脂质、脂肪酸类脂质或脂肪酸酯类脂质中的一种或多种，所述乳化稳定组分包括卵磷脂、吐温类乳化剂、阿拉伯胶或壳聚糖中的一种或多种。

19、所述槲皮素脂质小球为固体脂质纳米粒，平均粒径为100～200 nm，载药量为1.5wt%～5 wt %，包封率不低于90%

20、所述载药量是指经分离、纯化或冻干后的槲皮素脂质小球中实际包载的槲皮素质量占槲皮素脂质小球总质量的百分比。

21、所述槲皮素脂质小球分散液为以纯化水、去离子水或蒸馏水为连续相的水性胶体分散体系。分散液中可含有peg 400作为槲皮素预分散或助溶组分，含有卵磷脂和tween 80作为乳化稳定组分，并可选择性含有壳聚糖作为表面稳定组分。

22、所述分散液中槲皮素当量浓度优选为0.2～0.5 mg/ml，更优选为0.5 mg/ml。若采用壳聚糖酸性溶液进行表面稳定处理，则在制得分散液后将其ph调节至6.5～8.0，优选调节至7.0～7.5。

23、根据本发明的优选方案，槲皮素脂质小球分散液加入暂养水体前通过搅拌、振荡或曝气混合进行重新分散，并采用多点缓慢加入、沿水流方向加入或在回水混合区域加入中的一种或多种方式投加。

24、通过上述前期禁食暂养、后续持续禁食、水环境稳定管理、槲皮素脂质小球周期性干预、投加后分散管理以及换水后浓度重建的协同处理，可对草鱼禁食暂养期间的脂质沉积状态和肉品质进行调控。

25、所述方法用于草鱼上市前禁食暂养减脂提质处理，所述脂质沉积包括肠道脂肪系数、肌肉粗脂肪含量、血清甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇中的一种或多种；所述肉品质包括肌肉硬度、弹性、胶着性、咀嚼性、脂肪酸组成、挥发性风味物质和感官品质中的一种或多种。

26、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

27、1、考虑到草鱼刚转入暂养环境时处于应激状态，此时引入槲皮素会因鱼体生理不稳定而影响吸收效果。本发明首先建立前期禁食暂养状态，使不同个体在进入功能干预前形成相对统一的持续禁食处理起点，同时使鱼体完成由常规养殖状态向后续禁食暂养状态的过渡。随后在后期禁食暂养环节，在继续停止饲料投喂的条件下引入槲皮素脂质小球，使槲皮素处理建立在持续禁食暂养基础之上，而非替代禁食过程。槲皮素脂质小球解决了槲皮素的递送和分散问题。本发明通过在后期暂养阶段进行周期性补充槲皮素脂质小球分散液以及周期性换水等操作，使后期暂养阶段表现出降低草鱼肌肉粗脂肪、调节肠道脂肪系数和部分血清脂质指标，并改善部分肌肉质构指标的效果，可用于草鱼上市前禁食暂养阶段的脂质沉积调控和肉品质改善。

28、2、本发明通过脂质载体对槲皮素进行包埋或分散，有利于改善普通槲皮素直接加入水体时的分散问题，并为周期性补充、投加后分散管理和换水后浓度恢复提供可操作的递送形式。

29、3、本发明将槲皮素脂质小球周期补充、过滤净化运行配合、部分换水和换水后按实际水体体积重新补充相结合，有利于维持后续禁食阶段的连续干预。