一种百子莲根尖的愈伤组织诱导及增殖的方法与流程

技术特征：
1.一种百子莲根尖的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，包括如下步骤：a、无菌苗的获得：取百子莲种子进行消毒处理后，接种到种子萌发培养基，萌发后转入生根培养基，获得无菌苗；b、愈伤组织的诱导：取步骤a获得的无菌苗的根尖的小段作为外植体，将外植体接种于愈伤组织诱导培养基中诱导培养；c、愈伤组织的增殖：取经步骤b诱导后获得的愈伤组织放置在增殖培养基中增殖培养，获得愈伤组织块。2.根据权利要求1所述的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，增殖培养基的组分包括：2.17～4.33g
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ms固体培养基、2.0～3.0％(w/v)蔗糖、0.5～1.5mg
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6-ba、0.05～0.25mg
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naa、0.05～0.4g
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gqds、0.2～0.3％(w/v)植物凝胶，ph为5.8～6。3.根据权利要求1所述的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，步骤a中，消毒方法具体为无菌水清洗，然后无菌水浸泡20～30min，75％(v/v)酒精表面杀菌50～90s，之后无菌水冲洗，之后采用naclo和纳米银水溶液处理，再用无菌水冲洗4～6次。4.根据权利要求3所述的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，所述naclo和纳米银水溶液处理的步骤具体为，10～20％naclo表面杀菌10～20min，无菌水冲洗，再用20～60mg
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纳米银水溶液处理10～20min，无菌水冲洗。5.根据权利要求1所述的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，所述种子萌发培养基的组分包括：2.17～4.33g
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ms固体培养基、2.0～3.0％(w/v)蔗糖、0.6～1.0％(w/v)琼脂，所述培养基ph为5.8～6。6.根据权利要求1所述的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，所述生根培养基的组分为：2.17～4.33g
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ms固体培养基、2.0～3.0％(w/v)蔗糖、0.1～0.2mg
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iba、0.5～0.8％(w/v)琼脂，ph为5.8～6。7.根据权利要求1所述的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养基的组分包括：2.17～4.33g
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ms固体培养基、2.0～3.0％(w/v)蔗糖、2.0～3.0mg
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pic、1.0～1.5mg
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kt、0.05～0.1mg
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naa、0.2～0.4％(w/v)植物凝胶，ph为5.8～6。8.根据权利要求1所述的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，所述步骤a中，所述百子莲的种子为当年采收的千粒重6.60～6.80g的饱满干燥种子。9.根据权利要求1所述的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，所述步骤b中，外植体为从距离根尖1.0～1.5cm处垂直横切获得的组织块。10.根据权利要求1所述的愈伤组织诱导及增殖的方法，其特征在于，种子萌发和生根的条件为：温度23～27℃，相对湿度65～85％，光照10～14h/黑暗10～14h，光照强度2000～3000lx。

技术总结
本发明公开了一种百子莲根尖的愈伤组织诱导及增殖的方法，通过以百子莲无菌苗幼根的根尖为外植体，使用含PIC、KT、NAA的MS培养基诱导愈伤组织，解决了组织培养时间受限的问题，实现了80％～100％的高诱导率；并通过含6-BA、NAA和石墨烯量子点的MS培养基增殖根系愈伤组织，培养15天后的增殖率达到124.50％。为优质种苗产业化生产拓展了新的外植体类型和外源添加物种类。添加物种类。添加物种类。


技术研发人员：郭祥鑫 申晓辉 陈冠群 唐倩雯 李清韵 申瑞雪 孙华乐
受保护的技术使用者：上海上房园林植物研究所有限公司
技术研发日：2022.03.07
技术公布日：2022/5/30