一种姜荷花微种球生产和育苗方法与流程

1.本发明属于花卉栽培技术领域，涉及姜荷花栽培技术领域，具体涉及一种姜荷花微种球生产和育苗方法。


背景技术：

2.姜荷花(curcuma alismatifolia)是我国近年来引进的花卉新品种，隶属于姜科姜黄属，是一种多年生球根花卉，原产于泰国清迈一带，具有花型优美、花色艳丽等优点。姜荷花自然花期为6-10月，生长适宜温度为26-30℃，11月份逐渐进入休眠期，地上部分干枯，地下留种球越冬，适合在热带及亚热带地区种植推广。姜荷花种苗扩繁方式以组培为主，在工厂化育苗生产条件下，姜荷花组培苗可以做到周年生产，但受限于种苗生长季节，组培苗出瓶育苗集中于当年的3～6月份，秋冬季无法正常育苗。因此，多数组培工厂在生产姜荷花种苗时，需要精确安排来年种苗生产计划，受市场波动及外界环境条件影响较大。同时生产过程中剩余组培苗占用组培室空间，需要不断花费人力进行继代，或者丢弃，造成大量资源浪费，缺乏根据种苗市场行情进行调节的手段。因此，有必要提出新的姜荷花培育方法，以解决上述背景技术中提出的问题。


技术实现要素：

3.为了克服上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种姜荷花微种球生产方法，微种球诱导的成功率高，其获得的微种球耐储藏，应用于姜荷花组培扩繁生产中，可以处理富余的姜荷花组培苗，减少浪费，降低成本，有效解决秋冬季无加温大棚条件下姜荷花组培苗不能出瓶育苗的难题，可以作为种苗生产储藏的新技术。
4.为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：
5.本发明提供了一种姜荷花微种球生产方法，具体为：将姜荷花组培苗根系和叶片全部去除，只保留2-3cm的主茎，接种在微种球诱导培养基中，所述诱导培养基为含pp333、naa、蔗糖、肌醇、l-脯氨酸和卡拉胶的ms培养基，ph为5-6，接种后置于24-28℃且每天5-7小时的短光周期下培养45-60天诱导形成微种球，取出微种球后修剪去除组培苗叶片，放在阴凉通风处晾干15-20天后回收得到姜荷花微种球。
6.优选地，所述诱导培养基的配方为：ms pp333 0.01-0.02mg/l naa 0.05-0.15mg/l 蔗糖70-90g/l 肌醇100-200mg/l l-脯氨酸500mg/l 卡拉胶7-9g/l，ph值为5.8。
7.进一步地，所述诱导培养基的配方为：ms pp333 0.01mg/l naa 0.1mg/l 蔗糖80g/l 肌醇100mg/l l-脯氨酸500mg/l 卡拉胶7g/l，ph值为5.8。
8.姜荷花的种植方式主要为种球种植方式，秋冬季需要将种球挖起贮藏待春天重新种植，但当前种球的获取主要是靠姜荷花在秋冬季自然形成，尚未具备人工制备种球的技术，且自然形成的种球存在冬季无法自然越冬，种球冻死的问题。为此，本发明经研究发现，通过改变培养基和光照培养条件，可以促使姜荷花组培苗进入休眠准备，出瓶晾干处理后正式进入休眠期，即制备得到姜荷花微种球，且诱导成功率高。同时，所获得的姜荷花微种
球稳定性、抗寒性好，耐储藏，可在秋冬季室内储藏，储藏5个月的微种球发芽率仍高达95％，有效解决秋冬季姜荷花种苗出瓶生产的问题，可以作为姜荷花种苗生产储藏的新技术。此外，自然种球生长周期长，而本发明的微种球诱导技术，周期短，生产效率高(自然种球1年，微种球2个多月)。
9.优选地，所述短光周期为每天6小时。
10.优选地，晾干后的姜荷花微种球的保存期不少于半年，保存的方法包括但不限于沙藏法。
11.优选地，所述姜荷花组培苗的培育方法为：取姜荷花侧芽为外植体材料，在流水下清理干净表皮，先用75％酒精消毒1min，再用加入1-2滴吐温80的0.1％升汞溶液消毒15-20min，无菌水冲洗至少5遍，切成带上1-2个芽点的小块接种在丛生芽诱导培养基中，培养30-40天后获得姜荷花丛生芽，所述丛生芽诱导培养基为含3-5mg/l 6-ba、0.2mg/l naa、30g/l蔗糖和7g/l卡拉胶的ms培养基，ph值为5-6；将得到的姜荷花丛生芽进行切分扩繁继代到增殖培养基中，获得姜荷花组培苗，所述增殖培养基为含1-3mg/l 6-ba、0.1mg/l naa、30g/l蔗糖和7g/l卡拉胶的ms培养基，ph值为5-6。
12.本发明将生产中剩余或者增殖阶段的姜荷花组培苗继代到微种球诱导培养基上，通过调整培养基，并给予合适的光周期诱导姜荷花在组培瓶中进入休眠状态，出瓶晾干处理(进入休眠后出瓶晾干处理，使姜荷花正式休眠成为种球)，最后获得姜荷花微种球进行室内保存，省去组培苗育苗栽培阶段，避免了组培苗生产与市场供需不一致的问题，适合作为姜荷花育苗生产调节补充技术。
13.本发明还提供了一种姜荷花微种球育苗方法，具体为：对采用上述姜荷花微种球生产方法生产得到的微种球用50％多菌灵稀释液浸泡10-12小时，然后以细泥炭和细椰糠作为基质，采用穴盘育苗法进行催芽育苗，微种球种植后覆盖一层基质，之后置于26-28℃下催芽育苗60-70天，育成姜荷花商品种苗。
14.当前，秋冬季受限于姜荷花自然生长规律，常规组培方法繁殖姜荷花无法正常出瓶育苗，而本发明通过姜荷花微种球诱导技术，直接生产种球储藏，省略出瓶育苗步骤，使得姜荷花种苗生产在秋冬季可以正常进行。而且，本发明经研究发现，采用本发明的诱导方法生产姜荷花微种球后，以细泥炭和细椰糠作为基质，可以有效提高育苗的发芽率以及生长一致性，更有利于姜荷花商品种苗的繁殖和生产。
15.优选地，所述细泥炭和细椰糠的质量比为1:1。
16.优选地，所述50％多菌灵稀释液为50％多菌灵1000倍液。
17.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
18.本发明公开了一种姜荷花微种球生产方法，通过调整培养基(比如激素浓度和蔗糖浓度)，以及短光周期的培养条件，可以有效利用姜荷花植株的休眠习性，诱导姜荷花组培苗提前进入休眠阶段，让营养积累最后形成微种球，解决工厂化育种中组培苗出瓶受限于生长季节的问题，并且可以作为姜荷花种苗生产新方法，方便种苗运输，降低生产条件，压缩成本，实现真正的周年生产目标。具体而言，本发明具有以下优点：
19.(1)本发明利用常规的组培培养室条件，通过改变培养方法刺激姜荷花组培苗产生微种球，无需额外增加新设备，即可在秋冬季室内做到姜荷花微种球的生产，且方便储存和运输。
20.(2)本发明可以充分利用剩余的组培苗，将其诱导培养为微种球，减少浪费，降低成本，避免了组培苗生产与市场供需不一致的问题，可以作为种苗生产储藏的新技术。
21.(3)本发明通过对姜荷花微种球进行催芽条件优化，提高育苗的发芽率以及生长一致性，实现微种球诱导和育苗生产的全流程技术方案。
附图说明
22.图1为姜荷花微种球生产和育苗工艺图；
23.图2为
‘
清迈粉’姜荷花侧芽的取材图；
24.图3为
‘
清迈粉’姜荷花丛生芽的诱导过程；
25.图4为
‘
清迈粉’姜荷花丛生芽的继代过程；
26.图5为
‘
清迈粉’姜荷花微种球的诱导过程；
27.图6为姜荷花微种球诱导处理与生根壮苗培养组培苗的对比图(左：微种球诱导处理组；右：生根壮苗对照组)；
28.图7为获得的姜荷花微种球照片(左：微种球诱导处理组；右：生根壮苗对照组)。
具体实施方式
29.下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
30.下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到。
31.实施例1一种姜荷花微种球生产和育苗方法
32.如图1所示，该姜荷花微种球生产和育苗方法包括以下步骤：
33.(1)实验材料及姜荷花组培苗繁殖
34.供试材料为
‘
清迈粉’姜荷花，选择萌发健壮的侧芽(图2所示)为外植体，流水下清洗干净侧芽表面尘土后，在超净工作台上用75％酒精消毒1min，再用加入1～2滴吐温80的0.1％升汞溶液消毒20min，无菌水冲洗5遍，用锋利的手术刀切除坏死伤口并把侧芽切成带1-2个芽点的小块，然后将小块接种到丛生芽诱导培养基上，丛生芽诱导培养基的配方为：ms 6-ba 5mg/l naa 0.2mg/l 蔗糖30g/l 卡拉胶7g/l，ph值调至5.8。在26℃的恒温培养室进行诱导培养，每日光照保持12小时，40天后获得
‘
清迈粉’姜荷花丛生芽(图3所示)。将丛生芽去除叶片后切分为多个单芽继代到增殖培养基(图4所示)，增殖培养基的配方为：ms 6-ba 3mg/l naa 0.1mg/l 蔗糖30g/l 卡拉胶7g/l，ph值调至5.8。在与诱导培养相同的培养条件下，每40天扩繁继代一次，获得大量
‘
清迈粉’姜荷花组培苗。试验材料种植在广东省农业科学院白云基地环艺所大棚内，组培实验在白云基地组培楼内进行。
35.(2)微种球诱导培养
36.选取健壮的
‘
清迈粉’姜荷花组培苗，去除叶片与根系，保留主茎3cm接种到微种球诱导培养基进行微种球诱导培养(图5)，培养基的配方为：ms pp333 0.01mg/l naa0.1mg/l 蔗糖80g/l 肌醇100mg/l l-脯氨酸500mg/l 卡拉胶7g/l，ph值调至5.8。培养条件为在室内恒温26℃，每日光照调整为每天6小时的短光周期，培养50天即可出瓶晾干处理(图6，左
图)，修剪去除组培苗叶片，放在阴凉通风处晾干20天后，回收休眠微种球(图7，左图)。
37.对照组则选用常规生根壮苗培养基进行诱导培养，培养基的配方为1/2ms naa0.1mg/l 蔗糖20g/l 卡拉胶7g/l，ph值调至5.8。在培养室每日12小时光照培养壮苗50天后出瓶(图6，右图)，在阴凉处晾干处理后回收种球(图7，右图)。
38.出瓶后各随机选取30棵使用游标卡尺测量组培苗的球茎部位直径，计算平均值，并统计自然晾干处理后微种球总数以及计算诱导成功率(表1)。
39.通过表1可知，通过调整培养基配方以及短光周期的培养条件，有利于促进微种球的形成，并提高微种球诱导成功率。原因是通过调整培养基配方(比如激素浓度和蔗糖浓度)，以及短光周期的培养条件，有利于利用姜荷花植株休眠习性，诱导姜荷花组培苗提前进入休眠阶段，让营养积累最后形成微种球。
40.表1微种球数据统计
[0041][0042]
(3)微种球种植育苗
[0043]
姜荷花微种球使用沙藏法储藏在室内阴凉通风处越冬，等待生长季节到来(4月份)即可以进行播种催芽，使用50％多菌灵1000倍液浸泡微种球12小时，使用细泥炭和细椰糠按1:1的质量配比混合均匀作为基质，穴盘种植，并覆盖一层约1cm的基质，在28℃的室温下进行催芽，浇水管理以保持基质湿润为准，第三周开始萌芽生长，50-60天后可以成苗，达到姜荷花商品种苗销售规格大小。随机各选取100个不同储藏时间的微种球统计发芽率(表2)。
[0044]
由表2可以看出，采用本发明方法诱导获得的微种球，稳定性、抗寒性好，耐储藏，可有效提高种球的发芽率以及生长一致性，储藏5个月的微种球仍具有高达95％的发芽率，可在秋冬季室内做到姜荷花微种球的生产，且方便储存和运输，可以作为姜荷花种苗生产储藏的新技术。
[0045]
表2姜荷花微种球发芽率统计
[0046] 储藏1个月的微种球储藏3个月的微种球储藏5个月的微种球发芽率97％95％95％
[0047]
通过上述实施例的相关研究发现，通过改变培养基配方和光照培养条件，可以促使姜荷花组培苗进入休眠准备，出瓶晾干处理后即可回收姜荷花微种球，且诱导成功率高，该姜荷花微种球生产技术可以用在回收继代多余的组培苗，或者批量生产微型种球，方便远距离运输销售，降低生产成本。同时，所获得的姜荷花微种球稳定性、抗寒性好，耐储藏，可在秋冬季室内做到姜荷花微种球的生产，不受季节的影响，有效解决秋冬季无加温大棚条件下姜荷花组培苗不能出瓶育苗的难题，可以作为姜荷花种苗生产储藏的新技术。
[0048]
以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。