一种老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法与流程

本发明属于鱼类育苗，具体涉及一种老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法。

背景技术：

1、老鼠斑，学名驼背鲈（

chromileptes altivelis），鲈形目、鮨科、石斑鱼亚科、驼背鲈属鱼类。老鼠斑肉质鲜美、营养价值高，经济价值极高，是名贵的海水养殖鱼类之一。老虎斑，学名棕点石斑鱼（

epinephelus fuscoguttatus），鲈形目、鮨科、石斑鱼属鱼类，广泛分布于印度-西太平洋及红海等海域，是我国南方沿海重要养殖石斑鱼种类之一。

2、石斑鱼杂交育种是利用不同石斑鱼种间或属间的遗传互补性，培育聚合双亲优良性状的后代。申请人早期成功开发了老虎斑与老鼠斑互交育种繁育方法，杂交后代很好的聚合了双亲的优良性状，兼具生长快、成活率高、畸形率低、营养价值高等养殖优势，耐高温和耐低盐特性也得到提升。然而，各项指标仍有一定的提升空间，目前主要存在以下技术问题：

3、第一，石斑鱼杂交种育苗过程中，仔鱼开口摄食后的前三个月是高死亡率时期。传统育苗方法中，存活率难以突破80%。反交后代的鱼苗存活率尤为偏低。

4、第二，正交后代虽然耐盐性有所改善，但仍不能满足低盐海水养殖的要求，限制了在河口低盐海域或盐度波动较大区域的推广应用。

5、因此，亟需一种能够系统解决上述问题的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，实现杂交种鱼苗存活率、生长性能和耐盐性的进一步提升。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，以解决上述问题。

2、本发明的技术方案主要包括以下内容：

3、一种老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，包括以下步骤：

4、s1. 将老虎斑与老鼠斑杂交种的初孵仔鱼转入育苗池，投喂牡蛎受精卵；

5、s2. 4~15日龄投喂经小球藻液强化培养的ss型轮虫；

6、s3. 16~30日龄投喂经dha强化剂和粗糙脉孢菌（

neurospora crassa）共同强化的卤虫无节幼体；

7、s4. 31~35日龄投喂蒙古裸腹溞和卤虫；

8、s5. 36~60日龄逐步用微发酵微粒饲料替代活饵并最终完全转换为微发酵微粒饲料，所述微发酵微粒饲料由嗜热脂肪地芽孢杆菌对微粒饲料进行固态微发酵制备。

9、s6.育苗池水质管理：维持盐度30~32‰、温度25~28℃、溶氧≥6mg/l、氨氮<0.5mg/l。

10、优选的，所述步骤s1中初孵仔鱼密度为1万～3万尾/m³，牡蛎受精卵投喂密度为5~8个/ml，每日投喂2次；所述步骤s2中ss型轮虫投喂密度为5~8个/ml，每日投喂2次；所述步骤s3中卤虫无节幼体投喂密度为1.0~1.5个/ml，每日投喂3次；所述步骤s4中蒙古裸腹溞和卤虫投喂密度为400~500个/l，蒙古裸腹溞和卤虫投喂数量比例为1:1，每日投喂3次。

11、优选的，所述步骤s3中卤虫无节幼体的强化方法为：将卤虫无节幼体转入强化缸，调节密度至100~200个/ml，添加dha强化剂和粗糙脉孢菌（

neurospora crassa）菌液进行强化处理，强化时间为12~24小时。

12、优选的，所述dha强化剂的添加量为0.2~0.4g/l，所述粗糙脉孢菌液的添加终浓度为1×106~1×107cfu/ml。

13、优选的，所述dha强化剂的添加量为0.2g/l，所述粗糙脉孢菌液的添加终浓度为1×107cfu/ml，强化时间为12小时；或所述dha强化剂的添加量为0.4g/l，所述粗糙脉孢菌液的添加终浓度为1×106cfu/ml，强化时间为24小时。

14、优选的，所述步骤s5中微发酵微粒饲料的制备方法为：将微粒饲料各成分混合，接入活化嗜热脂肪地芽孢杆菌（

geobacillus stearothermophilus）菌液，终浓度4×106~5×106cfu/g物料，充分搅拌混合均匀；将接种后的物料置于50±2℃恒温培养箱中进行固态微发酵12~24小时，期间每2~3小时翻动一次；微发酵结束后，干燥至水分<10%，过筛分级，获得不同粒径的微发酵微粒饲料。

15、优选的，所述微粒饲料配方按质量百分比计为：鱼粉55%~60%、面粉10%~15%、豆粕5%~8%、鱼油8%~10%、啤酒酵母粉5%~8%、磷酸二氢钙1%~1.5%、氯化胆碱0.1%~0.2%、海藻粉0.8%~1.5%、吐温80 0.1%~0.2%、植酸酶0.03%~0.05%，余量为水。

16、优选的，所述步骤s5中微发酵微粒饲料替代活饵的方法为：在活饵中混入10%（w/w）微发酵微粒饲料替代等量活饵，每2天增加10%比例，直至完全转换为微发酵微粒饲料。

17、优选的，所述老虎斑与老鼠斑杂交种为正交或反交：所述正交以老虎斑雄鱼为父本、老鼠斑雌鱼为母本；所述反交以老虎斑雌鱼为母本、老鼠斑雄鱼为父本。

18、优选的，所述步骤s2中ss型轮虫采用质量浓度15‰的小球藻液强化培养6小时后投喂。

19、本发明的有益效果：

20、（1）本发明在卤虫无节幼体强化阶段引入粗糙脉孢菌（

neurospora crassa）与dha强化剂共同强化卤虫无节幼体。粗糙脉孢菌与dha强化剂协同作用，显著提高了卤虫无节幼体的营养价值，进而提升了鱼苗的生长性能和存活率。

21、（2）本发明采用嗜热脂肪地芽孢杆菌（

geobacillus stearothermophilus）对微粒饲料进行固态微发酵处理，有效降解饲料中的抗营养因子，提高蛋白质和矿物质的生物利用率，改善饲料适口性和消化吸收率，进一步促进了鱼苗的生长发育、耐低盐性和存活率。

22、（3）粗糙脉孢菌强化卤虫与嗜热脂肪地芽孢杆菌微发酵饲料两项技术协同应用，使杂交鱼苗存活率显著提升至92.0%~94.5%，相较于常规育苗方法、仅采用微发酵饲料而未强化卤虫的方法、仅强化卤虫而未采用微发酵饲料的方法、采用枯草芽孢杆菌代替嗜热脂肪地芽孢杆菌进行微发酵的方法，均有显著提升。表明两项技术具有显著的协同增效作用。

23、（4）本发明方法培育的杂交鱼苗兼具生长快、存活率高、耐低盐能力强等优势，能够满足低盐海水养殖的要求。

24、（5）本发明方法工艺规范、参数明确、可操作性强，适合老虎斑与老鼠斑杂交种的大规模化育苗生产，具有广阔的推广应用前景。

1.一种老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，所述步骤s1中初孵仔鱼密度为1万～3万尾/m³，牡蛎受精卵投喂密度为5~8个/ml，每日投喂2次；所述步骤s2中ss型轮虫投喂密度为5~8个/ml，每日投喂2次；所述步骤s3中卤虫无节幼体投喂密度为1.0~1.5个/ml，每日投喂3次；所述步骤s4中蒙古裸腹溞和卤虫投喂密度为400~500个/l，蒙古裸腹溞和卤虫投喂数量比例为1:1，每日投喂3次。

3. 根据权利要求1所述的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，所述步骤s3中卤虫无节幼体的强化方法为：将卤虫无节幼体转入强化缸，调节密度至100~200个/ml，添加dha强化剂和粗糙脉孢菌（neurospora crassa）菌液进行强化处理，强化时间为12~24小时。

4.根据权利要求3所述的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，所述dha强化剂的添加量为0.2~0.4g/l，所述粗糙脉孢菌液的添加终浓度为1×106~1×107cfu/ml。

5.根据权利要求4所述的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，所述dha强化剂的添加量为0.2g/l，所述粗糙脉孢菌液的添加终浓度为1×107cfu/ml，强化时间为12小时；或所述dha强化剂的添加量为0.4g/l，所述粗糙脉孢菌液的添加终浓度为1×106cfu/ml，强化时间为24小时。

6. 根据权利要求1所述的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，所述步骤s5中微发酵微粒饲料的制备方法为：将微粒饲料各成分混合，接入活化嗜热脂肪地芽孢杆菌（geobacillus stearothermophilus）菌液，终浓度4×106~5×106cfu/g物料，充分搅拌混合均匀；将接种后的物料置于50±2℃恒温培养箱中进行固态微发酵12~24小时，期间每2~3小时翻动一次；微发酵结束后，干燥至水分<10%，过筛分级，获得不同粒径的微发酵微粒饲料。

7. 根据权利要求1所述的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，所述微粒饲料配方按质量百分比计为：鱼粉55%~60%、面粉10%~15%、豆粕5%~8%、鱼油8%~10%、啤酒酵母粉5%~8%、磷酸二氢钙1%~1.5%、氯化胆碱0.1%~0.2%、海藻粉0.8%~1.5%、吐温80 0.1%~0.2%、植酸酶0.03%~0.05%，余量为水。

8.根据权利要求1所述的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，所述步骤s5中微发酵微粒饲料替代活饵的方法为：在活饵中混入10%（w/w）微发酵微粒饲料替代等量活饵，每2天增加10%比例，直至完全转换为微发酵微粒饲料。

9.根据权利要求1所述的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，所述老虎斑与老鼠斑杂交种为正交或反交：所述正交以老虎斑雄鱼为父本、老鼠斑雌鱼为母本；所述反交以老虎斑雌鱼为母本、老鼠斑雄鱼为父本。

10.根据权利要求1所述的老虎斑与老鼠斑杂交种规模化育苗方法，其特征在于，所述步骤s2中ss型轮虫采用质量浓度15‰的小球藻液强化培养6小时后投喂。