一种菌酶饲料的发酵工艺的制作方法

1.本技术涉及微生物发酵领域，更具体地说，它涉及一种菌酶饲料的发酵工艺。


背景技术：

2.菌酶饲料是以微生物、复合酶为生物饲料发酵剂菌种，将饲料原料转化为微生物菌体蛋白、生物活性小肽类氨基酸、微生物活性益生菌、复合酶制剂为一体的生物菌酶饲料。
3.饲料经发酵后均质、蓬松，改善了饲料的适口性，刺激了动物的采食量；并且饲料中的纤维素、淀粉、蛋白质等复杂的大分子有机物在一定程度上降解为动物易消化吸收的单糖、双糖、低聚糖和氨基酸等小分子物质，从而提高饲料的消化吸收率；同时饲料发酵的过程中还会产生并积累大量的营养丰富的微生物菌种细胞以及有用的代谢产物，从而为动物提供更多的营养物质。
4.一般的发酵饲料需要置于低温干燥的环境中储存，当保存温度大于15℃时，饲料中不稳定的营养物质开始失去活性，尤其是夏季高温环境中，平均温度在20℃以上，饲料中的营养物质的损失可达10％甚至更多，所以饲料在饲养动物之前都需要将其置于低温干燥的环境中；当饲养动物时，一般饲养员会根据动物的日采食量采取一次性投喂的方式，饲料无法一次性食用完，在夏季气候条件下，由于环境温度较高，剩余饲料中的营养物质容易在较高温度的环境下失去活性，从而容易影响动物的采食量、消化吸收率。


技术实现要素：

5.为了使菌酶饲料在较高温度环境下具有良好的储存稳定性，即使动物一次性食用不完，剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率，本技术提供一种菌酶饲料的发酵工艺。
6.本技术提供的一种菌酶饲料的发酵工艺，采用如下的技术方案：一种菌酶饲料的发酵工艺，包括如下步骤：s1、制备曲块，将曲块溶解，制得饲料种子液；曲块由包含曲块物料和混合菌粉制成；混合菌粉由包含酵母菌菌粉和枯草芽孢杆菌菌粉组成；s2、将s1制得的饲料种子液在28
‑
38℃条件下搅拌并发酵68
‑
78h，然后在47
‑
58℃条件下搅拌并干燥32
‑
40h，制得成品菌酶饲料。
7.通过采用上述技术方案，利用酵母菌、枯草芽孢杆菌制备曲块，曲块上附着有大量菌体，将曲块溶解后，菌体均匀的分散在饲料种子液中；将饲料种子液置于28
‑
38℃环境下发酵68
‑
78h，酵母菌分解曲块物料中的营养物质，其代谢产物具有较好的抗性。
8.枯草芽孢杆菌在发酵过程中快速生长繁殖，然后产生大量的芽孢；在47
‑
58℃条件下干燥32
‑
40h，随着水分的逐渐流失，进一步促进枯草芽孢杆菌中芽孢的产生，并且此温度干燥不会使芽孢失活。
9.利用酵母菌代谢产物的抗性配合枯草芽孢杆菌芽孢的抗性，使菌酶饲料具有良好的储存稳定性，即使动物一次性食用不完，剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
10.优选的，所述s1中的曲块采用如下方法制备而成：ⅰ制备混合菌粉，混合菌粉由重量比为1:0.2
‑
0.7:0.5
‑
1.5的酵母菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、丁酸梭菌菌粉混合制成；ⅱ制备曲块物料，将曲块物料、ⅰ制得的混合菌粉、水按照重量比为6.5:0.5
‑
1.5:3
‑
5混合，然后经压块成型、后发酵制成曲块。
11.通过采用上述技术方案，利用酵母菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌相配合制备混合菌粉，然后利用混合菌粉制备曲块；曲块表面与氧气直接接触，则曲块表面生长枯草芽孢杆菌，曲块中心位置处无氧气，则曲块中心位置处生长丁酸梭菌，曲块表面和曲块中心位置处之间生长兼性厌氧型的酵母菌，从而使得曲块上的不同位置在同一时间段能够生长不同的菌种，缩短发酵时间的同时，节约发酵成本。
12.枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌相配合制备的曲块发酵后，丁酸梭菌产生大量的芽孢，其芽孢为内生芽孢，对外界环境的高温、高热具有较强的抵抗力；枯草芽孢杆菌同样产生大量的芽孢，其芽孢具有良好的耐高温、耐干燥效果，并且缺水情况下不会损伤芽孢的活性；利用适当比例的丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌的芽孢相配合，能够使菌酶饲料具有较好的储存稳定性。
13.枯草芽孢杆菌的芽孢进入肠道后能够迅速消耗肠道环境中的游离氧，形成肠道低氧环境，从而促进丁酸梭菌芽孢重新恢复活性，二者相配合，促进肠道中的有益菌群繁殖的同时，还能够防止病原菌以及腐败菌在肠道的异常增殖，提高菌酶饲料消化率的同时，提高动物的采食量。
14.优选的，所述步骤ⅱ中后发酵温度为30
‑
35℃、相对湿度为80
‑
90％、时间为12
‑
18d。
15.通过采用上述技术方案，将压制成型的曲块在适宜条件下发酵12
‑
18d，使得曲块表面大量生长枯草芽孢杆菌，枯草芽孢杆菌生长过程中能够吸收曲块内部部分的氧气，而发酵过程中使得酵母菌在有氧的条件下大量繁殖，酵母菌同样能够吸收曲块内部的部分氧气，通过枯草芽孢杆菌、酵母菌层层配合的吸氧效果，使得曲块内部的几乎无氧气，从而促进丁酸梭菌的生长繁殖。
16.通过对成型曲块的发酵，使得曲块在同一时间同时含有大量的枯草芽孢杆菌、酵母菌和丁酸梭菌，菌体含量高则芽孢含量高，从而便于饲料种子液在发酵过程中能够形成大量的芽孢，使菌酶饲料具有良好的储存稳定性。
17.优选的，所述s1中曲块尺寸为20cm
×
15cm
×
7cm。
18.通过采用上述技术方案，制得的曲块为长方体，同体积的长方体和正方体，长方体的表面积大，则将曲块制成长方体能够更大面积的与外界环境中的氧气相接触，从而促进枯草芽孢杆菌、酵母菌在曲块上的生长繁殖。
19.通过限定曲块的尺寸，在枯草芽孢杆菌、酵母菌大量生长繁殖的前提下，氧气不容易渗透到曲块内部，使曲块内部的丁酸梭菌在不与氧气接触的条件下能够大量生长繁殖，
从而使制得的曲块在发酵时，能够在同一时间同时产生大量的枯草芽孢杆菌、酵母菌和丁酸梭菌。
20.优选的，所述s1中的曲块物料由包含以下重量份的原料制成：玉米粉15
‑
25份、豆粕粉15
‑
25份、小麦粉45
‑
55份、糖蜜4
‑
14份、矿物质1
‑
2份；以上原料的粉碎细度为1
‑
3mm。
21.通过采用上述技术方案，玉米粉、豆粕粉、小麦粉、糖蜜、矿物质按适当比例混合，利用糖蜜较好的粘结效果，以糖蜜为连结料用以连接其他物料；小麦粉外表一般呈卵圆形，豆粕粉一般呈不规则形状，则以小麦粉为填充料填充到豆粕粉、玉米粉颗粒堆积结构中，减少曲块内部孔隙，从而减少曲块内部氧气，以促进丁酸梭菌和酵母菌的生长繁殖。
22.玉米粉、豆粕粉中含有较高含量的c源、n源物质，以玉米粉、豆粕粉为主料为菌体的生长繁殖提供较高含量的营养物质，同时小麦粉中含有部分c源、n源物质，利用玉米粉、豆粕粉、小麦粉相配合，能够进一步为菌体的生长繁殖提供较高含量的营养物质；矿物质为补料，矿物质、糖蜜相配合为细菌的生长繁殖提供糖、无机盐等营养物质；使制得的曲块物料能够为菌体在生长繁殖的不同阶段提供营养物质，从而促进菌体的生长繁殖，使菌体产生大量的芽孢，从而使菌酶饲料具有良好的储存稳定性。
23.优选的，所述s2发酵过程中的搅拌速度为0
‑
8r/min，干燥过程中的搅拌速度为8
‑
15r/min。
24.通过采用上述技术方案，通过限定饲料种子液在发酵过程中的搅拌速度，使得饲料种子液中的枯草芽孢杆菌、酵母菌在生长繁殖过程中能够更好的与氧气、曲块物料中的营养物质相接触，促进二者生长繁殖，并且较低的搅拌速度不容易对菌体生长繁殖产生抑制，从而使饲料种子液中的菌体在发酵过程中能够产生最大量的芽孢，以提高菌酶饲料的储存稳定性。
25.通过限定干燥过程中的搅拌速度，使得水分快速干燥，水分的快速流失使得芽孢快速生成，从而进一步使菌体产生芽孢，以提高菌酶饲料的储存稳定性。
26.优选的，所述s2中饲料种子液在温度35℃、转速4r/min的条件下发酵72h，然后在温度55℃、转速12r/min的条件下干燥36h。
27.通过采用上述技术方案，发酵时间72h配合干燥时间36h，使得芽孢大量形成，并且菌体代谢产物含量较高，使菌酶饲料具有良好的储存稳定性，即使经较长时间储存后仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
28.优选的，所述s2中以1
‑
3℃/2min的升温速率进行热风升温。
29.通过采用上述技术方案，通过控制升温速度并且配合热风升温，加速水分干燥，并且促进菌体进一步产生芽孢，从而提高菌酶饲料的储存稳定性。
30.优选的，所述s1制备曲块，将曲块用水溶解后与竹粉混合，曲块、水、竹粉质量比为1:7
‑
10:0.05
‑
0.2，制得饲料种子液。
31.通过采用上述技术方案，枯草芽孢杆菌在初期生长繁殖的过程中吸收曲块中营养物质，供给初始菌体吸收营养物质，随着生长繁殖量不断增长，不断有新的菌体产生，部分新产生的枯草芽孢杆菌逐渐附着在粗糙的竹粉表面，以竹粉为支撑基体，借助竹粉多孔粗糙结构捕捉曲块中的营养物质，从而促进新生长的菌体能够更好的吸收营养物质，继续繁殖产生新的菌体；竹粉和曲块相配合，能够促进不同生长阶段的菌体均匀吸收营养物质，使其不断生长繁殖，提高菌体数量，进一步提高芽孢含量，从而提高菌酶饲料的储存稳定性。
32.优选的，所述竹粉为改性竹粉，改性竹粉采用如下方法制备而成：将明胶溶液喷涂到竹粉表面，明胶溶液与竹粉重量比为1:3
‑
5.5，干燥后制得改性竹粉。
33.通过采用上述技术方案，利用明胶附着在竹粉表面，明胶溶液干燥后形成明胶膜，当竹粉与曲块制成饲料种子液后，明胶膜能够阻止竹粉吸收种子液中的水分，以确保菌体吸收水分和水溶性营养物质，保证菌体的生长繁殖。
34.明胶膜的附着使得竹粉的外表面积有所增大，从而便于新的菌体附着在改性竹粉表面，随着菌体生长繁殖，会产生一些酸性物质的代谢产物，酸性物质容易分解明胶膜，明胶膜中蛋白质分解后会产生氨基酸等小分子物质，从而为附着在改性竹粉表面的新的菌体提供营养物质，促进新的菌体生长繁殖，从而使不同生长阶段的菌体均能够更好的生长，通过提高菌体数量进一步提高芽孢含量，从而提高菌酶饲料的储存稳定性。
35.综上所述，本技术具有以下有益效果：1、利用酵母菌代谢产物的抗性配合枯草芽孢杆菌芽孢的抗性，使菌酶饲料具有良好的储存稳定性，即使动物一次性食用不完，剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
36.2、利用酵母菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌相配合制备混合菌粉，然后利用混合菌粉制备曲块；使曲块上的不同位置在同一时间段能够生长不同的菌种，缩短发酵时间的同时，节约发酵成本。
37.3、发酵108h，使得酵母完全发酵，完全生成代谢产物，完全发酵的酵母进入动物肠道后不会试图获取动物肠道中营养物质，并且完全代谢后会产生较多的天然营养物质的代谢产物，例如ugf、酶等，可以提供给动物较多的营养物质。
38.4、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌相配合，能够进一步提高菌酶饲料中的芽孢含量，从而进一步提高菌酶饲料的抗性。
39.5、竹粉、曲块、水相配合，进一步促进枯草芽孢杆菌的生长繁殖，提高菌体数量，进一步提高芽孢含量，从而提高菌酶饲料的储存稳定性。
具体实施方式
40.以下结合实施例对本技术作进一步详细说明。
41.改性竹粉的制备例以下原料中的竹粉购买于上高县聚硅矿业有限公司，规格80目；其他原料及设备均为普通市售。
42.制备例1：改性竹粉采用如下方法制备而成：配置质量分数2％的明胶水溶液，采用包膜机将明胶水溶液喷涂到竹粉表面，明胶水溶液与竹粉重量比为1:4.2，干燥后制得改性竹粉；竹粉过80目筛。
43.制备例2：本制备例与制备例1的不同之处在于：明胶水溶液与竹粉重量比为1:3。
44.制备例3：本制备例与制备例1的不同之处在于：明胶水溶液与竹粉重量比为1:5.5。
45.曲块的制备例以下原料中的酵母菌购买于青岛根源生物技术集团有限公司生产的酿酒酵母；枯草芽孢杆菌购买于青岛根源生物技术集团有限公司生产的枯草芽孢杆菌菌粉，型号为ct
‑
10；丁酸梭菌购买于青岛根源生物技术集团有限公司生产的丁酸梭菌菌粉；其他原料及设备均为普通市售。
46.制备例4：曲块采用如下方法制备而成：ⅰ称取1kg酵母菌菌粉、0.5kg枯草芽孢杆菌菌粉混合搅拌，制得混合菌粉；ⅱ将玉米粉、豆粕粉、小麦粉粉碎至细度为2mm，称取玉米粉20kg、豆粕粉20kg、小麦粉50kg、糖蜜8.5kg、矿物质1.5kg混合制得曲块物料；矿物质由重量比为1:1的氯化钠和磷酸二氢钠组成；称取65kg曲块物料置于混合机中在500r/min的转速下搅拌2min，然后添加10kg混合菌粉、44kg水继续搅拌15min，然后用成型机压块成型制得曲坯，将曲坯在32℃、相对湿度85％的条件下后发酵15d，制成曲块；曲块尺寸为20cm
×
15cm
×
7cm。
47.制备例5：本制备例与制备例4的不同之处在于：ⅰ称取1kg酵母菌菌粉、0.5kg枯草芽孢杆菌菌粉、1kg丁酸梭菌菌粉混合搅拌，制得混合菌粉。
48.制备例6：本制备例与制备例4的不同之处在于：ⅰ称取1kg酵母菌菌粉、0.2kg枯草芽孢杆菌菌粉、0.5kg丁酸梭菌菌粉混合搅拌，制得混合菌粉。
49.制备例7：本制备例与制备例4的不同之处在于：ⅰ称取1kg酵母菌菌粉、0.7kg枯草芽孢杆菌菌粉、1.5kg丁酸梭菌菌粉混合搅拌，制得混合菌粉。
50.制备例8：本制备例与制备例4的不同之处在于：ⅱ将玉米粉、豆粕粉、小麦粉粉碎至细度为1mm，称取玉米粉15kg、豆粕粉15kg、小麦粉55kg、糖蜜4kg、矿物质1kg混合制得曲块物料；矿物质由重量比为1:1的氯化钠和磷酸二氢钠组成；称取65kg曲块物料置于混合机中在500r/min的转速下搅拌2min，然后添加5kg混合菌粉、30kg水继续搅拌15min，然后用成型机压块成型制得曲坯，将曲坯在30℃、相对湿度80％的条件下后发酵12d，制成曲块；曲块尺寸为20cm
×
15cm
×
7cm。
51.制备例9：本制备例与制备例4的不同之处在于：ⅱ将玉米粉、豆粕粉、小麦粉粉碎至细度为3mm，称取玉米粉25kg、豆粕粉25kg、小麦粉45kg、糖蜜14kg、矿物质2kg混合制得曲块物料；矿物质由重量比为1:1的氯化钠和磷酸二氢钠组成；称取65kg曲块物料置于混合机中在500r/min的转速下搅拌2min，然后添加15kg混合菌粉、50kg水继续搅拌15min，然后用成型机压块成型制得曲坯，将曲坯在35℃、相对湿度90％的条件下后发酵18d，制成曲块；曲块尺寸为20cm
×
15cm
×
7cm。实施例
52.以下原料中的原料和设备均为普通市售。
53.实施例1：一种菌酶饲料的发酵工艺：s1、称取140kg制备例4制备的曲块，1260kg自来水置于2m3搅拌罐中，搅拌至曲块完全溶解制得饲料种子液；自来水温度在30
‑
35℃；s2、将s1制得的饲料种子液在温度35℃、转速4r/min的条件下发酵72h，然后在温
度55℃、转速12r/min的条件下干燥36h，升温速率为2℃/2min，升温方式为热风升温，制得成品菌酶饲料。
54.实施例2：本实施例与实施例1的不同之处在于：s2、将s1制得的饲料种子液在温度28℃、转速0r/min的条件下发酵78h，然后在温度47℃、转速8r/min的条件下干燥32h，升温速率为1℃/2min，升温方式为热风升温，制得成品菌酶饲料。
55.实施例3：本实施例与实施例1的不同之处在于：s2、将s1制得的饲料种子液在温度38℃、转速8r/min的条件下发酵68h，然后在温度58℃、转速15r/min的条件下干燥40h，升温速率为2℃/2min，升温方式为热风升温，制得成品菌酶饲料。
56.实施例4：本实施例与实施例1的不同之处在于：曲块选用制备例5制备的曲块。
57.实施例5：本实施例与实施例1的不同之处在于：曲块选用制备例6制备的曲块。
58.实施例6：本实施例与实施例1的不同之处在于：曲块选用制备例7制备的曲块。
59.实施例7：本实施例与实施例1的不同之处在于：曲块选用制备例8制备的曲块。
60.实施例8：本实施例与实施例1的不同之处在于：曲块选用制备例9制备的曲块。
61.实施例9：本实施例与实施例4的不同之处在于：s1、称取140kg制备例5制备的曲块、1260kg自来水、14kg竹粉置于2m3搅拌罐中，搅拌至曲块完全溶解制得饲料种子液。
62.实施例10：本实施例与实施例4的不同之处在于：s1、称取140kg制备例5制备的曲块、980kg自来水、7kg竹粉置于2m3搅拌罐中，搅拌至曲块完全溶解制得饲料种子液。
63.实施例11：本实施例与实施例4的不同之处在于：s1、称取140kg制备例5制备的曲块、1400kg自来水、28kg竹粉置于2m3搅拌罐中，搅拌至曲块完全溶解制得饲料种子液。
64.实施例12：本实施例与实施例9的不同之处在于：竹粉选用制备例1制备的竹粉。
65.实施例13：本实施例与实施例9的不同之处在于：竹粉选用制备例2制备的竹粉。
66.实施例14：本实施例与实施例9的不同之处在于：竹粉选用制备例3制备的竹粉。
67.实施例15：本实施例与实施例1的不同之处在于：曲块在制备过程中，未经后发酵。
68.实施例16：本实施例与实施例1的不同之处在于：曲块物料原料中以同等质量的玉米粉替换小麦粉。
69.实施例17：本实施例与实施例1的不同之处在于：曲块尺寸为15cm
×
15cm
×
15cm。
70.对比例对比例1：本对比例与实施例1的不同之处在于：s2、将s1制得的饲料种子液在温度35℃、转速4r/min的条件下发酵72h，制得成品菌酶饲料。
71.对比例2：本对比例与实施例1的不同之处在于：s2、将s1制得的饲料种子液在温度35℃、转速4r/min的条件下发酵108h，制得成品菌酶饲料。
72.对比例3：本对比例与实施例1的不同之处在于：s2、将s1制得的饲料种子液在温度35℃、转速4r/min的条件下发酵36h，然后在温度55℃、转速12r/min的条件下干燥72h，升温速率为2℃/2min，升温方式为热风升温，制得成品菌酶饲料。
73.对比例4：本对比例与实施例1的不同之处在于：s2、将s1制得的饲料种子液在温度35℃、转速4r/min的条件下发酵60h，然后在温度55℃、转速12r/min的条件下干燥48h，升温速率为2℃/2min，升温方式为热风升温，制得成品菌酶饲料。
74.性能检测试验1、微生物数量、芽孢数量检测分别采用实施例1
‑
17以及对比例1
‑
4的制备方法制备菌酶饲料，采用gb478915
‑
2010食品微生物学检验霉菌和酵母计数的方法，在曲块制备结束后检测曲块中酵母菌数量，并且分别在菌酶饲料发酵后、干燥后(干燥后即为成品)检测酵母菌数量。
75.表1酵母菌数量测试表
分别采用实施例1
‑
17以及对比例1
‑
4的制备方法制备菌酶饲料，采用gb/t26428
‑
2010饲用微生物制剂中枯草芽孢杆菌的检测，在曲块制备结束后检测曲块中的枯草芽孢杆菌数量，并且分别在菌酶饲料发酵后、干燥后检测枯草芽孢杆菌数量；成品菌酶饲料的枯草芽孢杆菌数量
×
93％即为成品菌酶饲料中枯草芽孢杆菌的芽孢数量(芽孢数量保留3为有效数字)；对比例1
‑
2无干燥的步骤，则发酵后枯草芽孢杆菌数量
×
93％即为成品菌酶饲料中枯草芽孢杆菌的芽孢数量。
76.表2枯草芽孢杆菌数量测试表
分别采用实施例4
‑
17以及对比例1
‑
4的制备方法制备菌酶饲料，采用db41/t1728
‑
2018饲料添加剂丁酸梭菌的测定微生物法，在曲块制备结束后检测曲块中的丁酸梭菌数量，并且分别在菌酶饲料发酵后、干燥后检测丁酸梭菌数量；成品菌酶饲料的丁酸梭菌数量
×
91％即为成品菌酶饲料中丁酸梭菌的芽孢数量(芽孢数量保留3为有效数字)；对比例1
‑
2无干燥的步骤，则发酵后丁酸梭菌数量
×
91％即为成品菌酶饲料中丁酸梭菌的芽孢数量。
77.表3丁酸梭菌数量测试表
2、酶活检测分别采用实施例1
‑
17以及对比例1
‑
4的制备方法制备菌酶饲料，采用福林法测定菌酶饲料中的蛋白酶活力，记录数据，数据保留4位有效数字。
78.3、采食量检测分别采用实施例1
‑
17以及对比例1
‑
4的制备方法制备菌酶饲料，分别采用制得的菌酶饲料喂养雏鸡，将开袋后的菌酶饲料环境温度为38℃、相对湿度55％，分别在储存6h、12h后喂养雏鸡，雏鸡体重均为600g，记录其每日采食量。
79.4、消化吸收率检测分别采用实施例1
‑
17以及对比例1
‑
4的制备方法制备菌酶饲料，分别采用制得的菌酶饲料喂养雏鸡，将开袋后的菌酶饲料环境温度为38℃、相对湿度55％，在储存6h后喂养雏鸡，连续喂养雏鸡12天，在第12天采用凯氏定氮法检测雏鸡粪便中的粗蛋白含量，记录数据。
80.表4酶活、采食量、消化吸收率测试表
结合实施例1
‑
3并结合表1、2、3、4可以看出，曲块中的酵母菌数量、枯草芽孢杆菌数量较高，并且干燥后菌体数量仍然较高，转化的芽孢含量也较高，同时蛋白酶活力较高、动物采食量较高、菌酶饲料的消化吸收率较好；说明酵母菌和枯草芽孢杆菌相配合制备的曲块经发酵、干燥后，酵母菌将原料中的蛋白质分解成小分子营养物质，枯草芽孢杆菌产生大量芽孢，使制得的成品菌酶饲料利用芽孢较高的抗性配合酵母菌代谢产物较好的抗性，使菌酶饲料具有良好的储存稳定性，即使经较高温度、较长时间储存后仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
81.结合实施例1以及实施例4
‑
6并结合表1、2、3、4可以看出，实施例4
‑
6混合菌粉由酵母菌菌粉、枯草芽孢杆菌菌粉、丁酸梭菌菌粉混合制成，相比于实施例1，实施例4
‑
6曲块中的酵母菌、枯草芽孢杆菌数量均小于实施例1，并且实施例4
‑
6发酵后、干燥后，其酵母菌、枯草芽孢杆菌数量均小于实施例1，并且实施例4
‑
6枯草芽孢杆菌的芽孢数量小于实施例1，丁
酸梭菌芽孢含量较高；说明丁酸梭菌的添加一定程度上减小了酵母菌、枯草芽孢杆菌的占比，使得酵母菌、枯草芽孢杆菌数量受到影响，但是枯草芽孢杆菌中的芽孢与丁酸梭菌中的芽孢相配合，提高了菌酶饲料中芽孢含量，从而提高了菌酶饲料的储存稳定性；即使剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
82.实施例4
‑
6的蛋白酶活力小于实施例1，但是实施例4
‑
6制备的菌酶饲料1d采食量与3d采食量的差值均小于实施例1，并且实施例4
‑
6动物粪便中的粗蛋白含量均大于实施例1；说明丁酸梭菌、枯草芽孢杆菌的芽孢相配合，使菌酶饲料具有良好的储存稳定性，即使剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
83.实施例1结合实施例7
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8并结合表1、2、3、4可以看出，实施例7曲块中的酵母菌、枯草芽孢杆菌数量均小于实施例1，并且实施例7发酵后、干燥后，其酵母菌、枯草芽孢杆菌数量均小于实施例1，并且实施例7枯草芽孢杆菌的芽孢数量小于实施例1；曲块中丁酸梭菌数量较高、丁酸梭菌在发酵后、干燥后数量均较高，并且芽孢数量也较高，说明玉米粉、豆粕粉、小麦粉含量较低，容易影响各菌体的生长，从而容易影响菌体的数量和芽孢产量。
84.实施例7蛋白酶活力低于实施例1，实施例7制备的菌酶饲料1d采食量与3d采食量的差值小于实施例1；说明菌体数量减少，蛋白酶活力减少，并且影响了动物的采食量和消化吸收率。
85.实施例8曲块中的酵母菌、枯草芽孢杆菌数量均大于实施例1，并且实施例8发酵后、干燥后，其酵母菌、枯草芽孢杆菌数量均大于实施例1，并且实施例8枯草芽孢杆菌的芽孢数量大于实施例1；曲块中丁酸梭菌数量较高、丁酸梭菌在发酵后、干燥后数量均较高，并且芽孢数量也较高，说明玉米粉、豆粕粉、小麦粉含量较高，较高的营养物质含量能够在一定程度上促进菌体的生长，从而容易影响菌体的数量和芽孢产量。
86.实施例8蛋白酶活力高于实施例1，实施例8制备的菌酶饲料1d采食量与3d采食量的差值小于实施例1；说明菌体数量增加，蛋白酶活力增强，并且提高了动物的采食量。
87.结合实施例4以及实施例9
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11并结合表1、2、3、4可以看出，实施例9
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11原料中添加竹粉，相比于实施例4，实施例9
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11曲块中的酵母菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌的数量均大于实施例4，并且发酵后、干燥后的酵母菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌的数量均大于实施例4，枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌的芽孢数量也大于实施例4，蛋白酶活力大于实施例4，菌酶饲料1d采食量与3d采食量的差值小于实施例4，粪便中粗蛋白含量低于实施例4；说明枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌、酵母菌、竹粉相配合，能够促进不同生长阶段的菌体均匀吸收营养物质，使其不断生长繁殖，提高菌体数量，进一步提高芽孢含量，从而提高菌酶饲料的储存稳定性，即使剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
88.结合实施例9以及实施例12
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14并结合表1、2、3、4可以看出，实施例12
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14原料中添加竹粉，相比于实施例9，曲块中的酵母菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌的数量均大于实施例9，并且发酵后、干燥后的酵母菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌的数量均大于实施例9，枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌的芽孢数量也大于实施例9，蛋白酶活力大于实施例9，菌酶饲料1d采食量与3d采食量的差值小于实施例9，粪便中粗蛋白含量低于实施例9；说明枯草芽孢杆菌、丁酸梭
菌、酵母菌、改性竹粉相配合，利用明胶膜的阻隔性能配合明胶中蛋白质的营养效果，能够进一步促进菌体均匀吸收营养物质，提高菌体数量，进一步提高芽孢含量，从而提高菌酶饲料的储存稳定性，即使剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
89.实施例1结合实施例15
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17并结合表1、2、3、4可以看出，实施例15在制备曲块的过程中，未经后发酵，相比于实施例1，实施例15制备的菌酶饲料无论在发酵后还是干燥后，各菌体数量均低于实施例1，并且曲块中各菌体数量也低于实施例1，同时蛋白酶活力低于实施例1，采食量低于实施例1，粪便中粗蛋白含量高于实施例1；说明曲块的后发酵能够提高各菌体的数量，从而提高芽孢含量，并且可以提高菌酶饲料的消化吸收率、营养物质含量，采食量。
90.实施例16曲块物料原料中以同等质量的玉米粉替换小麦粉，相比于实施例1，实施例16制备的菌酶饲料无论在发酵后还是干燥后，菌体数量均低于实施例1，并且曲块中各菌体数量也低于实施例1，同时蛋白酶活力低于实施例1，采食量低于实施例1，粪便中粗蛋白含量高于实施例1；说明小麦粉、玉米粉、豆粕粉相配合，通过堆积结构能够减少曲块内部孔隙，从而促进丁酸梭菌、酵母菌的生长繁殖，提高菌数量，从而提高芽孢含量，即使剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
91.实施例17曲块尺寸为15cm
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15cm
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15cm，相比于实施例1，实施例17制备的菌酶饲料无论在发酵后还是干燥后，菌体数量均低于实施例1，并且曲块中各菌体数量也低于实施例1，同时蛋白酶活力低于实施例1，采食量低于实施例1，粪便中粗蛋白含量高于实施例1；说明20cm
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15cm
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7cm制备的曲块能够更好的使酵母菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌在同一时间繁殖较高数量的菌体，从而提高菌酶饲料的芽孢含量，即使剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
92.结合实施例1以及对比例1
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4并结合表1、2、3、4可以看出，发酵时间72h配合干燥时间36h，使得酵母菌、枯草芽孢杆菌菌体含量较高，并且枯草芽孢杆菌芽孢含量较高，使菌酶饲料在较高温度环境下具有良好的储存稳定性，即使剩余的菌酶饲料暴露于较高环境温度下，剩余的菌酶饲料中的营养物质仍具有良好的生物活性，动物食用后仍然可以有效的刺激动物的采食量、提高消化吸收率。
93.5、储存时间、变质情况检测分别采用实施例1
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3、对比例2的制备方法制备菌酶饲料，储存时间均≥8个月，并且在38
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40℃、相对湿度55％的条件下放置5d也不会出现腐败变质的情况；对比例2以及市售的济南鑫盈化工有限公司生产的混合发酵饲料在38
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40℃、相对湿度55％的条件下放置5d会出现腐败变质的情况。
94.说明本技术制备的菌酶饲料具有较长时间的货架期，并且即使敞口放置也不会腐败变质，仍然能够保留菌酶饲料的口感和营养物质。
95.本具体实施例仅仅是对本技术的解释，其并不是对本技术的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本
申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。