用于具有顺序pH调整的单通道自由流电泳的方法与流程

技术特征：
1.一种设备，其包含：主体，所述主体限定：入口，其被配置为接收含有分析物混合物的样品，出口，其被配置为排出所述样品的分级部分，阴极电解液通道，其被配置为耦接到阴极，以及阳极电解液通道，其被配置为耦接到阳极；盖；以及流体动力学障碍，其设置在所述盖和所述主体之间，所述流体动力学障碍和所述主体共同被配置为在所述入口和所述出口之间形成平行于所述阴极电解液通道和所述阳极电解液通道的中心通道。2.一种设备，其包含：阴极电解液通道，其被配置为含有第一电解质缓冲液并且耦接到阴极；阳极电解液通道，其被配置为含有第二电解质缓冲液并且耦接到阳极；中心通道，其具有入口和出口，所述中心通道被配置为经由所述入口接收含有分析物混合物的样品，使得所述样品沿朝向所述出口的流动方向流体动力学流动，并且使得所述样品的至少一部分通过所述出口排出，所述中心通道平行于所述阴极电解液通道和所述阳极电解液通道且在所述阴极电解液通道和所述阳极电解液通道之间；以及流体动力学障碍，其被配置为与所述中心通道以及所述第一电解质缓冲液或所述第二电解质缓冲液中的至少一个直接流体接触，使得当通电时，来自所述分析物混合物的至少一种分析物沿垂直于所述流动方向的方向朝向所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的一个迁移。3.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述中心通道部分地由所述流体动力学障碍的中心中的中空空间限定。4.根据权利要求2所述的设备，其中所述流体动力学障碍是第一流体动力学障碍，其被配置为与所述中心通道和所述第一电解质缓冲液直接流体接触，所述设备进一步包含：第二流体动力学障碍，其被配置为与所述中心通道和所述第二电解质缓冲液直接流体接触。5.根据权利要求2或4所述的设备，其中所述第一电解质缓冲液和所述第二电解质缓冲液是共同的电解质缓冲液。6.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个流体连接到含有电解质缓冲液的储器。7.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含流体连接到所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个的储器，所述储器具有100ml至500ml的体积。8.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含：储器，其流体连接到所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个；以及泵，其被配置为使电解质缓冲液从所述储器通过所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个再循环。9.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含：储器，其被配置为含有电解质缓冲液，所述储器流体耦接到所述阳极电解液通道和所
述阴极电解液通道；以及泵，其被配置为使所述电解质缓冲液在单个回路中从所述储器并且通过所述阳极电解液通道和所述阴极电解液通道再循环。10.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含：储器，其被配置为含有电解质缓冲液，所述储器流体耦接到所述阳极电解液通道和所述阴极电解液通道；以及泵，其被配置为使所述电解质缓冲液分别在两个回路中从所述储器通过所述阳极电解液通道和所述阴极电解液通道再循环。11.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含：所述阳极；以及所述阴极。12.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含流体耦接到所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个的含有mes-bistris的储器。13.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含流体耦接到所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个的含有电解质缓冲液和聚合物的储器。14.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含流体耦接到所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个的储器，所述储器含有电解质缓冲液和甲基纤维素。15.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含流体耦接到所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个的储器，所述储器含有具有0.1％至0.5％甲基纤维素的电解质缓冲液。16.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述阳极电解液通道和所述阴极电解液通道共同被配置为跨越并垂直于所述中心通道施加电场。17.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述分析物混合物包括具有1至11的不同等电点的肽。18.根据权利要求1或2所述的设备，其进一步包含流体耦接到所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个的储器，所述储器含有ph值为0.1至14的电解质缓冲液。19.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述样品含有样品缓冲液，所述设备进一步包含流体耦接到所述阴极电解液通道或所述阳极电解液通道中的至少一个的储器，所述储器含有电解质缓冲液，所述电解质缓冲液具有与所述样品缓冲液的ph匹配的ph。20.根据权利要求1所述的设备，其中所述主体是塑料。21.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述流体动力学障碍由纤维素、聚偏氟乙烯、聚偏二氟乙烯或聚四氟乙烯中的至少一种构成。22.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述流体动力学障碍的孔具有25nm至800nm的中值特征长度。23.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述流体动力学障碍具有100μm至200μm的宽度。24.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述中心通道具有1mm至10mm的宽度和10cm至20cm的长度。25.根据权利要求1所述的设备，其中所述盖是无孔的。
26.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述流体动力学障碍流体隔离所述中心通道，但将所述中心通道电耦接到所述阳极电解液通道或所述阴极电解液通道中的至少一个。27.根据权利要求1或2所述的设备，其中所述流体动力学障碍是多孔膜。28.一种方法，其包含：使样品流动通过单通道自由流电泳装置的中心通道；经由与中心通道平行的阳极电解液通道和阴极电解液通道施加不平行于所述样品流动方向的电场，所述阳极电解液通道、所述中心通道和所述阴极电解液通道离子耦接但通过流体动力学障碍流体隔离；根据感兴趣的分析物的等电点和电解质缓冲液的ph值，将所述感兴趣的分析物与所述样品分离；以及收集从分析物混合物分离的含有所述感兴趣的分析物的所述样品级分。29.根据权利要求28所述的方法，其进一步包含在使所述样品流动通过所述中心通道之前将所述样品与样品缓冲液混合，所述样品缓冲液具有与所述电解质缓冲液的所述ph值匹配的ph。30.根据权利要求28所述的方法，其进一步包含使电解质缓冲液从储器并且通过所述阳极电解液通道和所述阴极电解液通道循环。31.根据权利要求28所述的方法，其进一步包含施加跨越所述阳极电解液通道和所述阴极电解液通道的电压以产生所述电场。32.根据权利要求28所述的方法，其进一步包含使电解质缓冲液自储器循环，使得所述电解质缓冲液在返回到所述储器之前流动通过所述阳极电解液通道和所述阴极电解液通道。33.根据权利要求28所述的方法，其进一步包含使电解质缓冲液自储器循环，使得所述电解质缓冲液经由两个回路流动通过所述阳极电解液通道和所述阴极电解液通道。34.根据权利要求29所述的方法，其中所述样品缓冲液包括mes-bistris。35.根据权利要求28所述的方法，其中含有所述感兴趣的分析物的所述样品级分以5μl/分钟至15μl/分钟的速率收集。36.根据权利要求28所述的方法，其中含有所述感兴趣的分析物的所述样品级分以1μl/分钟至50μl/分钟的速率收集。37.根据权利要求28所述的方法，其中：所述感兴趣的分析物是第一分析物；所述ph值是第一ph值；所述第一分析物具有对应于所述第一ph值的第一等电点；并且所述级分是第一级分，所述方法进一步包含：在收集所述第一级分之后，将所述电解质缓冲液的所述第一ph值调整到第二ph值；以及收集含有第二分析物的所述样品的第二级分，所述第二分析物具有对应于所述第二ph的第二等电点。38.根据权利要求28所述的方法，其进一步包含：顺序调整所述电解质缓冲液的所述ph值；以及
收集所述样品的多个级分，在收集该级分期间来自所述样品的所述多个级分的每个所述样品级分含有分析物的富集部分，所述分析物具有对应于所述电解质缓冲液的所述ph值的等电点。39.根据权利要求38所述的方法，其中所述电解质缓冲液的所述ph值通过修改所述电解质缓冲液中的mes和bistris的比率顺序调整。40.根据权利要求38所述的方法，其中所述电解质缓冲液的所述ph值经由计量泵或阀顺序调整。41.根据权利要求38所述的方法，其中以恒定速率收集来自所述样品的所述多个级分的每个所述样品级分。42.根据权利要求37所述的方法，其中所述电解质缓冲液的所述ph通过改变所述电解质缓冲液的温度调整。

技术总结
本文所述的实施例涉及单通道自由流电泳装置或设备，以及通过顺序调整电解质缓冲液的pH值和根据感兴趣的分析物的对应等电点分离感兴趣的分析物而从样品分离和收集感兴趣的分析物的方法。该方法包括使样品流动通过单个中心通道，通过平行于中心通道的阳极电解液通道和阴极电解液通道施加垂直于样品流动方向的电场，然后根据其各自的等电点收集感兴趣的分析物级分。分析物级分。分析物级分。


技术研发人员：D
受保护的技术使用者：普诺森公司
技术研发日：2020.10.09
技术公布日：2022/7/9