一种海胆种胆筛选方法与流程

本发明涉及海水养殖行业海珍品育苗，特别是涉及一种海胆种胆筛选方法。

背景技术：

1、海胆（

echinoidea）隶属于棘皮动物门（

echinodermata）、海胆纲（

echinoidea），是一类典型的海洋底栖无脊椎动物，主要分布于寒温带至亚热带海域的浅海岩礁或藻类繁茂区域。海胆具有丰富的营养价值和极高的药用保健价值，是公认的海珍品。近几年，海胆市场需求急剧扩大，海胆价格成倍增长，海胆产业迅速发展。海胆的性腺是其最主要的经济部位，俗称“海胆黄”。性腺富含蛋白质、不饱和脂肪酸、氨基酸及多种维生素，具有较高的营养价值和商品价值，在我国也逐渐形成稳定的消费市场。由于其价格较高，使得海胆养殖在渔业经济中占据重要地位。

2、研究表明，海胆的生长性状和性腺品质性状具有中高度遗传力，且生长性状和性腺品质性状之间存在较强的正遗传相关。因此，对海胆种胆的生长性状和性腺品质性状进行筛选对海胆育苗生产很有必要。但目前海胆育苗生产中，种胆基本通过海胆的生长性状，包括种胆的规格和是否伤残、有病斑、棘刺倒伏等进行筛选。由于成活海胆看不到性腺，只能在刺激排放生殖细胞后，通过观察种胆是否排放生殖细胞、排放生殖细胞的持续性、排放量、排放卵细胞是否结块等，判断性腺发育程度是否适宜授精方面筛选种胆。而海胆性腺品质，包括性腺是否残缺、畸形、颜色品相这些影响精卵质量和后代品质的实质性性腺性状指标，由于从外观难以分辨，所以在生产中一直不能利用。

3、因此，海胆育苗生产中，亟需能够判断性腺品质的海胆种胆筛选方法，以提高海胆生殖细胞质量，从而提高海胆苗种质量和成活率。

技术实现思路

1、针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种利用性腺品质筛选海胆种胆的方法。具体的，分别收集海胆种胆排放的精子和卵子，并记录精子和卵子对应的种胆来源；先通过观察精子排放的持续性、排放卵子是否结块、卵子的排放量，从成熟程度上对种胆进行初步筛选，以快速剔除性腺过熟和性腺不够成熟而产生劣质生殖细胞的个体，保证进入受精环节的生殖细胞具备较高的活力；然后对初筛合格的种胆逐个解剖，通过观察性腺形态和色泽对种胆进行二次筛选，剔除性腺畸形、残缺和色泽灰白的种胆，可有效提高用于育苗的种海胆生殖细胞质量，提高各阶段幼体的变态成活率，进而提高育苗效率。本发明创造性地建立了“初筛+解剖复检”的双重筛选流程，确保海胆种胆排放的精子、卵子品质与发育潜力，从而确保后代海胆的品质。

2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明提供了一种海胆种胆筛选方法，包括以下步骤：

4、（1）采集无伤残、无病斑、棘刺无倒伏的海胆作为种胆，将种胆进行暂养后，采用催产刺激法诱导种胆排卵或排精；分别收集各个种胆的精子或卵子，并记录精子或卵子对应的种胆来源；

5、（2）诱导种胆排卵或排精过程中，对种胆进行初步筛选；具体为：诱导雄性种胆排精过程中观察精子排放的持续时间；诱导雌性种胆排卵，观察排放的卵子是否结块、卵子的排放量；

6、（3）对初步筛选合格的种胆进行解剖，通过观察性腺形态及色泽对种胆进行二次筛选；

7、（4）选取二次筛选合格后的种胆对应的精子和卵子进行人工授精。

8、作为优选，步骤（1）中，种胆壳径≥5cm。

9、作为优选，步骤（1）中，种胆暂养期间，控制密度为80-100枚/m3、光照强度≤100lux，每日更换全量海水1次，饵料为新鲜海带、裙带菜、盐渍海带、贻贝肉中的一种或多种。

10、作为优选，步骤（1）中，催产刺激法的具体步骤为：向种胆围口膜处注射kcl溶液刺激种胆排精或排卵。

11、进一步的，所述kcl浓度为0.4mol/l-0.6mol/l，每个种胆的注射量为2.5-3.5ml。

12、作为优选，步骤（2）中，若雄性海胆排放精子的持续时间≥5min，即认为雄性种胆初步筛选合格，反之则不合格；若雌性种胆排放的卵子分散无结块、排卵结束时卵子排放量≥10ml，即认为雌性种胆初步筛选合格，反之则不合格。

13、作为优选，步骤（3）中，当种胆的性腺形态规整，无残缺，无畸形，且性腺颜色非灰白色，则满足二次筛选合格，反之则不合格。

14、本发明的有益效果：

15、1.本发明创造性地建立了“初筛+解剖复检”的双重筛选流程，确保海胆种胆排放的精子、卵子品质与发育潜力，从而确保后代海胆的品质。

16、具体的，分别收集海胆种胆排放的精子和卵子，并记录精子和卵子对应的种胆来源；先通过观察精子排放的持续性、排放的卵是否结块、卵子的排放量，对种胆从成熟程度上进行初步筛选，以快速剔除性腺过熟和性腺不够成熟而产生劣质生殖细胞的个体，保证进入受精环节的生殖细胞具备较高的活力；然后对初筛合格的种胆逐个解剖，通过观察性腺形态和色泽对种胆进行二次筛选，海胆的性腺品质具有中高度遗传力，性腺畸形和色泽灰白的种胆生殖细胞质量差，还会将这些性腺特征遗传给后代海胆，且性腺形态和色泽不佳还会影响海胆的商业价值。本发明通过二次筛选过程，剔除性腺畸形、残缺和色泽灰白的种胆，可有效提高用于育苗的种海胆生殖细胞质量，提高受精后的幼体上浮率，降低各发育阶段幼体的损耗，提高后续海胆苗获得量，进而提高育苗效率。

17、另外，单个雌性海胆可排放生殖细胞数百万，雄性生殖细胞更多，只要有一个性腺畸形或性腺颜色不好的海胆个体的生殖细胞被应用生产，就会形成大量低质量海胆苗种。所以本发明补加的种胆二次筛选过程，对提高后代海胆群体的整体质量意义很大。

18、2.本发明提供的方法简便、重复性强，在生产中具有可操作性。本发明在传统育苗种胆初步筛选中增加一步解剖复筛过程，并未过多延长操作时间，生产操作上可接受。并且本发明不依赖复杂的实验设备与精密仪器，在生产过程中可直接使用，普通技术人员经短期培训即可独立操作。此外，本发明适用于所有海胆，可为海胆良种选育与苗种规模化生产提供了可靠的技术支撑。

1.一种海胆种胆筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的海胆种胆筛选方法，其特征在于，步骤（1）中，种胆的壳径≥5cm。

3.如权利要求1所述的海胆种胆筛选方法，其特征在于，步骤（1）中，种胆暂养期间，控制密度为80-100枚/m3、光照强度≤100lux，每日更换全量海水1次，饵料为新鲜海带、裙带菜、盐渍海带、贻贝肉中的一种或多种。

4.如权利要求1所述的海胆种胆筛选方法，其特征在于，步骤（1）中，催产刺激法的具体步骤为：向种胆围口膜处注射kcl溶液刺激种胆排精或排卵。

5.如权利要求4所述的海胆种胆筛选方法，其特征在于，所述kcl浓度为0.4mol/l-0.6mol/l，每个种胆的注射量为2.5-3.5ml。

6.如权利要求1所述的海胆种胆筛选方法，其特征在于，步骤（2）中，若雄性海胆排放精子的持续时间≥5min，即认为雄性种胆初步筛选合格，反之则不合格；若雌性种胆排放的卵子分散无结块、排卵结束时卵子排放量≥10ml，即认为雌性种胆初步筛选合格，反之则不合格。

7.如权利要求1所述的海胆种胆筛选方法，其特征在于，步骤（3）中，当种胆的性腺形态规整，无残缺，无畸形，且性腺颜色非灰白色，则满足二次筛选合格，反之则不合格。