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一种小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的构建方法及其应用

2023-10-27 10:34:40 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)造模前3天用肝素盐水浸泡动脉插管;(2)用异氟烷麻醉小鼠,麻醉称重后固定于手术台上,再用异氟烷面罩吸入持续麻醉,小鼠备皮,进行表面消毒;(3)
①ꢀ
于小鼠右侧腹股沟处做切口i;结扎远心端,在靠近近心端处提起血管,做切口ii,置入肝素浸盐水浸泡后的动脉插管,连接测量仪,监测血压;
②ꢀ
于小鼠左侧股骨处做切口iii;
③ꢀ
依小鼠中线做切口iv,自腹股沟处至胸骨下缘剪开小鼠腹部皮肤、腹膜,暴露腹部器官,暴露,完成后用6-0丝线缝合腹膜、皮肤;
④ꢀ
腹部暴露同时通过动脉插管快速放血,放出小鼠全身血量的30%,造成失血性休克;
⑤ꢀ
造模完成后用6-0丝线缝和伤口,麻醉至造模完成1h后停止。2.根据权利要求1所述的小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的构建方法,其特征在于,步骤(1)中,肝素盐水的用量为100 units/ml。3.根据权利要求1所述的小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的构建方法,其特征在于,步骤(2)中,小鼠为10周龄,且体重在20~22g的健康雄性c57bl/6小鼠。4.根据权利要求3所述的小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的构建方法,其特征在于,步骤(2)中,用5%异氟烷麻醉小鼠,麻醉称重后以仰卧位固定于手术台上,再用2%异氟烷面罩吸入持续麻醉,小鼠备皮,并用碘伏三次,完成皮肤表面消毒。5.根据权利要求1所述的小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的构建方法,其特征在于,步骤(3)中,
①ꢀ
于小鼠右侧腹股沟处做长度为0.8~1cm垂直于血管走向切口i,分离肌肉组织和结缔组织,游离股静脉和股动脉;结扎股动脉远心端,在靠近近心端处提起血管,用显微剪刀于血管做切口ii,置入肝素浸盐水浸泡后的动脉插管,连接测量仪,监测血压;
②ꢀ
于小鼠左侧股骨处沿股骨方向做长度为0.8~1cm纵行切口iii,暴露肌肉,钝性拨开肌肉,暴露股骨,于股骨中部剪断左侧股骨,再用无菌棉球填充断端;
③ꢀ
依小鼠中线做切口iv,自腹股沟处至胸骨下缘依次剪开小鼠腹部皮肤、腹膜,暴露腹部器官且无出血,暴露30min,完成后用6-0丝线缝合腹膜、皮肤;
④ꢀ
腹部暴露同时通过动脉插管快速放血,放出小鼠全身血量的30%,造成失血性休克;
⑤ꢀ
造模完成后用6-0丝线缝和伤口,麻醉至造模完成1h后停止。6.根据权利要求5所述的小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的构建方法,其特征在于,步骤(3)中,小鼠全身血量计算公式如式1所示:血量 = 体重 *α
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式1其中,血量的单位为ml,体重的单位为g,α=0.07 ml/g。7.如权利要求1~6任一项所述的小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的应用,其特征在于,小鼠严重创伤/全身炎症反应模型用于创伤疾病机理研究、分子靶标鉴定或创伤药物的筛选。8.根据权利要求7所述的小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的应用,其特征在于,小鼠严重创伤/全身炎症反应模型用于严重创伤引起的出血性休克、系统性炎性反应、器官损伤、出凝血障碍以及复苏病机理研究、分子靶标鉴定或创伤药物的筛选。9.如权利要求7所述的小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的应用,其特征在于,小鼠严重创伤/全身炎症反应模型用于损伤、休克和无菌性炎症的机理研究、分子靶标鉴定或创伤药物的筛选。

技术总结
本发明属于生物技术领域,尤其涉及一种小鼠严重创伤/全身炎症反应模型的构建方法及其应用。该小鼠严重创伤/全身炎性反应模型的构建方法,包括以下步骤:用肝素盐水浸泡动脉插管;麻醉小鼠,称重后固定,持续麻醉,小鼠备皮,消毒;于小鼠右侧腹股沟处做切口I;分离、暴露股动脉,结扎股动脉远心端,在靠近近心端处提起血管,做切口II,置入插管,连接测量仪;于小鼠左侧股骨处做切口III,分离、暴露股骨,剪断股骨;依小鼠中线做切口IV,剪开小鼠腹部皮肤、腹膜,暴露腹部脏器,缝合;放出30%血量;缝和,麻醉至造模完成后停止。本发明通过股动脉放血、股骨骨折、腹部脏器暴露造成严重损伤,用于探索严重创伤后疾病发展的病理生理变化。探索严重创伤后疾病发展的病理生理变化。探索严重创伤后疾病发展的病理生理变化。


技术研发人员:李睿 常盼盼 周靖 黄伟 王天兵
受保护的技术使用者:北京大学人民医院
技术研发日:2023.07.19
技术公布日:2023/10/25
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