包含环状RNA分子的制剂在制备治疗肿瘤的药物中的应用的制作方法

技术特征：
1.一种包含环状rna分子的制剂在制备用于预防或治疗肿瘤的药物中的应用，其中，所述环状rna分子编码具有肿瘤免疫治疗活性的多肽。2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述包含环状rna分子的制剂为注射剂；优选地，所述注射剂还包含用于溶解所述环状rna分子的溶剂；更优选地，所述注射剂由环状rna分子和溶解所述环状rna分子的溶剂组成。3.根据权利要求1或2所述的应用，其中，所述环状rna分子包括编码所述具有肿瘤免疫治疗活性的多肽的编码区，和与所述编码区可操作地连接的ires元件；优选地，所述ires元件包含如下(i)-(iv)组成的组中的任一项：(i)包含如seq id no：11-14任一序列所组成的组中的一种或多种序列的核苷酸序列；(ii)包含如seq id no：11-14任一序列所示的序列的反向互补序列的核苷酸序列；(iii)在高严格性杂交条件或非常高严格性杂交条件下，能够与(i)或(ii)所示的核苷酸序列杂交的序列的反向互补序列；(iv)与(i)或(ii)所示的核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的序列；优选地，所述ires元件选自如下(a1)-(a7)中的任一项：(a1)包含如seq id no：11所示序列的核苷酸序列；(a2)包含如seq id no：12所示序列的核苷酸序列；(a3)包含如seq id no：13所示序列的核苷酸序列；(a4)包含如seq id no：14所示序列的核苷酸序列；(a5)包含如seq id no：15所示序列的核苷酸序列；(a6)包含如seq id no：16所示序列的核苷酸序列；(a7)包含如seq id no：17所示序列的核苷酸序列。4.根据权利要求3所述的应用，其中，所述环状rna分子还包括位于所述ires元件上游的5’间隔区，和位于所述编码区下游的3’间隔区；优选地，所述5’间隔区包含如下(b1)-(b2)中任一项所示的序列：(b1)如seq id no：20-21任一序列所示的核苷酸序列；(b2)与(b1)所示的核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的序列；优选地，所述3’间隔区包含如下(c1)-(c2)中任一项所示的序列：(c1)如seq id no：22-23任一序列所示的核苷酸序列；(c2)与(c1)所示的核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的序列。5.根据权利要求4所述的应用，其中，所述环状rna分子还包括位于所述5’间隔区上游的第二外显子，和位于所述3’间隔区下游的第一外显子；优选地，所述第二外显子包含如下(d1)-(d2)中任一项所示的序列：(d1)如seq id no：19所示的核苷酸序列；(d2)与(d1)所示的核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的序列；优选地，所述第一外显子包含如下(e1)-(e2)中任一项所示的序列：
(e1)如seq id no：18所示的核苷酸序列；(e2)与(e1)所示的核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的序列。6.根据权利要求1-5任一项所述的应用，其中，所述包含环状rna分子的制剂通过瘤内给药施用于受试者体内；优选地，所述包含环状rna分子的制剂通过瘤内注射给药施用于受试者体内。7.根据权利要求1-6任一项所述的应用，其中，所述环状rna分子包含编码所述具有肿瘤免疫治疗活性的多肽的编码区，其中，所述具有肿瘤免疫治疗活性的多肽选自如下的一种或多种：细胞因子、抗原结合片段、免疫检查点抑制剂；可选地，所述细胞因子选自il、ifn、tnf、gm-csf、m-csf中的一种或多种；可选地，所述抗原结合片段与如下的一种或多种肿瘤抗原特异性结合：cd19、cd20、cd22、cd30、cd33、cd38、cd123、cd138、cd171、afp、cea、psca、gd2、nkg2d、bcma、egfr、her2、egfrvⅲ、cd171、fap、il13rα2、vegfr1、vegfr2、gpc-3、mesothelin、claudin 18.2、epcam、muc1、muc16、epha2、epha3、cd133、psma；可选地，所述免疫检查点抑制剂为如下一种或多种免疫检查点蛋白抑制剂：pd-1、pd-l1、pdl2、ctla4、lag3、tim3、tigit和cd103。8.根据权利要求7所述的应用，其中，所述编码区编码如下一种或多种的细胞因子：il-15、il-12、ifn alpha-2b、gm-csf；优选地，所述il-15包含如下(j1)-(j2)任一项所示的序列：(j1)如seq id no：1所示的氨基酸序列，(j2)如seq id no：1所示氨基酸序列经过取代、重复、缺失或添加一个或多个氨基酸，且具有il-15的细胞因子活性的多肽；优选地，所述il-12包含如下(k1)-(k2)任一项所示的序列：(k1)如seq id no：2所示的氨基酸序列，(k2)如seq id no：2所示氨基酸序列经过取代、重复、缺失或添加一个或多个氨基酸，且具有il-12的细胞因子活性的多肽；优选地，所述ifn alpha-2b包含如下(l1)-(l2)任一项所示的序列：(l1)如seq id no：3所示的氨基酸序列，(l2)如seq id no：3所示氨基酸序列经过取代、重复、缺失或添加一个或多个氨基酸，且具有ifn alpha-2b的细胞因子活性的多肽；优选地，所述gm-csf包含如下(m1)-(m2)任一项所示的序列：(m1)如seq id no：4所示的氨基酸序列，(m2)如seq id no：4所示氨基酸序列经过取代、重复、缺失或添加一个或多个氨基酸，且具有gm-csf的细胞因子活性的多肽。9.根据权利要求1-8任一项所述的应用，其中，所述制剂包含如下(g1)-(g4)的一种或多种的环状rna分子：(g1)与seq id no：7所示核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的环状rna分子；(g2)与seq id no：8所示核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优
选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的环状rna分子；(g3)与seq id no：8所示核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的环状rna分子；(g4)与seq id no：8所示核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的环状rna分子。10.根据权利要求1-9任一项所述的应用，其中，所述包含环状rna分子的制剂在制备如下(f1)-(f3)至少一种药物中的应用：(f1)抑制或杀伤肿瘤细胞的药物，(f2)在受试者中诱导抗肿瘤免疫应答的药物，(f3)降低或消除肿瘤免疫抑制微环境的药物。11.根据权利要求1-10任一项所述的应用，其中，所述包含环状rna分子的制剂还包含肿瘤治疗剂，其中，所述肿瘤治疗剂选自放疗剂、化疗剂、免疫调节剂、细胞毒性剂、抗体、疫苗中的一种或多种；优选地，所述肿瘤治疗剂为免疫调节剂；更优选地，所述免疫调节剂为免疫检查点抑制剂。12.一种包含环状rna分子的制剂，其用于预防或治疗肿瘤，所述包含环状rna分子的制剂如权利要求1-11任一项中所定义；优选地，所述包含环状rna分子的制剂为注射剂；优选地，所述包含环状rna分子的制剂通过瘤内给药施用于受试者体内；更优选地，所述包含环状rna分子的制剂是向瘤内注射施用的注射剂。13.一种药物组合物，其用于预防或治疗肿瘤，其中，所述药物组合物包括：(h1)包含环状rna分子的制剂，所述包含环状rna分子的制剂如权利要求1-11任一项中所定义；(h2)肿瘤治疗剂，所述肿瘤治疗剂如权利要求11中所定义。14.一种预防或治疗肿瘤的方法，其中，所述方法包括向受试者施用包含环状rna分子的制剂，其中，所述包含环状rna分子的制剂如权利要求1-11任一项中所定义；可选地，所述施用方式选自口服、腹膜内、静脉内、动脉内、肌肉内、皮内、皮下、经皮、鼻腔、经直肠，瘤内注射、神经鞘内注射、蛛网膜下腔注射或系统性施用；优选地，所述施用方式为瘤内注射施用。

技术总结
本公开属于生物医药领域，具体来说，本公开涉及一种包含环状RNA分子的制剂在制备用于预防或治疗肿瘤的药物中的应用，包含环状RNA分子的制剂，药物组合物以及预防或治疗肿瘤的方法。本公开首次发现了环状RNA分子适合作为肿瘤免疫治疗药物，能够有效减缓肿瘤生长速度，实现抑制、杀伤肿瘤的体内免疫治疗效果，在肿瘤的临床治疗中具有广阔的应用前景。肿瘤的临床治疗中具有广阔的应用前景。肿瘤的临床治疗中具有广阔的应用前景。


技术研发人员：左炽健 杨嘉丽 朱佳凤 孙振华
受保护的技术使用者：苏州科锐迈德生物医药科技有限公司
技术研发日：2021.08.05
技术公布日：2023/2/17